Coumarin (2H-1-Benzopyran-2-one) act against planktonic and biofilm forms of Staphylococcus aureus, Klebsiellapneumoniae and Pseudomonas aeruginosa

SUMMARY Introduction: biofilm-related infections caused by Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa are difficult to treat and few effective pharmacological options are currently available for this purpose. In this context, coumarin (2H-1-Benzopyran-2-one) has been reported to have antibacterial and antibiofilm activity, but this potential remains poorly understood. Aim: to investigate the action of coumarin on planktonic and biofilm forms of S. aureus, K. pneumoniae and P. aeruginosa. Results: a minimum inhibitory concentration (MIC) of coumarin ranging from 256 to 1024 fig/mL was observed, with a remarkable ability to inhibit the formation of biofilms and to act on mature biofilms in concentrations close to MIC. Conclusion: coumarin has strong activity against planktonic and biofilm forms on the three species of great relevance in the clinical scenario. These results are interesting to enable a pharmacological alternative for the treatment of these infections.

Introducción: las infecciones relacionadas con la biopelícula causadas por Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa son difíciles de tratar y actualmente existen pocas opciones farmacológicas eficaces para este propósito. En este contexto, se ha informado que la cumarina (2H-1-Benzopiran-2-ona) tiene actividad antibacteriana y antibiofilm, pero este potencial sigue siendo poco conocido. Objetivo: investigar la acción de la cumarina sobre formas planctónicas y de biopelículas de S. aureus, K. pneumoniae y P. aeruginosa. Resultados: se observó una concentración inhibitoria mínima (CMI) de cumarina en el rango de 256 a 1024 µg/mL, con una notable capacidad para inhibir la formación de biofilms y actuar sobre biofilms maduros en concentraciones cercanas a la CMI. Conclusión: la cumarina tiene una fuerte actividad contra las formas planctónicas y biofilm sobre las tres especies de gran relevancia en el escenario clínico. Estos resultados son interesantes para habilitar una alternativa farmacológica para el tratamiento de estas infecciones.

Introdução: as infecções relacionadas ao biofilme causadas por Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae e Pseudomonas aeruginosa são difíceis de tratar e poucas opções farmacológicas eficazes estão disponíveis atualmente para esse propósito. Nesse contexto, foi relatado que a cumarina (2H-1-benzopirano-2-ona) tem atividade antibacteriana e antibiofilme, mas esse potencial permanece pouco conhecido. Objetivo: investigar a ação da cumarina sobre as formas planctónicas e de biofilme de S. aureus, K. pneumoniae e P. aeruginosa. Resultados: observou-se uma concentração inibitória mínima (CIM) de cumarina variando de 256 a 1024 µg/mL, com notável capacidade de inibir a formação de biofilmes e de atuar sobre biofilmes maduros em concentrações próximas à CIM. Conclusão: a cumarina possui forte atividade contra as formas planctónicas e de biofilme sobre as três espécies de grande relevância no cenário clínico. Esses resultados são interessantes para possibilitar uma alternativa farmacológica para o tratamento dessas infecções.

In silico and in vitro analysis of a new potential antifungal substance, 2-Bromo-N-phenylacetamide, against invasive candidiasis isolates

SUMMARY Introduction: invasive candidiasis is related to high rates of morbidity and mortality. There are few classes of drugs available for the treatment of this type of infection and the index of resistant strains is increasing. Such circumstances highlight that the search for new pharmacotherapeutic alternatives is increasingly necessary. This study investigated 2-Bromo-N-phenylacetamide, a substance whose antifungal activity has not yet been reported. Objective: to evaluate its activity against invasive candidiasis isolates, by determining the minimum inhibitory and fungicide concentrations. Methodology: molecular docking was performed to investigate the possible mechanism of action of the substance. The substance was also associated with fluconazole, to assess the viability of the combination in clinical practice. The minimum inhibitory concen trations ranged between 4 to 32 jig/mL, and it acts in a fungicidal way. Results: molec ular docking suggests that 2-Bromo-N-phenylacetamide possibly acts on the fungal plasma membrane. And the association of 2-Bromo-N-phenylacetamide with flucon azole against resistant strains showed an indifferent effect. Conclusion: further studies should be carried out to elucidate the potential of this substance, which may become a future drug candidate to treat invasive candidiasis and other fungal infections.

Introducción: la candidiasis invasiva está relacionada con altas tasas de morbilidad y mortalidad. Hay pocas clases de medicamentos disponibles para el tratamiento de este tipo de infección y el índice de cepas resistentes está aumentando. Tales circunstancias ponen de relieve que la búsqueda de nuevas alternativas farmacoterapéuticas es cada vez más necesaria. Este estudio investigó la 2-Bromo-N-fenilacetamida, una sustancia cuya actividad antifúngica aún no se ha informado. Objetivo: evaluar su actividad frente a aislados de candidiasis invasiva, mediante la determinación de las concentra ciones mínimas inhibitorias y fungicidas. Metodología: se realizó un acoplamiento molecular para investigar el posible mecanismo de acción de la sustancia. La sustancia también se asoció con fluconazol, para evaluar la viabilidad de la combinación en la práctica clínica. Las concentraciones mínimas inhibidoras oscilaron entre 4 a 32 µg/mL y actúa de forma fungicida. Resultados: el acoplamiento molecular sugiere que la 2-Bromo-N-fenilacetamida posiblemente actúa sobre la membrana plasmática de los hongos. Y la asociación de 2-Brorno-Ar-fenilacetamida con fluconazol contra cepas resistentes mostró un efecto indiferente. Conclusión: deben realizarse más estudios para dilucidar el potencial de esta sustancia, que puede convertirse en un futuro candi dato a fármaco para tratar la candidiasis invasiva y otras infecciones fúngicas.

Introdução: a candidíase invasiva está relacionada a altas taxas de morbidade e morta lidade. Existem poucas classes de medicamentos disponíveis para o tratamento desse tipo de infecção e o índice de cepas resistentes está aumentando. Tais circunstâncias evidenciam que a busca por novas alternativas farmacoterapêuticas é cada vez mais necessária. Este estudo investigou a 2-Bromo-N-fenilacetamida, uma substância cuja atividade antifúngica ainda não foi relatada. Objetivo: avaliar sua atividade contra isolados de candidíase invasiva, por meio da determinação das concentrações mínimas inibitórias e fungicidas. Metodologia: o docking molecular foi realizado para inve stigar o possível mecanismo de ação da substância. A substância também foi associada ao fluconazol, para avaliar a viabilidade da associação na prática clínica. As concen trações inibitórias mínimas variaram entre 4 a 32 µg/Ml e atuam de forma fungicida. Resultados: o docking molecular sugere que a 2-Bromo-N-fenilacetamida possivel mente atua na membrana plasmática do fungo. E a associação de 2-Bromo-N-fenilace-tamida com fluconazol contra cepas resistentes mostrou efeito indiferente. Conclusão: Novos estudos devem ser realizados para elucidar o potencial dessa substância, que pode se tornar uma futura droga candidata ao tratamento de candidíase invasiva e outras infecções fúngicas.

Presença de Candida spp. em usuários de próteses dentárias removíveis / Presencia de Candida spp. en usuarios de prótesis dentales removible / Presence of Candida spp. in patients who wear dentures

Introdução: O uso contínuo das próteses removíveis e a higiene inadequada das mesmas podem levar ao desenvolvimento da estomatite protética. Doença frequente em usuários de próteses e muito associada à Candida spp. Objetivo: determinar características sociais e os cuidados dos indivíduos com a higienização das próteses dentárias removíveis, assim como a presença de espécies de Candida em usuários de próteses numa comunidade do município de Cabedelo, Paraíba, Brasil. Métodos: Tratou-se de um estudo piloto, transversal, observacional e laboratorial com a avaliação de 14 voluntários. Foram utilizados formulários de investigação e realizada a coleta, o isolamento e identificação do material biológico. Resultados: Os participantes da pesquisa apresentaram renda e escolaridade baixas. A higiene diária das próteses, a escovação com dentifrício, a não remoção das próteses para dormir e a utilização das mesmas por mais de seis anos foram verificadas na maior parte da amostra. Conclusão: Demonstrou-se uma alta presença de Candida spp. nos usuários de próteses dentárias removíveis e Candida albicans foi a espécie mais prevalente(AU)

Introducción: El uso continuo de las prótesis removibles y la higiene inadecuada de estas pueden conducir al desarrollo de la estomatitis protésica, enfermedad frecuente en usuarios de prótesis y muy asociada a la Candida spp. Objetivo: determinar las características sociales y los cuidados de los individuos con la higienización de las prótesis dentales removibles, así como la presencia de especies de Candida en usuarios de prótesis en una comunidad del municipio de Cabedelo, Paraíba, Brasil. Métodos: Se trata de un estudio piloto, transversal, observacional y de laboratorio con la evaluación de 14 voluntarios. Se utilizaron formularios de investigación y se realizó la recolección, el aislamiento e identificación del material biológico. Resultados: Los participantes de la encuesta presentaron ingresos y escolaridad bajos. La higiene diaria de las prótesis, el cepillado con dentífrico, la no remoción de las prótesis para dormir y la utilización de estas durante más de seis años se verificaron en la mayor parte de la muestra. Conclusión: Se demostró una alta presencia de Candida spp. en los usuarios de prótesis dentales removibles y Candida albicans fue la especie que más predominó(AU)

Introduction : The continued use of dentures and inadequate hygiene may lead to the development of denture stomatitis, a frequent disease in patients who wear dentures and very much associated with Candida spp. Objective : To determine the social characteristics and the care of the individuals with the hygiene of their dentures, as well as the presence of Candida species in patients who wear dentures from a community of Cabedelo Municipality, Paraíba, Brazil. Methods : This is a pilot, cross-sectional, observational and laboratory study with the evaluation of 14 volunteers. Research forms were used and the collection, isolation and identification of the biological material were carried out. Results : The participants had low income and schooling. The daily hygiene of the prostheses, brushing with dentifrice, the non-removal of the prosthesis for sleeping and their use for more than six years were verified in most of the sample. Conclusions : A high presence of Candida spp. in the patients who wear dentures was shown, while C. albicans was the most prevalent species(AU)

Efecto combinado del aceite esencial de Cinnamomum zeylanicum blume y nistatina sobre cepas de Candida no-albicans / Combined effect of Cinnamomum zeylanicum blume essential oil and nystatin on strains of non-albicans Candida

Introduction: considering the emergence of resistant species of albicans and non-albicans Candida to agents therapeutically available as a result of the increased number of immunocompromised population and of the increasingly frequent use of prophylaxis and empirical treatment with antifungals, it's verified that there is a clear and emerging need to introduce new antimicrobials agents in the therapeutic arsenal. The purpose of this study was to evaluate the antifungal activity of essential oil of Cinnamomum zeylanicum Blume alone and combined with Nystatin on strains of C. tropicalis and C. krusei. Methods: this was an experimental research in laboratory. It was determined the Minimum Inhibitory Concentration, using the microdilution method, as well as the Fractional Inhibitory Concentration to determine the possible synergistic effects of the association. Strains of C. tropicalis ATCC 40147 and C. krusei ATCC 40042 were used in the tests. When assessed separately, C. zeylanicum essential oil and Nystatin presented Minimum Inhibitory Concentration of 312,5 µg/mL and 64 µg/mL, respectively, on both tested strains. Results: When combined, were found Minimum Inhibitory Concentration of 39 µg/mL and 32 µg/mL for the essential oil and for Nystatin, respectively. The Fractional Inhibitory Concentration value was 0,6024 for both tested strains, indicating additivity of the inhibitory effect on fungal growth. Conclusions: the results indicate that C. zeylanicum essential oil has antifungal activity against the strains of non-albicans Candida evaluated and that its association with Nystatin potentiates this effect(AU)

Introducción: es necesaria la introducción de nuevos agentes antimicrobianos por el surgimiento de especies de Candida albicans y no albicans resistentes a los agentes terapéuticos disponibles .El objetivo del estudio fue evaluar la actividad antifúngica del aceite esencial de Cinnamomum zeylanicum Blume aislado y asociado con nistatina sobre cepas Candida tropicalis y Candida krusei. Métodos: se realizó una investigación experimental de laboratorio. La concentración mínima inhibitoria fue determinada utilizando el método de microdilución, y la concentración inhibitoria fraccionada se usó para determinar los posibles efectos sinérgicos de la asociación. Para las pruebas fueron utilizadas las cepas de C. tropicalis ATCC 40147 y C. krusei ATCC 40042. Se usaron el aceite esencial de C. zeylanicum y nistatina. Cuando fueron evaluados por separado presentaron la concentración mínima inhibitoria de 312,5 µg/mL y de 64 µg/mL, respectivamente, sobre ambas cepas ensayadas. Resultados: una vez asociados, la concentración mínima inhibitoria fue de 39 µg/mL para el aceite esencial y de 32 µg/mL para la nistatina. El valor de la concentración inhibitoria fraccionada para ambas cepas probadas fue de 0,6024, lo que indica adicción del efecto inhibidor sobre el crecimiento de hongos. Conclusiones: los resultados indican que el aceite esencial de C. zeylanicum tiene actividad antifúngica frente a las cepas de Candida no albicans y que la asociación del mismo con la nistatina promueve la potenciación de este efecto(AU)

Efeito antifúngico de tinturas de própolis e romã sobre espécies de Candida / Efecto antimicótico de las tinturas a partir de propóleo y pomegranate contra las especies de Candida / Antifungal effect of tinctures from propolis and pomegranate against species of Candida

A utilização de produtos naturais na odontologia tem se mostrado como uma fonte alternativa no combate às patologias orais, incluindo as infecções fúngicas, causadas, geralmente, por Candida spp. Avaliar a ação antifúngica de tinturas de própolis Apis milifera e romã Punica granatum sobre Candida albicans (ATCC 76618), Candida krusei (ATCC 6538) e Candida tropicalis (ATCC 13803). A ação antifúngica das tinturas foi avaliada pelo método da Concentração Inibitória Mínima em meio de cultura sólido Ágar Saburaud Dextrose (Difco®). Foram confeccionados poços, com 6 mm de diâmetro, destinados a inserção de 50 µL das tinturas. Foram avaliadas seis concentrações seriadas das tinturas, sendo a concentração inicial para a tintura de própolis 200 mg/mL e 300 mg/mL a concentração inicial para a tintura de romã. Posteriormente, as placas de Petri foram incubadas em estufa bacteriológica por 48 h a 37 ºC. A análise dos dados para a Concentração Inibitória Mínima foi feita através da mensuração dos halos de inibição, sendo considerados quando iguais ou superiores a 10 mm de diâmetro. Para a tintura de romã observou-se que as Concentração Inibitória Mínima sobre Candida albicans, Candida krusei e Candida tropicalis foram 9,37 mg/mL, 9,37 mg/mL e 18,75 mg/mL, respectivamente. Em relação à tintura da própolis, constatou-se que apenas em sua forma pura apresentou ação antifúngica sobre Candida krusei e Candida tropicalis, entretanto a mesma ação não foi observada sobre Candida albicans. As tinturas avaliadas apresentam ação antifúngica sobre as cepas avaliadas, exceto a tintura da própolis sobre Candida albicans(AU)

Se ha demostrado que el uso de productos naturales en Estomatología es una fuente alternativa contra las enfermedades orales, incluyendo las infecciones micóticas, generalmente causadas por Candida spp. El objetivo de este trabajo fue evaluar la acción antimicótica de las tinturas a partir del propóleo (Apis milifera) y a partir de pomegranate (Punica granatum) sobre Candida albicans (ATCC 76618), Candida krusei (ATCC 6538) y Candida tropicalis (TCC 13803). La actividad antimicótica de las tinturas fue evaluada por el método Minimum Inhibitory Concentration en Aagar Dextrosa Saburaud (Difco®). Se crearon 6 orificios con un diámetro de 6 mm para la inserción de 50 µL de tinturas. Se evaluaron 6 concentraciones seriadas donde la concentración inicial para las tinturas a partir de propóleo fue de 200 mg/mL y de 300 mg/mL como concentración inicial para la tintura a partir de pomegranate. Posteriormente, los discos de Petri fueron incubados durante 48 h a 37ºC. El análisis de los datos para Minimum Inhibitory Concentration fue realizado midiendo las zonas de inhibición, se consideró inhibición cuando es igual o mayor de 10 mm de diámetro. En el caso de la tintura de pomegranate, se comprobó que la Minimum Inhibitory Concentration en Candida albicans, Candida krusei y Candida tropicalis fueron de 9,37 mg/mL, 9,37 mg/mL y 18,75 mg/mL respectivamente. Para las tinturas a base de propóleo, la acción antimicótica fue verificada solo en la concentración pura sobre Candida krusei y Candida tropicalis, pero no fue observada en Candida albicans. Las tinturas a base de pomegranate y propóleo tuvieron actividad antimicótica sobre las cepas evaluadas, excepto en el caso de la tintura a base de propóleo sobre Candida albicans(AU)

The use of natural products in Dentistry has been shown as an alternative source against oral diseases, including fungi infections, generally caused by Candida spp. The aim was to evaluate the antifungal action of tinctures from propolis (Apis milifera) and from pomegranate (Punica granatum) on Candida albicans (ATCC 76618), Candida krusei (ATCC 6538) and Candida tropicalis (ATCC 13803). The antifungal activity of tinctures was evaluated by Minimum Inhibitory Concentration method on Saburaud Dextrose Agar (Difco®). Six wells were confectioned, with 6 mm of diameter, to the insertion of 50 µL of tinctures. Six serial concentrations were evaluated, been 200 mg/mL the initial concentration for tincture from propolis and 300 mg/mL the initial concentration for tincture from pomegranate. Later, the Petri plates were incubated in bacteriological incubator for 48 h on 37 ºC. Data analysis for Minimum Inhibitory Concentration was conducted by measurement of inhibition zones, been considered inhibited when equal or bigger than 10 mm of diameter. For tincture from pomegranate, was verified that the Minimum Inhibitory Concentration on Candida albicans, Candida krusei and Candida tropicalis were 9.37 mg/mL, 9.37 mg/mL and 18.75 mg/mL, respectively. For tinctures from propolis, the antifungal action was verified only in pure concentration on Candida krusei and Candida tropicalis, but it was not observed on Candida albicans. The tinctures from pomegranate and propolis had antifungal activity on evaluated strains, except for tincture from propolis on Candida albicans(AU)