WBC count and functional changes induced by co-administration of clofazimine and clarithromycin, in single and multiple doses, in Wistar rats

Clofazimine and clarithromycin are used to treat leprosy and infections caused by Mycobacterium avium complex. Little data on the toxicity of co-administration of these two drugs are available. Here we evaluated the potential adverse effects of polytherapy with these two drugs in male Wistar rats by determining WBCs counts and other blood cell counts, neutrophilic phagocytosis, and burst oxidative, by flow cytometry. We observed an increase in WBCs, in multiple-dose regimens, and in polymorphonuclear cells, in both single- clarithromycin only and multiple dose regimens. We also observed a reduction in mononuclear cell counts in single and multiple doses. The drugs seem to reverse the mononuclear and polymorphonuclear cell ratio. An increase in oxidative burst was observed in animals treated with the drugs administered either individually or combined. In conclusion, clofazimine and clarithromycin change WBCs counts. Our results may contribute for a better understanding of the mechanisms related to the effects of co-administrating the two drugs.

Clofazimina e laritromicina são utilizadas no tratamento da hanseníase e em infecções causadas pelo complexo Mycobacterium avium. Devido à escassez de dados sobre a toxicidade de esquemas terapêuticos que associam estes fármacos, este estudo teve por objetivo avaliar os efeitos adversos desta terapia, em ratos machos Wistar, por meio da determinação da contagem global e específica de leucócitos e ensaios de fagocitose e burst oxidativo de neutrófilos por citometria de fluxo. Houve aumento do número de leucócitos (dose múltipla) e de células polimorfonucleares (doses única e múltipla) nos grupos tratados com claritromicina em monoterapia ou associada à clofazimina e redução das células mononucleares, em doses única e múltipla, nos mesmos grupos. Os fármacos parecem inverter a proporção entre células mono e polimorfonucleares. Observou-se aumento do burst oxidativo nos animais tratados com os fármacos isolados ou associados. Concluindo, clofazimina e claritromicina provocam alterações leucocitárias e os resultados podem contribuir para melhor entendimento dos mecanismos relacionados aos efeitos da administração dos fármacos em associação.

Leukocytes respiratory burst and lysozyme level in pacu (Piaractus mesopotamicus Holmberg, 1887) / Atividade respiratória de leucócitos e nível de lisozima em pacu (Piaractus mesopotamicus)

Innate immune responses are useful to determine the health status of fish and to evaluate the effect of immunomodulatory substances in fish farming. Leukocytes respiratory burst was measured in pacu (Piaractus mesopotamicus) using chemiluminescence assay and nitroblue tetrazolium (NBT) reduction assay. The nitroblue tetrazolium reduction seemed more adequate than chemiluminescence assay for leukocytes oxidative burst determination, since it was difficult to isolate the blood leucocytes for chemiluminescence assay. Plasma and serum lysozyme were measured using a turbidimetric assay. The heating of serum and plasma samples (56 ºC for 30 minutes) for complement system inactivation darkened the plasma samples and interfered in the results. The lysozyme activity in serum was higher than in plasma, suggesting that serum samples are more appropriate for the analysis. This study established protocols that can be useful tools in the study of immune mechanisms of the tropical fish pacu.

Respostas imunológicas inatas são úteis para determinar o estado de saúde de peixes e avaliar o efeito de substâncias imunomoduladoras no cultivo destes animais. A atividade respiratória de leucócitos foi medida em pacu (Piaractus mesopotamicus) através de ensaio de quimioluminescência e ensaio de redução do nitroblue tetrazolium (NBT). O ensaio de redução do nitroblue tetrazolium pareceu mais adequado que o ensaio de quimioluminescência para determinação da atividade respiratória de leucócitos, uma vez que foi difícil isolar com êxito os leucócitos do sangue para o ensaio de quimioluminescência. Lisozima sérica e plasmática foram medidas por meio de ensaio turbidimétrico. Com o objetivo de inativar as proteínas do sistema complemento, as amostras de soro e plasma foram aquecidas (56 ºC por 30 minutos). Porém, este procedimento provocou a turvação das amostras de plasma e interferiu nos resultados. A atividade de lisozima no soro foi maior que no plasma, sugerindo que amostras de soro são mais apropriadas para esta análise. Este estudo estabeleceu protocolos que podem ser utilizados como ferramentas no estudo de mecanismos imunológicos do peixe tropical pacu.