Reproductive biology of Pêga Jackasses: characteristics of sperm-rich fraction collected using the split-ejaculate method / Biologia reprodutiva de jumentos da raça Pêga: características da fração rica em espermatozoides coletada de forma fracionada

The aim of this study was to evaluate the physical and morphological characteristics of the sperm-rich fraction of jackass semen. To this end, 130 ejaculates from five Pêga jackasses were collected using an open model artificial vagina. The sperm-rich fraction was collected using the split-ejaculate method and assessed for the number of mounts/ejaculate, for physical and morphological characteristics of the semen and number of doses produced/ejaculate. It was observed that all characteristics evaluated differed among the five jackasses, except for the head defect rates. The mean values obtained for the jackass sperm-rich fraction collected were: number of mounts/ejaculate - 1.27; semen volume - 20.21mL; motility - 84.53%; vigor - 4.46; motility after dilution - 80.10%; sperm concentration/mL - 894.38 x 10 6; total sperm/ejaculate - 16.14 x 10 9; number of insemination doses/ejaculate (400x10 6 motile sptz) - 33.39; number of insemination doses/ejaculate (800 x 10 6 motile sptz) - 16.69; and percentage of normal sperm - 90.46%. Thus, in the present experiment the split-ejaculate method using an open artificial vagina worked well with the jackasses, and the sperm-rich fraction of the ejaculate of Pêga jackasses had high quality and sperm concentration, allowing its use for semen processing without reducing the number of insemination doses produced per ejaculate.(AU)

Foram coletados 130 ejaculados de cinco jumentos da raça Pêga, utilizando-se vagina artificial modelo aberta, com o objetivo de se avaliar as características físicas e morfológicas da fração rica em espermatozoides do ejaculado de asininos. Para tal, a fração rica em espermatozoides, composta pelos três primeiros jatos ejaculados, foi coletada e avaliada quanto ao número de montas/ejaculado, quanto às características físicas e morfológicas do sêmen, bem como quanto ao número de doses inseminantes produzidas/ejaculado. Observou-se que todas as características avaliadas diferiram entre os cinco reprodutores avaliados, com exceção do percentual de defeitos de cabeça. Os valores médios obtidos da coleta da fração rica do ejaculado de jumentos foram: número de montas/ejaculado - 1,27; volume de sêmen - 20,21mL; motilidade - 84,53%; vigor - 4,46; motilidade pós-diluição - 80,10%; espermatozoides/mL - 894,38 x 10 6; espermatozoides/ejaculado - 16,14 x 10 9; número de doses inseminantes/ejaculado (400x10 6 sptz móveis) - 33,39; doses inseminantes/ejaculado (800 x 10 6 sptz/móveis) - 16,69; e percentual de espermatozoides normais - 90,46%. Assim, no presente experimento, observou-se boa aceitação dos reprodutores à coleta fracionada utilizando-se a vagina artificial aberta, sendo a fração rica do ejaculado de jumentos da raça Pêga caracterizada por alta qualidade e concentração espermática, o que viabilizou sua utilização para o processamento do sêmen, sem prejuízos quanto ao número de doses inseminantes produzidas/ejaculado.(AU)

Physical and morphological characteristics of the first three jets of Pêga jackasses sperm-rich fraction / Características físicas e morfológicas dos três primeiros jatos da fração rica do ejaculado de jumentos da raça Pêga

The first three jets of the sperm-rich fraction of Pêga jackasses were collected and assessed separately. Five fertile Pêga jackasses were used as semen donors and underwent fractionated semen collection, using an open model artificial vagina. The first three jets of the semen were collected separately and assessed for volume, sperm motility, vigor, concentration/mL of semen, and sperm morphology. These characteristics were compared between first, second and third jets and between jackasses. It was observed that the jet volume differed (P<0.05) between jackasses, although it was similar (P>0.05) between first, second and third jets. Sperm motility did not differ (P>0.05) between jets and jackasses. Vigor was similar (P>0.05) between jets of the same jackass, and only the first jet differed (P<0.05) between jackasses. The first, second and third jets of the sperm-rich fraction had decreased sperm concentrations (P<0.05) of 955.56, 725.56 and 280.56x 106 sperm/mL of semen, respectively. Sperm morphology differed between the first three jets only for the incidence of mid-piece defect, higher in the third one (4.26%), compared to the first (3.36%) and second (3.38%) ones. When comparing the morphological characteristics of the sperm-rich fraction between five jackasses, regardless of the jet, there were differences in the percentage of normal sperm, proximal cytoplasmic droplet, mid-piece and head defects.(AU)

Objetivou-se, no presente experimento, caracterizar os três primeiros jatos da fração rica do ejaculado de jumentos da raça Pêga. Para tal, cinco jumentos foram submetidos à coleta fracionada do sêmen, utilizando-se vagina artificial modelo aberta. Os três primeiros jatos da fração rica do ejaculado foram coletados separadamente e avaliados quanto ao volume, à motilidade e ao vigor espermáticos, à concentração espermática/mL de sêmen e à morfologia espermática. Comparações foram realizadas entre jatos e entre jumentos. Observou-se que o volume do jato diferiu (P<0,05) entre os jumentos, embora fosse similar (P>0,05) entre os jatos. A motilidade espermática não diferiu (P>0,05) entre jatos nem entre jumentos. O vigor espermático foi similar (P>0,05) entre os jatos de um mesmo jumento, e apenas o vigor do jato 1 diferiu (P<0,05) entre os jumentos. Independentemente do jumento, a fração rica do ejaculado foi composta por três jatos apresentando concentrações espermáticas decrescentes (P<0,05), com 955,56; 725,56 e 280,56 x 106 espermatozoides/mL de sêmen. A morfologia espermática diferiu entre os três jatos avaliados apenas para a incidência de defeitos de peça intermediária, sendo maior no jato três (4,26%), em relação aos jatos um (3,36%) e dois (3,38%). Comparando-se as características morfológicas do sêmen entre os cinco jumentos avaliados, independentemente do jato, observaram-se diferenças entre os reprodutores quanto ao percentual de espermatozoides normais, com gota citoplasmática proximal, com defeitos de peça intermediária e de cabeça.(AU)

Efeito do tipo de envase, flatpacks ou palhetas, sobre a criopreservação da fração rica do sêmen asinino / The effect of the type of package, FlatPacks or straws, on cryopreservation of the jackass sperm-rich fraction

Com o objetivo de se estudar o efeito do tipo de envase sobre a criopreservação do sêmen asinino, coletado de forma fracionada, utilizou-se o sêmen de cinco jumentos da raça Pêga, submetido a um protocolo de congelamento envolvendo um diluidor e duas formas de envase, flatpacks ou palhetas de 0,55mL, tendo como ponto final a avaliação dos parâmetros seminais in vitro após o descongelamento do sêmen. Os resultados de motilidade espermática para as amostras envasadas em flatpacks ou em palhetas foram de 24,67% e 35,34%, no momento do descongelamento; de 13,39% e 25,83%, 60 minutos após o descongelamento; e de 7,86% e 13,33%, aos 120 minutos após o descongelamento, respectivamente. Já os valores para o vigor espermático foram de 2,55 e 3,33, no momento do descongelamento; de 1,57 e 2,48, após 60 minutos do descongelamento; e de 1,11 e 1,67, após 120 minutos do descongelamento, na mesma ordem anterior. As características seminais diferiram entre os jumentos, evidenciando uma grande variação individual. O percentual de ejaculados aprovados (motilidade ≥30%, vigor ≥3) foi influenciado pelo reprodutor e pelo tipo de envasamento, estando o melhor resultado (P<0,05), de 86,21%, associado ao sêmen envasado em palhetas, quando comparado ao valor de 56,67%, obtido para o sêmen envasado em flatpacks.

The effect of the type of package on the cryopreservation of jackass semen was studied, using the sperm-rich fraction of five jackasses and a special cryopreservation semen protocol, related to one extender and two different packages, FlatPacks or straws. The characteristics of the in vitro semen were evaluated after thawing. The motility results were 24.67% and 35.34% after thawing; 13.39% and 25.83% 60 minutes after thawing and 7.86% and 13.33%, 120 minutes after thawing. The vigor results were 2.55 and 3.33 after thawing, 1.57 and 2.48 60 minutes after thawing and 1.11 and 1.67 120 minutes after thawing, for FlatPacks or straws packages, respectively. The jackasses used were different regarding seminal characteristics, with great individual variation. The approved post-thaw viability (motility ≥ 30%, vigor ≥ 3) was affected by jackass and type of package, with the best results (P<0.05) for semen packed in straws (86.21%), compared to semen packed in FlatPacks (56.67%).

Efeito da categoria reprodutiva sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of mare status on fertility of inseminated mares with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito da categoria reprodutiva sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação retal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 106 espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento) depositada no corpo do útero. O diagnóstico de gestação foi realizado por meio de palpação transretal, rufiação e ultrassonografia, realizada a cada 14 dias. Os resultados de 195 ciclos, referentes a 141 éguas, foram agrupados de acordo com a categoria reprodutiva a que pertenciam: potra, égua solteira, égua parida e no "cio do potro". As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 60,00%, 48,28%, 75,00% e 47,17% e, após quatro ciclos, de 61,54%, 47,13%, 54,76% e 47,17%, na mesma ordem para as categorias descritas anteriormente. A categoria reprodutiva não teve efeito (P>0,05) sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino resfriado, sendo as potras, éguas solteiras, éguas paridas e no "cio do potro" igualmente eficientes para o uso na reprodução...

The effect of the mare status on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen, was studied. The cycles were controlled by transrectal palpation and teasing, and mares were inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, from the detection of a follicle with 3.0 to 3.5cm diameter in one of the ovaries until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glycine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 106 motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The inseminations were carried out in the uterine body. Pregnancy was detected using transrectal palpation, teasing and ultrasound exams every 14 days. The results of 195 cycles of 141 mares were grouped according to the mare status: maiden, barren, lactation or in foal heat. Pregnancy rates for the first cycle were 60.00%, 48.28%, 75.00% and 47.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 61.54%, 47.13%, 54.76% and 47.17%, respectively for maiden, barren, lactation and in foal heat mares (P>0,05). The mare status did not affect pregnancy rates of mares inseminated with diluted and cooled jackass semen and were efficient to use on reproduction...

Efeito da idade sobre a fertilidade e perdas embrionárias de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of age on fertility and embryonic loss of mares inseminated with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito da idade sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação transretal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados, a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de 400 x 106 espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento). Os resultados de 195 ciclos estrais, referentes a 141 éguas, foram agrupados em classes, de acordo com a idade das éguas: 2,5 a 6 anos, 6,5 a 10 anos, 10,5 a 14 anos e 14,5 a 19 anos. As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 68,42%, 50,75%, 46,88% e 52,17% e, após quatro ciclos, de 69,57%, 47,92%, 46,34% e 45,71% para as faixas etárias de 2,5 a 6, 6,5 a 10, 10,5 a 14 e 14,5 a 19 anos, respectivamente (P>0,05). A idade não teve efeito sobre a fertilidade das éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado...

The effect of the mare age on fertility of mares inseminated with diluted, cooled and stored jackass semen was studied. The females were controlled by transrectal palpation and teasing, and inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday, since the detection of a 3.0 to 3.5cm follicle diameter, in one of the ovaries, until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glicine extender and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 106 motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The results of 195 cycles of 141 mares were grouped, in accordance with the age: 2.5 to 6 years, 6.5 to 10 years, 10.5 to 14 years and 14.5 to 19 years. The pregnancy rates for the first cycle were 68.42%, 50.75%, 46.88% and 52.17%, and after four cycles, the pregnancy rates/cycle were 69.57%, 47.92%, 46.34% and 45.71%, respectively for 2.5 to 6, 6.5 to 10, 10.5 to 14 and 14.5 to 19 years (P>0,05). The mare age had no influence on fertility, using diluted and cooled jackass semen...

Efeito do número de inseminações artificiais sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído e resfriado a 5ºC por 12 horas de armazenamento / Effect of the number of inseminations/cycle on fertility of inseminated mares with jackass semen diluted and cooled at 5ºC for 12 hours

Estudou-se o efeito do número de inseminações sobre a fertilidade de éguas inseminadas com sêmen asinino diluído, resfriado e armazenado. Os ciclos foram acompanhados por palpação retal e rufiação, sendo as inseminações realizadas às terças, quintas e sábados (três vezes por semana), a partir da detecção de um folículo de 3,0 a 3,5cm de diâmetro, em um dos ovários, até a ovulação. O sêmen de cinco jumentos da raça Pêga foi diluído nos diluidores de leite em pó desnatado-glicose ou glicina-gema de ovo, resfriado a 5ºC e armazenado por 12 horas, sendo a dose inseminante de aproximadamente 400x10(6) espermatozoides móveis (no momento da diluição final, pré-resfriamento). De acordo com o número de inseminações artificiais (IA)/ciclo, os resultados de 195 ciclos, referentes a 140 éguas, foram agrupados em 1IA, 2IA e 3 ou mais IA. As taxas de concepção, ao primeiro ciclo, foram de 50,0 por cento, 62,1 por cento e de 41,0 por cento e, após quatro ciclos, de 47,7 por cento, 55,6 por cento e de 42,9 por cento para 1IA, 2IA e 3 ou mais IA, respectivamente (P>0,05). O número de IA/ciclo, utilizando sêmen asinino resfriado, não teve efeito sobre a fertilidade das éguas.

The effect of the number of inseminations/cycles on the fertility of inseminated mares with diluted, cooled and stored jackass semen was studied. The cycles were controlled by rectal palpation and teasing, and mares were inseminated every Tuesday, Thursday and Saturday (three times/week), from the detection of a 3.0 to 3.5cm follicle diameter in one of the ovaries until ovulation. The semen of five Pêga jackasses was diluted in skim milk-glucose or in egg yolk-glicine diluter and cooled at 5ºC for 12 hours, with the inseminate dose of 400 x 10(6) motile spermatozoa (at the moment of the final dilution, before cooling). The results of 195 cycles of 140 mares were grouped, in accordance with the number of artificial inseminations (AI)/cycle in: 1AI, 2AI and 3 or more AI. The conception rates for the first cycle were 50.0 percent, 62.1 percent and 41.0 percent, and after four cycles they were 47.7 percent, 55.6 percent and 42.9 percent, respectively for 1AI, 2AI and 3 or more AI (p>0.05). The number of AI/cycles, using cooled jackass semen, had no influence on fertility.