Interação molecular entre alfa-ciclodextrina e triptofano / Alfa-ciclodextrin and tryptophan molecular interaction / Interacción molecular entre alfa-ciclodextrina y triptófano

O objetivo deste trabalho foi determinar a constante de formação do complexo de inclusão entre a alfa-ciclodextrina e o aminoácido triptofano. Para a determinação da constante de inclusão, foi utilizado o método competitivo do alaranjado de metila. O triptofano realiza interações moleculares com a alfa-ciclodextrina com constante de inclusão de 36,16 M-1. Estes resultados embasam o desenvolvimento de trabalhos de entrega metabólica de triptofano e a redução de gostos indesejados de proteínas hidrolisadas utilizadas na alimentação animal.

The objective of this research was to determine the inclusion constant between tryptophan and alpha-cyclodextrin (alpha-CD) by spectrophotometry based on methyl orange molecular probe. Tryptophan and alpha-CD showed molecular interaction with inclusion formation constants of 36.16 M-1. These results are important for the development of tryptophan metabolic delivery and reduction of the bitter taste from hydrolyzed proteins used to feed animals.

El objetivo de esta investigación fue determinar la constante de formación del complejo de inclusión entre alfa-ciclodextrina y triptófano. Para la determinación de la constante de inclusión, fue utilizado el método competitivo del naranja de metilo. El triptófano realiza interacciones moleculares con el alfa-ciclodextrina con constante de inclusión de 36,16 M-1. Estos resultados fundamentan el desarrollo de trabajos de entrega metabólica de triptófano y la reducción de gustos indeseados de proteínas hidrolizadas utilizadas en la alimentación animal.

A comparative study on fungal laccases immobilized on chitosan

A enzima fenol-oxidase lacase obtida da cultura de dos fungos Pleurotus ostreatus e Botryosphaeria sp, e de origem comercial, obtida de Aspergillus sp. foi imobilizada em quitosana, grau farmacêutico, por adsorção seguida de ligação cruzada. Diferentes condições de imobilização com relação à granulometria do suporte e à quantidade de extrato enzimático de lacase utilizado foram testadas, visando-se obter elevadas atividades enzimáticas com a enzima imobilizada. Dois diferentes substratos foram utilizados para a determinação da atividade enzimática, ABTS e DMP. A maior atividade foi obtida com 1,0mg/mL do extrato enzimático de lacase de Botryosphaeria sp. para 1,0g de suporte (200 mesh). Estas enzimas imobilizadas se destinam à melhoria de vinhos brancos, via degradação de compostos fenólicos indesejados.

Operational stability and kinetics of lactose hydrolysis by b-galactosidase from Kluyveromyces fragilis

A modelagem cinética da hidrólise da lactose e a estabilidade operacional da enzima b-galactosidase de Kluyveromyces fragilis foi determinada utilizando como substrato leite em pó desengordurado e reconstituído de modo a fornecer duas concentrações de lactose: 5 por cento e 10 por cento (p/v). Para a estabilidade operacional, ambas concentrações de lactose foram estudadas na presença e na ausência de tampão pH 6,5. A cada 40 minutos, foi determinada a atividade residual pelo método das velocidades iniciais. Os resultados experimentais mostraram que o tampão provoca inativação da enzima. Para soluções de lactose em água, a atividade residual decaiu apenas 15 por cento em 6 horas e depois decresceu bruscamente. Na modelagem cinética, a reação de hidrólise foi conduzida a 40oC/7 h, empregando-se concentrações de enzima equivalentes a 1500 e 8100 LAU/L. O modelo ajustado permitiu concluir que é necessário utilizar a quantidade de 3450 LAU/L da enzima para se obter a hidrólise de 70 por cento a 80 por cento da lactose do leite em duas a três horas de reação

Hydrolysis of lactose by Beta-galactosidase from Kluyveromyces fragilis: characterization of the enzyme

A enzima Beta-galactosidase de Kluyveromyces fragilis foi caracterizada na forma solúvel, utilizando como substrato, lactose 5 por cento p/v presente no leite em pó desengordurado. A enzima, diluída 50 vezes, hidrolisou a lactose em reator batelada de 50 ml de capacidade. A atividade da enzima e sua energia de ativação foram determinadas em função da temperatura e pH. A faixa de temperatura analisada foi de 20 a 55oC e de pH de 5,5 a 8,0. A energia de ativação foi de 9,50 kcal/mol. A energia de desativação foi de 33,74 kcal/mol. Embora a enzima tenha apresentado uma atividade específica alta a 45oC e pH 6,5 (3,312 U/mg proteína), os valores obtidos indicam que o melhor aproveitamento da atividade enzimática se dá a 40oC ou abaixo, com um tempo de meia-vida superior a 12 horas. A energia de ativação aumentou proporcionalmente com o aumento de pH. Portanto, a energia de ativação depende diretamente do pH da solução e varia com a origem da enzima

Propriedades da ciclodextrina glicosiltransferase produzida por bacillus firmus alcalofílico / Properties of cyclodextrin glycosyltransferase produced by alkalophilic bacillus firms

Ciclodextrinas (CDs) são oligossacarídeos cíclicos formados por um número variável de unidades de glucose, unidas entre si por ligações a-1,4. As CDs mais comuns contém 6, 7 ou 8 unidades de glucose e são denominadas a-, b- e g-CD respectivamente. Elas possuem a capacidade de encapsular outras moléculas no interior de sua cavidade cônica. As CDs são produzidas a partir do amido pela ação da enzima ciclodextrina glicosiltransferase (CGTase). Um novo bacilo alcalofílico, Bacillus firmus, produtor de CGTase com alta atividade, foi isolado de solo brasileiro. Este trabalho apresenta o estudo de algumas propriedades desta CGTase, tais como: sua atividade dextrinizante e a diluição em que esta atividade é máxima; e a Dextrose Equivalente (D.E.) de amido de milho que proporciona maior produção de CDs pela enzima. O estudo da atividade dextrinizante se baseou na metodologia de WILSON & INGLEDEW (1982), e utilizou amido 0,2 por cento e reagente de iodo. As diluições realizadas da enzima foram 1:10, 1:25, 1:50, 1:100, 1:200 e 1:400. As absorbâncias dos controles e amostras foram lidas a 620 nm. Para se conhecer a D.E. em que se produz maior quantidade de CDs, seguiu-se a metodologia de LIMA et al. (1998). Foram realizados quatro testes a 50oC/24 h referentes as D.E. 2, 5, 10 e 15, utilizando em cada teste 50 mL de solução de amido de milho hidrolisado, pH 8 e 1x 10-3 mg/mL de CGTase de Bacillus firmus. São relatados os seguintes resultados: a diluição da enzima 1:100 foi a que proporcionou a melhor atividade dextrinizante (1498,37 U/mL); e a solução de D.E. 15 foi a que apresentou maior produção de b-CD, sendo que a produção de g-CD foi praticamente a mesma para todas as D.E. testadas.