Evaluación y comparación de pruebas serológicas para la detección de la neosporosis bovina en Argentina / Evaluation and comparison of serological methods for the detection of bovine neosporosis in Argentina

Neospora caninum is a protozoan parasite that causes abortion and important economic losses in cattle worldwide. The accurate diagnosis of neosporosis is essential for management and control measures. The aims of this study were: i) to evaluate the performance of an in-house enzyme-linked immunosorbent assay based on the 38 kDa native antigen (p38-ELISA) to diagnose bovine neosporosis in Argentina using a well- characterized local sera panel from experimentally infected and naturally exposed cattle and ii) to compare the diagnostic performance and agreement of three N. caninum serological tests: p38-ELISA, indirect fluorescence antibody test (IFAT) and immunoblotting (IB) using the same sera panel. Serum samples testing either positive or negative by IFAT and IB were considered "Relative Standards of Comparison" (RSC) and used for p38-ELISA evaluation. Receiver operating characteristics analysis revealed that p38-ELISA was highly accurate (area under the curve= 0.982) according to RSC with a cut-off index of 0.0905. Relative sensitivity and specificity of p38-ELISA were 97.8 % and 99.5 %, respectively and agreement between RSC and p38-ELISA was almost perfect (k= 0.97). The evaluation and performance comparison of serological tests were performed according to the definition of gold standard based on the decision of the "majority of tests". All tests displayed high sensitivity and specificity values (greater than 95 %); and excellent agreement. This study describes the accurate performance of p38-ELISA evaluated locally and the highly accurate diagnostic performance of the studied tests for the detection of anti-N. caninum antibodies in cattle from Argentina.

Neospora caninum es un parásito protozoo responsable de abortos y pérdidas económicas en bovinos. La realización de un diagnóstico serológico preciso y con resultados comparables obtenidos por diferentes pruebas contribuye al manejo de este problema y a encarar medidas de control. Los objetivos del presente trabajo fueron los siguientes: 1) evaluar en Argentina una prueba de enzimoinmunoensayo in-house con el antígeno nativo de 38 kDa de N. caninum (ELISA-p38) para el diagnóstico de la neosporosis bovina, utilizando un panel de sueros locales bien caracterizados, procedentes de bovinos infectados de modo experimental o naturalmente expuestos; 2) comparar el desempeño y establecer el nivel de concordancia de tres pruebas serológicas para la detección de N. caninum, ELISA-p38, inmunofluorescencia indirecta (IFI) e inmunoblot (IB), con el mismo panel de sueros. Los sueros que resultaron positivos o negativos a IFI e IB fueron considerados como estándares relativos de comparación (ERC) para evaluar la prueba de ELISA-p38. El análisis de característica operativa del receptor determinó que la prueba de ELISA-p38 fue altamente precisa (área bajo la curva= 0,982) usando el punto de corte 0,0905. La sensibilidad y especificidad relativa del ELISA-p38 fue 97,8 % y 99,5 %, respectivamente, con una concordancia casi perfecta (k= 0,97) respecto del ERC. La comparación del desempeño de las pruebas se realizó usando como gold standard el criterio de la decisión de la "mayoría de las pruebas". Las pruebas exhibieron altos valores de sensibilidad y especificidad (mayores del 95 %) y excelente concordancia. Este trabajo describe un buen desempeño de la prueba de ELISA-p38 evaluada localmente y adecuada performance diagnóstica de las pruebas serológicas analizadas para la detección de anticuerpos anti N. caninum en bovinos de Argentina.

Prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii em ovinos no município de Uberlândia, MG / Prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in sheep in Uberlândia municipality, MG

O objetivo do estudo foi verificar a prevalência de anticorpos contra Toxoplasma gondii em 334 amostras de sangue de ovinos oriundos de 12 propriedades localizadas no município de Uberlândia, Minas Gerais. O teste utilizado para a pesquisa foi a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), com ponto de corte na diluição 1:64. Identificou-se a prevalência de 30,8% anticorpos anti-T. gondii em ovinos e a frequência de soropositivos por propriedade variou de 10 a 66,7%, sendo que todas as propriedades apresentaram pelo menos uma amostra reagente. Ao associar a soropositividade com sexo, idade e raça, observou-se diferença estatística significativa para faixa etária, de modo que os animais com menor idade (6 a 11 meses) foram menos reagentes do que os ovinos com maior idade. Esses resultados sugerem a adoção de medidas preventivas na região estudada.(AU)

The aim of this study was to verify the prevalence of anti-Toxoplasma gondii antibodies in 334 blood samples of sheep from 12 properties located in Uberlândia municipality, Minas Gerais, Brazil. The indirect immunofluorescence assay test (IFAT) was used for the detection of anti-T. gondii antibodies, with a cut-off at dilution 1:64. The prevalence of anti-T. gondii antibodies in sheep was 30.8% and seropositive frequency per property ranged from 10 to 66.7%, and all properties have at least one reacted sample. When ovine seropositivity was associated with gender, age and breed, there was a statistically significant difference for age, so that animals with lower age (6 to 11 months) were less reacted than the older sheeps. These results suggest the adoption of preventive measures in the region studied.(AU)

Detection of anti-Toxoplasma gondii antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, Paraná, Brazil / Detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em cavalos carroceiros da região metropolitana de Curitiba, Paraná, Brasil

Toxoplasma gondii, the agent for toxoplasmosis, has worldwide distribution. Horses normally play a secondary role in its life cycle, but movement around urban areas, feeding on grass and the increasing use of carthorses for gathering recyclable material in some urban areas of Brazil may increase their exposure to T. gondii infection. The aim of the present study was to investigate the frequency of anti-T. gondii antibodies in carthorses in the metropolitan region of Curitiba, PR. IgG antibodies against T. gondii were detected using the indirect fluorescence antibody test (IFAT) (titers ≥ 64). Seventeen (17.0%) of the 100 horses sampled were seropositive. There were no statistical differences in relation to sex (p = 0.28) or age (p = 0.15). Our findings suggest that carthorses are exposed to T. gondii infections and that no associations with age or sex exist.

Toxoplasma gondii, agente da toxoplasmose, tem distribuição mundial. Geralmente cavalos desempenham papel secundário no ciclo de vida do T. gondii. Entretanto, a circulação em meio urbano, a alimentação com gramíneas e o aumento no uso de cavalos carroceiros para recolhimento de material reciclável em algumas áreas urbanas do Brasil podem aumentar a exposição desses cavalos ao T. gondii. O objetivo deste estudo foi investigar a frequência de anticorpos anti-T. gondii em cavalos carroceiros da região metropolitana de Curitiba, PR. Os anticorpos da classe IgG contra T. gondii foram detectados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI) (títulos ≥ 64). Dezessete (17%) dos 100 cavalos avaliados foram positivos e não houve diferença entre sexos (p = 0,28) ou idade (p = 0,15). Esses achados sugerem que cavalos carroceiros estão expostos a infecções por T. gondii, não existindo associação com a idade ou o sexo dos animais.

Prevalence of anti-Neospora caninum antibodies in cattle from the state of Mato Grosso do Sul, Brazil / Prevalência de anticorpos anti-Neospora caninum em rebanhos bovinos de Mato Grosso do Sul, Brasil

Neospora caninum is an obligate intracellular parasite that can infect domestic and wild canids, as well as ruminants and equines. It was described in 1988 and has been known as a major cause of abortion in bovines and neuromuscular alterations and death in dogs. To estimate the prevalence of bovine neosporosis in the 22 municipalities of the so-called Estrato 1 subregion of the Brazilian state of Mato Grosso do Sul, blood samples were collected from cows aged 24 months and older, from December 2003 to March 2004. During sample collection, a questionnaire was used to gather data of epidemiological interest. The samples were subjected to serological diagnosis (indirect fluorescence antibody test - IFAT). Prevalences of 14.9 percent (449/2488) and 69.8 percent (143/205) were found for the animals and herds sampled, respectively. The variable found to be associated with seropositivity to N. caninum was abortion (OR 2.52; CI 1.25-5.06). The results revealed the presence of infection by N. caninum in the herds investigated, drawing attention to its role as a potential cause of abortion in cattle in Mato Grosso do Sul.

Neospora caninum é um parasita intracelular obrigatório que pode infectar canídeos domésticos e selvagens, ruminantes e eqüídeos. Esse parasita foi descrito em 1988 e, desde sua descoberta, tem emergido como uma das principais causas de aborto em bovinos, além de causar alterações neuromusculares e morte em cães. Para estimar a prevalência da neosporose bovina em 22 municípios que compõem a sub-região denominada Estrato 1 do estado de Mato Grosso do Sul, foram analisados soros obtidos no período de dezembro de 2003 a março de 2004 de fêmeas com idade igual ou superior a 24 meses. Durante a colheita das amostras foi preenchido um questionário com informações de interesse epidemiológico. A determinação da presença de anticorpos anti-N. caninum foi feita pela Reação de Imunofluorescência Indireta, sendo as prevalências encontradas nos animais e nos rebanhos amostrados de 14,9 por cento (449/2488) e 69,8 por cento (143/205), respectivamente. A variável que apresentou associação de soropositividade com N. caninum foi o aborto (OR 2,52; IC 1,25-5,06). Os resultados indicam que a infecção por N. caninum está presente nos rebanhos e que deveria ser considerada como uma potencial causa de aborto em Mato Grosso do Sul.