Multilocus genotyping of Cryptosporidium hominis associated with diarrhea outbreak in a day care unit in São Paulo

Mundialmente, diferentes espécies de Cryptosporidium estão relacionadas com doenças diarréicas. No Brasil há poucos dados sobre os genótipos das espécies de Cryptosporidium associadas a infecções. OBJETIVO: No presente estudo, caracterizamos, por métodos moleculares, a espécie e o genótipo de Cryptosporidium sp diagnosticado em surto diarréico ocorrido na creche do Hospital das Clínicas, São Paulo, Brasil. MATERIAL E MÉTODOS: Identificação específica e tipagem dos isolados associados ao surto foram feitos a partir do seqüenciamento de fragmentos de DNA amplificados por PCR dos seguintes loci: a região que codifica o SSUrRNA, o gene que codifica uma proteína do envoltório dos oocistos de Cryptosporidium (COWP), e o locus de microsatélite ML1, representado por seqüências repetitiva de três nucleotídeos GAG contendo substituições que diferem entre os genótipos de Cryptosporidium parvum e Cryptosporidium hominis. RESULTADOS: Um total de 29 amostras positivas para Cryptosporidium associadas ao surto diarréico foi analisado com base nos métodos moleculares acima descritos. O estudo revelou a presença do genótipo ML1 de Cryptosporidium hominis. DISCUSSÃO: A análise molecular reforçou a hipótese de que a transmissão de Cryptosporidium hominis durante o surto diarréico ocorreu de pessoa a pessoa através da rota fecal oral. Esta é a primeira vez que ferramentas moleculares são utilizadas para identificação de espécies e genótipos de isolados acusando a presença do genótipo ML1 em pacientes brasileiros.

Mantenimiento en cultivo y caracterización de un microsporidio encephalitozoon hellem aislado en un paciente con SIDA y neumonía / Culture maintanance and characterization of a microsporidian encephalitozoon hellen isolated from AIDS patient with neumonia

Comunicamos la identificación, a nivel de especie, de un microsporidio aislado en cultivo celular a partir de un lavado broncoalveolar de un paciente con Sida y neumonía. La caracterización del aislado se realizó mediante: 1) estudio morfológico de microscopía óptica y electrónica, 2) estudio inmunológico con antisuero específicos, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (WB) y 3) estudio molecular tras reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con iniciadores especie-específicos diseñados a partir de la región que codifica la subunidad menor del ARN ribosomal. Las características ultraestructurales del aislado permitieron su identificación en el género Encephalitozoon. La identificación específica del microsporidio como Encephalitozoon hellem se realizó mediante IFI y WB, empleando suero policlonal de conejo anti-E. hellem (CDC:0291:V213), y mediante la amplificación por PCR del fragmento diagnóstico utilizando el par de iniciadores EHELF/EHELR específicos para esta especie. El aislado ha sido denominado EHVS-96 y se mantiene en cultivo continuo en células Vero-E6. Este es el primer aislamiento en cultivo y caracterización de E. hellem en España

A 3-year follow-up of a brazilian AIDS patient with protracted diarrhea caused by Enterocytozoon bieneusi

Enterocytozoon bieneusi e o mais comum microsporidio agente de infeccoes gastrointestinais que ocorre predominantemente em pessoas com AIDS. Em todo o mundo os microsporidios sao reconhecidos como importantes patogenos oportunistas, entretanto poucos casos ja foram diagnosticados no Brasil, provavelmente devido ao pouco conhecimento do quadro clinico que os agentes produzem ou a dificuldades no diagnostico laboratorial. No presente trabalho relatamos o caso de um paciente brasileiro HIV-positivo acompanhado durante 3 anos, em que foram detectados esporos de microsporidios nas fezes, identificados como Enterocytozoon bieneusi por microscopia eletronica e PCR. O paciente apresentava diarreia cronica, contagem de linfocitos CD4 abaixo de 100/mm3 e fez uso de albendazol em diferentes ocasioes com melhora transitoria da diarreia, que reaparecia logo que a droga era suspensa...