Low Cost Micropropagation of Local Varieties of Taro (Colocasia esculenta spp.).

Aims: This study was conducted to evaluate low cost protocol for the micropropagation of three varieties of taro (Dasheen, Eddoe and wild) from eastern Kenya. Study Design: The plants were grown in polythene bags arranged in a completely randomized block design (CRBD) replicated nine times. Place and Duration of Study: Department of plant sciences Kenyatta University in plant and tissue culture laboratory, between June 2010 and December 2011. Methodology: The three media types tested were Omex foliar feed (LCM1), Stanes micronutrients (LCM2) and micro food (LCM3) as substitute for Murashige and Skoog (MS) media. Results: The results showed significant differences (p˂0.05) in the shoot generation for Eddoe and wild varieties in LCM1 and LCM2 respectively compared to LCM3 and MS. Plants grown in MS media and LCM3 had the longest height compared to LCM1 and LCM2. Naphthalene Acetic Acid (NAA) and Citishooter did not show any significant differences on the number of roots. All the regenerated plants in this study were similar in morphology and vigour. Media cost was reduced by 94.7% (LCM1) and 96% for both LCM2 and LCM3. Conclusion: This study indicates the potential of low cost media as a substitute for conventional micro propagation.

Early selection of elite clones of an ornamental bromeliad in vitro / Seleção precoce in vitro de clones elite de uma bromélia ornamental

Orthophytum grossiorum is a typical bromeliad from Atlantic forestry threatened of extinction. The objectives of this research were to select O. grossiorum clones with ornamental values easy to propagate in vitro, and establish in vitro propagation protocols for these clones. The project was developed in three steps: germination and in vitro selection of seedlings responsive to BAP (6-benzylaminopurine), selection of clones with ornamental values, and establishment of protocol for in vitro propagation of the selected clones. In the first step only 18.33 percent of plantlets germinated in vitro were responsive to BAP. These plantlets were selected and replicated in vitro several times, each replicated plantlet constituting a clone. In the second step these clones were established ex vitro and surveyed for ornamental attributes. Five out of 11 clones were selected in this step. These clones presented distinct phenotypic traits and were considered of high ornamental quality. In the third step a protocol for in vitro propagation was developed for each selected clone.

Orthophytum grossiorum é uma bromélia ameaçada de extinção típica de Mata Atlântica. Os objetivos deste trabalho foram selecionar clones de O. grossiorum com potencial ornamental e de fácil propagação in vitro e estabelecer protocolo de propagação in vitro para esses clones. O trabalho foi desenvolvido em três etapas: germinação e em seleção in vitro de plântulas responsivas a BAP (6-benzylaminopurine), seleção de clones com valores ornamentais e estabelecimento de protocolo para propagação in vitro dos clones selecionados. Na primeira etapa, foi observado que apenas 18.33 por cento das plântulas germinadas in vitro eram responsivas a BAP. Essas plântulas foram selecionadas e reproduzidas em in vitro, e cada plântula selecionada e reproduzida constituiu um clone. Na segunda etapa, esses clones foram estabelecidos ex vitro e selecionados em relação aos atributos ornamentais. Nessa etapa, foram selecionados cinco entre 11 clones. Esses apresentaram características fenotípicas distintas, sendo considerados de alta qualidade ornamental. Na terceira etapa, o protocolo para em propagação in vitro foi desenvolvido para cada clone selecionado.

Utilization of the biorreactor of imersion by bubbles at the micropropagation of Ananas comosus L. Merril

The research for new techniques of in vitro cultivation is being object of many studies around the world, in order to optimize and decrease production costs of seedlings with agronomical interest. The main goal of this work was to compare different systems of in vitro cultivations using Ananas comosus L. Merril. So, the in vitro growth of the plantlets was promoted in two different bioreactors: Bioreactor of Immersion by Bubbles (B.I.B.®) and the Reactor of Temporary Immersion (R.I.T.A.®) with immersion cycle every 2 hours for 15 minutes and the traditional system in flasks with 200 mL. All cultivation systems used the MS liquid nutritive solution, supplemented with BAP (1 mgL-1), ANA (0.25 mgL-1), sucrose (30 gL-1) and Tween 20® (0.5 µL). The pH was adjusted to 5.8 and sterilized at 120°C for 15 minutes. The cultures were kept into a growth room during 30 days, with controlled temperature of 25±2°C, under white cold light (46.8 µmol.m-2.s-1), with photoperiod of 16 hours. The experimental design used was randomized, with three treatments, three repetitions and ten plants each stage. Among the evaluated systems, the BIB® presented the best results for the tested variables, mainly the total number of shoots, being 2.3 e 3.1 times superior when compared with the system R.I.T.A.® and the traditional consecutively. So the system of immersion by bubbles turns into an effective equipment to produce seedlings of pineapple in large scale.

A busca por novas técnicas de cultivo in vitro vem sendo amplamente estudadas, visando otimizar e baixar o custo de produção das mudas que tenham interesse agronômico. O objetivo deste trabalho foi comparar diferentes sistemas de cultivo in vitro de Ananas comosus L. Merril. Para tanto, o crescimento in vitro de plântulas foi promovido em sistemas de biorreatores (B.I.B.® e R.I.T.A.®) com ciclo de imersão a cada 2 horas por 15 minutos e o sistema tradicional em frascos de 200 mL. Em todos os sistemas de cultivo, foram utilizadas solução nutritiva líquida MS, suplementado com 1 mg L-1 de BAP, 0,25 mg L-1 de ANA, 30 g L-1 de sacarose e 0,5 µL de Tween® 20, pH ajustado para 5,8 e autoclavagem a 120°C por 15 minutos. As culturas foram mantidas em sala de crescimento durante 30 dias, temperatura controlada de 25±2°C, sob luz branca fria (46,8 µmol.m-2.s-1), com 16 horas de fotoperíodo. O delineamento foi inteiramente casualizado, com três tratamentos, três repetições e dez plantas por estágios. Para os sistemas avaliados, o biorreator de imersão por bolhas apresentou os melhores resultados dentre as variáveis analisadas, com destaque ao número total de brotações, sendo 2,3 e 3,1 vezes superiores quando comparado com o sistema R.I.T.A.® e sistema tradicional respectivamente. Portanto, o sistema de imersão por bolhas torna-se um equipamento eficaz na produção de mudas de abacaxizeiro em larga escala.

In vitro propagation of nidularium fulgens / Propagaciòn in vitro de nidularium fulgens lem / Propagação in vitro de nidularium fulgens lem

Nidularium fulgens Lem. is a native bromeliad species of the Brazilian Atlantic Forest, used in gardens and vases. Like other bromeliad species, plants are extracted from their environment in order to be commercialized. This study tested different concentrations of growth regulators on the in vitro propagation of N. fulgens. Pre-established in vitro seedlings were inoculated in MS culture medium with BA (6-benzylaminopurine) added at the concentrations of 0, 0.5, 1.0, 2.0 and 4.0mg·l-1 in combination with NAA (naphthaleneacetic acid) at 0, 0.1, 0.5, 1.0mg·l-1 (experiment 1), and with TDZ (thidiazuron) at 0, 0.01, 0.02, 0.05 and 0.1mg·l-1 in combination with NAA at 0, 0.1, 0.5 and 1.0mg·l-1 (experiment 2). The combination of auxins and cytokinins, especially TDZ, is important for micropro-pagation of N. fulgens. Higher numbers of shoots were obtained when 0.02mg·l-1 TDZ plus 0.5 or 0.1mg·l-1 NAA or MS medium was supplemented with 1.0mg·l-1 BA and 0.1mg·l-1 NAA. The occurrence of shoots longer than 1.0cm was optimized when MS medium was supplemented with 0.02mg·l-1 TDZ and 0.5mg·l-1 NAA. Roots were not observed when BA or TDZ were added to the MS culture medium. Plants over 2.0cm were acclimatized, resulting in a 100% survival rate. The use of the produced plants is suggested for in vitro preservation programs of endangered populations.

Nidularium fulgens Lem. es una especie de bromelia nativa del Bosque Atlántico Brasilero, utilizada en jardines y floreros. Al igual que con otras especies de bromelias, las plantas son extraídas de su hábitat para ser comercializadas. En este estudio se ensayó el efecto de diferentes concentraciones de reguladores del crecimiento en la propagación de N. fulgens. Plántulas preestablecidas in vitro fueron inoculadas en medio de cultivo MS con BA (6-benzilaminopurina) en concentraciones de 0; 0,5; 1,0; 2,0 y 4,0mg·l-1 en combinación con NAA (ácido naftaleneacético) 0; 0,1; 0,5 y 1,0mg·l-1 (experimento 1), o inoculadas con TDZ (thidiazuron) 0; 0,01; 0,02; 0,05 y 0,1mg·l-1 en combinación con NAA 0; 0,1; 0,5 y 1,0mg·l-1 (experimento 2). La combinación de auxinas y citoquinas, especialmente TDZ, es importante para la micropropagación de N. fulgens. Se obtuvo más vástagos cuando se empleó 0,02mg·l-1 de TDZ con 0,5 o 0,1mg·l-1 NAA, o cuando el medio MS fue suplementado con 1,0mg·l-1 BA y 0,1mg·l-1 NAA. La ocurrencia de vástagos de más de 1,0cm de largo fue optimizada cuando el medio se suplementó con 0,02mg·l-1 TDZ y 0,5mg·l-1 NAA. No se observaron raíces cuando se añadió BA o TDZ al medio de cultivo. Se aclimatizaron plantas con más de 2,0cm resultando en un 100% de supervivencia. Se sugiere el uso de las plantas producidas para programas de preservación in vitro de poblaciones en peligro de extinción.

Nidularium fulgens Lem. é uma espécie de bromélia nativa do Bosque Atlântico Brasileiro, utilizada em jardins e vasos. Igualmente que com outras espécies de bromélias, as plantas são extraídas de seu hábitat para ser comercializadas. Neste estudo se ensaiou o efeito de diferentes concentrações de reguladores do crescimento na propagação de N. fulgens. Plântulas preestablecidas in vitro foram inoculadas em meio de cultivo MS (MURASHIGE & SKOOG, 1962) com BAP (6-benzilaminopurina) em concentrações de 0; 0,5; 1,0; 2,0 e 4,0mg·l-1 em combinação com ANA (ácido naftaleneacético) 0; 0,1; 0,5 e 1,0mg·l-1 (experimento 1), ou inoculadas com TDZ (thidiazuron) 0; 0,01; 0,02; 0,05 e 0,1mg·l-1 em combinação com ANA 0; 0,1; 0,5 e 1,0mg·l-1 (experimento 2). A combinação de auxinas e citoquinas, especialmente TDZ, é importante para a micropropagação de N. fulgens. Obteve-se maior número de germinações quando se empregou 0,02mg·l-1 de TDZ com 0,5 ou 0,1mg·l-1 ANA, ou quando o meio MS foi suplementado com 1,0mg·l-1 BAP e 0,1mg·l-1 ANA. A ocorrência de partes aéreas com mais de 1,0cm de comprimento foi optimizada quando o meio foi suplementado com 0,02mg·l-1 TDZ e 0,5mg·l-1 ANA. Não foram observadas raízes quando acrescentado BAP ou TDZ ao meio de cultivo. Aclimatizaram-se plantas com mais de 2,0cm resultando em um 100% de sobrevivência. Sugere-se o uso das plantas produzidas para programas de preservação in vitro de populações em perigo de extinção.