Epigenetic characterization of the H19/IGF2 locus in calf clones placenta / Caracterização epigenética do locus H19/IGF2 na placenta de bezerros clones

Somatic Cell Nuclear Transfer (SCNT-Cloning) is a promising technique in many areas and is based on genetically identical individuals. However, its efficiency is low. Studies suggest that the leading cause is inadequate epigenetic reprogramming. This study aimed to characterize the methylation pattern of the exon 10 regions of the IGF2 gene and the Imprinting Control Region (ICR) of the H19 gene in the placenta of cloned calves. For this study, female and male cloned calves presenting different phenotypes were used. Genomic DNA from these animals' placenta was isolated, then treated with sodium bisulfite and amplified to the ICR/H19 and IGF2 loci. PCR products were cloned into competent bacteria and finally sequenced. A significant difference was found between controls and clones with healthy phenotypes for the ICR/H19 region. In this region, controls showed a hemimethylated pattern, as predicted in the literature due to this region has an imprinted control, while clones were showed less methylated. For the IGF2, no significant differences were found between controls and clones. These results suggest that different genomic regions in the genome may be independently reprogrammed and that failures in reprogramming the DNA methylation patterns of imprinted genes may be one of the causes of the low efficiency of SCNT.(AU)

A Transferência Nuclear de Células Somáticas (TNCS-Clonagem) é uma técnica promissora em várias áreas, e se baseia na produção de indivíduos geneticamente idênticos. No entanto, sua eficiência é baixa. Estudos sugerem que a principal causa seja uma reprogramação epigenética inadequada. O objetivo desse trabalho é caracterizar o padrão de metilação da região éxon 10 do gene IGF2 e da Região Controladora de Imprinting (ICR) do gene H19 na placenta de bezerros clonados. Para a execução do trabalho foram selecionados clones bovinos fêmeas e machos, apresentando diferentes fenótipos. O DNA da placenta desses animais foi extraído, e em seguida foi tratado com bissulfito de sódio e amplificado para os loci ICR/H19 e IGF2. Os produtos da PCR foram clonados em bactérias competentes e, por fim, sequenciados. Foi encontrada uma diferença significativa entre os controles e os clones com fenótipos saudáveis para a região da ICR/H19. Nesta região, os controles tiveram um padrão hemimetilado, como previsto pela literatura, devido essa região ser imprinted. Enquanto os clones encontravam-se menos metilados. Para a região do éxon 10 do IGF2, não foi encontrada diferença significativa entre controles e clones. Estes resultados sugerem que as diferentes regiões do genoma podem se reprogramar independente umas das outras e que falhas na reprogramação do padrão de metilação do DNA de genes imprinted podem ser uma das causas da baixa eficiência da TNCS.(AU)

Qualidade de imagens radiográficas processadas em consultórios odontológicos e em laboratório / Quality of radiographic image processed in dental offices and laboratory

Objetivos: Este estudo avaliou a qualidade de imagens radiográficas expostas em consultórios odontológicos e processadas nos próprios consultórios por cirurgiões-dentistas e/ou auxiliares ou em laboratório, por pesquisadores. Métodos: Dezoito consultórios odontológicos participaram da pesquisa. Cada um recebeu um par de caixas de filmes periapicais Kodak Ektaspeed, os quais foram expostos conjuntamente, com um molar inferior extraído. O tempo de exposição variou em função do consultório odontológico. A auxiliar e/ou o cirurgião-dentista realizaram o processamento de um dos filmes, com as mesmas técnicas e recursos utilizados habitualmente (Grupo 1). O outro filme foi processado por pesquisadores em no Laboratório de Metrologia da Universidade de Pernambuco (Grupo 2). Por meio de questionário, dois radiologistas avaliaram a nitidez, densidade, contraste, definição do esmalte, dentina e junção amelodentinária, erros presentes nas imagens e se cada imagem podia ser suficiente para um bom diagnóstico. A análise estatística foi analisada utilizando o teste do Qui-quadrado e o teste exato de Fisher. Resultados: O Grupo 2 demonstrou maior número de radiografias com baixa densidade e radiografias escuras (p<0,05). O Grupo 1 apresentou maior número de radiografias claras, com pontos escuros, pontos marrons e radiografias arranhadas (p<0,05). Não houve diferença estatística significante em relação à nitidez, contraste, definição do esmalte, dentina e junção amelodentinária, presença de pontos claros e capacidade de levar a um bom diagnóstico (p>0,05). Conclusões: Este estudo sugeriu que imagens radiográficas produzidas em consultórios odontológicos apresentam imperfeições na técnica de execução e no processamento. Entretanto, apesar da importância do correto processamento radiográfico, a sobre-exposição de filmes foi a maior causa de falhas na qualidade da imagem.

This work aims evaluate subjectively the quality of radiographic images exposed in dental offices and processed in proper dental offices by surgeon-dentists and/or assistants or in laboratory, by researchers. Methods: Eighteen dental offices integrated the research. Each one received a pair of Kodak Ektaspeed periapical films which was exposed together with an extracted inferior molar. The exposition time varied in function of each dental office. The assistant and/or surgeon dentist carried through the processing of one of the films, with the same technique and resources used habitually (Group 1). The other film was processed by researchers in the Laboratory of Metrology of Federal University of Pernambuco (Group 2). Through a questionnaire, two radiologists evaluated the sharpness, density, contrast, definition of enamel, dentine and amelodentinary junction, errors present in the images and if each image would be enough for a good diagnosis. Results: Through Chi-Square or Fisher´s Exact test, it was observed that Group 2 got a bigger number of radiographs with low density and dark radiographs (p-value<0,05). Group 1 presented a bigger number of clear radiographs, with dark spots, brown spots and scratch radiographs (p-value<0,05). There wasn?t statistical significant difference in relation to sharpness, contrast, definition of enamel, dentine, and amelodentinary junction, presence of clear spots and the capacity of carrying through a good diagnosis (p-value> 0.05). Conclusions: This study suggested that radiographic images produced in dental office present imperfections in technique execution and in the processing. However, despite the importance of a correct radiographic processing, the overexposure of the films was the major cause of flaws in image quality.

Obstruçäo da via de saída do ventrículo esquerdo após plastia valvar mitral com implante do anel de Gregori / Obstruction of the left ventricular outflow tract after mitral valvuloplasty with implantation of Gregori's ring

Mitral valvuloplasty is efficient for repairing mitral valve disease with few complications. In some cases, obstruction of the left ventricular outflow tract may occur due to systolic anterior motion of the mitral valve. We report the case of a patient with this complication and a pressure gradient between the left ventricle and the aorta of 130 mm Hg after mitral valvuloplasty with implantation of a Gregori's ring. The management was clinical with suspension of the vasoactive drugs and introduction of a beta-blocker. Two years after the surgery, the patient is asymptomatic and has a normal life