Análisis de la sección 8 del cromosoma x de drosophila melanogaster mediante el uso de clones yac de saccharomyces cerevisiae / Analysis of section 8 of x chromosome from drosophila melanogaster by use of yac clones in saccharomyces cerevisiae

En drosophila melanogaster, los genes estructurales que codifican para hexoquinasas A y B, se ubican estrechamente ligados en el cromosoma I (x). Estos loci corresponden a la región citológica 8D4.EI en el mapa citogenético de dicho cromosoma. Con el objetivo de determinar la ubicación exacta de los loci para hexoquinasas A y B se realizó un análisis molecular, mediante el uso de cromosomas artificiales de levadura, que contienen DNA de la sección 8 del cromosoma x. Para tal efecto, se aisló DNA cromosómico intacto de siete clones YAC de s. cerevisiae que cubren dicha región. El DNA fue resuelto mediante electroforesis de campo pulsado y analizado por hibridación con DNA del plásmido pB322 y con un fragmento de DNA de 0, 67 Kb de d. melanogaster, amplificado por PCR con partidores heterólogos específicos para hexoquinasas. Los resultados de estos experimentos permitieron concluir que, la sonda homóloga es capaz de hibridar con el YAC II, lo cual coincide con la cobertura de este clon en la región citológica esperada

The separation and identification of picomole amounts of intermediates of glucose metabolism by high performance liquid chromatography on pellicular resins

A column (CarboPac PA1, Dionex) containing an anion-exchange pellicular resin was used for the separation of phosphoryl-hexoses derived from labeled glucose microinjected into individual frog oocytes or from cultures of Escherichia coli. Intermediates were identified by: a) comparison of retention times with those of authentic commercial compounds; b) the use of internal labeled standards; c) incubation of samples with specific enzymes and noting the disappearance of one radioactive peak and appearance of another at a new retention time