Molecular characterization of Leptospira sp. strains isolated from human subjects in São Paulo, Brazil using a polymerase chain reaction-based assay: a public health tool

A polymerase chain reaction (PCR)-based assay which amplifies repetitive DNA elements present within bacterial genomes was used to characterize and differentiate Leptospira sp. Thirty-five strains from a reference culture collection and 18 clinical isolates which had been previously analyzed by cross agglutinin absorption test (CAAT) were evaluated by this technique. PCR results from analysis of the reference culture collection showed no bands corresponding to serogroups Australis, Autumnalis, Bataviae, Celledoni, Cynopteri, Djasiman, Panama, Pomona, Pyrogenes, and Tarassovi. However, the PCR method was able to clearly discriminate the serogroups Andamana, Ballum, Canicola, Grippotyphosa, Hebdomadis, Icterohaemorrhagiae, Javanica, Sejroe, Semaranga, and Shermani. Clinical isolates previously characterized by CAAT as serovar Copenhageni, serovar Castellonis, and as serovar Canicola were in agreement with PCR results. The clinical isolate previously characterized as serovar Pomona was not differentiated by PCR. Forty additional clinical isolates from patients with leptospirosis obtained in São Paulo, Brazil were also evaluated by this PCR method. Thirty-nine of these were determined to belong to serogroup Icterohaemorrhagiae (97.5 percent) and one to serogroup Sejroe (2.5 percent). These results demonstrate that the PCR method described in this study has utility for rapid typing of Leptospira sp. at the serogroup level and can be used in epidemiological survey.

Human leptospirosis: a twenty-nine-year serological study in São Paulo, Brazil

Estudo retrospectivo com 9.335 casos de leptospirose humana no Estado de São Paulo, Brasil, diagnosticados entre 1969 e 1997 mostrou que a doença é endêmica no estado. Adultos com idade entre 20-39 anos foram os mais infectados (32,40 por cento) sendo 87,0 por cento dos casos do sexo masculino. A incidência anual média foi de 0,53 por uma população de 100.000. Casos ocorreram principalmente em janeiro a abril de cada ano. O maior número de casos foi observado em 1991 e 1996 com média pluviométrica de 159,9 e 160,3, respectivamente. Estes dados enfatizam a importância da leptospirose na saúde pública no Estado de São Paulo, Brasil.

Avaliacao da contraimunoeletroforese com antigenos dos sorovars icterohaemorrhagiae E patoc no diagnostico sorologico da leptospirose humana / Evaluation of counterimmunoelectrophoresis with antigens of icterohaemorrhagiae and patoc serovars in serodiagnosis of human leptospirosis

Avaliou-se o desempenho da contraimunoeletroforese (CIE) no diagnostico sorologico da leptospirose humana utilizando tres tipos de antigenos derivados da L. interrogans sorovar icterohaemorrhagiae e do sorovar patoc da L. biflexa. Comparuo-se os resultados obtidos na CIE com a prova de referencia a soroaglutinacao microscopica (SAM). Soros pareados de 135 pacientes com leptospirose foram subdivididos em 4 grupos de acordo com os resultados da SAM. Como controle coletou-se sangue de 69 individuos sadios. A concordancia entre as duas tecnicas variou de 92,64 a 94,11 por cento. Os resultados obtidos pela CIE com os antigenos do sorovar icterohaemorrhagiae foram mais favoraveis do que aqueles derivados do patoc. Ressaltam-se as caracteristicas de elevada sensibilidade detectando anticorpos antileptospiras mais precocemente do que a microaglutinacao. As caracteristicas encontradas no presente estudo credenciam o emprego da CIE como um metodo util e pratico para o diagnostico da leptospirose humana na fase aguda da doenca.

Microscopia ótica de alta resoluçäo: adaptaçäo do método e sua aplicaçäo ao estudo da leptospirose experimental em cobaias / High resolution light microscopy: adaptation of the method and its use in the study of experimental leptospirosis in guinea pigs

As lesöes morfológicas em parênquina e vasos de fígado e rim foram estudadas em um lote de cobaias infectadas experimentalmente com Leptospira interrogans sorogrupos icterohaemorrhagiae, em comparaçäo com um grupo de cobaias normais näo infectadas. O material foi analisado a microscopia óptica convencional (MOC), através da inclusäo em parafina, e a de alta resoluçäo (MOAR), esta com cortes de um micrômetro de espessura e até-96 mm2 de superfície, em tecido incluido em glicol-metacrilato. A utilizaçäo pela primeira vez da microscopia óptica de alta resoluçäo para o estudo da leptospirose revelou novos aspectos da doença, na medida em que permitiu análise de detalhes celulares e visäo de conjunto do quadro histológico na mesma amostra. Assim foi possível constatar se tanto alteraçöes da coesäo intercelular como especializaçöes de membranas, incluindo borda em escova, e vesículas de pinocitose, além da distribuiçäo intracelular de organelas saculares, provavelmente mitocondrias. A introduçäo desta metodologia de baixo custo e fácil execuçäo poderátrazer contribuiçöes úteis a histotecnologia com objetivos diagnósticos e em pesquisa.