Antibacterial Activity of Zinc Oxide Nanoparticles in Self- Curing Acrylic Resin Against Streptococcus mutans

ABSTRACT: Antibacterial activity of zinc oxide nanoparticles in self-curing acrylic resin against Streptococcus mutans. The main objective of this study was to investigate whether nanoparticles of zinc oxide (ZnO) in self-curing acrylic resin, hav e antimicrobial properties against Streptococcus mutans, one of the microorganisms involved in the development of caries. Self- cured acrylic resin samples were prepared by incorporating ZnO nanoparticles at different concentrations based on the minimum inhibitory concentration (MIC) for Streptococcus mutans ATCC 25175. Antibacterial activity against a biofilm was evaluated in samples that were aged in artificial saliva for different times using spectral confocal laser microscopy and scanning electron microscopy. Kruskal-Wallis test using IBM SPSS Statistics version 23.0 software (SPSS Inc. ®, Chicago, IL, United States) were used, establishing the value of p <0.05 for statistical significance. The volume of the total biomass that formed in the samples aged for one day was significantly lower than the volume of the total biomass that was formed in those aged for additional days (p <0.001). Electron microscopy analysis revealed high porosity surfaces in all samples. Bacterial clusters wer e located next to large pores and irregular surfaces, while smooth surfaces had defined and linear organization cocci or simple chains. Considering the limitations of this study, the results suggest that the antibacterial activity of ZnO nanoparticles add ed to self-curing acrylic (ALIKE) is effective, mainly in fresh 1-day samples, independent of their concentration, and in samples with 16 MIC aged for 14 days, indicating it does not lose its antibacterial activity despite setting for more days. In addition, the ZnO nanoparticles added to ALIKE have the ability to inhibit the formation of biofilms, although they do not minimize the number of viable bacteria.

RESUMEN: El objetivo principal de este estudio fue investigar si nanopartículas de óxido de zinc (ZnO), incorporadas a acrílico acrilico de autocurado, tienen propiedades antimicrobianas contra Streptococcus mutans, uno de los microorganismos implicados en el desarrollo de caries. Se prepararon muestras de resina acrílica autopolimerizada mediante la incorporación de nanopartículas de ZnO a diferentes concentraciones basadas en la concentración mínima inhibitoria (MIC) para Streptococcus mutans ATCC 25175. Se evaluó la actividad antibacteriana contra una biopelícula en muestras envejecidas en saliva artificial para diferentes tiempos utilizando espectros microscopía láser confocal y microscopía electrónica de barrido. Se utilizó la prueba de Kruskal-Wallis utilizando el software IBM SPSS Statistics versión 23.0 (SPSS Inc. ®, Chicago, IL, Estados Unidos), estableciendo el valor de p <0,05 para la significancia estadística. El volumen de la biomasa total que se formó en las muestras envejecidas durante un día fue significativamente menor que el volumen de la biomasa total que se formó en las envejecidas durante días adicionales (p <0,001). El análisis de microscopía electrónica reveló superficies de alta porosidad en todas las muestras. Los cúmulos bacterianos se ubicaron junto a poros grandes y superficies irregulares, mientras que las superficies lisas tenían cocos o cadenas simples de organización lineal y definida. Considerando las limitaciones de este estudio, los resultados sugieren que la actividad antibacteriana de las nanopartículas de ZnO agregadas al acrílico autopolimerizable (ALIKE) es efectiva, principalmente en muestras frescas de 1 día, independientemente de su concentración, y en muestras con 16 MIC envejecidas para 14 días, lo que indica que no pierde su actividad antibacteriana a pesar de estar fraguada durante más días. Además, las nanopartículas de ZnO añadidas a ALIKE tienen la capacidad de inhibir la formación de biopelículas, aunque no minimizan el número de bacterias viables.

Candida auris infection in the central catheter of a patient without sepsis symptoms / Infección por Candida auris en el catéter central de un paciente sin síntomas de sepsis

Abstract Background: Candida auris is an emerging yeast frequently reported as resistant to multiple antifungal drugs commonly used to treat Candida infections. This specie can colonize the patient's skin and has great ability for producing outbreaks in hospitals. C. auris is phylogenetically related to other Candida species, can be misidentified using conventional biochemical or commercial methods and requires specific technology for its identification. Case report: We report the first isolate of C. auris in Cali, Colombia, from a central venous catheter in a 37-year-old patient with rheumatoid arthritis and endocarditis who did not have symptoms of sepsis. The yeast was initially misidentified as C. haemulonii using the Phoenix system and subsequently identified as C. auris by matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS). The broth microdilution method was used to determine the minimum inhibitory concentration; the isolate was susceptible to fluconazole, itraconazole, voriconazole and amphotericin B. Conclusions: This report contributes to knowledge of the epidemiology of C. auris infections in individuals with underlying disease and describes an isolate with a behavior different from what is usually reported.

Resumen Antecedentes: Candida auris es una levadura emergente, informada con frecuencia como resistente a diversos antifúngicos usados comúnmente para tratar infecciones por Candida. Esta especie puede colonizar la piel y tiene gran capacidad de producir brotes en ambientes hospitalarios. Está filogenéticamente relacionada con otras especies de Candida, es mal identificada por los métodos bioquímicos o comerciales, y requiere tecnología específica para su identificación. Reporte de caso: Se informa el primer aislamiento de C. auris en Cali, Colombia en un paciente de 37 años con artritis reumatoide y endocarditis, sin síntomas de sepsis, a partir de la punta de catéter venoso central. La levadura inicialmente se identificó como C. haemulonii por el sistema Phoenix® y posteriormente como C. auris por espectrometría de masas desorción/ionización láser asistida por una matriz con detección de masas por tiempo de vuelo (MALDI-TOF MS). Se determinó la concentración inhibitoria mínima por el método de microdilución en caldo que mostró un aislamiento sensible a fluconazol, itraconazol, voriconazol y anfotericina B. Conclusión: Este informe contribuye al conocimiento de la epidemiología de las infecciones por C. auris en individuos con enfermedad subyacente y describe un aislamiento con un comportamiento diferente a lo indicado en otros estudios.

Antibacterial and Antifungal Activities of Compounds Isolated from Gymnosporia Royleana (Celastraceae) / Actividades antibacterianas y antifúngicas de compuestos aislados de Gymnosporia Royleana (Celastraceae)

ABSTRACT Objective: In the present study, five new source compounds isolated from aerial parts of Gymnosporia royleana (G royleana) were screened for antibacterial and antifungal activities. Methods: Extraction from plant material was carried out using cold maceration technique. Isolation of pure compounds was accomplished through repeated column chromatography of different fractions obtained from crude extract and using silica gel as stationary phase. Their structures were established via advanced spectroscopic techniques along with the spectral data previously reported for these compounds. Dilution method was used for the evaluation of antimicrobial potential of the compounds against various microbial strains. Results: Among the tested compounds, Gymnosporin B displayed moderate antimicrobial activity against Escherichia Coli (E coli), Staphylococcus aureus (S aureus), Candida albicans (C albicans) and Aspergillus flavus (A flavus) [minimum inhibitory concentration (MIC) range; 32-64 μg/mL]. Similarly, Gymnosporin C also showed moderate activity against E coli and S aureus (MIC; 32 μg/mL each) as well as weak activity against C albicans and A flavus (MIC; 64 μg/mL each). However, Royaflavone showed moderate antibacterial activity against S aureus only (MIC; 32 μg/mL). Antimicrobial activity of the rest of the compounds was weak and negligible. Conclusion: The present study has provided fascinating results of antimicrobial activities of the isolated compounds. However, the broad antimicrobial spectrum of Gymnosporin B and Gymnosporin C demands for further exploration of these triterpenes, both on the basis of mechanism and quantitative structure-activity relationship.

RESUMEN Objetivo: En el presente estudio, cinco nuevos compuestos de origen aislados de partes aéreas de Gymnosporia royleana (G royleana) fueron tamizados en sus actividades antibacterianas y antifúngicas. Métodos: La extracción de material vegetal se realizó mediante la técnica de maceración en frío. El aislamiento de compuestos puros se logró a través de la cromatografía en columna repetida de diversas fracciones obtenidas del extracto crudo y usando gel de silicona como fase estacionaria. Sus estructuras fueron establecidas mediante técnicas espectroscópicas avanzadas junto con los datos espectrales previamente reportados para estos compuestos. El método de dilución fue usado para evaluar el potencial antimicrobiano de los compuestos contra diversas cepas microbianas. Resultados: Entre los compuestos sometidos a prueba, Gymnosporina B mostró una actividad antimicrobiana moderada contra Escherichia Coli (E coli), Staphylococcus aureus (S aureus), Candida Albicans (C albicans) y Aspergillus flavus (A flavus) [rango de concentración inhibitoria mínima (CIM); 32 - 64 μg/mL]. De manera similar, Gymnosporina C también mostró actividad moderada contra E coli y S aureus (CIM; 32 μg/mL cada uno) así como débil actividad frente a C albicans y A flavus (CIM; 64 μg/mL cada uno). Sin embargo, Royaflavone mostró actividad antibacteriana moderada sólo frente a S aureus (CIM; 32 μg/mL). La actividad antimicrobiana del resto de los compuestos fue débil e insignificante. Conclusión: El presente estudio ha proporcionado resultados interesantes acerca de las actividades antimicrobianas de los compuestos aislados. Sin embargo, el amplio espectro antimicrobiano de la Gymnosporina B y la Gymnosporina C exige una mayor exploración de estos triterpenos, tanto sobre la base del mecanismo como a partir de la relación cuantitativa estructura-actividad.

Sensibilidad a los antimicrobianos de aislamientos de Streptococcus equi subsp. equi de la provincia de Buenos Aires, Argentina / Antimicrobial susceptibility in isolates of Streptococcus equi subsp. equi from Buenos Aires province, Argentina

Streptococcus equi subsp. equi es el agente etiológico de la adenitis equina, una enfermedad infecciosa que afecta al tracto respiratorio superior y linfonódulos de cabeza y cuello de equinos. La terapia antimicrobiana tradicional incluye como antibiótico de primera elección a la penicilina G (PEN), a la que los estreptococos suelen ser sensibles. El objetivo de este trabajo fue estudiar el perfil de sensibilidad a distintos antimicrobianos de cepas de S. equi que circulan en la provincia de Buenos Aires, Argentina. Se estudiaron 92 aislamientos mediante el método de difusión con discos; los antimicrobianos evaluados fueron PEN, cefotaxima, eritromicina, tetraciclina, enrofloxacina (ENR), trimetroprima-sulfametoxazol (TMS), ciprofloxacina, clindamicina (CLI), estreptomicina (STR) y florfenicol. Se determinó la concentración inhibitoria mínima (CIM) de la PEN y de aquellos antimicrobianos frente a los cuales S. equi mostró resistencia o sensibilidad intermedia. Se obtuvieron altos porcentajes de sensibilidad a todos los antimicrobianos por el método de difusión y valores de CIM por debajo de los puntos de corte para PEN, TMS y CLI. Se identificaron cepas resistentes a ENR y STR, con CIM50, CIM9o y rangos de CIM por encima de los puntos de corte. Los resultados confirman que la PEN podría utilizarse empíricamente, ya que las cepas circulantes en Buenos Aires no mostraron resistencia a este antimicrobiano. Se enfatiza en la relevancia del uso racional de los antibióticos para lograr éxito terapéutico, evitar la cronicidad, la recidiva de infecciones y la aparición de resistencia.

Streptococcus equi subsp. equi is the etiologic agent of strangles, an infectious disease affecting the upper respiratory tract and head and neck lymph nodes of equines. Routine antimicrobial therapy includes penicillin (PEN) as antibiotic of first choice. Streptococci are usually susceptible to PEN and only a few antimicrobial studies had been performed. The aim of this work was to study the antimicrobial susceptibility profile of S. equi from Buenos Aires, Argentina. Ninety-two isolates were studied by the single disk method to PEN, cefotaxime, erythromycin (ERY), tetracycline, enrofloxacin (ENR), trimethoprim sulfamethoxazole (TMS), ciprofloxacin, clindamycin (CLI), streptomycin (STR) and florfenicol. Minimum inhibitory concentration (MIC) to PEN and antibiotics with resistance and intermediate susceptibility were tested. High percentages of susceptibility were obtained by the disk diffusion method and MIC values of PEN, TMS and CLI were found to be under the breakpoint values. Resistant strains of ENR and STR with MIC50, MIC90 and MIC ranges above breakpoints were identified. These findings confirm that PEN may be used empirically because resistant strains were not found in Buenos Aires. Emphasis is placed on the rational use of antibiotics to achieve therapeutic success, to prevent chronicity, recurrence of infections and the emergence of resistance.

Evaluación de susceptibilidad y respuesta al tratamiento con piperacilina/tazobactam en pacientes con infecciones por Escherichia coli productoras de β -lactamasas de espectro extendido (BLEE) CTX-M / Evaluation of susceptibility and response to therapy with piperacillin-tazobactam in patients with infections caused by Escherichia coli with extended-spectrum β -lactamase (ESBL) CTX-M

Resumen Introducción: En las infecciones por enterobacterias productoras de β-lactamasas de espectro extendido (BLEE), los β-lactámicos preferidos para tratamiento son los carbapenémicos. Sin embargo, estudios clínicos muestran eficacia de piperacilina/tazobactam en ciertas infecciones por Escherichia coli productoras de BLEE. Objetivo: Determinar la cura clínica y microbiológica con piperacilina/tazobactam en pacientes con infecciones por E. coli productoras de BLEE, tipo CTX-M. Materiales/Métodos: Estudio descriptivo, retrospectivo, con adultos internados en un hospital universitario. Incluimos infecciones del tracto urinario (ITU), intra-abdominales (IIA) e infecciones de tejidos blandos (ITB). Resultados: Estudiamos 40 pacientes, donde 65% correspondían a ITU, 25% IIA y 10 % ITB. La cura clínica global se logró en 89,4%, con mejores resultados en las ITU (100%), seguidas de ITB (80%) e IIA (70%). El 85% de las cepas tenía concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) ≤ 8 μg/mL y 70% con CIM ≤ 4 μg/mL. La tasa de fracaso fue mayor en las infecciones con inóculos altos intraabdominales. La BLEE del tipo CTX-M-15 se encontró en 62,5%. Conclusiones: Piperacilina/tazobactam logró cura clínica y microbiológica, en pacientes con infecciones por E. coli productoras de BLEE susceptibles, especialmente en ITU e IPB y en menor medida en IIA.

Background: Carbapenems are the preferred β-lactamics for treatment for infections caused by enterobacteria producing extended-spectrum β-lactamases (ESBL); however, clinical studies show effectiveness of piperacillin/tazobactam in certain infections by Escherichia coli ESBL producers. Aim: To determine the clinical and micro-biological cure with piperacillin/tazobactam in patients with infections caused by E. coli ESBL producers, CTXM type. Methods: Retrospective descriptive study with adults hospitalized in a university hospital. We included urinary tract infections (UTI), intra-abdominal infections (IAI), soft tissue infections (STI) and/or bacteremia. Results: We studied 40 patients, where 65% corresponded to UTI, 25% to IAI and 10% were STI. The overall clinical cure was achieved in 89.4%, with the best results in the ITU (100%), followed by STI (80%) and 70% in IAI. The 85% of the strains had minimum inhibitory concentrations (MIC) ≤8 μg/ml and 70% with MIC ≤4 μg/mL, however the rate of failure were high in intra-abdominal infections with high inocula or not controlled; CTX-M-15 was found in the 62.5%. Conclusions: Piperacillin/tazobactam was efficient to obtain clinical and microbiological cure in patients with infections caused by ESBL producers but susceptible E. coli, especially in UTI and STI and to a lesser extent in IAI.

Uso de la terapia combinada en infecciones causadas por enterobacterias resistente a carbapenémicos desde un enfoque microbiológico: revisión sistemática / Combined therapy use in infections caused by carbapenem-resistant enterobacteriaceae since a microbiological approach: a systematic review

Introducción: las carbapenemasas representan actualmente una amenaza para la salud humana en todo el mundo y constituirán uno de los problemas más difícilesde tratar en los próximos años. Objetivo: describir del uso de la terapia combinada con carbapenémicos en las infecciones por enterobacterias resistente a carbapenémicos desde un enfoque microbiológico. Materiales y Métodos: se realizó una revisión sistemática en PubMed sobre estudios en humanos y modelos de infección múridos, publicados entre 2010 y 2016 en inglés. Los estudios debían reportar los resultados de mortalidad asociada según el esquema de monoterapia y terapia combinada con carbapenémicos. La búsqueda para la selección de los estudios se basó en las palabras clave: ®Carbapenem Resistance AND carbapenems¼, ®treatment and outcomes carbapenems enterobacteriaceae¼, ®Klebsiella pneumoniae¼, ®carbapenemase¼, ®Klebsiella pneumoniae AND combination therapy¼. Resultados: se seleccionaron cinco estudios que incluyeron en total 1.313 pacientes con infecciones por enterobacterias resistentes a carbapenémicos y que proporcionaban información sobre el uso de la terapia combinada con carabapenémicosfrente a la monoterapia en términos de las tasas de mortalidad asociada. Conclusiones: actualmente no se dispone de estudios clínicos controlados publicadosen el tema, por lo que la elección del tratamiento antibiótico frente a las infecciones por enterobacterias resistentes a carbapenémicos aún es controvertida. La evidencia clínica emergente sugiere que el uso de la terapia combinada resulta beneficioso para este tipo de infecciones. Hoy en día los clínicos optan por reutilizarviejos antibióticos como las polimixinas, a pesar de la resistencia codificada por el gen mcr-1 adquirida por plásmidos.

Introduction: carbapenemases currently represent a threat to human health worldwide and going to constitute one of the most difficult problems to resolve in the coming years. Objective: To describe the use of combined therapy with carbapenems in carbapenem-resistant Enterobacteriaceae infections since a microbiologicalapproach. Materials and methods: A systematic literature review was conducted on PubMed database about humans and murine infection models studies, published between 2010 and 2016, in English language. Studies had to reportclearly the primary outcome of mortality assessed according the monotherapy scheme and combined therapy with carbapenems. Search strategies for the selectionof studies were based on the key words: ®Carbapenem Resistance AND carbapenems¼, ®treatment and outcomes carbapenems Enterobacteriaceae¼, ®Klebsiella pneumoniae¼, ®carbapenemase¼, ®Klebsiella pneumoniae AND combination therapy¼. Results: Five studies involving 1,313 patients with carbapenem-resistant Enterobacteriaceae infections and that provide the information about the use of combined therapy versus monotherapy in terms of mortality rates were selected. Conclusions: Until my knowledge to date, they have not published controlled clinicaltrials around this issue, so the choice of antibiotic treatment against carbapenem-resistant Enterobacteriaceae infections is still controversial. Emerging clinical evidence suggests that the use of combined therapy is beneficial for these kinds of infections. Currently clinicians opt to reusing old antibiotics like polymyxins in spite of acquired resistance by plasmids, encoded by the mcr-1 gene.

Lo que debemos saber sobre losmétodos de sensibilidad a losantifúngicos / What we must know about antifungal suceptibility testing

El aumento creciente de infecciones fúngicas y la aparición de resistencia a los antimicóticos,han hecho necesario el desarrollo de métodos estandarizados para la determinación dela susceptibilidad antifúngica. Tales métodos deben ser reproducibles y adaptables a un laboratorioasistencial, de manera que permitan la detección de resistencia in vitro, la cual, en la mayoría delos casos, suele correlacionarse con una evolución clínica desfavorable. Tanto el Clinical LaboratoryStandards Institute, como el European Committee for Antimicrobial Susceptibility Testing han desarrolladoguías para la medición estandarizada de la sensibilidad de varias especies de hongos a losantimicóticos actuales. En la literatura científica colombiana son pocos los datos disponibles sobrela sensibilidad antifúngica, por lo que frente al creciente aumento de la resistencia a los antifúngicos,se hace necesario comenzar a recopilar datos propios. En este artículo se hace una revisión de lasúltimas publicaciones indexadas en Pubmed con relación a los distintos métodos disponibles paramedir la sensibilidad antifúngica y, adicionalmente, se destaca su utilidad en la práctica clínica.

The increasing number of fungal infections andthe emergence of antifungal resistance, have prompted the development of standardized methods for determining antifungal sensitivityprofiles, aiming at obtaining reproducible andadaptable tests that could be done in hospital laboratories for the in vitro determination of resistanceas, in most cases, data correlate withan unsatisfactory clinical outcome. Both the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI)and the European Committee for AntimicrobialSusceptibility Testing (EUCAST), have developed guidelines for the interpretation of standardized sensitivity measurements of the various fungalspecies to current antifungal compounds.In the Colombian scientific literature, few data are available on antifungal sensitivity; however,with the increasing number of antifungal resistant isolates, it is necessary to begin collecting our own data. This paper reviews recent publicationsin PubMed regarding the various methods of antifungal susceptibility testing and highlights their usefulness in clinical practice.

Estudio de susceptibilidad a tigeciclina: Influencia del agar Mueller-Hinton en el método de difusión en agar y validación del método E-test® para Acinetobacter baumannii / In vitro evaluation of tygecicline: Influence of Mueller-Hinton agar in agar diffussion methods and validation of E-test® for Acinetobacter baumannii

Tigecycline is a glicylcicline with broad antimicrobial spectrum. Susceptibility testing to this drug for Acinetobacter is difficult in hospitals due to the utilization of the disk diffusion method. FDA break points have shown an unacceptable rate of errors (23 percent) for disk diffusion versus broth microdilution in American studies and overcall of resistance depending on the brand of Mueller Hinton agar used. Modifications to these FDA break points have been proposed, but there is not enough evidence yet. Data from a multicenter study from Chile allowed the evaluation of the characteristics of the agar used for susceptibility testing and the utility of E-test as an alternative MIC method for Acinetobacter. The Mueller Hinton agar brand is an important factor that affects disk diffusion method results. There is very good correlation between broth microdilution and E-test for the susceptibility category as well as for MIC determination. The intermedíate and resistant results obtained with disk diffusion method should be checked by using E-test.

Tigeciclina es una glicilciclina de amplio espectro antimicrobiano. La determinación de la susceptibilidad a este fármaco presenta dificultades en el laboratorio asistencial al utilizar la técnica de difusión por disco para Acinetobacter spp. Los puntos de corte -según la (FDA- han mostrado una tasa inaceptable de errores (23 por ciento) en comparación con el método de micro-dilución en caldo en estudios americanos, diversas evaluaciones demuestran que existe una sobreestimación de resistencia in vitro dependiendo de las características del agar Mueller Hinton utilizado. Se han propuesto modificaciones a los puntos de corte pero no se han oficializado por insuficientes evidencias. Los datos de un estudio multicéntrico realizado en Chile permitieron evaluar la influencia de las distintas marcas de medios de cultivo en el tamaño de los halos y la utilidad de la epsilometría (E-test®) como método CIM para Acinetobacter sp. La marca de agar Mueller Hinton y otros factores propios del medio dificultan la determinación de la susceptibilidad a tigeciclina utilizando difusión por disco. Existe muy buena correlación entre la micro-dilución en caldo y el E- test®, tanto para la categoría de susceptibilidad como para la CIM. Por esto, se sugiere que los resultados intermedios o resistentes obtenidos por difusión en agar para A. baumannii sean comprobados mediante el uso de E-test®.

Evaluación de un micrométodo colorimétrico para determinar la concentración inhibitoria mínima de drogas antituberculosas frente a Mycobacterium tuberculosis / Evaluation of a colorimetric micromethod for determining the minimal inhibitory concentration of antibiotics against Mycobacterium tuberculosis

La tuberculosis multidrogorresistente (MDR), originada por aislamientos de cepas simultáneamente resistentes a isoniacida y rifampicina, es reconocida en la actualidad como un problema sanitario mundial. Nuevas técnicas que permitan detectar en forma temprana cepas MDR son necesarias para evitar su dispersión en la comunidad. En este trabajo hemos evaluado el empleo de un micrométodo colorimétrico para determinar las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) de las drogas de primera línea frente a dichas cepas, usando el indicador: bromuro de 3-(4,5 dimetiltiazol-2-yl)-2,5 difeniltetrazolio (M-MTT). Junto a la cepa de referencia H37Rv se procesaron 603 aislamientos clínicos, 507 provenientes de casos pulmonares (84,1%) y 96 de extrapulmonares (15,9%). Como estándar de referencia se utilizó el método de proporciones en medio de Löwenstein-Jensen (MP), con isoniacida (INH), 0,20 µg/ml; estreptomicina (SM), 4,00 µg/ml; etambutol (EMB), 2,00 µg/ml y rifampicina (RMP), 40,00 µg/ml. Los intervalos de concentraciones de las drogas empleadas en el M-MTT fueron: INH, 1,00-0,03 µg/ml; SM, 8,00-0,25 µg/ml; EMB, 32,00-1,00 µg/ml y RMP: 2,00-0,06 µg/ml. El resultado de la CIM por el M-MTT fue obtenido en un tiempo promedio de 8 días (rango total: 7 a 12 días). Los puntos de corte para cada una de las drogas, calculados mediante el análisis de la curva ROC, fueron: INH, 0,25 µg/ml; RMP, 0,50 µg/ml; SM, 4,00 µg/ml y EMB, 4,00 µg/ml. Los valores de sensibilidad y especificidad fueron 100% en el caso de RMP; y 97,8% y 99,5%, respectivamente, para INH. El análisis estadístico de los resultados permitió concluir que el M-MTT es un método seguro para la rápida detección de MDR. Por su sencillez y bajo costo, podría ser aplicado en los países en vías de desarrollo.

Multidrug-resistant tuberculosis (MDR) caused by strains resistant to both isoniazid and rifampin is now considered a serious sanitary problem worldwide. New technical tools for the early detection of these strains are urgently needed to avoid their spread within the community. We have evaluated a microplate colorimetric-based method to determine the minimal inhibitory concentration (MIC) of first-line antituberculosis drugs by using 3-(4, 5 dimethylthiazolyl 1-2 yl)-2,5 diphenyl tetrazolium bromide as a bacterial growth indicator (MTT) (M-MTT). A total of 603 clinical isolates, 507 from respiratory cases (84.1%) and 96 from non-respiratory cases (15.9%) were processed. The proportion method on a Löwenstein-Jensen medium (PM) with isoniazid (INH), 0.20 µg/ml; streptomycin (SM), 4.00 µg/ml; ethambutol (EMB), 2.00 µg/ml and rifampin (RMP), 40.00 µg/ml, was used as the gold standard. The drugs and the concentration range tested were: INH, 1.00-0.03 µg/ml; SM, 8.00-0.25 µg/ml; EMB, 32.00-1.00 µg/ml and RMP, 2.00-0.06 µg/ml. MIC results were obtained on an average of 8 days (range: 7-12). The cut-off values for each drug, calculated by the ROC curve method, were: INH, 0.25 µg/ml, RMP, 0.50µg/ml, SM, 4.00 µg/ml and EMB, 4.00 µg/ml. Sensitivity and specificity for RMP were 100 %, while for INH, they were 97.8% and 99.5% respectively. The results obtained suggested that M-MTT is a low cost and easy to set up method that could be applied to MDR clinical diagnosis in developing countries.

Actualidad en el tratamiento contra la candidiasis en pacientes con SIDA / The treatment against Candiadiasis in patients with AIDS at the present time

Desde el 2000, diariamente se registran 14.000 nuevas infecciones por HIV en la población mundial. Esta realidad nos muestra que en los próximos años la tasa de pacientes que desarrollen SIDA será alta y por ende también lo serán las enfermedades por agentes oportunistas que en ellos se presentan. De estas enfermedades entran a ocupar el primer lugar las candidiasis, que en muchos casos son la primera manifestación clínica que se presenta en un paciente con HIV que está pasando a desarrollar el síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El problema que acompaña a esta lesión fúngica es que tiende a recurrir, por lo que el uso de medicamentos de manera cíclica y por largos períodos, necesario para controlarla, está creando que las concentraciones inhibitorias mínimas de algunos de ellos suban o incluso sean ineficaces para algunas cepas que pasan a ser resistentes. De ahí radica la necesidad de dar un tratamiento controlado con el fin de optimizar la administración del mismo así como importante resulta también probar nuevos fármacos que nos permitan un mejor control sin que se desarrolle resistencia.

Since the year 2000, daily there are 14000 new cases of HIV infections registered in the worldwide population. This shows us that in the years to come the rate of patients to develop AIDS will be high and so will be the opportunistic diseases that occurs in these patients. Candidiasis occupies the first place among this opportunistic diseases and in many cases is the first clinical manifestation that indicates the transition that an HIV patient is developing AIDS. The problem that accompanies this fungal lesion is that in tends to reoccur that is why it is necessary to use drugs for long periods of time and in a cyclical manner to control the infection. This causes that in some of them the minimal inhibitory concentrations to rise or be inefficient in some strains who in turn become resistant. That it why is necessary to give a controlled treatment in order to optimize the administration and also to study new drugs that will helps us better control the development of resistant strains T.

Empleo del disco de 1µg de oxacilina para predecir resistencia a penicilina y ceftriaxona en Streptococcus pneumoniae / The use of 1mg Oxacillin disc for predicting penicillin and ceftriaxone resistance in streptococcus pneumoniae

Introducción: el Comité Nacional para Estándares del Laboratorio Clínico (NCCLS) recomienda la prueba tamiz con oxacilina (1µg) con el método de difusión de disco para predecir, en Streptococcus pneumoniae, tanto la susceptibilidad disminuida a la penicilina (SDP), como laresistencia a cefalosporinas de tercera generación. Sin embargo, el grado de resistencia se debe establecer con la concentración inhibitoria mínima (CIM) del antibiótico. Objetivo: correlacionar en aislamientos invasores de S. pneumoniae, el halo de inhibición de 6 mm con el disco de oxacilina, con la CIM de penicilina y ceftriaxona. Materiales y Métodos: se analizaron los datos de 586 aislamientos en los cuales se había determinado tanto la susceptibilidad a la penicilina con el disco de oxacilina (1 µg) como la CIM a la penicilina y a la ceftriaxona, siguiendo los procedimientos e interpretaciones dadas por el NCCLS. estudiados que presentaron un halo de 6 mm (diámetro del disco) se estableció en 15 (15,2 por ciento) resistencia intermedia a la penicilina (CIM 0,125 a 1,0 µg/mL) y en 84 (84,8 por ciento) resistencia alta (CIM ≥2,0 µg/mL); con relación a la ceftriaxona, 20 (20,2 por ciento) aislamientos fueron sensibles (CIM ≤0,5 µg/mL), 51 (51,5 por ciento) presentaron resistencia intermedia (CIM 1,0 µg/mL) y 28 (28,3 por ciento) resistencia alta (CIM ≥2,0 µg/mL). Conclusiones: una lectura de 6 mm con el disco de oxacilina (1µg) puede servir como indicador de alta resistencia a penicilina con una sensibilidad de 100 por ciento y una especificidad de 81,7 por ciento. Adicionalmente, puede predecir resistencia intermedia o alta a las cefalosporinas, dato importante para orientar la conducta terapéutica antes de conocer los resultados de la CIM