RESUMEN
Abstract In Argentina, despite the important studies conducted on the prevalence of infection and the antibiotic resistance of Helicobacter pylori, there are no reports simultaneously analyzing a profile of virulence factors of the bacterium and polymorphisms in cytokine genes in patients with different alterations in the gastric mucosa (including intestinal metaplasia, IM). Our aim was to evaluate H. pylori genotypes in 132 adult patients with chronic gastritis presenting three different histological findings (inactive chronic gastritis, active chronic gastritis IM( and active chronic gastritis IM+) along with SNP-174 G>C in the IL-6 gene. cagA, vacA and babA2 genes were analyzed by multiplex PCR. The -174 G>C SNP IL-6 gene was analyzed by PCR-RFLP. Patients with active chronic gastritis IM+ showed the highest proportion of the cagA(+)/IL-6GG, cagA(+)/vacAm1s1/IL-6GG and cagA(+)/vacAm1s1/babA2(+)/IL-6GG combinations (p<0.05). There was 4-5 times greater probability of finding patients presenting the GG genotype for SNP-174 G>C IL-6, which in turn were infected with the most virulent H. pylori genotypes -cagA(+), cagA(+)/vacAm1s1 and cagA(+)/vacAm1s1/babA2- in the ACGIM+ group in comparison to the ICG group. Our results provide regional data to the idea that the transition towards severe alterations in the gastric mucosa would be the result of a balance between specific factors of H. pylori and inherent host factors. This fact can be useful to identify patients at greater risk and to select those individuals requiring appropriate eradication treatment to prevent progression to gastric cancer.
Resumen En Argentina, a pesar de los importantes estudios realizados sobre la prevalencia de infección y la resistencia a antibióticos de Helicobacter pylori, no existen reportes que analicen simultáneamente un perfil de factores de virulencia de la bacteria y polimorfismos en genes de citoquinas en pacientes con diferentes alteraciones en la mucosa gástrica (incluida la metaplasia intestinal [MI]). Nuestro objetivo fue evaluar genotipos de H. pylori en 132 pacientes adultos con gastritis crónica, con tres diferentes hallazgos histológicos (gastritis crónica inactiva [GCI], gastritis crónica activa [MI(] y gastritis crónica activa [MI+]), junto con el SNP-174 G>C en el gen de IL- 6. Los genes cagA, vacA y babA2 se analizaron mediante PCR multiplex. El SNP-174 G>C IL-6 se analizó mediante PCR-RFLP. Los pacientes con gastritis crónica activa MI+ mostraron la mayor proporción de combinaciones cagA(+)/IL-6GG, cagA(+)/vacAm1s1/IL-6GG y cagA(+)/vacAm1s1/babA2(+)/IL-6GG (p<0,05). Hubo 4-5 veces mayor probabilidad de encontrar pacientes con el genotipo GG en SNP-174 G>C IL-6 y a su vez infectados con los genotipos más virulentos de H. pylori-cagA(+), cagA(+)/vacAm1s1 y cagA(+)/vacAm1s1/babA2-en el grupo gastritis crónica activa MI+ en comparación con el grupo GCI. Nuestros resultados aportan datos regionales a la idea de que la transición hacia alteraciones más graves en la mucosa gástrica resultaría de un equilibrio entre factores específicos de H. pylori y factores inherentes al huésped. Esto puede ser útil para identificar pacientes con mayor riesgo y seleccionar aquellos individuos que requieran un apropiado tratamiento de erradicación para prevenir la progresión al cáncer gástrico.
RESUMEN
Helicobacter pylori is a gastric pathogen that is widely recognized as a causative agent of gastric disease. Its eradication is variable, mainly due to increased resistance to clarithromycin. Our objective was: to evaluate (i) if the biopsy specimen used for the rapid urease test is a useful sample to detect resistance to clarithromycin by PCR-RFLP and (ii) the distribution of A2142G and A2143G point mutations in the 23S rRNA gene, in relation to virulence factors in our region. Gastric specimens were collected from adult dyspeptic patients (n = 141) and H. pylori was investigated by the rapid urease test, histopathological analysis and PCR for the hsp60 gene. Clarithromycin resistance was detected by PCR-RFLP in 62 H. pylori (+) paired biopsy specimens submitted to molecular analysis and the rapid urease test. H. pylori virulence factors were analyzed by multiplex PCR using specific primers for the cagA, vacA and babA2 genes. Thirteen out of 62 strains (20.9%) were resistant to clarithromycin: 6/13 (46.2%) harbored the A2143G mutation whereas 7/13 (53.8%) carried the A2142G point mutation. vacA m1s1 was the most frequent genotype among the resistant strains. In conclusion, the biopsy specimens used for the rapid urease test were suitable samples for clarithromycin resistance detection in patients infected with H. pylori, which became especially useful in cases where the number or size of the biopsies is limited. In addition, this is the first report of a molecular analysis for clarithromycin resistance performed directly from gastric biopsies in our region.
Helicobacter pylori es un patógeno ampliamente reconocido como causante de enfermedad gástrica. Su erradicación es variable, principalmente debido al incremento de la resistencia a claritromicina. Nuestros objetivos fueron evaluar la utilidad de la biopsia usada para realizar el test rápido de ureasa en la detección de resistencia a claritromicina por PCR-RFLP y conocer la distribución de las mutaciones puntuales A2142G y A2143G en el gen ARNr 23S, en relación con los factores de virulencia en nuestra región. Se recolectaron muestras gástricas (n=141) provenientes de pacientes adultos dispépticos y se investigó la presencia de H. pylori mediante el test rápido de ureasa, análisis histopatológico y PCR para el gen hsp60. La resistencia a claritromicina se analizó por PCR-RFLP en 62 muestras pareadas de biopsias gástricas H. pylori+ destinadas al análisis molecular y al test rápido de ureasa. Los factores de virulencia de H. pylori fueron analizados mediante PCR multiplex usando oligonucleótidos específicos para los genes cagA, vacA y babA2. Trece de 62 cepas (20,9%) fueron resistentes a claritromicina, 6/13 (46,2%) llevaron la mutación A2143G, mientras que 7/13 (53,8%) presentaron la mutación A2142G. El genotipo vacA s1m1 fue el más frecuente entre las cepas resistentes a claritromicina. En conclusión, las biopsias destinadas al test rápido de ureasa fueron muestras apropiadas para la detección de la resistencia a claritromicina en pacientes infectados con H. pylori. Esto es especialmente útil en aquellos casos en los que el número o el tamaño de las muestras son limitados. Además, este es el primer reporte de estudio de resistencia a claritromicina (mediante técnicas moleculares), directamente de biopsias gástricas en nuestra región.
Asunto(s)
Humanos , Helicobacter pylori/efectos de los fármacos , Infecciones por Helicobacter/diagnóstico , Claritromicina/farmacología , Factores de Tiempo , Ureasa/metabolismo , Polimorfismo de Longitud del Fragmento de Restricción , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Helicobacter pylori/enzimología , Helicobacter pylori/genética , Helicobacter pylori/patogenicidad , Infecciones por Helicobacter/microbiología , Mutación Puntual , Farmacorresistencia Bacteriana , Pruebas Diagnósticas de Rutina/métodosRESUMEN
Our goals were: a) to detect Helicobacter pylori in gastric biopsies of symptomatic adults by PCR, b) to detect the presence of the cagA gene as well as of the allelic variants of the vacA gene, and c) to correlate genotypes with the endoscopic diagnoses. H. pylori was detected in 81
(39/48) of patients by nested PCR for hsp60. The presence of cagA was detected in 15/22 of samples and vacA s1 - m1 was the most frequent allelic combination (15/22). Gastritis, the most frequent diagnosis, was associated with genotype cagA+ in 10/13 of patients. In this group, 9/13 showed the allelic variant vacA s1- m1. The variant vacA s2 - m2 was detected in 3/3 of gastritis cases by H. pylori with the cagA- genotype. These results are the first reported in our region and provide data of epidemiological interest.
Asunto(s)
Estómago/microbiología , Gastritis/epidemiología , Helicobacter pylori/genética , Infecciones por Helicobacter/epidemiología , Adolescente , Adulto , Adulto Joven , Alelos , Antígenos Bacterianos/genética , Argentina/epidemiología , Biopsia , /genética , ADN Bacteriano/genética , Enfermedades del Esófago/epidemiología , Enfermedades del Esófago/microbiología , Estómago/patología , Femenino , Frecuencia de los Genes , Gastritis/microbiología , Enfermedades Gastrointestinales/epidemiología , Enfermedades Gastrointestinales/microbiología , Gastroscopía , Genotipo , Helicobacter pylori/aislamiento & purificación , Helicobacter pylori/patogenicidad , Humanos , Anciano , Infecciones por Helicobacter/microbiología , Masculino , Persona de Mediana Edad , Proteínas Bacterianas/genética , Virulencia/genéticaRESUMEN
sophageal squamous papilloma is an uncommon, usually asymptomatic, benign tumor of the squamous epithelium consisting of a raised, sessile, small and round (smooth or rough) lesion. The prevalence is between 0.01 and 0.45
of cases, with a male/female ratio of 3:1. The etiology and pathogenesis appear to be a mechanical or chemical irritation of the mucosa in addition to the presence of human papillomavirus (HPV), important agent in the evolution to a squamous carcinoma, especially HPV types 16 and 18. In this paper, we describe a case of esophageal papilloma whose diagnosis involved endoscopic images, pathological studies and detection of viral DNA by polymerase chain reaction. By using molecular techniques (PCR-RFLP) a profile consistent with HPV type 16 has been obtained. The patient underwent polypectomy and currently, after 3 years of diagnosis, he remains asymptomatic. This work is one of the first national reports of a patient with esophageal papilloma in which one of the most frequently HPV genotypes associated with esophageal carcinoma (HPV 16) has been detected.
Asunto(s)
ADN Viral/análisis , Infecciones por Papillomavirus/complicaciones , Neoplasias Esofágicas/virología , /genética , Papiloma/virología , Adulto , Humanos , Infecciones por Papillomavirus/diagnóstico , Masculino , Neoplasias Esofágicas/patología , /aislamiento & purificación , Papiloma/patología , Reacción en Cadena de la PolimerasaRESUMEN
El objetivo del presente trabajo fue comparar dos métodos colorimétricos comerciales, realizados en forma manual, para la determinación de hierro sérico; uno (el método comparativo) utiliza betafenantrolina como reactivo de color y otro (el método en comparación), usa ferrozine para el mismo propósito. Se procesaron 64 sueros de diferentes pacientes, siguiendo las recomendaciones para validación de métodos dadas por el National Committee for Clinical Laboratory Standards. Las concentraciones cubrieron todo el rango de interés clínico (rango 0,63-38,31 µmol/l / 3,5-214 µg por ciento), y representaron el espectro de valores esperados en la aplicación clínica de rutina. Los métodos demostraron buena correlación (r = 0,96 p<0,0001). Se observó un buen acuerdo entre ambos obteniéndose, a partir del gráfico de Bland-Altman, en el rango de concentración de hierro útil para propósitos de diagnóstico clínico (0,63-10,74 µmol/L) una desviación relativa del 11,21 por ciento. A partir de este análisis se concluyó que las diferencias entre los dos métodos son aceptables y que ambos podrían intercambiarse, remarcándose importantes ventajas de índole práctica que tiene el método en comparación tales como utilización de menor volumen de muestra y menor tiempo de reacción