Identificación de bacterias periodontopáticas en cepillos dentales con y sin agente antibacterial / Identification of periodontopathic bacteria on toothbrushes with and without antibacterial agent

Resumen Introducción y objetivo: Los cepillos dentales pueden servir como reservorio para la translocación de bacterias periodontopáticas. El objetivo fue determinar la contaminación por bacterias periodontopatógenas en dos tipos de cepillos dentales, con y sin antibacterial. Materiales y métodos: Participaron 20 pacientes con periodontitis, que cepillaron 2 cuadrantes al azar con un cepillo antibacterial y los 2 cuadrantes contralaterales con cepillo normal, con la técnica de Bass modificado. Los cepillos se lavaron con agua por 10 segundos y se almacenaron individualmente en bolsas estériles a temperatura ambiente. A las 0, 4 y 24 h se cortaron 4 cerdas de cada cepillo y se suspendieron en el medio de dilución VMGA I, se sembraron en 3 medios de cultivo en anaerobiosis y CO2, se identificaron de acuerdo a la morfología de las colonias y pruebas adicionales con el sistema de identificación RAPID ANA II. Se evaluó la normalidad de las variables cuantitativas, se comparó el número de UFC/ml en los medios de cultivo a los diferentes tiempos de siembra, mediante la prueba U de Mann Whitney, con un alfa de 0,05. Resultados: Hubo diferencias significativas en el número de UFC/ml en agar sangre a las 24 horas de cultivo (p=0,011). Se identificaron a partir de los cultivos en los 3 tiempos bacterias como Porphyromonas gingivalis,Prevotella intermedia/nigrescens, Fusobacterium spp y Eikenella corrodens, mientras que Tannerella forsythia, Eubacterium spp y bacilos entéricos se recuperaron solo en la siembra inmediata. Conclusión:Ambos tipos de cepillos tuvieron contaminación bacteriana en los distintos medios de cultivo.

Abstract Introduction and objective: Dental toothbrushes can serve as reservoir to translocation of periodontopathic bacteria. The aim was to determine periodontal bacterial contamination in both types of toothbrushes, with and without antibacterial bristles. Materials and methods:We included 20 patients with periodontitis, which brushed two randomly selected quadrants with antibacterial brush and the 2 contralateral quadrants with normal toothbrush with modified Bass technique, and thereafter, the brushes were washed with water for 10 seconds and stored in sterile bags at room temperature. At 0, 4 and 24 h bristles were cut from each brush 4 and suspended in the dilution medium VMGA I. These were plated on 3 culture media in anaerobiosis and CO2 and identified according to the colony morphology and further tests such as UV fluorescence, catalase and identification system RAPID ANA II. Normality of the quantitative variables was assessed and compared the number of CFU/ ml in the culture media to different culturing times, by the nonparametric Mann Whitney U test with a significance level of p <0.05. Results: There were significant differences in the number of CFU / ml in blood agar at 24 hours of culture (p = 0.011). Were identified from cultures at 3 times bacteria like Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia/ nigrescens, Fusobacterium spp and Eikenella corrodens, while Tannerella forsythia, Eubacterium spp and enteric bacilli were recovered only in the immediate culturing. Conclusion: Both types of brushes had bacterial contamination in the different culture media tested.

Eficacia de cuatro cepillos dentales en la remoción de placa bacteriana mediante la técnica modificada de Bass en estudiantes de Salud Oral de la ciudad de Cali / Efficacy of four toothbrushes on removal of plaque with modified Bass technique in Dental Hygiene students at Cali

Objetivo: Evaluar la eficacia de cuatro cepillos dentales de diferente diseño (Colgate Microsonic®, Colgate Twister Fresh®, Colgate 360 Sensitive® y Colgate 360®) para determinar si existe superioridad clínica en la remoción de placa bacteriana de alguno de ellos mediante la técnica de Bass modificado en estudiantes de salud oral de la ciudad de Cali. Materiales y métodos: Se trata de un ensayo clínico aleatorizado que compara la eficacia de cuatro diseños de cepillos dentales a través de diferentes técnicas de cepillado en 200 estudiantes de dos programas de entrenamiento de auxiliares de salud oral, de sexo femenino, con edades comprendidas entres los 15 y 43 años, escogidos por conveniencia y los cuales conformaron los grupos control (cualquier técnica de cepillado) e intervención (técnica de cepillado de Bass modificado). El seguimiento fue realizado durante 21 días a través de la aplicación del Índice de placa bacteriana de O´leary realizada por un odontólogo. Resultados: El cepillo Colgate Twister Fresh® (33%) tuvo mayor probabilidad de reducir el índice de placa bacteriana en cualquier momento del seguimiento cuando se comparó su eficiencia con la de los otros cepillos. La técnica modificada de Bass tuvo mayor probabilidad de reducir placa bacteriana que otras técnicas pero de igual forma esta diferencia no fue significativa. Conclusiones: No se encontró diferencia significativa entre las técnicas de cepillado tenidas en cuenta en este estudio. Ninguno de los cuatro diseños de cepillos empleados en este estudio presentó significancia estadística respecto a la eliminación de la placa bacteriana.

Aim: To evaluate the efficacy of four different designed toothbrushes (Colgate Microsonic®, Colgate Twister Fresh®, Colgate 360 Sensitive® y Colgate 360®) to determine the clinical advantage on removal of plaque using modified Bass technique in dental hygiene students in Cali. Methods: This is a controlled clinical trial to compare the efficacy of four toothbrushes designs with different tooth brushing methods in 200 female dental hygiene students with ages from 15 to 43. Control group used any tooth brushing technique whereas test group used modified Bass technique. Follow up was made daily for 21 days with O´Leary Plaque Index. Results: Colgate Twister Fresh® toothbrush had more probability to reduce plaque index at any time of follow up period than other toothbrushes. Modified Bass technique had more chance to reduce plaque than other techniques but with no significant differences. Conclusions: there were no statistically significant differences between tooth brush techniques. None of the four designs of studied toothbrushes showed differences in regard to plaque elimination.

Contaminación bacteriana de cepillos dentales en niños y sus padres: una cuestión de educación / Bacterial contamination of toothbrushes in children and their parents: an education issue

Se ha determinado que los instrumentos dentales y de higiene oral puedan contribuir en la transmisión de microorganismos que causan infecciones orales. Se estudió la contaminación bacteriana de cepillos dentales en 104 sujetos de 40 grupos familiares (16 padres, 40 madres y 48 niños). Se tomaron muestras subgingivales al inicio del estudio y fueron analizadas por medio de cultivo no selectivo y selectivo para organismos periodontopáticos y bacilos entéricos. Los pacientes fueron examinados usando el índice CPITN para establecer el grado salud periodontal. Cada padre de familia recibió un cepillo dental y crema dental para uso personal durante un mes en su hogar, mientras que los niños recibieron un cepillo que fue utilizado con crema dental en la cita de examinación y otro para uso durante un mes. Los cepillos y muestras subgingivales fueron recolectados y analizados para la presencia de microorganismos periodontopáticos y bacilos entéricos. La información fue analizada usando pruebas estadísticas de Wilkoxon signed rank test y Friedman test (P = 0,05). Los cepillos dentales de la mayoría de sujetos resultaron altamente contaminados con bacilos entéricos gram negativos comparado con el ambiente subgingival en donde fueron mas frecuentes los microorganismos periodontopáticos. Los microorganismos mas frecuentes en cepillos dentales de padres y niños fueron los bacilos entéricos gram negativos (55%) seguidos por Fuso-bacterium sp (30%). Se concluyó que los cepillos dentales de los grupos familiares después de un mes de uso albergan altos niveles de bacilos entéricos gram negativos. Esta contaminación de los cepillos puede representar un factor de riesgo en la transmisión de microorganismos superinfectantes y periodontopáticos implicados en el inicio de procesos infecciosos en la cavidad oral, incluyendo gingivitis y periodontitis.

Toothbrush contamination could facilitate transmission/translocation of pathogenic organisms between individuals and oral sites. The purpose of this study was to determine the bacterial contamination of toothbrushes in 40 families. One hundred and four healthy subjects were included in this descriptive study. Every individual was examined clinically and microbiologically using the CPITN index and collecting subgingival plaque samples. Each parent received a toothbrush for home use and after one month they returned it to the investigators. Children received two toothbrushes, one used during the first examination and the other for home use which was returned after 1 month. All toothbrushes were cultured to determine periodontopathogens and enteric rods. Wilkoxon signed rank test and Friedman test (P = 0.05) were used to compare differences in the subgingival microbiota and toothbrush contamination among family members. Toothbrushes of most subjects resulted highly contaminated with enteric rods (P=0.001) compared to the subgingival environment where periodontopathic bacteria were more prevalent. The most frequent microorganisms found in toothbrushes used by parents and children for one month were. Enterobacteriaceae and Pseudomonadaceae species (55%) and Fuso-bacterium species (30%). High levels of enteric rods were commonly detected in toothbrushes used for 1 month among families members. These opportunistic organisms may have an important role in oral infections including gingivitis and periodontitis.

Contaminación in vitro de cepillos dentales / In vitro contamination of toothbrushes

Se deierminó que los cepillos dentales mantienen viables y pueden transmitir 3 microorganismos frecuentemente implicados en infecciones orales. Los microorganismos fueron inoculados in vitro en cepillos mantenidos a temperatura ambiente y sometidos a subcultivo desde las 3 horas hasta los 16 días. Inóculos de aproximadamente 5 millones de bacterias/ml de un importante periodontopático, el Actinobacillus actinomycetemcomitans; de un entérico oportunista, el Enterobacter cloacae y una dosis infectiva 50, ID50 de un herpesvirus oral, el Herpes simplex virus tipo 1, (HSV-1) fueron colocados sobre cerdas de los cepillos. A. actinomycetemcomitans y el HSV-1 resultaron viables hasta por 72 horas. E. cloacae fué viable hasta por 16 dias, el tiempo máximo de subcultivo planteado en este estudio (Tabla 1). La viabilidad bacteriana se demostró por subcultivo de los microorganismos en TSBV y la identidad de los microorganismos se determinó por la morfología de la colonia, la catalasa, el MUG, la reacción en cadena de la polimerasa especie/especifico para A. actinomycetemcomitans y pruebas bioquímicas rápidas como subcultivo en McConkey y asimilación de sustratos para E. cloacae. La viabilidad viral se estableció por aparición del efecto citopatogénico en mononocapas de pulmón embrionario humano del inóculo recuperado de los cepillos, pase seriado e lFA indirecta contra HSV-1. Este estudio concluye que los cepillos dentales pueden ser un reservorio y además transmitir importantes patógenos orales entre familiares o individuos.

This study determined that toothbrushes could maintain viable and perhaps transmit to other family member 3 important oral pathogens. The toothbrushes were infected with an approximate inoculum of 5 million bacteria's per ml of Actinobacillus actinomycetemcomitans, and Enterobacter cloacae, respectively and an infective dose 50 (ID 50) of Herpes Simplex type I, (H5V-1 ). These microorganisms were placed directly on the tooth bristles at room temperature and subcultured at different times to establish individual microbial survival rates. Microorganisms were cultured at 3 hours. 24 hours, 96 hours, 5 days, 12 days, and 16 days after the initial toothbrush inoculation. A. actinomycetemcomitans, and HSV-1 resulted viable after 72 hours on toothbrushes. E. cloacae was viable as far as 16 days after the initial inoculation. The microbial viability was determined by subculture in TSBV and the identity of the microorganisms established by the bacterial colony morphology, rapid biochemical tests, and specie-specific polymerase chain reaction for A. actinomycetemcomitans. Viral viability was determined by visualization of the viral induced cytopathic effect on a cultured monolayer of embryonic lung fibroblasts from replicating HSV-1. Positive cultures were confirmed by IFA assay against HSV-L 1. In conclusion this study demonstrated in vitro that toothbrushes could act as a reservoir of microbes and maybe transmit important oral pathogens.