Avaliação intralaboratorial e otimização de método para determinação de tricotecenos em milho por cromatografia a gás-espectrometria de massas / Intralaboratorial evaluation and otimization of a method for determination of trichothecenes in corn by gas chromatography-mass spectrometry

Tricotecenos são micotoxinas produzidas por diferentes espécies de Fusarium. Estas micotoxinas formam um grupo de cerca de mais de cem compostos caracterizados pela presença em suas estruturas do mesmo sistema de anéis tetracíclicos cirpenol.Alguns deles são contaminantes naturais em trigo e milho,como o desoxinivalenol(DON),o nivalenol (NIV),a toxina T-2 (T2),o diacetoxiscirpenol (DAS) e a toxina HT-2(HT2).No presente trabalho foram avaliados e otimizados sistemas de limpeza, extração e derivação para determinação simultânea de DON, NIV, DAS, HT2 e T2 em amostras de milho e seus produtos por cromatografia a gás associada à espectrometria de massas (CG/EM).A extração com acetonitrila: água (84:16) seguida de limpeza com coluna MycoSep 227 apresentou os melhores resultados para as cinco toxinas estudadas. A derivação com anidrido trifluoroacético/ bicabornato de sódio mostrou-se melhor tanto para a detecção como para quantificação dos tricotecenos estudados por CG/EM. As recuperações obtidas variaram de 83,3 a 113,3% para DON, 84,6 a 114,5% para NIV,52,1 a 122,7% para DAS,71,1 a 95,9% para T2 e de 81,8 a 155,4% para HT2.Os limites de detecção variaram de 20 a 50 ng/g para DON,de 10 a 40 ng/g para NIV,de 30 a 120 ng/g para DAS,de 20 a 100 ng/g para T2 e de 20 a 50 ng/g para HT2.A repetividade do método mostrou desvios padrão relativos variando de 4,5 a 18,1 para DON,2,9 a 15,4 para NIV,3,4 a 48,1 para DAS, 3,1 a 14,4 para HT2 e de 6,4 a 47,3 para T2

Avaliaçäo de métodos para determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa / Evaluation of analytical methods for the determination of trichothecenes in corn by gas chromatography

Sistemas de extraçäo e limpeza foram avaliados para a determinaçäo de tricotecenos em milho por cromatografia gasosa com detector de ionizaçäo de chama. O método de extraçäo e limpeza descrito por Furlong & Soares (1995), combinado com uma coluna de limpeza preconizada pr Romer (1986), foi o sistema que apresentou melhores resultados. Para extraçäo foi usado metanol:cloreto de potássio 4 por cento (9:1) seguido por clarificaçäo com sulfato de amônio 30 por cento e partiçäo com diclorometano. A seguir, o extrato foi passado pela coluna de alumina:carväo (2,3:1,9) e os tricotecenos eluídos com acetonitrila:água (84:16). O extrato, após reaçäo de derivaçäo com anidrido trifluoroacético (TFAA) em piridina, foi injetado em um cromatógrafo a gás com detector por ionizaçäo em chama. As recuperaçöes médias obtidas foram 72 por cento para desoxinivalenol (DON), 88 por cento para diacetoxiscirpenol (DAS) e 87 por centopara toxina T2(T2). Os limites de detecçäo obtidos foram 30 ng/g pra DON, 50 ng/g para DAS e 40 ng/g para toxina foram 9,8,6,3 e 6,6 por cento para DON,DAS e T2, respectivamente. (AU)

Extraction and cleanup systems were evaluated for the determination of trichothecenes incorn by gas chromatography with flame ionization detector. The extraction and cleanup method describedby Furlong & Soares (1995), combined with the Romer (1986) cleanup column exhibited the best results.The extraction used methanol: 4% potassium chloride (9:1), followed by a clarification with 30% ammoniumsulfate, and partition with dichloromethane.The extract was then passed through an alumina:carboncolumn (2.3:1.9) and eluted with acetonitrile:water (84:16). Trifluoroacetic anhydride in the presence ofpyridine was used for derivatization before injection in a gas chromatograph with an ionization detector.The average recoveries were 72% for deoxynivalenol (DON), 88% for diacetoxyscirpenol (DAS) and 87%for toxin T2 (T2). The detection limits were 30 ng/g for DON, 50 ng/g for DAS and 40 ng/g for T2. Theaverage coefficients of variation for spiked samples at the 500 ng/g level were 9.8, 6.3 e 6.6% for DON,DAS, and T2, respectively. (AU)

Como obter resultados confiáveis em cromatografia / How to obtain reliable results in chromatography

Resultados analíticos que näo tenham passado por um processo de validaçäo carecem de qualquer valor. O presente trabalho enfoca etapas algumas vezes negligenciadas em laboratórios de cromatografia e que, no entanto, säo cruciais para a obtençäo de resultados analíticos confiáveis: uso de métodos analíticos validados e como validá-los, confirmaçäo da identidade do composto de interesse, escolha de métodos de quantificaçäo adequados, emprego de amostras de referência e testes de recuperaçäo na rotina de controle de qualidade e participaçäo em testes de proficiência. (AU)

Analytical results that did not go through a validation process lack any value. The resentreview focus into steps for chromatography labs but some times neglected and that are essential forobtaining reliable analytical results: use of validated analytical methods and how to validate analyticalmethods, confirmation of identity of analytes, choice of adequate confirmation methods, routine use ofreference materials and recovery tests for analytical quality control and participation in proficiency tests. (AU)