Detection of Perkinsus marinus in the oyster Crassostrea rhizophorae in southern Bahia by proteomic analysis / Detecção de Perkinsus marinus na ostra Crassostrea rhizophorae do sul da Bahia por análise proteômica

This study reports the presence of the pathogen Perkinsus marinus, notifiable to the World Organization for Animal Health (Office International des Èpizooties = OIE) in the oyster Crassostrea rhizophorae in southern Bahia via proteomic analysis. We analyzed Crassostrea brasiliana from a long-line cultivation system and C. rhizophorae from an adjacent mangrove in Porto do Campo, Camamu Bay, Bahia, Brazil. The collections (n = 100) were performed in October 2012. In the laboratory, the oysters were measured and opened to remove the meat, which was steeped in dry ice. For extraction of proteins, adaptation of a protocol used for mussels was used, after which separation in the first dimension was taken by isoelectric focusing (IEF). The peptides were transferred to a Mass Spectrometer. The obtained spectra were analyzed with the ProteinLynx Global Server 4.2 software tool and also by MASCOT (Matrix Science) and compared to the databases of the SWISSPROT and NCBI, respectively. The identification was evidenced by beta-tubulin, Perkinsus marinus ATCC 50983 and protein homology code in the database NCBI = gi | 294889481. This is the first record of P. marinus in Bahia and the fourth in Brazil.(AU)

Este estudo relata a presença do patógeno Perkinsus marinus, de notificação obrigatória à Organização Internacional de Epizootias (OIE) na ostra Crassostrea rhizophorae no sul da Bahia, via análise proteômica. Foram analisadas as ostras Crassostrea brasiliana de um cultivo em espinhel e C. rhizophorae de um manguezal adjacente, na localidade de Porto do Campo, Baía de Camamu, Bahia. As coletas (n = 100) foram efetuadas em outubro de 2012. Em laboratório, as ostras foram medidas e abertas para a retirada da carne, que foi macerada em gelo seco. Para a extração das proteínas, foi adotada a adaptação de um protocolo utilizado para mexilhões, após o que foi realizada a separação na primeira dimensão, por focalização isoelétrica (IEF). Os peptídeos foram transferidos para um Espectrômetro de Massas. Os espectros obtidos foram analisados no software ProteinLynx Global Server 4.2 e também pela ferramenta MASCOT (Matrix Science) e comparados com os bancos de dados do SWISSPROT e do NCBI, respectivamente. A identificação foi evidenciada por meio da beta-tubulina, homologia Perkinsus marinus ATCC 50983 e código da proteína no banco de dados NCBI = gi|294889481. Este é o primeiro registro de P. marinus na Bahia e o quarto no Brasil.(AU)

Perkinsus beihaiensis infecting the oyster Crassostrea rhizophorae under cultivation and in natural stock in Camamu Bay, Bahia, Brazil / Perkinsus beihaiensis infectando a ostra Crassostrea rhizophorae em cultivo e em estoque natural na Baía de Camamu, Bahia, Brasil

This study investigated the infection of Perkinsus beihaiensis (Perkinsozoa) in the oyster Crassostrea rhizophorae, both from a long-line cultivation system and from a nearby intertidal zone of mangrove, both in the state of Bahia, northeastern Brazil. The collections were performed in October and November 2012, and in January 2013. The oysters (n = 300) were measured, examined macroscopically for signs of infection and then submitted to the following laboratory techniques: histology, Ray"s fluid thioglycollate medium assay (RFTM), polymerase chain reaction (PCR) and sequencing, which confirmed the identification of the pathogen. Histological and RFTM analyses showed, respectively, a mean prevalence of 93.3% and of 69%. The infection was usually mild or very mild. There was no significant difference (p > 0.05) between the environments in terms of infection prevalence or severity. This is the first record of P. beihaiensis in the state of Bahia and the second in oysters from Brazil and South America...

Foi investigada a infecção de Perkinsus beihaiensis (Perkinsozoa) na ostra Crassostrea rhizophorae em um sistema de cultivo do tipo espinhel e em um estoque natural de ostras no manguezal adjacente ambos localizados no estado da Bahia, Nordeste do Brasil. As colheitas foram realizadas em outubro e novembro de 2012 e em janeiro de 2013. As ostras (n = 300) foram medidas, examinadas macroscopicamente quanto a sinais da infecção e submetidas às técnicas laboratoriais: histologia, ensaio em meio de cultivo de tioglicolato de Ray (RFTM), reação em cadeia da polimerase (PCR) e sequenciamento, que confirmou a identificação do patógeno. As análises histológicas e o RFTM mostraram, respectivamente, prevalência média de 93,3% e de 69%. A infecção foi geralmente leve ou muito leve. Não houve diferença significativa (p > 0,05) entre os ambientes em termos de prevalência ou severidade da infecção. Este é o primeiro registro de P. beihaiensis no estado da Bahia e o segundo em ostras do Brasil e América do Sul...

Standardized method to obtain dermo-epidermal junction samples from bovine hoof / Método padronizado para obtenção de amostras da junção derme-epiderme do casco de bovinos

As afecções podais em bovinos causam importante impacto econômico negativo na bovinocultura. Pesquisas têm sido realizadas com o objetivo de avançar no entendimento dos processos ocorridos na junção derme-epiderme do casco de bovinos com laminite e nos demais tecidos moles durante as lesões infecciosas. Apesar disso, não foram encontrados na literatura consultada estudos que descrevessem um método padronizado para a obtenção de amostras do tecido laminar do casco. Nesse contexto, foi necessário criar e estabelecer um método viável para a colheita de amostras da junção derme-epiderme, de modo a viabilizar o estudo de pós-graduação que originou esta comunicação. O objetivo é relatar um método padronizado, testado e bem-sucedido para obtenção de amostras da junção derme-epiderme do casco de bovinos em suas regiões solear, axial e dorsal. Foram obtidos fragmentos transversais das unhas de vacas abatidas em frigorífico. A espessura desses fragmentos foi de 1,5cm, aproximadamente, e contemplava as regiões solear, axial e dorsal do casco. De forma sistematizada, amostras da junção derme-epiderme de cada uma dessas regiões foram removidas, fixadas em formol, processadas e incluídas em parafina. A análise usando microscopia de luz demonstrou cortes histológicos íntegros e sem artefatos, que permitiram ampla avaliação das estruturas tanto da derme quanto da epiderme. Concluiu-se que o método proposto viabiliza a obtenção de amostras de padrão e qualidade adequados ao estudo do tecido laminar do casco bovino.(AU)

Clinical Outcomes Following Simultaneous Orbital Implant Insertion Operation and Dermo-Fat Graft for Anophthalmos Patients

PURPOSE: To investigate the clinical results of patients who have undergone simultaneous dermo-fat graft and insertion of orbital implants in patients who are unable to put on an ocular prosthesis due to severe conjunctival sac contracture or large orbital implant exposure. METHODS: A retrospective analysis was performed of patients who underwent dermo-fat graft simultaneously with orbital implant insertion for replacement of the conjunctival sac from 2007 to 2012. Eight eyes were enrolled in this study and all patients were followed up for phthisis bulbi or implant exposure. RESULTS: Among the eight eyes, five eyes (62.5%) that were diagnosed with orbital implant exposure underwent orbital implant exchange and dermo-fat graft, and two eyes (25%) were anophthalmic enophthalmic patients and underwent secondary orbital implant insertion and dermo-fat graft. One patient (12.5%) underwent orbital implant insertion and dermo-fat graft simultaneously during the evisceration operation. We followed the progress for 46.3 months. For seven out of eight eyes, the results of the wound healing process were successful. One patient underwent removal and reinsertion of the orbital implant with dermo-fat graft, and the wound in this case healed well. However, after five months, dermo-fat re-graft was performed for orbital implant re-exposure and it was not exposed thereafter. Overall cosmetic appearance was satisfactory in each patient, and all patients were able to comfortably retain a prosthesis. CONCLUSIONS: We found that undergoing dermo-fat graft simultaneously when performing orbital implant insertion is effective for replacement of the conjunctival sac and orbital volume.

Cosmecêuticos - Atualização / Cosmeceuticals - Up date

Este artigo discute os produtos tópicos que ficam entre os cosméticos (função decorativa) e as drogas (medicamentos que alteram a estrutura e a função da pele). Na verdade, os cosmecêuticos não são inofensivos como um cosmético, mas também não são medicamentos.

Histopathology of dairy cows' hooves with signs of naturally acquired laminitis / Histopatologia do casco de vacas de aptidão leiteira com e sem sinais de laminite naturalmente adquirida

The purpose of this study was to investigate histological changes in dairy cows' hooves with or without injuries from naturally acquired laminitis. Cull cows with no clinical signs of hoof abnormalities (G1, n=9) and those with macroscopic lesions associated with laminitis without (G2, n=23) or with lameness (G3, n=7) were used in the study. After slaughter, samples of dermo-epidermal junctions of sole, axial and dorsal regions of the hoof were obtained and histologically processed using HE and PAS staining. Congestion, hemorrhage and inflammatory infiltrate in the dermis of sole, axial and dorsal regions were blindly and semiquantitatively evaluated by the same researcher. Inflammatory infiltrate was evaluated in the dermal laminae of axial and dorsal regions. The morphology of epidermal cells and the presence of irregularities in three regions of the basement membrane (BM) length were examined using PAS staining. Scores of lesions in different regions of the hoof in the same group and in different groups for each region of the hoof were compared using non-parametric analyses. Inflammatory infiltrate in the dermis of all regions of the hoof was detected in all groups with no significant statistical difference. Cows with no clinical signs of hoof abnormalities secondary to laminitis (G1) have inflammation scores and epidermal cell changes similar to those of groups with laminitis injuries, suggesting the existence of a prodromal phase for this disease in bovines. BM had irregularities with a variable intensity along its length, however, with no difference among groups. The pattern of BM irregularities found has not been reported so far and does not resemble the BM collapse described in horses and cattle with induced acute laminitis. Is it concluded that even in the absence of macroscopic hoof signs associated to laminitis, dairy cows have histological injuries compatible with inflammation of the dermo-epidermal junction as in affected animals. Basement membrane of cows with or without laminitis associated lesions had irregularities with an irregular distribution along its length which need to be further studied.

O objetivo deste trabalho foi investigar as alterações histológicas no casco de vacas leiteiras sem e com lesões de laminite, naturalmente, adquirida. Utilizaram-se animais de descarte sem lesões macroscópicas no casco (G1 n=9) e com lesões macroscópicas associadas à laminite sem (G2 n=23), ou com claudicação (G3 n=7). Após o abate, amostras da junção derme-epiderme das regiões solear, axial e dorsal do casco foram obtidas e processadas, histologicamente, nas colorações de HE e PAS. Avaliou-se, semiquantitativamente, às cegas e por um mesmo pesquisador, congestão, hemorragia e infiltrado inflamatório na derme das regiões solear, axial e dorsal. Avaliou-se infiltrado inflamatório na lâmina dermal das regiões axial e dorsal. A morfologia das células epidermais e a presença de irregularidades em três regiões do comprimento da membrana basal (MB) foram examinadas na coloração de PAS. Os escores das lesões nas diferentes regiões do casco no mesmo grupo e nos diferentes grupos para cada região do casco foram comparados através de análises não paramétricas (P<0,05). Infiltrado inflamatório na derme de todas as regiões do casco foi detectado em todos os grupos sem diferença estatística (P>0,05). Vacas sem lesões macroscópicas secundárias à laminite (G1) apresentaram escores de inflamação e alteração de células epidermais semelhantes aos dos grupos com lesões de laminite, sugerindo a existência de fase prodrômica para a doença em bovinos. A MB apresentou irregularidades com intensidade variável ao longo de seu comprimento (P<0,05), porém, sem diferença entre grupos (P>0,05). O padrão de irregularidades na MB encontrado não foi relatado até o momento e não se assemelha ao colapso de MB descrito em equinos e bovinos com laminite induzida. Concluiu-se que, mesmo na ausência de lesões macroscópicas no casco causadas por laminite, vacas leiteiras apresentam lesões histológicas compatíveis com inflamação da junção derme-epiderme como em animais afetados. A membrana basal de bovinos sem e com lesões de laminite apresenta irregularidades com distribuição irregular ao longo de seu comprimento que precisam ser melhor estudadas.

Preservation of antigenicity of autoimmune blistering diseases according to different methods of dermo-epidermal separation / 대한피부과학회지

There are many known methods of dermo-epidermal separation for the investigation of autoimmune blistering diseases. Investigators should select a proper method since many differences exist preservation of antigenicity. In order to determine the stabilization of antigenirity by different separation methods, we have separated dermo-epidermal junction by means of 1M s;ilt, 56C PBS, 20mM EDTA and dispase. Indirect immunofluarescence and immunoblotting were performed on each specimen with sera of patients with pemphigus vulgaris, pemphigus foliaceus, paraneoplastic pemphigus, bullous pemphigoid and epidermolysis bullosa acquisita. The results are as follows : 1. In indirect immunofluorescence study of pemphigus group, best, result were obtained when normal skin without dermo-epidermal separation was used. Dispase well preserved antigenicity of pemphigus after dermo-epidermal separation, but no differences were noted in antigenicity stabilization among separation mehods by immunoblotting. 2. In indirect immunofluorecence study for differentiation of bullous pemphigoid and epidermolysis bullosa acquisita, we recommend EDTA and dispase methods in addition to 1M salt induced skin separation that have been most popularly used. 3. Results of the immunoblotting of bullous pemphigoid showed that 1M salt, EDTA and heat preserved the antigenicity well but the antigenicity was lost by dispase. 4. Results of the immunoblotting of epidermolysis bullosa acquisita she wed that antigen did not exist in epidermal extract. 5. Antigen preservation according to the different methods of demo-epidermal separation was not identical between indirect immunofluorescence and immunoblotting.