Comparación de las tinciones con hematoxilina y eosina versus azul de toluidina en la evaluación de los carcinomas cutáneos durante la cirugía micrográfica de Mohs / Comparative study of toluidine blue and hematoxylin and eosin staining in evaluating skin-carcinoma during Mohs micrographic surgery / Comparação da coloração de hematoxilina e eosina versus azul de toluidina na avaliação de carcinomas cutâneos durante a cirurgia micrográfica de Mohs

Resumen: Introducción: la cirugía micrográfica de Mohs es una técnica quirúrgica especializada para el tratamiento del cáncer de piel no melanoma. La histopatología cumple un rol fundamental, y la elección de la tinción es un punto de controversia. Objetivos: comparar el rendimiento de las tinciones de hematoxilina y eosina (HyE) versus azul de toluidina (AT) durante la cirugía. Método: estudio observacional, descriptivo y transversal a partir de noviembre de 2017 hasta mayo de 2018. Se incluyeron las láminas empleadas durante la cirugía en el período mencionado. Estas fueron analizadas por el cirujano de Mohs, tres residentes y una dermopatóloga. Se valoró el rendimiento de ambas tinciones, teniendo en cuenta las características celulares y los elementos del estroma. Resultados: se estudiaron 23 tumores (16 carcinomas basocelulares y 7 carcinomas espinocelulares). Al observarse al microscopio óptico tanto con la tinción de AT como con HyE no se encontraron diferencias significativas entre ambos grupos en lo global, sólo en algunas características, especialmente con la HyE. Conclusiones: es el primer trabajo en Uruguay que compara la eficacia de las dos tinciones durante la cirugía micrográfica de Mohs. Como conclusión tanto la tinción de HyE como el AT son muy buenas técnicas para el diagnóstico de carcinomas cutáneos.

Abstract: Introduction: Mohs micrographic surgery is a specialized surgical technique used to treat nonmelanoma carcinoma. Histopathology plays a vital role in the diagnosis of this condition, and the choice staining method is controversial. Objective: to compare results in the use of hematoxylin and eosin (H&E) versus Toluidine blue (TB) staining during surgery. Method: observational, descriptive and transversal study conducted from November, 2017 until May, 2018 of the slides used during surgeries in the selected period. Slides were analysed by the Mohs surgeon, 3 residents and a dermopathologist to evaluate the results of both staining methods, in consideration of cell features and stromal elements. Results: 23 tumors were analysed (16 Basal Cell carcinomas and 7 Squamous Cell Carcinoma). Microscopic observation of slides prepared with Toluidine blue and hematoxylin and eosin stains did not show significant global differences between both groups, except in terms of a few characteristics, in particular with hematoxylin and eosin stains. Conclusions: this was the first study in Uruguay to evaluate the effectiveness of both staining methods during Mohs micrographic surgery, and it concluded that both Toluidine blue and hematoxylin and eosin stains are very good techniques in evaluating skin-cancer.

Resumo: Introdução: a cirurgia micrográfica de Mohs é uma técnica cirúrgica especializada para o tratamento do câncer de pele não melanoma. A histopatologia desempenha um papel fundamental, onde a escolha da coloração é um ponto de controvérsia. Objetivos: comparar o desempenho das colorações de hematoxilina e eosina versus azul de toluidina durante a cirurgia. Método: estudo observacional, descritivo e transversal de novembro de 2017 a maio de 2018. Foram incluídas as lâminas utilizadas durante as cirurgias no referido período. Estas foram analisadas pelo cirurgião especializado na técnica de Mohs, 3 residentes e um dermatopatologista onde foi avaliado o desempenho de ambas as colorações, levando em consideração as características celulares e os elementos do estroma. Resultados: foram estudados 23 tumores (16 carcinomas basocelulares e 7 carcinomas espinocelulares). Quando observados ao microscópio de luz para coloração AT e H&E, não foram encontradas diferenças significativas entre os dois grupos em geral, apenas em algumas características, especialmente com o H&E. Conclusões: é o primeiro estudo no Uruguai que compara a eficácia dos 2 corantes durante a cirurgia micrográfica de Mohs. Em conclusão, tanto a coloração com hematoxilina e eosina quanto com azul de toluidina são técnicas muito boas para o diagnóstico de carcinomas de pele.

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River / Alterações histopatológicas em brânquias, fígado, rim e músculos de Ictalurus punctatus coletados em áreas poluídas do rio

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

Identificación de Helicobacter pylori por medio de la coloración especial de Warthin-Starry en biopsias de pacientes con gastritis crónica folicular, previamente negativas en la tinción de hematoxilina-eosina / Warthin-Starry stain identification of Helicobacter pylori in biopsies of patients who previously tested negative in hematoxylin-eosin staining for follicular gastritis

Resumen Las técnicas empleadas para la detección del Helicobacter pylori (H. pylori) son no invasivas e invasivas. En estas últimas, la presencia del H. pylori se determina a partir de la tinción de hematoxilina-eosina (HE), prueba rutinaria, mientras que en pocas ocasiones se aplica la tinción de Warthin-Starry (WS) como coloración especial. Objetivo: identificar la presencia de H. pylori por medio de la coloración especial de la WS en biopsias de pacientes con gastritis crónica folicular, previamente negativas en la tinción HE. Materiales y métodos: se desarrolló un estudio de tipo descriptivo transversal, en un período de 12 meses. Se tomaron los bloques de parafina de las muestras de la mucosa gástrica de pacientes con diagnóstico de gastritis crónica e hiperplasia folicular. Además, se extrajo un corte histológico del mismo bloque, al cual se le aplicó HE y se determinó la presencia o ausencia de H. pylori. Así, de estar ausente, se tomó del mismo bloque un corte adicional y se aplicó WS. Esto se evaluó con el fin de identificar la existencia o no del bacilo. Resultados: se recolectaron 314 muestras; 209 fueron negativas y 105 fueron positivas para HE. El 45 % (94) de estas muestras fueron positivas respecto a la presencia del bacilo, al aplicar la segunda coloración, y el 55 % (115) de las muestras persistieron negativas. Conclusión: el hallazgo de H. pylori es significativamente alto al aplicar la coloración de WS a muestras cuyo estudio histológico evidenció la ausencia del bacilo en biopsias de la mucosa gástrica, especialmente en muestras con escasa cantidad de bacterias.

Abstract Non-invasive and invasive techniques can be used for detection of Helicobacter pylori. An invasive technique identifies the bacteria through routine hematoxylin-eosin staining. Warthin-Starry stain is rarely used. Objective: Our objective was to identify H. pylori by Warthin-Starry staining of patient's biopsies with chronic follicular gastritis who had previously tested negative in hematoxylin-eosin staining. Materials and methods: This is a descriptive, cross-sectional descriptive study that was carried out over a period of 12 months. The study examined paraffin blocks of samples taken from the gastric mucosa of patients diagnosed with chronic gastritis and follicular hyperplasia. A histological section was extracted from a block and tested with hematoxylin-eosin staining for the presence or absence of H. pylori. If absent, an additional cut was taken from the same block and Warthin-Starry staining was used to retest for the presence of the bacteria. Results: Of the 314 samples collected, 209 tested negative, and 105 tested positive for H. pylori when hematoxylin-eosin staining was used. Of the 209 negative samples, 45% (94) tested positive when Warthin Starry stain was used, and 55% (115) still tested negative. Conclusion: Findings of H. pylori are significantly higher when Warthin Starry stain was used to test samples whose previous histological study had evidenced an absence of the bacillus, especially in samples with a small amount of bacteria.

Esferocitosis hereditaria: experiencia clínica y diagnóstica en Argentina / Hereditary spherocytosis: clinical and diagnostic experience in Argentina / Esferocitose hereditária: experiência clínica e diagnóstica na Argentina

Los objetivos del presente estudio fueron: a) Analizar las características demográficas y clínicas de nuestra población al diagnóstico; b) Evaluar si las pruebas más recientes presentan ventajas sobre las tradicionales; c) Confirmar la frecuencia de las distintas deficiencias de proteínas de membrana; d) Establecer la relación entre severidad y resultado de las pruebas o tipo de deficiencia. Se analizaron 359 individuos estudiados desde 2007, cuando se incorporaron criohemólisis hipertónica (CH), citometría de flujo con eosina-5'- maleimida (5'EMA-CF), FOE por citometría de flujo (FOE-CF) y electroforesis de proteínas de membrana (SDS-PAGE) al estudio de laboratorio clásico, fragilidad osmótica eritrocitaria (FOE) y autohemólisis (AH). Criterios diagnósticos para Esferocitosis Hereditaria (ESH): esferocitos en frotis y dos pruebas positivas. Se identificaron 174 pacientes con ESH y 22 portadores sanos. El 74,9% eran menores de 12 años. La transmisión fue dominante en el 83,1% de los casos. Tuvieron manifestaciones neonatales 89,1%. Las pruebas con mayor sensibilidad fueron CH (92,0%), FOE diferida (91,1%) y 5'EMA-CF (88,5%). En los 125 pacientes en quienes se realizaron CH, 5'EMA-CF y FOE-CF se observó que todos tenían al menos una prueba positiva; 122 (97,6%) tuvieron dos o tres positivas. Las deficiencias más frecuentes fueron ankirina y espectrina. No hubo diferencia en el resultado de las pruebas entre los subgrupos de severidad. Se concluye que las deficiencias más frecuentes en Argentina son ankirina y espectrina, coincidiendo con otras poblaciones latinoamericanas. El uso simultáneo de CH, 5'EMA-CF y FOE-CF permite diagnosticar más del 97% de los casos. La incidencia de manifestaciones neonatales es elevada.

The aims of this study were (a) to assess demographic and clinical aspects of our population at diagnosis; (b) to evaluate diagnostic accuracy of hypertonic cryohemolysis (HC), eosin-5'-maleimide flow cytometry (EMA-FC) and flow cytometric osmotic fragility (OF-FC) in relation to standard screening tests osmotic fragility (OF) and autohemolysis (AH); (c) to confirm the previously reported prevalence of membrane proteins defects; and (d) to assess the relationship between severity of anemia and results of confirmatory tests. Since 2007, the following tests were available in our laboratory: OF, AH, HC, EMA-FC, OF-FC and SDS-PAGE of membrane proteins. Diagnostic criteria for hereditary spherocytosis were spherocytes in blood smear plus ≥2 positive tests. Data from 359 individuals were analyzed: 174 HS patients and 22 silent carriers were detected; 74.9% of patients were less than 12 years old; 83.1% of them showed a dominant inheritance pattern; antecedent of neonatal jaundice/anemia was registered in 89.1%. Tests with higher sensitivity were: HC (92.0%), incubated OF (91.1%), and EMA-FC (88.5%). HC, EMA-FC and OF-FC were simultaneously performed on 125 patients: each of them had at least 1 positive test; 122 (97.6%) had 2 or 3 positive tests. Ankyrin and spectrin were the most frequently found protein deficiencies. Comparison of test results in relation to severity of anemia showed no difference between groups. It can be concluded that compared toother Latin American countries, ankyrin and spectrin were the most frequent protein deficiencies. Simultaneous performing of HC, EMA-FC and OF-FC enabled diagnosing HS in more than 97% of patients. A high incidence of neonatal jaundice/anemia was observed.

Os objetivos do presente estudo foram: a) analisar as características demográficas e clínicas de nossa população ao diagnóstico; b) Avaliar se as provas mais recentes apresentam vantagens sobre as tradicionais; c) Confirmar a frequência das diversas deficiências de proteínas de membrana; d) Establecer a relação entre severidade e resultado das provas ou tipo de deficiência. Foram analisados 359 indivíduos estudados desde 2007, quando se incorporaram crio-hemólise hipertônica (CH), citometria de fluxo com eosina-5'-maleimida (5'EMA-CF), FOE por citometria de fluxo (FOE-CF) e eletroforese de proteínas de membrana (SDS-PAGE) ao estudo de laboratório clássico - fragilidade osmótica eritrocitária (FOE) e auto-hemólise (AH). Critérios diagnósticos para ESH: esferócitos em esfregaço e duas provas positivas. Foram identificados 174 pacientes com ESH e 22 portadores sadios. 74,9% eram menores de 12 anos. A transmissão foi dominante em 83,1%. Tiveram manifestações neonatais 89,1%. As provas com maior sensibilidade foram CH (92,0%), FOE diferida (91,1%) e 5'EMA-CF (88,5%). Nos 125 pacientes aos quais lhes realizaram CH, 5'EMA-CF e FOE-CF se observou que todos tinham no mínimo uma prova positiva; 122 (97,6%) tiveram duas ou três positivas. As deficiências mais frequentes foram anquirina e espectrina. Não houve diferença no resultado das provas entre os subgrupos de severidade. Conclui-se que as deficiências mais frequentes na Argentina são anquirina e espectrina, as quais coincidem com outras populações latinoamericanas. O uso simultâneo de CH, 5'EMA-CF e FOE-CF permite diagnosticar mais de 97% dos casos. A incidência de manifestações neonatais é elevada.

Histopathological alterations in gills, liver, kidney and muscles of Ictalurus punctatus collected from pollutes areas of River

Abstract Untreated sewage and industrial wastes from Faisalabad city are disposed to River Chenab through Chakbandi Main Drain (CMD). The present project is planned to investigate the effects of this freshwater pollution on the body of fish Ictalurus punctatus. The specimens of this fish species were collected upstream and downstream of the entrance of CMD into River Chenab. Fish gills, liver, kidney and muscles from dorsolateral regions of fish were subjected to histopathology. Farmed fish and fish from upstream areas were used as control. Fish collected from polluted experimental sites showed significant damage in selected organs. Gill tissues showed an abnormality in the form of an uplifting of the primary epithelium, fusion, vacuolation, hypertrophy, and necrosis. While liver tissues subjected to hepatocytes degeneration, necrosis, mitochondrial granular hepatocyte, and sinusoids dilation. Kidney tissues indicated increased bowmen space and constricted glomerulus and degenerated nephrons. Edema, necrosis, and atrophy were observed in muscle tissues of fish from polluted areas. Fish from the upstream area showed fused gill lamellae, inflammatory cell infiltration, hypertrophy and vacuolation in hepatocytes. Kidney tissues indicated the presence of nuclear tubular cells, destructive renal tubules, hemorrhage, and necrosis at tubular epithelium. Intra myofibril spaces were also observed in muscles. Specimens of control fish indicated no variation in gills, liver, kidney, and muscles. The present study revealed a strong correlation between the degree of tissue damage and environmental contamination. Present findings also compel global warnings to protect our water bodies and fish to rescue the human population.

Resumo O esgoto não tratado e os resíduos industriais da cidade de Faisalabad, no Paquistão, são descartados no Rio Chenab através do dreno principal de Chakbandi (CMD). O presente projeto busca investigar os efeitos dessa poluição de água doce no corpo de peixes Ictalurus punctatus. Os espécimes deste peixe foram coletados a montante e a jusante da entrada do CMD no Rio Chenab. Brânquias, fígado, rim e músculos das regiões dorsolaterais dos peixes foram submetidos à histopatologia. Peixes de criação e peixes de áreas a montante foram utilizados como controle. Peixes coletados em locais experimentais poluídos mostraram danos significativos em órgãos selecionados. Os tecidos branquiais mostraram uma anormalidade na forma de elevação do epitélio primário, fusão, vacuolação, hipertrofia e necrose. Observou-se que os tecidos hepáticos estão sujeitos a degeneração de hepatócitos, necrose, hepatócitos mitocondriais granulares e dilatação de sinusoides. Os tecidos renais indicaram aumento do espaço dos arqueiros, glomérulos contraídos e néfrons degenerados. Edema, necrose e atrofia foram observados nos tecidos musculares de peixes de áreas poluídas. Peixes da área a montante apresentaram lamelas branquiais fundidas, infiltração de células inflamatórias, hipertrofia e vacuolização em hepatócitos. Os tecidos renais indicaram a presença de células tubulares nucleares, túbulos renais destrutivos, hemorragia e necrose no epitélio tubular. Os espaços intramiofibrilas também foram observados nos músculos. Amostras de peixes controle não indicaram variação em brânquias, fígado, rim e músculos. O presente estudo revelou uma forte correlação entre o grau de dano tecidual e a contaminação ambiental. As descobertas atuais também constituem avisos globais para proteger nossos corpos d'água e peixes para resguardar a população humana.

Caracterização de colágenos tipos I e III no estroma do carcinoma de células escamosas cutâneo em cães / Characterization of types I and III collagen in the stroma of cutaneous squamous cell carcinoma in dogs

O carcinoma de células escamosas (CCE) é uma neoplasia epitelial maligna que acomete cães e diversas outras espécies, incluindo a humana. O CCE afeta vários sítios anatômicos e pode desenvolver metástase. O objetivo deste estudo foi a caracterização das fibras de colágenos tipos I e III no estroma do CCE cutâneo de cães. Para este trabalho, utilizaram-se 44 amostras de pele incluídas em parafina e que tiveram prévio diagnóstico de CCE. As amostras foram processadas histologicamente e coradas com hematoxilina/eosina para confirmação do diagnóstico e classificação do grau de diferenciação tumoral e com a coloração histoquímica de picrosirius para observação dos colágenos tipos I e III. O colágeno tipo III mostrou maior expressão nos CCEs cutâneos bem diferenciados. O papel do colágeno do tipo III nas neoplasias não está bem esclarecido, e outros fatores além do grau de diferenciação celular podem estar envolvidos em sua expressão e determinar sua importância na biologia tumoral.

Squamous cell carcinoma (SCC) is a malignant epithelial tumor that affects dogs and several other species, including humans. The SCC occurs in various anatomical sites and can develop metastasis. The aim of this study was to characterize types I and III collagen fibers in the stroma of cutaneous SCC in dogs. For this work 44 paraffin-embedded samples with previous diagnostic of SCC were used. Samples were processed and evaluated histologically with hematoxylin/eosin to confirm the diagnosis and classification of cell differentiation degree and with Picrosirius for observation of types I and III collagen. Type III collagen expression was higher in well-differentiated SCC. The role of type III collagen in cancer is not very clear and factors other than cell differentiation degree may be involved in its expression and determine its importance in tumor biology.

Histological identification of H. pylori stained by hematoxylin-eosin and Giemsa: review for quality control / Identificação histológica do H. pylori corado por hematoxilina-eosina e Giemsa: revisão para controle de qualidade

Introduction: Several special staining methods are available for H. pylori (Hp) identification in histological sections of chronic gastritis (CG), including the routine hematoxylin-eosin (HE) method. Some reports suggest that ancillary stains are not always needed to establish the diagnosis of Hp infection. In addition, the benefit of using them, when biopsies show minimal inflammation, is not clear. Objective: We performed a retrospective study to compare the usefulness of HE with Giemsa method for the histopathological diagnosis of Hp in tissue sections. Methods: Histological sections from 390 consecutive patients were reviewed. The patients were registered in the histopathology laboratory of Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. They were divided in 4 groups according to the gastric inflammatory changes as follows: Group I, gastric mucosa with normal morphology or minimal inflammatory changes (n = 146); Group II, chronic gastritis (CG) with mild inflammatory activity (n = 101); Group III, CG with patent inflammatory activity (n = 123); Group IV, patients with atrophic body gastritis (n = 20). All histological sections were carefully evaluated by 2 examiners at the oil immersion objective (1000×). Results: The identification of Hp was positive by Giemsa and HE, respectively at: Group III, 111 (90.2%) and 93 (75.6%) patients (p < 0.01); Group II, 43 (42.6%) and 29 (28.7%) patients (p < 0.05). Hp was negative in Groups I and IV. Conclusion: The results show that Giemsa stain is superior to HE for histological identification of Hp in CG. Although Hp could be identified by HE stain in the majority of CG cases, a significant number of infected patients may be neglected, regardless the intensity of the inflammatory response. .

Introdução: Diversos métodos de coloração especial estão disponíveis para a identificação da bactéria H. pylori (Hp) em cortes histológicos. Entretanto, questiona-se a utilidade desses métodos na rotina diária dos laboratórios de patologia diagnóstica. Objetivos: Comparar a utilidade da coloração por hematoxilina-eosina (HE) com a do Giemsa para diagnóstico histopatológico do Hp. Materiais e métodos: Foram revistos os cortes histológicos de 390 pacientes consecutivos cadastrados no Laboratório de Histopatologia do Instituto Alfa de Gastroenterologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG), Belo Horizonte, Brasil. Os pacientes foram divididos em quatro grupos: Grupo I - mucosa gástrica apresentando morfologia normal (n = 146); Grupo II - gastrite crônica (GC) com atividade inflamatória discreta (n = 101); Grupo III - CG com atividade inflamatória patente (n = 123); Grupo IV - pacientes com gastrite atrófica corpo (n = 20). Todos os cortes histológicos foram cuidadosamente avaliados por dois examinadores no aumento microscópico de imersão (1000×). Resultados: A identificação do Hp foi positiva pelo Giemsa e pela HE em, respectivamente, 111 (90,2%) e 93 (75,6%) pacientes do Grupo III (p < 0,01) e em 43 (42,6%) e 29 (28,7%) pacientes (p < 0,05) do Grupo II, e negativa nos grupos I e IV. Conclusão: Os resultados mostram que a coloração pelo Giemsa é superior à pelo HE para identificação do Hp em cortes histológicos. Conclui-se que o Hp pode ser visualizado pelo HE na maioria dos casos de GC, contudo, um número significativo de pacientes infectados pode ser negligenciado, independentemente da intensidade da resposta inflamatória. .

Laser terapêutico e células inflamatórias - parte 2: neutrófilos* / Therapeutic laser and inflammatory cells - part 2: neutrophils

O objetivo deste trabalho foi estudar a intensidade do infiltrado inflamatório agudo, presente em tecido conjuntivo perilesional do dorso de ratos submetidos à irradiação laser de baixa potência (λ 685 nm) após uma única aplicação. Foram utilizados dezoito ratos machos, linhagem Wistar, de 250 a 300 gramas, nos quais foram realizadas feridas cirúrgicas padronizadas. A amostra foi constituída de seis grupos, três experimentais e três controles, compostos por quatro e dois ratos, cada grupo, respectivamente. Os grupos experimentais foram irradiados em quatro pontos perilesionais equidistantes, com uma única dose de 0,5J/cm² por ponto, com potência de 35 mW, frequência de 35 pulsos por segundo e tempo de aplicação por ponto de 17 s. Os grupos-controles não foram irradiados. Os animais foram mortos 6, 12 e 24 horas após a irradiação, sendo obtidas peças que seguiram para processamento laboratorial de rotina. O estudo das lâminas foi realizado através da descrição e contagem absoluta dos granulócitos pelo método esteriológico. Os resultados obtidos demonstraram que há uma diminuição no número total de granulócitos, não significante estatisticamente (p≥0,05), quando comparados aos grupos controles. Concluiu-se que a luz laser é capaz de diminuir a intensidade do infiltrado inflamatório após uma única irradiação.

The aim of this work was study the intensity of acute inflammatory infiltrate inconnective tissue after low level laser therapy (λ = 685 nm) irradiation. Eighteen maleWistar rats (250 to 300 grams) with standardized surgical wounds were randomlydistributed into 6 groups - 3 study groups with 4 rats each, and 3 control groups with2 rats each. In the study groups, four equidistant spots around the standardizedwound were irradiated (0.5 J/ cm², 35 mW, 35 Hz, 17 seconds). The control groupswere not irradiated. The animals were killed at 6, 12 and 24 hours after laser therapy.Biological specimens were harvested and routinely processed. The total number of granulocyteswascounted using the stereological method. A non-statistically significant decrease in thetotal number granulocytes was observed in the all study groups. Our results showedthat one single irradiation with laser light reduced the total number of graunulocytesin the animal model used in this study.

Estudio histológico del sistema digestivo en diferentes estadios de desarrollo de la cachama blanca (Piaractus brachypomus) / Histological Study of the Digestive System in Different Stages of Development of Pacu (Piaractus brachypomus) / Estudo histológico do sistema digestivo em diferentes estágios de desenvolvimento do pacu branco (Piaractus brachypomus)

La cachama blanca (Piaractus brachypomus) es la segunda fuente de producción piscícola en Colombia, después de la tilapia roja (Oreochomi ssp.) y antes de la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). Se destaca, además, como una de las especies con mayor potencial productivo en el país. Se realizó el estudio histológico del sistema digestivo de la Piaractus brachypomus a fin determinar la morfología normal en diferentes estadios de desarrollo. Para ello se clasificaron los animales según la edad, el tamaño y el peso en ovas embrionadas, larvas con saco vitelino, alevinos después de reabsorción de saco vitelino, juveniles (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) y adultos (300 g). La fijación de los tejidos se realizó en formaldehído al 3,7 % y se describió microscópicamente cavidad bucal, faringe, esófago, estómago, ciegos pilóricos, intestinos y las glándulas anexas, hígado y páncreas. Por último, se describió macroscópicamente la organización anatómica de este sistema.

Pacu (Piaractus brachypomus) is the second source of fish production in Colombia after the red tilapia (Oreochomi ssp.) and before the rainbow trout (Oncorhynchus mykiss). It also stands out as one of the species with the most productive potential in the country. A histological examination was performed on the digestive system of the Piaractu sbrachypomus in order to determine normal morphology at different stages of development. For that purpose, the animals were classified according to age, size and weight in fertilized eggs, yolk-sac larvae, fingerlings after yolk-sac reabsorption, young (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) and adults (300 g). Tissue fixation took place in formaldehyde at 3.7 % and the oral cavity, pharynx, esophagus, stomach, pyloric caeca, intestines and related glands, liver and pancreas were microscopically described. Finally, the anatomical organization of this system was macroscopically described.

O pacu branco (Piaractus brachypomus) é a segunda fonte de produção originária da piscicultura na Colômbia, depois da tilápia vermelha (Oreochomi ssp.) e antes da truta arco-íris (Oncorhynchus mykiss). Destaca-se, também, como uma das espécies com maior potencial produtivo no país. Realizou-se estudo histológico do sistema digestivo da Piaractus brachypomus a fim determinar a morfologia normal em diferentes estágios de desenvolvimento. Para isso se classificaram os animais de acordo à idade o tamanho e o peso em ovas embrionadas, larvas com saco vitelino, alevinos depois de reabsorção de saco vitelino, juvenis (3-5 cm, 5-7 cm, 10 cm, 15 cm) e adultos ( 300 g). A fixação dos tecidos se realizou em formaldeído ao 3,7 % e se descreveu microscopicamente cavidade bucal, faringe, esôfago, estômago, cegos pilóricos, intestinos e as glândulas anexas, fígado e pâncreas. Finalmente, descreveu-se macroscopicamente a organização anatômica deste sistema.

Contemporary staining of arterial system with cadaver fixation: an experimental study / Tinción contemporánea del sistema arterial con fijación cadavérica: un estudio experimental

Although many methods are investigated, cadavers have unique role for education of gross anatomy. This study was performed to make cadaveric based gross anatomy more enjoyable and decrease the time needed for achievement of arterial system for teachers and learners. The adult rabbits in control (n=3) and experimental groups (n=9) sacrificed following deep anesthesia. The samples were fixed by injection of fixative solution to the left ventricle and the corps dropped to the traditional fixative liquid for at least 1 month. The injected fixative solution of experimental group contained stained human red blood cells. The red blood cells stained by eosin (0.25 percent in saline) for 30 minutes and injected between two injections of fixative. After passing the period of fixation, the samples were dissected and arterial system in the Neck, Trunk and extremities were recognized. The degree of staining of the arteries categorized as low, medium and high. The data of staining of arteries were analyzed by chi square using SPSS 16.0 for Windows XP (SPSS Inc., Chicago, IL). P value< 0.05 was considered significant. In almost all of the experimental samples, axillary and femoral arteries were stained (P= 0.005). The arteries of the neck (carotids), the wall of thorax (Intercostals), arch of aorta, abdominal arteries (renal, mesenteric) and iliac arteries stained (p=0.000). This study presents inexpensive and readily used protocol for making easier learning and teaching of gross anatomy by differentiating arteries from their associated nerves and veins in cadavers...

Aunque muchos métodos de enseñanaza se han investigado, los cadáveres tienen un papel único para la enseñanza de anatomía macroscópica. Este estudio se realizó para hacer de la anatomía basada en el cadáver más agradable y reducir el tiempo necesario para el aprendizaje del sistema arterial de profesores y alumnos. Dos grupos de conejos adultos, uno control (n = 3) y otro experimental (n = 9) fueron sacrificados después de una anestesia profunda. Las muestras fueron fijadas mediante la inyección de solución en el ventrículo izquierdo manteniéndose los cuerpos en líquido fijador durante al menos 1 mes. La solución fijadorea inyectada en el grupo experimental contenía glóbulos rojos (GR)humanos teñidos. Los GR se tiñeron con eosina (0,25 por ciento en solución salina) durante 30 minutos y se inyectaron entre dos inyecciones de fijador. Después del período de fijación, las muestras fueron disecadas, y se reconoció el sistema arterial en el cuello, tronco y miembros. El grado de tinción de las arterias fue clasificado como bajo, medio y alto. Fue utilizado el test de Chi cuadrado con el programa SPSS 16.0 para Windows XP (SPSS Inc., Chicago, IL). Un valor P < de 0,05 fue considerado significativo. En casi la totalidad de las muestras experimentales, se tiñeron las arterias axilar y femoral (P = 0,005). Se tiñeron las arterias del cuello (carótidas), de la pared del tórax (intercostales), arco aórtico, arterias abdominales (renal y mesentérica) y arterias ilíacas (p = 0,000). Este estudio presenta un protocolo realizable de bajo costo que permite hacer más fácil el aprendizaje y la enseñanza de la anatomía macroscópica, permitiendo diferenciar las arterias de los nervios y venas asociadas...

Neoplasias sólidas de células redondas en edad pediátrica: correlación entre diagnóstico morfológico e inmunohistoquímica / Solid neoplasm of circle celis in the pediatric age: correlation between morphological and immunohistochemistry diagnóstic

Precisar la importancia de realizar el estudio de inmunohistoquímica y su correlación con el diagnóstico anatomopatológico de rutina para el diagnóstico de los tumores sólidos malignos de células redondas en pacientes pediátricos. Se realizó un estudio transversal, descriptivo, retrospectivo no experimental. Se estudiaron 147 pacientes con diagnóstico de neoplasia de células redondas, de los cuales 96 cumplieron con criterios de inclusión. La mayor frecuencia de casos la obtuvo el linfoma No Hodgkin (20,8%), seguido del linfoma de Hodgkin (15,6%) y tumor de Wilms (17,7%). El grupo etario mayormente afectado fue el escolar (37,5%). El género predominante fue el masculino (60,4%). Las manifestaciones clínicas más frecuentes fueron masa palpable (76,04%), fiebre(44,79%), anemia (41,67%), dolor (41,30%) y pérdida de peso (33,33%). Se evidenció la mayor correlación diagnóstica en el tumor de Wilms (100%), seguido del linfoma No Hodgkin (80%) y el linfoma de Hodgkin (75%); la menor correlación la presentaron el sarcoma de Ewingy el neuroblastoma (41,7%, ambos). La correlación total resultó “considerable” según la fuerza de concordancia del coeficiente de Kappa (k: 0,601. P=0,000). Se requiere la integración del examen histopatológico de rutina como método diagnóstico de pesquisa y del estudio de inmunohistoquímica como método auxiliar diagnóstico, para determinar la histogénesis de las neoplasias, descartar diagnósticos diferenciales, realizar un diseño terapéutico apropiado y precisar el pronóstico.

To precise the state and the importance o fthe study of immunohistochemistry and its correlation with the routine pathological diagnosis to use in diagnosis of malignant solid tumors of round cells in pediatric patients. We was performed a transversal, descriptive and retrospective non-experimental study. We studied 147 patients diagnosed with round cell tumor, 96 of them weremet in inclusion criteria. The highest frequency of the cases was Non-Hodgkin lymphoma (20.8%), followed by the Hodgkin lymphoma (15.6%) and the Wilms tumor(17.7%). The age group most affected was the school(37.5%). The male gender was the predominant (60.4%).The most frequent clinical manifestations were a palpablemass (76.04%), the fever (44.79%), the anemia (41.67%),the pain (41.30%) and the weight loss (33.33%). Evidencedthe highest correlation in the diagnosis of Wilms tumor(100%), followed by Non-Hodgkin lymphoma (80%) and Hodgkin lymphoma (75%); showed the lowest correlation between the Ewing sarcoma and neuroblastoma (41.7%, both). The total correlation is “considerable” accordingto strength of agreement the Kappa coefficient (k: 0.601.P=0.000). It requires the integration of routine histopathological examination as diagnostic method of research and study of immunohistochemistry as an auxiliary diagnostic method to determine the histogenesis of neoplasm and exclude the differential diagnoses, make anappropriate therapeutic design and the determine prognosis of this group of patients.

Marcadores moleculares em câncer de mama preditivos de metástases axilares / Molecular features of breast cancer predictive of lymph node metastases

OBJETIVO: Avaliar e relacionar fatores morfológicos e moleculares de câncer de mama preditivos de metástases em linfonodos axilares. MÉTODOS: Selecionamos 123 casos de carcinomas mamários invasores subdivididos em três grupos de acordo com o status axilar (pacientes com macrometástases, com micrometástases e linfonodo-negativas). Avaliamos e correlacionamos a presença de metástases axilares com fatores morfológicos (tamanho do tumor, tipo e grau histológicos, invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina) e moleculares do tumor primário (receptores de estrógeno e progesterona, Ki67, p53, E-caderina, Her2, e invasão linfática e sangüínea em lâminas coradas pela imunoistoquímica, para D2-40 e CD31). RESULTADOS: A ocorrência de metástases axilares esteve positivamente relacionada à embolização neoplásica em vasos linfáticos em lâminas coradas pela hematoxilina e eosina (HE), quando analisamos os casos com metástases e sem metástases (p=0,04), e, quando eles eram analisados em três subgrupos (p=0,002). Também identificamos relação positiva e estatisticamente significativa entre a presença de metástases axilares e invasão de vasos sangüíneos em lâminas coradas pelo CD31 (p=0,02). As demais variáveis moleculares e morfológicas não mostraram relação estatisticamente significativa com a presença de metástases. CONCLUSÃO: A invasão neoplásica em vasos linfáticos e sangüíneos identificadas em cortes histológicos corados pela HE e por marcadores imunoistoquímicos relaciona-se positivamente com a ocorrência de metástases, e é preditivo de metástases em linfonodos axilares em câncer de mama.

OBJECTIVE: The aim of our study was to analyze morphologic and molecular markers of breast cancer relating them to the presence of metastases in axillary lymph nodes. METHODS: We selected 123 cases of invasive mammary carcinomas stratified into three subgroups: with macrometastases, with micrometastases, and lymph node negative. Presence of metastases was evaluated relating them with morphologic factors (size of primary tumor, type and grade, presence of lymphatic and blood vessel invasion in hematoxylin and eosin-stained slides) and molecular factors of primary tumor (estrogen and progesterone receptors, E-cadherin, Ki67, p53, Her2 expression, and the presence of lymphatic and blood vessel invasion in immunostained sections for D2-40 and CD31). RESULTS: Axillary lymph node metastases were positively related to the presence of lymphatic vessel invasion in hematoxylin and eosin (H&E)-stained slides, when analyzed with or without metastases (p=0.04) and when analyzed in the three subgroups (p=0.002). Lymph node metastases were also positively related to presence of blood vessel invasion identified by immunohistochemistry (IHC) for CD31 (p=0.02). However other morphologic and molecular factors were not related to the presence of axillary node metastases. CONCLUSION: Lymphatic and blood vessel invasion identified in H&E and IHC-stained slides are positively related to the rmetastatic status of axillary lymph nodes and are predictive of axillary lymph node metastases in breast cancer.