Anopheles (Kerteszia) cruzii (DIPTERA: CULICIDAE) IN PERIDOMICILIARY AREA DURING ASYMPTOMATIC MALARIA TRANSMISSION IN THE ATLANTIC FOREST: MOLECULAR IDENTIFICATION OF BLOOD-MEAL SOURCES INDICATES HUMANS AS PRIMARY INTERMEDIATE HOSTS / Anopheles (Kerteszia) cruzii (Diptera: Culicidae) em área peridomiciliar durante transmissão de malária assintomática na Mata Atlântica: identificação molecular das fontes de repasto sanguíneo indica humanos como hospedeiros intermediários primários

Anopheles (Kerteszia) cruzii has been implicated as the primary vector of human and simian malarias out of the Brazilian Amazon and specifically in the Atlantic Forest regions. The presence of asymptomatic human cases, parasite-positive wild monkeys and the similarity between the parasites infecting them support the discussion whether these infections can be considered as a zoonosis. Although many aspects of the biology of An. cruzii have already been addressed, studies conducted during outbreaks of malaria transmission, aiming at the analysis of blood feeding and infectivity, are missing in the Atlantic Forest. This study was conducted in the location of Palestina, Juquitiba, where annually the majority of autochthonous human cases are notified in the Atlantic Forest of the state of São Paulo. Peridomiciliary sites were selected for collection of mosquitoes in a perimeter of up to 100 m around the residences of human malaria cases. The mosquitoes were analyzed with the purpose of molecular identification of blood-meal sources and to examine the prevalence of Plasmodium. A total of 13,441 females of An. (Ker.) cruzii were collected. The minimum infection rate was calculated at 0.03% and 0.01%, respectively, for P. vivax and P. malariae and only human blood was detected in the blood-fed mosquitoes analyzed. This data reinforce the hypothesis that asymptomatic human carriers are the main source of anopheline infection in the peridomiciliary area, making the probability of zoonotic transmission less likely to happen.

Anopheles (Kerteszia) cruzii é o vetor primário das malárias humana e simiana fora da Amazônia Brasileira e especificamente nas regiões de Mata Atlântica. A presença de casos humanos assintomáticos, macacos silvestres positivos para Plasmodium e a similaridade entre os parasitas que os infectam suportam a discussão se essas infecções podem ser consideradas como zoonoses. Embora muitos aspectos da biologia de An. cruzii já tenham sido abordados, estudos conduzidos durante surtos de transmissão de malária, visando a análise de repasto sanguíneo e infectividade, são ausentes na Mata Atlântica. Este estudo foi conduzido na localidade de Palestina, Juquitiba, Mata Atlântica do Estado de São Paulo, onde anualmente a maioria dos casos humanos autóctones é notificada. Locais em peridomicílio foram selecionados para coleta de mosquitos em um perímetro de até 100 m em torno das residências de casos humanos de malária e da floresta circundante. Os mosquitos foram analisados com o objetivo de identificação molecular das fontes de repasto sanguíneo e para examinar a prevalência de Plasmodium. Um total de 13.441 fêmeas de An. (Ker.) cruzii foi coletado. A taxa de infecção mínima foi calculada a 0,03% e 0,01%, respectivamente, para P. vivax e P. malariae e somente sangue humano foi detectado nos mosquitos analisados que se alimentaram com sangue. Nossos dados reforçam a hipótese de que os portadores humanos assintomáticos são a principal fonte de infecção para os anofelinos na área do peridomicílio, tornando a transmissão zoonótica improvável.

Febre amarela silvestre: reemergencia de transmissao no estado de Sao Paulo, Brasil, 2009 / Fiebre amarilla silvestre: re emergencia de transmision en el estado de Sao Paulo, Brasil, 2009 / Yellow fever: reemerging in the state of Sao Paulo, Brazil, 2009

OBJETIVO Descrever a investigação do surto de febre amarela silvestre e as principais medidas de controle realizadas no estado de São Paulo. MÉTODOS Estudo descritivo do surto de febre amarela silvestre na região sudoeste do estado, entre fevereiro e abril de 2009. Foram avaliados casos suspeitos e confirmados em humanos e primatas não humanos. A investigação entomológica, em ambiente silvestre, envolveu captura em solo e copa de árvore para identificação das espécies e detecção de infecção natural. Foram realizadas ações de controle de Aedes aegypti em áreas urbanas. A vacinação foi direcionada para residentes dos municípios com confirmação de circulação viral e nos municípios contíguos, conforme recomendação nacional. RESULTADOS Foram confirmados 28 casos humanos (letalidade 39,3%) em áreas rurais de Sarutaiá, Piraju, Tejupá, Avaré e Buri. Foram notificadas 56 mortes de primatas não humanos, 91,4% do gênero Alouatta sp . A epizootia foi confirmada laboratorialmente em dois primatas não humanos, sendo um em Buri e outro em Itapetininga. Foram coletados 1.782 mosquitos, entre eles Haemagogus leucocelaenus , Hg. janthinomys/capricornii , Sabethes chloropterus , Sa. purpureus e Sa. undosus . O vírus da febre amarela foi isolado de um lote de Hg. leucocelaenus procedente de Buri. A vacinação foi realizada em 49 municípios, com 1.018.705 doses aplicadas e o registro de nove eventos adversos graves pós-vacinação. CONCLUSÕES Os casos humanos ocorreram entre fevereiro e abril de 2009 em áreas sem registro de circulação do vírus da febre amarela há mais de 60 anos. A região encontrava-se fora da área com recomendação de vacinação, com alto percentual da p...

OBJETIVO Describir la investigación de brote de fiebre amarilla silvestre y las principales medidas de control realizadas en el estado de Sao Paulo. MÉTODOS Estudio descriptivo del brote de fiebre amarilla silvestre en la región suroeste del Estado, entre febrero y abril de 2009. Se evaluaron casos sospechosos y confirmados en humanos y primates no humanos. La investigación entomológica, en ambiente silvestre, involucró capturo en suelo y copa de árboles para identificación de las especies y detección de infección natural. Se realizaron acciones de control de Aedes aegypti en áreas urbanas. La vacunación fue direccionada a residentes de los municipios con confirmación de circulación viral y en los municipios contiguos, siguiendo recomendación nacional. RESULTADOS Se confirmaron 28 casos en humanos (letalidad 39,3%) en áreas rurales de Sarutaiá, Pirajú, Tejupá, Avaré y Buri. Se notificaron 56 muertes de primates no humanos, 91,4% del género Allouatta sp. La epizootia fue confirmada laboratorialmente en dos primates no humanos siendo uno de Buri y el otro de Itapetininga. Se colectaron 1.782 mosquitos, entre ellos Haemagogus leucocelaenus, Hg. janthinomys/capricornii, y Sabethes chloropterus, Sa. purpureus y Sa. undosus. El virus de la fiebre amarilla fue aislado de un lote de Hg. leucocelaenus procedente de Buri. La vacunación fue realizada en 49 municipios, con 1.018.705 dosis aplicadas y el registro de nueve eventos adversos graves post-vacunación. CONCLUSIONES Los casos humanos ocurrieron entre febrero a abril de 2009 en áreas sin registro de circulación del virus de la fiebre amarilla por más de 60 años. La región se encontraba fuera del área de recomendación de vacunación, con alto porcentaje de población susceptible. La adopción oportuna de medidas de control permitió ...

OBJECTIVE To describe the investigation of a sylvatic yellow fever outbreak in the state of Sao Paulo and the main control measures undertaken. METHODS This is a descriptive study of a sylvatic yellow fever outbreak in the Southwestern region of the state from February to April 2009. Suspected and confirmed cases in humans and in non-human primates were evaluated. Entomological investigation in sylvatic environment involved capture at ground level and in the tree canopy to identify species and detect natural infections. Control measures were performed in urban areas to control Aedes aegypti . Vaccination was directed at residents living in areas with confirmed viral circulation and also at nearby cities according to national recommendation. RESULTS Twenty-eight human cases were confirmed (39.3% case fatality rate) in rural areas of Sarutaiá, Piraju, Tejupá, Avaré and Buri. The deaths of 56 non-human primates were also reported, 91.4% were Allouatta sp. Epizootics was confirmed in two non-human primates in the cities of Itapetininga and Buri. A total of 1,782 mosquitoes were collected, including Haemagogus leucocelaenus , Hg. janthinomys/capricornii , and Sabethes chloropterus, Sa. purpureus and Sa. undosus . Yellow fever virus was isolated from a group of Hg. Leucocelaenus from Buri. Vaccination was carried out in 49 cities, with a total of 1,018,705 doses. Nine serious post-vaccination adverse events were reported. CONCLUSIONS The cases occurred between February and April 2009 in areas with no recorded yellow fever virus circulation in over 60 years. The outbreak region occurred outside the original recommended vaccination area with a high percentage of susceptible population. The fast adoption of control measures interrupted the human transmission within a month and the confirmation of viral circulation in humans, monkeys and mosquitoes. The results allowed the identification of new areas of viral circulation but ...

Isolation of yellow fever virus (YFV) from naturally infectied Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (diptera, cukicudae) in São Paulo State, Brazil, 2009 / Isolamento do vírus da Febre Amarela de mosquitos naturalmente infectados Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Diptera, Culicidae), São Paulo, Brasil, 2009

After detecting the death of Howlers monkeys (genus Alouatta) and isolation of yellow fever virus (YFV) in Buri county, São Paulo, Brazil, an entomological research study in the field was started. A YFV strain was isolated from newborn Swiss mice and cultured cells of Aedes albopictus - C6/36, from a pool of six Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg. leucocelaenus) mosquitoes (Dyar & Shannon) collected at the study site. Virus RNA fragment was amplified by RT-PCR and sequenced. The MCC Tree generated showed that the isolated strain is related to the South American I genotype, in a monophyletic clade containing isolates from recent 2008-2010 epidemics and epizootics in Brazil. Statistical analysis commonly used were calculated to characterize the sample in relation to diversity and dominance and indicated a pattern of dominance of one or a few species. Hg. leucocelaenus was found infected in Rio Grande do Sul State as well. In São Paulo State, this is the first detection of YFV in Hg. leucocelaenus.

Após a detecção de morte de macacos Bugios (gênero Alouatta) e isolamento do vírus da Febre Amarela (YFV) no município de Buri, Estado de São Paulo, Brasil, foi iniciada uma investigação entomológica em campo. Uma cepa de YFV foi isolada em camundongos recém-nascidos e cultura de células de Aedes albopictus - C6/36, a partir de um lote de seis mosquitos Haemagogus (Conopostegus) leucocelaenus (Hg leucocelaenus) Dyar & Shannon coletados no local de estudo. RNA do vírus foi amplificado por RT-PCR e seqüenciado. A topologia gerada indica que a cepa isolada está relacionada ao genótipo South American I, em clado monofilético englobando isolados recentes de epidemias e epizootias entre 2008 e 2009. Análises estatísticas geralmente usadas caracterizaram a amostra em relação à diversidade e dominância, indicando dominância relativa de uma ou poucas espécies. Hg. leucocelaenus foi detectado infectado também no Rio Grande do Sul. No Estado de São Paulo trata-se da primeira detecção do YFV em Hg leucocelaenus.

Observations on Haemagogus janthinomys Dyar (Diptera: Culicidae) and other mosquito populations within tree holes in a gallery forest in the northwestern region of Sao Paulo state, Brazil

In 2000, an outbreak of sylvatic yellow fever possibly occurred in gallery forests of the Grande river in the Paraná basin in the northwestern region of São Paulo state. The aim of this study was to obtain information on the bionomics of Haemagogus and other mosquitoes inside tree holes in that area. Eighteen open tree holes were sampled for immature specimens. Adults were collected twice a month in the forest in Santa Albertina county from July 2000 to June 2001. The seasonal frequency of fourth instars was obtained by the Williams geometric mean (Mw), while the adult frequency was estimated either by hourly arithmetic or the Williams' means. Cole's index was applied to evaluate larval inter-specific associations. Among the ten mosquito species identified, the most abundant was Aedes terrens Walker followed by Sabethes tridentatus Cerqueira and Haemagogus janthinomys Dyar. Larval and adult abundance of these species was higher in summer than in winter. Although larval abundance of Hg. janthinomys peaked in the rainy season, correlation with rainfall was not significant. Six groups of larval associations were distinguished, one of which the most positively stable. The Hg. janthinomys and Ae. terrens association was significant, and Limatus durhamii Theobald was the species with most negative associations.

Studies on entomological monitoring: mosquito species frequency in riverine habitats of the Igarapava Dam, Southern Region, Brazil

Avaliou-se a diversidade de mosquitos em diferentes habitats antes e depois da formação do reservatório de Igarapava no Rio Grande, Cerrado do Sudeste do Brasil, com objetivo de verificar alteração nessas populaçäes de mosquitos. Quatro habitats foram selecionados como sítios de coleta: a) peridomicílio rural, b) pastagem, c) veredas e d) mata ciliar. Realizaram-se coletas bimestrais com isca humana e armadilha de Shannon, incluindo períodos de atividade culicídea diurna, crepuscular vespertina e noturna. Os resultados do Indice de Shannon para os potenciais vetores nos diferentes habitats foram comparados pelo teste t de Student. As abundâncias sazonais de Aedes scapularis, Anopheles darlingi e Anopheles albitarsis s.l., foram descritas com a média móvel e comparadas com o teste c2. Houve alteração nas freqüências dos mosquitos nos habitats, com exceção das veredas, que estavam afastadas 13 km da área de influência do reservatório. A modificação nas abundâncias sazonais dos potenciais vetores sugere o incremento de criadouros após a formação do reservatório. Indices de diversidade são ferramentas úteis para monitorar populaçäes de mosquitos vetores em ambientes cujas mudanças drásticas podem alterar ciclos de transmissão de doenças transmitidas por vetores.

Febre amarela silvestre no Estado de São Paulo, Brasil: casos humanos autóctones / Jungle yellow fever in São Paulo state, Brazil: human autochthonous cases

Os autores relatam a ocorrência e os dados resultantes das investigações de casos humanos de Febre Amarela (FA) silvestre no estado de São Paulo. Em 2000, 7 casos suspeitos de FA silvestre foram confirmados, 5 importados de outros Estados e 2 provavelmente autóctones, de áreas localizadas às margens do Rio Grande, à noroeste do estado de São Paulo. Quatro deles evoluiram para óbito. Inquérito sorológico foi realizado em 630 habitantes de 13 municípios ribeirinhos e pesquisa entomológica foi feita nas áreas suspeitas de transmissão autóctone. A confirmação desses casos foi feita por testes sorológicos clássicos, isolamento de vírus e técnicas moleculares. As 7 amostras de soros resultaram positivas em pelo menos uma das técnicas empregadas. Todas as amostras foram reagentes no teste de MAC-ELISA. Obteve-se isolamento de vírus a partir de amostras de soros de 4 pacientes e nenhum isolamento de mosquitos. O inquérito sorológico com 630 soros, mostrou 5,23 por cento de prevalência de anticorpos para o vírus FA. A detecção de 2 casos autóctones no estado de São Paulo confirma a tendência de deslocamento da transmissão da Febre Amarela para o Sul do Brasil. A presença de anticorpos para FA em população de áreas sem transmissão recente, revela risco de reurbanização da doença

Risco de contato entre a populaçäo rural e a populaçäo anofelina em mata residual no planalto oeste do Estado de Säo Paulo / Risk of contact between human and vector populations in forested regions of western Säo Paulo State

Objetivo: Descreve a abundância de anofelinos adultos em matas residuais e estima o risco de contato entre homem e transmissor de malária Anopheles darlingi nestas áreas. Métodos: Foram analisados em três matas residuais, coletando-se com armadilha de Shannon. Pesquisaram-se criadouros das matas. Areas de margens de ribeiräo e afluentes foram consideradas potenciais criadouros. A mata da Fazenda Rancho Alegre e margens fluviais foram propostas como áreas de dispersäo de An. darlingi. Utilizou-se de SIG para análise de dados da populaçäo vetora e populaçäo humana de área contígua à mata. Aplicou-se a teoria de Dempster-Shafer para avaliar áreas de probabilidade de contato homem-vetor. Resultados: Embora An. darlingi tenha sido pouco abundante, verificou-se a exposiçäo dos moradores devido à atividade periódica, de repouso, locomoçäo e hábitos culturais. Obtiveram-se três imagens de linhas de evidência a partir de : sítios de oviposiçäo, freqüência e distribuiçäo de domicílios para compor a base de conhecimento. Conclusöes: Matas com graus de alteraçäo sugerem diferente diversidade em espécies anofelinas. A atividade de An. darlingi e An.albitarsis sugere serem espécies sinantrópicas enquanto An. triannulatus apresenta-se silvestre. Moradores de 10 domicílios sem forro no teto, cujos horários de deslocamento a pé ocorriam antes das 8 horas e após as 17 horas foram considerados em situaçäo de risco. Considerou-se o domicílio 111 situado em área de maior risco por apresentar 20-30 por cento de incerteza de informaçäo de suporte à hipótese de contato.

Infeccao do Anopheles (Kerteszia) cruzi por Plasmodium vivax e Plasmodium vivax variante VK247 nos Municipios de Sao Vicente e Juquitiba, Sao Paulo / Infection of Anopheles (Kerteszia) cruzi with Plasmodium vivax and Plasmodium vivax variant VK247 in the municipalities of Sao Vicente and Juquitiva, Sao Paulo

O Estado de São Paulo, situado na região Sudeste do Brasil, apresenta esporadicamente casos autóctones de malária que se caracterizam pela presença de quadro clínico benigno com parasitemias baixas e sintomatologia branda, identificados como malária vivax. Pouco se sabe a respeito da sintomatologia e resposta imune desenvolvidas pelo ser humano para as variantes Plasmodium vivax VK247 e Plasmodium vivax-like humano. Estas variantes são transmitidas pelo mosquito Anopheles (Kerteszia) cruzii, uma das espécies mais abundantes no Sudeste brasileiro. O objetivo deste trabalho foi verificar a infecção em anofelinos desta região, através do teste imunoenzimático ELISA com utilização de anticorpos monoclonais específicos dirigidos contra as regiões repetitivas da proteína circunsporozoíta de P. vivax clássico, P. brasilianum/P. malariae e P. vivax VK247. Coletas entomológicas foram realizadas no período de 1991 a 1993 em São Vicente e Juquitiba, municípios localizados em área remanescente da Mata Atlântica do Estado de São Paulo. A Mata Atlântica é rica em plantas da família Bromeliaceae, criadouros de formas imaturas de anofelinos do subgênero Kerteszia. De um total de 1 117 espécimes de An. (Ker.) cruzii capturados no Município de São Vicente, 0,179% foram positivos para P. vivax clássico. Em Juquitiba, dentre 1 161 An. (Ker.) cruzii pesquisados, 0,086% foram positivos para o P. vivax VK247, o que demonstra a presença da variante na região. Embora o índice de infecção encontrado seja baixo, a alta densidade destes mosquitos e sua voracidade (picam durante as 24 h do dia) poderiam compensar a baixa porcentagem de espécimes infectados

Sporadic cases of autochthonous malaria have been recorded in São Paulo State, located in the Southeast region of Brazil. These cases are characterized by their benign course, low parasitemia, and mild symptomatology and have been identified as vivax malaria. Little is known about the symptoms and immune response elicited in humans by the variants Plasmodium vivax VK247 and P. vivax-like human malaria parasites. These variants are transmitted by Anopheles (Kerteszia) cruzii, one of the most common species of mosquitoes in the Southeast of Brazil. The objective of the study described in this paper was to investigate infection in anophelines using ELISA immunoenzymatic assay with specific monoclonal antibodies directed against the repetitive regions of the circumsporozoite protein in classic P. vivax, P. brasilianum/P. malariae, and P. vivax VK247. Between 1991 and 1993, mosquitoes were collected in São Vicente and Juquitiba, municipalites located in a remnant of the Brazilian Atlantic forest in São Paulo State, an ecosystem rich in plants of the Bromeliaceae family. These plants function as nurseries for immature forms of anophelines of the subgenus Kerteszia. Of 1 117 An. (Ker.) cruzii captured in São Vicente, 0.179% were positive for classic P. vivax. In Juquitiba, of 1 161 An. (Ker.) cruzii, 0.086% were positive for P. vivax VK247, confirming the presence of this variant in the region. Although the infection rate is low, the high density of these mosquitoes and their voracity (they exhibit 24-h biting activity) could compensate for the low percentage of infected specimens

Malaria transmission associated with airplane travel

Plasmodium falciparum malaria was diagnosed in 3 patients in Säo Paulo during a 5 day period between August 31, and September 4, 1996, at a time and place where malaria transmission does not occur. After investigation of the 3 cases it was determined that the infections were acquired as a result of an international airplane flight from Lebanon to Säo Paulo on August 16, which included a 30 minute stop-over in Abidjan, Ivory Coast, Africa. During the epidemiological evaluation, it was found that each of the patients had been seated in the first class cabin. Entomological investigation at the airport revealed the presence of 4 specimens of Anopheles gambiae in airplanes (3 in the first class cabin and 1 in the luggage compartment) used on this route. The species of mosquito identified is predominant in Africa. Two of the patients were seriously ill, but all recovered after treatment with either mefloquine (1 patient) or artesunate (2 patients). A survey of other passengers on the same flight or on similar flights did not reveal any other cases of malaria. Malaria was not considered during initial evaluation by the attending physicians at the three different hospitals where in the patients were admitted. These cases reveal the existence of vector borne disease transmission during airplane travel, and emphasize the importance of obtaining a travel history during the evaluation of an ill patient. In addition, the cases reinforce the need for vigilance in the control of vector of disease around seaports, airports and hospitals.