Formação de biofilme por Vibrio parahaemolyticus isolados de pescados / Biofilm formation by Vibrio parahaemolyticus isolated from fish

O pescado é um alimento altamente perecível, possui pH próximo a neutralidade, elevada atividade de água e alto teor de nutrientes facilmente utilizáveis por micro-organismos. Vibrio parahaemolyticus pode ser encontrado em ambientes com salinidade entre 3% e 8% e tem pH ideal para multiplicação entre 7,8 e 8,6. É um patógeno que pode causar gastrenterite aguda pelo consumo de frutos do mar contaminados, crus ou mal cozidos. Mesmo os processos de tratamento de água como cloração, adição de antibióticos e filtros apresentam dificuldade em reduzir a contaminação por Vibrio, sendo suposto que este gênero bacteriano pode formar biofilmes em diferentes superfícies. O objetivo do trabalho foi verificar a capacidade de V. parahaemolyticus isolados de pescados formarem biofilme após estresse subletal. No decorrer de um ano, foram realizadas 12 coletas mensais de amostras de peixes capturados no estuário da Lagoa dos Patos, as quais foram analisadas quanto à presença de V. parahaemolyticus. Concomitantemente, foram coletadas assepticamente amostras de água do estuário para análise de sanilidade e pH. Os isolados de Vibrio foram analisados pela reação em cadeia da polimerase (PCR) para identificação da espécie pela presença dos genes toxR. Além dos isolados obtidos no presente trabalho, também foram estudadas 15 outras cepas de V. parahaemolyticus previamente isoladas em outros trabalhos. As cepas foram avaliadas quanto à capacidade de produção de biofilme em placas de microtitulação. A capacidade de produção de biofilme após as cepas serem submetidas a diferentes tipos de estresse subletal (42ºC, 20ºC, 4ºC e pH ácido) também foi testada. Dentre os 120 peixes analisados, foram isolados V. parahaemolyticus de quatro (3,33%) pescados, sendo Mugil platanus a única espécie de peixe na qual o micro-organismo foi encontrado. Das 19 cepas analisadas, 89,5% foram capazes de formar biofilme, o que parece indicar que essa capacidade tem um papel importante na sobrevivência do micro-organismo nos pescados. Dessas, 25% das cepas aumentaram a capacidade de formar biofilme. Com base nos resultados, conclui-se que peixes da espécie M. platanus do estuário da Lagoa dos Patos são hospedeiros de V. parahaemolyticus e que a quase totalidade das cepas são formadoras de biofilme. A exposição a condições subletais de estresse tem efeito distinto sobre as diferentes cepas, induzindo aumento na capacidade de formar biofilme em algumas. Este foi o primeiro estudo realizado com V. parahaemolyticus, para avaliar o efeito de fatores de estresse sobre a formação de biofilme.(AU)

Fish is a highly perishable food, has a neutral pH, high water activity and high content nutrient, which makes it favorable to the microorganisms multiplication. Vibrio parahaemolyticus may be found in environments with a salinity of 3% and 8% and has optimal pH for multiplication between 7.8 and 8.6. This pathogen can cause acute gastroenteritis by consumption of contaminated raw or undercooked seafood. There is difficulty in reducing Vibrio contamination during fish processing, being supposed that this bacterial genus can form biofilm on different surfaces. The aim of this study was to verify the ability of V. parahaemlyticus isolated from fish from biofilm after sublethal stress. In the course of one year, 12 monthly samples of fish caught in the Lagoa dos Patos Estuary were analyzed for the presence of V. parahaemolyticus. Concurrently, water samples from estuary were collected aseptically for salinity analysis and pH. Vibrio isolates were analyzed by polymerase chain reaction (PCR) to identification of the species by presence of the toxR gene. In addition to the isolates obtained in this study were also studied 15 other strains of V. parahaemolyticus previously isolated in other works. The strains were evaluated for biofilm production capacity in microtiter plates. The biofilm production capacity after the strains had being subjected to different types of sublethal stress (42oC, 20°C, 4°C and acid pH) was also tested. Among the 120 analyzed fish, V. parahaemolyticus were isolated from four (3.33%) fishes, and Mugil platanus was the only species in which the microorganism was found. Among the 19 strains analyzed, 89.5% were able to form biofilm, which seems to indicate that this ability has an important role in the microorganism survival in the fish. Among these strains, 25% increased the ability to form biofilm after sublethal exposure. Based on the results, we concluded that fish of the species M. platanus of the Lagoa dos Patos Estuary are hosts of V. parahaemolyticus and that almost all of these strains are forming biofilm. Exposure to sublethal stress conditions has distinct effect on different strains, inducing an increase in the ability to form biofilm in some. This was the first study about the effects of stress on the V. parahaemolyticus biofilms formation.(AU)

Vibrio parahaemolyticus isolados de pescados do estuário da Lagoa dos Patos / Vibrio parahaemolyticus isolated from fishes captured from the Lagoa dos Patos estuary

O estuário da Lagoa dos Patos é um importante polo pesqueiro artesanal por constituir área de criação de diversas espécies de peixes e crustáceos. Suas águas são influenciadas diretamente por fatores meteorológicos, os quais interferem na entrada de água oceânica no estuário e na vazão, refletindo na sua salinidade. Por esta razão, há a possibilidade de V. parahaemolyticus ser encontrado no estuário da lagoa e, consequentemente, nos pescados nele capturados, o que ofereceria risco aos consumidores. O objetivo do estudo foi de avaliar a presença de V. parahaemolyticus em pescados do estuário da Lagoa dos Patos, capturados e processados artesanalmente. Cinquenta e seis amostras de pescados oriundos do estuário da Lagoa dos Patos foram analisadas quanto à presença de V. parahaemolyticus. Três das cinco espécies analisadas, camarão-rosa (Farfantepenaeus paulensis), tainha (Mugil platanus) e linguado (Paralichthys orbignyanus) albergavam o micro-organismo pesquisado. Estes resultados servem de alerta para a necessidade de maior fiscalização na produção de pescados, bem como da adoção de medidas higiênico-sanitárias que previnam o risco de transmissão deste patógeno para os consumidores. Este é o primeiro registro de isolamento deV. parahaemolyticus de F. paulensis, M. platanus e P. orbignyanus.

Lagoa dos Patos estuary is an important artisanal fishing pole because it represents an area for breeding several species of fish and shellfish. Water is directly influenced by meteorological factors, which interfere in the ocean water into the estuary and flow, reflecting on the salinity. For this reason, there is the possibility of V. parahaemolyticus be found in the lagoon estuary; consequently the fish caught from these place could offer risks to the health of consumers. The objective of this study was to evaluate the presence of V. parahaemolyticus in the Lagoa dos Patos estuary, and in the fishes captured from small-scale fishing and processing. Fifty-six samples of fish caught from the Lagoa dos Patos estuary were analyzed for the presence of V. parahaemolyticus. Three of five species analyzed, shrimp (Farfantepenaeus paulensis), mullet (Mugil platanus) and sole (Paralichthys orbignyanus) harbored this microorganism. These results serve as a warning for providing the best technical oversight to the production of fish, and also the adoption of hygienic and sanitary measures to prevent the risk of transmission of this pathogen to consumers. This is the first report on the isolation of V. parahaemolyticus from F. paulensis, M. platanus and P.orbignyanus.

Effects of bacterial infestation caused by human wastes on the skin structures of Mugil platanus Günther, 1880 (Mugilidae) / Efeitos da infestação de bactérias provocada por resíduos humanos na pele de Mugil platanus Günther, 1880 (Mugilidae)

Manifestation of infectious pathologies in fishes usually increases in environments where organic wastes are disposed. Specimens of Mugil platanus Günther, 1880 and water samples collected at three points of the Tramandaí river were analyzed during a one year period. The macroscopic observation revealed ulcerations in the caudal peduncle area covered with a mass of amorphous and whitened tissues. Histopathologic analysis showed the presence of negative gram bacteria, probably responsible for alterations of the normal structure of the epidermic tissues. Non-parametric statistical analysis for ammonia concentration showed a significant variation among the three collected spots as well as in the multiple comparison between two spots. In this study, we describe cutaneous lesions observed in Mugil platanus specimens and tested their correlation with environmental ammonia concentration.

A manifestação de patologias infecciosas em populações de peixes costuma ser incrementada em ambientes onde são lançados despejos orgânicos. Exemplares da espécie Mugil platanus Günther, 1880 coletados em três pontos do rio Tramandaí foram utilizados para análise das alterações, e amostras de água foram tomadas durante o período de um ano para verificação da presença de bactérias. A observação macroscópica revelou ulcerações na região do pedúnculo caudal revestidas por uma massa de tecido amorfo e esbranquiçado. A análise histopatológica mostrou a presença de bactérias gram negativas, que provavelmente foram as responsáveis pela alteração da estrutura normal dos tecidos de revestimento do corpo. O resultado da análise estatística não paramétrica para a concentração de amônia mostrou variação significativa entre os três pontos amostrados bem como nas comparações múltiplas entre os pontos dois a dois. Este trabalho descreve as lesões cutâneas observadas em Mugil platanus e testa sua correlação com a concentração de amônia.

Myxobolus platanus n. sp. (Myxosporea, Myxobolidae), a parasite of Mugil platanus Günther, 1880 (Osteichthyes, Mugilidae) from Lagoa dos Patos, RS, Brazil

Myxobolus platanus n. sp. infecting the spleen of Mugil platanus Günther, 1880 (Osteichthyes, Mugilidae) from Lagoa dos Patos, Brazil is described The parasites formed round or slightly oval whitish plasmodia (about 0.05-0.1mm in diameter) on the surface of the organ. The spores were round in frontal view and oval in lateral view, 10.7µm (10-11) long, 10.8µm (10-11) wide and 5µm thick, and presented four sutural marks along the sutural edge. The polar capsules, equal in size, were prominent, surpassing the mid-length of the spore, and were oval with the posterior extremity rounded, and converging with their anteriorly tapered ends. They were 7.7µm (7-8) long and 3.8µm (3.5-4) wide. A small intercapsular appendix was present. The polar filament formed five to six coils obliquely placed to the axis of the polar capsule. No mucous envelope or distinct iodinophilous vacuole were found

Descreve-se Myxobolus platanus n. sp. infectando o baço de Mugil platanus Günther, 1880 (Osteichthyes, Mugilidae) da Lagoa dos Patos, Brasil. Os parasitas formavam plasmódios brancos redondos ou ligeiramente ovais (diâmetro de cerca de 0,05-0,1mm) à superfície do órgão. Os esporos eram circulares em observação frontal e ovais em obervação lateral, medindo, em média, 10,7µm (10-11) de comprimento, 10,8µm (10-11) de largura e 5µm de espessura, e tinham quatro marcas suturais ao longo da linha de sutura. As cápsulas polares eram grandes e do mesmo tamanho ultrapassando a zona média do esporo. Eram de forma oval, tendo a extremidade posterior arredondada, e convergiam pelas extremidades anteriores afiladas, medindo 7,7µm (7-8) de comprimento por 3,8µm (3,5-4) de largura. Um pequeno apêndice intercapsular estava presente. O filamento polar formava cinco a seis dobras colocadas obliquamente em relação ao eixo da cápsula. Não havia envelope mucígeno nem vacúolo iodofílico

Co-infestation of gills by different parasite groups in the mullet, Mugil platanus Günther, 1880 (Osteichthyes, Mugilidae): effects on relative condition factor

This study involved 334 specimens of mullet, Mugil platanus, captured monthly in the estuarine region of Cananéia, São Paulo State, Brazil, from July 1988 to June 1989, and examined for the presence of gill parasites. Parasitological inspections revealed the occurrence of the following groups: Trichodina sp., Monogenoidea, Copepoda, and Hirudinea. Only four mullets were not parasitized. Total weight and total length of all 334 mullet specimens examined were used for adjusting the weight-length relationship curve and calculating the relative condition factor (Kn). The 118 specimens infested with monogenoideans on average had lower weights than expected (Kn 1.0), and the 81 fish co-infested with Copepoda, Monogenoidea, and Trichodina sp. showed a Kn 1.0. The other infested and non-infested mullets had a Kn > 1.0. It was possible to infer that gill infestation with monogenoideans alters mullet weight, especially in the presence of co-infestation with Trichodina sp. and copepods.

Foram examinados exemplares de tainha, Mugil platanus, capturados mensalmente na região estuarino-lagunar de Cananéia, SP, entre julho de 1988 e junho de 1989, a fim de verificar a ocorrência de parasitos branquiais. Das 334 tainhas examinadas, apenas quatro não apresentaram nenhum parasito. Nas demais, foram encontrados os seguintes grupos: Trichodina sp., Monogenoidea, Copepoda e Hirudinea. Utilizando os valores de peso total (Wt) e de comprimento total (Lt) de todos os espécimes estudados calculou-se o fator de condição relativo (Kn). Constatou-se que os 118 espécimes infestados por monogenóideos encontravam-se, em média, com peso inferior ao esperado. Os 81 espécimes que tinham, concomitantemente nas brânquias, Trichodina sp., copépodos e monogenóideos apresentaram, em média, peso inferior ao esperado. Os demais espécimes parasitados, assim como os não parasitados, estavam com o peso igual ou acima do esperado. Foi possível constatar que o parasitismo das brânquias por monogenóideos afeta o peso das tainhas, Mugil platanus, da região estuarino-lagunar de Cananéia, SP, especialmente quando co-infestado com Trichodina sp. e copépodos.