Atividade antimicrobiana in vitro de quinupristina/dalfopristina para cocos gram-positivos isolados de cinco centros brasileiros: resultado do estudo de vigilância L-SMART / Antimicrobial in vitro activity of quinupristin/dalfopristin against gram-positive cocci isolated from 5 Brazilian centers: results from the local smart (L-SMART) surveillance study

Há alguns anos tem-se verificado um aumento progressivo da resistência de alguns cocos gram-positivos a determinados antimicrobianos. Este aumento da resistência tem sido observado principalmente no ambiente hospitalar, e as bactérias mais comumente envolvidas são os Staphylococcus spp. e os Enterococcus spp. Devido a este fato, novos antimicrobianos são avaliados para o tratamento de infecções causadas por estas cepas multirresistentes. A associação quinupristina/dalfopristina (Q/D), também conhecida como Synercid©, é um antibacteriano da classe das estreptograminas, de uso endovenoso, composto por dois derivados semi-sintéticos da pristanamicina. A combinação das estreptograminas B e A na razão de 30:70 tem atividade antimicrobiana voltada para cocos gram-positivos, como Staphylococcus spp., Streptococcus spp., incluindo S. pneumoniae e Enterococcus faecium, sendo o E. faecalis habitualmente resistente. Neste estudo foi avaliada atividade in vitro de Q/D e outros oito antimicrobianos frente a 631 amostras de cocos gram-positivos isoladas de cinco centros brasileiros, complementadas com outras 20 cepas de E. faecium resistentes à vancomicina, provenientes dos Estados Unidos. Para a avaliação da sensibilidade aos antimicrobianos foi determinada a concentração inibitória mínima (MIC) pelo método do Etest (AB Biodisk, Solna, Suécia) e as cepas testadas foram: Staphylococcus aureus (n=267), Staphylococcus coagulase negativo (n=131), Streptoccus pneumoniae (n=130), Streptococcus beta-hemolíticos (n=28), Enteroccus faecalis (n=44) e E. faecium (n=51). A Q/D demonstrou excelente atividade contra Staphylococcus spp., independente de serem sensíveis ou resistentes à oxacilina. Para S. pneumoniae, a Q/D apresentou igualmente uma ótima atividade, inclusive para as cepas com resistência intermediária ou total para penicilina. Entre as cepas de E. faecium sensíveis à vancomicina, o MIC 90 de Q/D obtido foi de 3µg/ml, sendo que 45 por cento das cepas testadas foram sensíveis e 55 por cento apresentaram sensibilidade intermediária à associação. Desta forma, pode-se afirmar que a associação. Desta forma, pode-se afirmar que a associação Q/D representa uma nova opção para o tratamento endovenoso de infecções causadas por cocos gram-positivos, principalmente para as cepas multiresistentes, sendo também uma alternativa ao uso de glicopeptídeos

Proteases (caseinase and elastase), hemolysins, adhesion and susceptibility to antimicrobials of Stenotrophomonas maltophilia isolates obtained from clinical specimens

Forty-six S. maltophilia isolates obtained from hospital clinical specimens were studied for protease (caseinase and elastase) production, hemolytic activity, adhesion to HEp-2 cells, plastic and glass. Susceptibility to antimicrobial agents was also evaluated. The majority of isolates were obtained from respiratory tract secretions of patients using medical devices. All the isolates grown overnight were able to hydrolyze casein at 30ºC and 37ºC. After 72h, all the isolates hydrolyzed elastase at 30ºC and 40 isolates (87 per cent) at 37ºC. Most of the isolates presented hemolytic activity after 96h of incubation at both temperatures. Rabbit blood showed the hightest hemolytic activity, after 96h 61(per cent) and 98(per cent) of tested isolates presented b-hemolysis at 30ºC and 37ºC, respectively. All isolates were susceptible to trimethoprim-sulfametoxazole and were resistant to most b-lactams tested. By the dilution method, S. maltophilia showed a high susceptibility to ticarcillin-clavulanate and a lower susceptibility to ciprofloxacin than the agar diffusion. The isolates showed adhesion to HEp-2 cells, plastic and glass. The proteolytic activities and adhesion to inanimate surfaces detected in S. maltophilia can be related to the pathogenesis of this bacterium and/or medical device colonization which favors the development of nosocomial infections.

Avaliaçäo in vitro de macrolídeos e antibióticos B-lactâmicos orais ante a microrganismos isolados no tato respiratório / In vitro evaluation of oral macrolides and B-lactam antibiotics against isolated Pathogens from the respiratory tract

No período de setembro de 1999 a julho de 2000, analisamos a atividade in vitro de seis antimicrobianos, respectivamente, azitromicina, claritromicina, amoxicilina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefprozil e cefaclor ante a um total de 597 amostras bacterianas isoladas do trato respiratório superior e inferior de pacientes da comunidade, sem restriçäo de faixa etária, assim distribuídas: 247 cepas de H. influenzae, 147 S. aureus, 114 S. pneumoniae, 51 S. pyogenes e 38 M catarrhalis. A determinaçäo da Concentraçäo Inibitória Mínima (MIC) foi realizada pelo método do Etest e interpretadas de acordo com critérios padronizados pelo NCCLS. Entre as 247 cepas de H. influenzae, 9,7 porcento eram produtoras de B-lactamase, sendo que 100 porcento destas cepas foram sensíveis à amoxicilina/ác. clavulânico e cefaclor, 98 porcento à cefprozil, 96 porcento à azitromicina e 90 porcento à claritromicina. Das 147 cepas de S. aureus, 100 porcento eram sensíveis à oxacilina, amoxilina/ác. clavulânico, cefprozil e cefaclor, 71 porcento à claritromicina e 68 porcento à azitromicina. Entre as 114 cepas de S. peneumoniae, nenhuma cepa apresentou resistência total à penicilina, 14 cepas apresentaram resistência intermediária para penicilina, sendo que 100 porcento das cepas foram sensíveis à amoxicilina e amoxicilina/àc. clavulânico, 99 porcento à cefprozil e cefaclor, 88 porcento à azitromicina e 86 porcento à claritromicina. Entre as 14 cepas de pneumococos com resistência intermediária para penicilina, 3 cepas eram resistentes à azitromicina e 4 cepas à claritromicina. Entrre as 51 amostras de S. pyogenes, 4 cepas apresentaram resistência à azitromicina e claritromicina. Para M. catarrhalis, 100 porcento das cepas eram produtoras de B-lactamase e o MIC para azitromicina, claritromicina, amoxicilina, amoxicilina/ác. clavulânico, cefprozil e cefaclor foram 0,25; 0,25; 3; 0,25; 4 e 1,5 ug/ml, respectivamente.(au)

Detection of Mycobacteria in the bloodstream of patients with Acquired Immunodeficiency Syndrome in a University Hospital in Brazil

This study was done to determine the occurrence of mycobacteria in the bloodstreams of patients with fever and advanced AIDS in a Brazilian hospital. We also verified the capability of an automated method for recovering these bacteria. During a period of 19 months, 254 patients with AIDS were evaluated. Blood cultures were generally submitted in pairs and drawn separately. Blood cultures were processed by the BACTEC 460TB System (Becton Dickinson Microbiology Systems, Sparks, MD). Of the 530 vials submitted, 77 (14.5 percent) from 41 (16 percent) patients were positive. Mycobacterium avium complex was recovered from 45 (58.4 percent) of the 77 positive vials, corresponding to 22 (53.6 percent) patients with positive blood cultures. The average time to detect Mycobacterium avium complex was 15 days. Mycobacterium tuberculosis was recovered from 26 (33.8 percent) of the 77 positive vials, corresponding to 15 (36.6 percent) patients with positive blood cultures, with an average detection time of 24 days. Other species of mycobacteria were recovered from 6 (7.8 percent) of the 77 vials, corresponding to 4 (9.8 percent) patients. M. avium complex was fairly prevalent (8.7 percent) in severely ill patients with AIDS in our hospital. M. tuberculosis was also an important (6.0 percent) agent of systemic bacterial infections in these patients. The rapid diagnosis of mycobacteremia was possible with the implementation of this automated technology.

In vitro susceptibility of gram-positive cocci isolated from skin and respiratory tract to azithromycin and twelve other antimicrobial agents

This study was conducted to evaluate the activity of azithromycin in comparison to 112 other antibacterial agents against recent isolates obtained consecutively from patients with respiratory tract or skin infections, from january to july, 2000. A total of 717 gram-positive cocci were analyzed in this study and the following species were studied: staphylococcus aureus (n=576), ß-hemolytic streptococci (n=115), and streptococcus pneumoniae (n=26). Susceptibility testing was carried out by the disk diffusion method and interpreted according to NCCLS breakpoints. The activity of azithromycin was compared to erythromycin, clindamycin, chloramphenicol, ciprofloxacin, ofloxacin, oxacillin, penicillin, ceftriaxone, tetracycline, trimethoprim/sulfamethoxazole, teicoplanin, and vancomycin. Of the 26 S. pneumoniae isolates recovered from the respiratory tract, 5 (19.2 percent) were imediate resistant to penicillin. All of these strains were susceptible to chloramphenicol, ofloxacin, and vancomycin, and 24 (92 percent) were also susceptible to azithromycin, clindamycin, and erythromycin. Among the 67 ß-hemolytic streptococci strains isolated from the respiratory tract, 66 (99 percent) were susceptible to azithromycin, erythromycin, clindamycin, and ofloxacin. All 48 ß-hemolytic streptococci strains isolated from skin were susceptible to azithromycin and clindamycin, 47 (98 percent) were susceptible to erythromycin, and 46 (96 percent) were susceptible to ofloxacin. Of the 576 strains of S. aureus, 253 (43.9 percent) were isolated from the respiratory tract and 323 (56.1 percent) from skin. Among S. aureus isolates from the respiratory tract and skin, 46 (18 percent) and 78 (24 percent), respectively were resistant to oxacillin. Isolates from the respiratory tract and skin showed the same percentage of resistance (36 percent) to azithromycin. These in vitro results suggest that azithromycin can be a therapeutic option for treatment of infections caused by these bacteria since the never macrolides have several distinct advantages over erytromycin including improved oral bioavailability, longer half-life allowing once or twice daily administration, higher tissue concentrations and less gastrointestinal adverse effects.

Avaliaçäo de um novo sistema para identificaçäo de bacilos gram-negativos / Evaluation of a new system for identification of gram-negative bacilli

Uma nova metodologia para a identificaçäo de bacilos Gram-negativos de importância médica, denominada Crystal Enteric/Nonfermenter Identification System (Becton & Dickinson Microbiology Systems, EUA), foi avalida comparativamente com o sistema automatizado Vitek (bioMérieux Vitek, EUA). Duzentas e quarenta e nove amostras bacterianas isoladas a partir de diversos materiais clínicos e pertencentes a diversas espécies bacterianas da família Enterobacteriaceae (189 amostras) e também ao grupo dos bacilos Gram-negativos näo-fermentadores da glicose (60 amostras), previamente identificadas por provas bioquímicas tradicionais, foram aalisadas no intuito de se avaliar a especificidade destas duas metodologias. Duzentas e vinte e cinco amostras bacterianas (90,4 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Crystal e 230 amostras (92,4 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Vitek. Em relaçäo aos bacilos Gram-negativos näo-fermentadores da glicose, dentre as 60 amostras bacterianas estudadas, 51 (85 por cento) foram corretamente identificadas pelo sistema Crystal e 50 (83,3 por cento) foram corretamente identifcadas pelo sistema Vitek. Do total de amostras estudadas, 14 (5,6 por cento) näo foram identificadas e cinco (2 por cento) foram incorretamente identificadas pelo sistema Crystal, enquanto que o sistema Vitek näo identificou cinco amostras (2 por cento) e identidicou incorretamente nove amostras (3,6 por cento). Os resultados obtidos demonstraram que o sistema Crystal é uma metodlogia confiável, simples de usar, näo necessitando equipamentos automatizados ou reagentes especiais, podendo ser adequadamente utilizada por laboratórios de Microbiologia para a identificaçäo de diversas espécies de bacilos Gram-negativos de importância clínica

Avaliaçao de um novo sistema para detecçao de micobactérias: "mycobacterium growth indicator tube" (MIGIT) / Evaluation of a new system for the detection of mycobacteria: mycobacterium grouth indicator tube (MGIT)

Com o objetivo de avaliar uma nova metodologia para detectar o crescimento de micobactérias, analisamos 159 materiais clínicos previamente selecionados pelo método de Ziehl-Neelsen (149 positivos e 10 negativos), provenientes de diversos pacientes do Hospital das Clínicas da FMUSP. As amostras foram descontaminadas e concentradas pelo método do NALC (N-acetil-L-cisteína), examinadas pela coloraçao de Ziehl-Neelsen e 0,5ml de cada amostra tratada foi inoculada diretamente no MGIT ("Mycobacterium Growth Indicator Tube", Becton Dickinson Microbiology Systems, EUA) e o mesmo volume foi inoculado no meio e Lowenstein-Jensen (LJ). Os tubos de MIGT e de LJ foram incubados a 37 graus e observados diariamnte quanto ao crescimento e emissao de fluorescência. Para as leituras do MGIT foi utilizada uma luz UV de 365 nm e as culturas no meio de LJ foram observadas visualmete quanto ao crescimento. O MGIT contém 4,5 ml de meio Middelbrook 7H9 enriquecido e um sensor de fluorecência na base do tubo, sensíve ao oxigênio. Havendo crescimento de micobactérias, o seu metabolismo resulta em um consumo de oxigênio, ocasionando um aumento de fluorescência. Das 149 amostras com pesquisa positiva pelo método de ZIehl-Neelsen, 144 amostras foram positivas no MGIT, sendo 53 positivas na primeira semana e 78 na segunda semana de incubaçao. Das 131 amostras positivas no meio de LJ, a maioria apresentou crecimento após 15 dias de incubaçao. O MIGIT provou ser um sistema simples, rápido e sensível para detectar o crecimento de micobactérias diretamente de espécimes clínicos

Identificaçåo de bactérias gram positivas resistentes à vancomicina / Identification of vancomycin resistant gram positive bacteria

Infecçöes por bactérias Gram positivas resistentes à vancomicina têm surgido com aior frequência nos últimos anos, causando problemas clínicos e terapêuticos. Os laboratórios de microbiologia devem adequar-se técnicamente para detecçåo e identificaçåo destes microorganismos. Apresentamos uma revisåo bibliográfica sobre a importância clínica destes agentes bem como um fluxograma simplificado para sua correta identificaçåo

Epidemilogia molecular de infecçöes hospitalares sequenciais em uma unidade de terapia intensiva causada por cepas multiresistentes de Klebsiella pneumoniae / Molecular epidemiology of sequencial hospital infections in an intensive care unit by multiresistant Klebsiella pneumoniae

Foram estudadas, durante o período de um ano, 17 amostras de Klebsiella pneumoniae isoladas de pacientes internados em uma unidade de terapia intensiva e com infecçöes hospitalares diversas, com o objetivo de se averiguar a identidade das cepas envolvidas. A investigaçäo laboratorial envolveu a caracterizaçäo bioquímica, a determinaçäo do padräo de sensibilidade aos antimicrobianos e análise do conteúdo de DNA plasmidial dos microrganismos isolados. Os resultados mostraram que a análise do conteúdo plasmidial é uma metodologia bastante útil para diferenciar amostras bacterianas multirresistentes pertencentes a uma única espécie, bem como é mais sensível que a biotipagem e o antibiograma. Constatou-se também que a metodologia da Biologia Molecular permitiu o rastreamento das cepas envolvidas pelo estudo da disseminaçäo de plasmídios "R". Concluiu-se que a implantaçäo da metodologia da genética molecular vem proporcionar sistema preciso e confiável de vigilância epidemiológica facilitando a execuçäo de medidas de ordem técnico-administrativas no controle e prevençäo das infecçöes hospitalares

Perfil plasmidial como marcador epidemiológico na investigaçäo de infecçöes hospitalares / Plasmid profiles as epidemiologic markers in the research of nosocomial infections

A análise do perfil plasmidial vem se tornando um método muito útil na tipagem de microrganismo para o estudo epidemioológico das infecçöes hospitalares. Tanto bacilos Gram-negativos como estafilococos têm sido estudados utilizando-se esta técnica. A importância dos plasmídios bacterianos nas infecçöes hospitalares deve-se principalmente à capacidade de transferência dos gens de resistência aos antimicrobianos (plasmídios R) entre os microrganismos. Na investigaçäo de surtos de infecçäo, a análise do perfil plasmidial é um método rápido e eficiente para o rastreamento da cepa epidêmica e tem apresentado vantagens sobre outros sistemas de tipagem. As análises com endonucleases de restriçäo têm possibilitado a compreensäo de como a transferência de plasmídios R várias espécies bacterianas pode contribuir para a resistência endêmica aos antibióticos em determinada instituiçäo. A relevância da análise do perfil plasmidial para o controle das infecçöes hospitalares, bem como para o rastreamento da resistência aos antimicrobianos, e a investigaçäo de surtos continuará a crescer na medida da evoluçäo do estudo da biologia molecular, ecologia e epidemiologia dos plasmídios bacterianos