A severidade da cárie na primeira infância aumenta atividade da SOD sensível ao KCN, reduz proteínas carboniladas e aumenta a biodisponibilidade do óxido nítrico na saliva / The severity of caries increases the activity of SOD sens KCN, reduces carbonylated proteins and increases the bioavailability of nitric oxide in saliva

O objetivo deste estudo foi avaliar se a progressão da severidade das lesões de cárie alteraria as atividades das isoformas da superóxido dismutase (SOD), sensível ou não ao cianeto de potássio (KCN), a carbonilação de proteínas e a biodisponibilidade do óxido nítrico (NO) salivar. Amostras de saliva, não estimulada, foram coletadas de crianças (1 a 3 anos) em uma creche municipal de Birigui, SP, Brasil. As crianças foram divididas em 4 grupos (n=30/grupo) de acordo com os critérios do ICCMSTM, sendo o grupo A (livres de cárie), grupo B (cárie inicial), grupo C (cárie moderada) e grupo D (cárie extensa). A atividade enzimática da SOD sensível ao KCN e da SOD insensível ao KCN (SOD sens KCN e SOD ins KCN, respectivamente) foram determinadas pelo método de oxidação do pirogalol. O método da carbonilação da proteína foi utilizado para determinar o dano oxidativo (DO), baseado no método alcalino de DNPH (2,4- Dinitrofenilhidrazina). A biodisponibilidade de NO salivar foi quantificada pelo método de Griess. Os dados foram analisados pelo teste de ANOVA e pós-teste de StudentNewman-Keuls (α = 0,05), e pela correlação de Pearson e Spearman. Os resultados demostraram que a progressão das lesões de cárie aumentou a atividade da SOD sens KCN, mas não alterou a atividade da SOD ins KCN, reduziu a carbonilação de proteína, e aumentou a biodisponibilidade do NO salivar. Em conclusão, os dados deste estudo mostraram que a progressão da cárie aumenta a atividade da SOD sens KCN que, possivelmente, reduz o dano oxidativo e favorece a biodisponibilidade de NO salivar. Embora exista um aumento da defesa antioxidante enzimática e da biodisponibilidade de NO, a progressão da cárie nestas condições se daria quando os fatores extrínsecos estiverem prevalecendo aos fatores de defesa antioxidante da saliva e ação antibacteriana do NO. Com isso, podemos reforçar a importância do acompanhamento odontológico preventivo da cárie desde a primeira infância para que sejam reduzidos os fatores de risco da cárie e prevaleça a defesa antioxidante salivar e ação antibacteriana do NO(AU)

The aim of this study was to assess whether caries progression alters the activity of superoxide dismutase (SOD) isoforms, protein carbonylation (a biomarker of oxidative damage) and the bioavailability of nitric oxide (NO) in children's saliva. Saliva samples, not stimulated, were collected from children (1 to 3 years old) in a municipal day care center in Birigui, SP, Brazil. The children were divided into 4 groups (n=30/group), according to the ICCMSTM criteria, being group A (caries free), group B (initial caries), group C (moderate caries) and group D (extensive caries). The enzymatic activity of potassium cyanide (KCN)- sensitive superoxide dismutase (SOD) and KCN-insensitive SOD (SOD sens KCN and SOD ins KCN, respectively) were determined by the pyrogallol oxidation method. The protein carbonylation method based on the alkaline method of DNPH (2,4- Dinitrophenylhydrazine) was used to determine oxidative damage (OD). Salivary nitric oxide (NO) bioavailability was quantified by the Griess method. Data were analyzed by ANOVA and Student-Newman-Keuls post-test (α = 0.05), and by Pearson and Spearman correlation. The results showed that with the progression of caries, there was an increase in SOD sens KCN activity, with no change in SOD ins KCN activity, a reduction in protein carbonylation, and an increase in salivary NO bioavailability. We can conclude that the greater the severity of caries, the greater the activity of SOD sens KCN, which leads to less oxidative damage and greater bioavailability of NO. However, it is possible that in the stages of greater caries severity, the antibacterial action of NO is superimposed by external cariogenic factors, favoring the process of demineralization and enamel and dentin damage. Thereby, we understand that the clinical dental care of children in early childhood is a key factor for controlling cariogenic factors and keeping in balance with the antioxidant defense and antibacterial action of NO in saliva(AU)

Blood carbonyl protein measurement as a specific oxidative stress biomarker after intestinal reperfusion in rats / Dosagem da proteína carbonilada sanguínea como biomarcador específico do estresse oxidativo após reperfusão intestinal em ratos

PURPOSE: An experimental study was performed to investigate the use of protein carbonyl group as a specific biological marker for oxidative stress in a rat model of intestinal ischaemia-reperfusion. METHODS: Twenty four male Wistar rats were randomly distributed into three groups with eight animals each: Group 1 - Control group; Group 2 - Sham; Group 3 - Intestinal ischaemia by clamping ileal branches of the superior mesenteric artery for one hour, followed by another hour of reperfusion. Blood samples were taken in order to analyze the protein carbonyl level by Slot blotting assay. RESULTS: In group 3 a significant increase of protein carbonyl level was observed if compared to the homogenous levels of groups 1 and 2. CONCLUSION: From the results it may be concluded that the protein carbonylation may be used as a specific marker for measuring oxidative stress in rat intestinal reperfusion model.

OBJETIVO: Realizou-se um estudo experimental com a finalidade de investigar o uso da proteína carbonilada como um marcador biológico específico do estresse oxidativo em um modelo de isquemia e reperfusão intestinal, em ratos. MÉTODOS: Vinte e quarto ratos da linhagem Wistar, machos foram distribuídos, aleatoriamente, em três grupos compostos por oito animais cada: Grupo 1 - Controle; Grupo 2 - Simulação e Grupo 3 - Submetido à isquemia, mediante clampeamento de ramos ileais da artéria mesentérica superior por uma hora, seguida de reperfusão, por igual período. Amostras sanguíneas obtidas foram utilizadas para analise dos níveis de proteína carbonilada, através do método Slot blotting. RESULTADOS: No grupo 3 houve uma elevação significante da concentração de proteína carbonilada sérica se comparada aos níveis sanguíneos homogêneos encontrados nos grupos 1 e 2. CONCLUSÃO: Fundamentado nos resultados é possível concluir que, a carbonilação protéica pode ser utilizada como um marcador específico para a mensuração do estresse oxidativo em modelos de reperfusão intestinal, em ratos.

Propofol and N-Acetylcysteine attenuate oxidative stress induced by intestinal ischemia/reperfusion in rats: Protein carbonyl detection by immunoblotting / Propofol e N-Acetilcisteína atenuam o estresse oxidativo induzido pela isquemia/reperfusão intestinal em ratos: Detecção de proteína carbonilada por immunoblotting

PURPOSE: To evaluate the antioxidant effect of Propofol and N-Acetylcysteine (NAC) on intestinal ischemia/reperfusion (I/R) in rats by determining carbonyl protein level. METHODS: Forty Wistar rats were randomly assigned into the following groups: Control; Sham; I/R with Propofol; I/R with Propofol and NAC; I/R with Ketamine and Xylazine. The I/R groups underwent 60 minutes of ischemia and an equal period of reperfusion. Blood samples, collected by cardiac punction, were centrifuged for plasma obtainment. Protein carbonyl level in plasma samples was determined by immunoblotting. RESULTS: No significant difference in protein carbonyl level was found between Control and Sham groups (P>0.05). The highest reduction in protein carbonyl level (P<0.05) was obtained with the administration of Propofol and NAC (Group 4) in intestinal I/R procedure. CONCLUSION: The administration of Propofol and NAC showed the best antioxidant effect on oxidative stress in rats that underwent intestinal I/R procedure, suggesting a synergistic interaction.

OBJETIVO: Avaliar o efeito antioxidante do Propofol e N-Acetilcisteína (NAC) na isquemia/reperfusão (I/R) intestinal em ratos através da determinação do nível de proteína carbonilada. MÉTODOS: 40 ratos Wistar foram aleatoriamente distribuídos nos seguintes grupos: Controle; Sham; I/R com Propofol; I/R com Propofol e NAC; I/R com Ketamina e Xilazina. Os grupos I/R foram submetidos à isquemia durante 60 minutos e à reperfusão por igual período de tempo. Amostras de sangue, coletadas por punção cardíaca, foram centrifugadas para a obtenção de plasma. O nível de proteína carbonilada nas amostras de plasma foi determinado por imunoblotting. RESULTADOS: Nenhuma diferença significativa foi encontrada entre os grupos Controle e Sham (P>0.05). Uma redução marcante no nível de proteína carbonilada (P<0.05) foi obtida com a administração combinada de Propofol e NAC (Grupo 4) durante o procedimento de I/R intestinal, comparando-se com os demais grupos I/R testados. CONCLUSÃO: A administração de Propofol e NAC apresentou o melhor efeito antioxidante sobre o estresse oxidativo em ratos submetidos ao procedimento de I/R intestinal, sugerindo-se uma interação sinergística.