Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ / Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus investigation in prepucial mucous of bulls from Médio Paraíba/RJ region, Brazil

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9%), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9%) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.

Inquérito sorológico da brucelose canina através da utilização de antígeno externo e interno de Brucella canis e Brucella ovis / Serodiagnosis of canine brucellosis using external and internal antigens of Brucella canis and Brucella ovis

O objetivo desse estudo foi investigar a ocorrência da brucelose canina na cidade do Rio de Janeiro utilizando-se a técnica deimunodifusão em gel de agarose.Antígenos externo e interno de Brucella canis e Brucella ovis foram previamente preparadose um antígeno comercial usado para diagnóstico da brucelose canina foi também utilizado.Amostras de soro de 316 cãescoletadas aleatoriamente foram examinadas.Oito amostras (2,53 por cento) foram positivas no teste utilizando-se antígeno externo deB. canis e B. ovis e sete amostras (2,2 por cento) foram confirmadas com o antígeno comercial.Três amostras (0,95 por cento) foram positivaspara todos os antígenos testados. Antígenos externo e interno devem ser usados nos testes sorológicos para diagnóstico dabrucelose canina para detecção precoce e obtenção de resultados mais precisos, respectivamente.

The present study was designed to carry out a serologic investigation of canine brucellosis by using agar gel immunodiffusiontest in the Rio de Janeiro city. External and internal antigens of B. canis and B. ovis were previously prepared and a commercialkit used for canine brucellosis diagnosis, was also employed. Random samples of 316 dogs were examined. Eight samples (2,53 percent) were positive by using external antigen of B. canis and B. ovis. Seven samples (2,2 percent) were positive using the commercialantigen also, and three samples (0,95 percent) were positive for all the antigens employed. External and internal antigens must beused for early detection and accurate results, respectively.

Brucelose canina: obtenção de antígenos e avaliação pela técnica de imunodifusão em gel de sacarose / Canine Brucellosis: antigen obtention and evaluation by Agar Gel Immunodiffusion

Cães com brucelose causada por arucella canis apresentam poucos sinais importantes de doença sistêmica e nenhum deles especifico para brucelose. Devido às limitações dos procedimentos bacteriológicos, casos suspeitos devem ser avaliados sorologicamente. O objetivo deste estudo foi avaliar a utilização de antigenos externos e internos de arucella canis e de arucella ovis, pelo teste de imunodifusão em gel de agarose (IOGA). Antigenos externos e internos foram extraidos por solução salina tamponada e fosfatada (PBS) a quente a partir das cepas RM 6/66 de arucella canis e REO 198 de arucella ovis cultivadas em Ágar e Caldo Tripticase soja (Meio de Castaneda). Os antigenos externos foram obtidos após centrifugação e concentração do sobrenadante por ultrafiltração. Simultaneamente os sedimentos foram submetidos ao ultra-som e centrifugados sendo a porção sobrenadante considerado o extrato cru sonicado de a. canis e de a. ovis (antigeno interno). Soro hiperimune anti a. canis e anti a. ovis foram obtidos por inoculação intraperitoneal em coelhos (a. canis e a. ovis ), em cadela (a. canis) e em ovelha (a. ovis ) sendo utilizados como controles positivos na avaliação diagnóstica. Para referenciar os antigenos produzidos utilizou-se, ainda, soros de cães provenientes de um canil comercial localizado no Rio de Janeiro, RJ, suspeito de infecção brucélica pela ocorrência de abortos e natimortos. Houve resposta sorológica aos antigenos obtidos e a enfermidade foi confirmada por isolamento do agente etiológico, a partir de hemoculturas, em três animais do canil. Concluiu¬se que os antigenos externos apresentaram melhor resposta em animais experimentalmente inoculados e em naturalmente infectados, mas a confirmação deve ser feita com o antigeno sonicado

Isolamento e propagação da Ehrlichia canis em células DH82 e obtenção de antígeno para a reação de imunofluorescência indireta / Isolation and propagation of Ehrlichia canis in DH82 cells as a source of antigens in indirect immunofluorescence test

Ehrlichia canis, agente etiológico da Ehrlichiose Monocítica Canina, foi obtida a partir de um cão naturalmente infectado e propagada em outro por infecção experimental. A camada de mononucleares deste animal foi separada e inoculada em células macrofágicas de linhagem contínua de origem canina, denominadas DH82. A cultura apresentou-se positiva 18 dias pós a infecção. A propagação da Ehrlichia canis in vitro foi acompanhada a partir da observação de mórulas nas células presentes no sobrenadante da cultura infectada, pelas técnicas de citocentrifugação, inoculação em tubos de Leighton e imunofluorescência direta. O cultivo apresentou cerca de 30 por cento de infecção após 30º dia, alcançando 80 por cento no 47º, sendo então dividido a 1:2. As células DH82 permitiram o isolamento de E. canis e foram utilizadas como fonte de antígeno para o teste de imunofluorescência indireta.