Antifungal activity of homeopathic medicines against the white mold causing agent Sclerotinia sclerotiorum

White mold disease, caused by fungus Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary., is a disease hard to control due to the high amount of sclerotia produced, which guarantees its survival in the soil for years leading to significant yield losses. Alternative techniques to control the pathogen have been researched, including homeopathy. The present work aimed to evaluate the in vitro antifungal effect of homeopathic medicines on S. sclerotiorum mycelial growth. Homeopathic medicines Sulphur, fungal sclerotium Nosode and Calcarea carbonica, in 30CH, 200CH and 1000CH dynamizations were tested. Assays were carried out in a completely randomized design, with four repetitions. Experiments were performed through the addition of homeopathic medicines on the surface of plates containing culture medium, followed by insertion of a disc containing fungus mycelia and incubation. Control treatment received no homeopathic medicine. The mycelial progression was monitored by seven halo diameter measurements during experiment period. All homeopathic medicines tested and their dynamizations were able to inhibit partially the development of the fungus. Calcarea carbonica at the dynamization of 1000 CH showed the best inhibitory effect on S. sclerotiorum, which under its effect produced a mycelial halo 40% smaller than the control treatment.

Estudio del efecto de dosis infinitesimales del nosode Streptococcinum sobre la actividad microbiana del Streptococcus ß-hemolítico del grupo a en un modelo in vitro / Study of the effect of infinitesimal doses of nosode Streptococcinum on the microbial activity of ß-hemolytic Streptococcus of group a in an in vitro model

El no reconocimiento de la homeopatía por parte de la «ciencia oficial¼, basándose en su aparente no plausibilidad biológica, (existencia de un mecanismo biológico plausible que explique la relación causa-efecto) no significa que los medicamentos homeopáticos no tengan un efecto. Sin embargo, incluso cuando en la literatura médica aparecen referidos efectos aceptables, entonces estos son relacionados con el azar, el efecto placebo o diseños metodológicos poco estrictos, atribuyendo dicha acción a factores como el azar, la no plausibilidad biológica, el efecto placebo, o a diseños metodológicos incorrectos. El presente estudio demuestra el efecto del nosode Streptococcinum sobre la actividad microbiana In Vitro del Streptococcus pyogenes a través de pruebas de sensibilidad microbiana, por las técnicas de dilución en caldo (método objetivo) y difusión en discos (método cualitativo), según las guías vigentes del NCCLS- (National Comittee for Clinical Laboratory Standars), referente actual del método empírico analítico (positivista) para estudios microbiológicos. Se importó la cepa Streptococcus pyogenes ATCC® 49399™ - KWIK-STIK™ - 2 KWIK STIK PASE 4 de Laboratorios Scharlau. (ITA). A partir de la misma y su posterior activación, se preparó el nosode Streptococcinum en las diluciones homeopáticas 6CH (no infinitesimal), y las infinitesimales 30CH, 200CH de la escala CH (Centesimal Hahnemanniana) y las diluciones 0/6, 0/30 y 0/60 LM de la escala cincuenta milesimal Hahnemaniana según la Farmacopea Homeopática Alemana (FHA). También, a partir de esta cepa, su activación y su calibración de curva de crecimiento a (λ=0.625nm), se montaron las pruebas de sensibilidad microbiana, según el método de difusión en disco con agar sangre y el método de dilución en caldo nutritivo con tripticasa de soja, cegando el experimento (método doble ciego), aleatorizando el experimento, e incluyendo controles (blanco) para mayor confiabilidad del ensayo. Se encontró que el nosode Streptococcinum en diluciones infinitesimales no presenta actividad antimicrobiana ni en el método de dilución en caldo ni en el método de difusión en disco, pero sí actividad promicrobiana en ambos métodos. Lo anterior se demostró cualitativamente (método de difusión en disco) a simple vista en todas las diluciones homeopáticas probadas, excepto en el control, y por espectrofotometría (cuantitativo), al alcanzarse la fase logarítmica una hora antes de lo esperado con la adición del nosode, al compararse con las curvas de calibración de crecimiento en las potencias 30CH, 200CH, 0/6, 0/30 y 0/60 LM, más no en la dilución 6CH, bajo la cual la curva de crecimiento se ajustó a la calibración. Lo anterior indica que el nosode Streptococcinum, a dosis infinitesimales, se comporta como un factor que acelera el crecimiento in vitro del S. pyogenes en el medio de cultivo, evidenciándose así una acción ponderal de las dosis infinitesimales, probablemente relacionada con la hormesis o con la ley de Arnold Shultz. Se requieren sin embargo nuevas pruebas confirmatorias. Se recomienda realizar estudios adicionales In vitro del efecto del Streptococcinum sobre células inmunológicas, y ensayos clínicos controlados para verificar la plausibilidad del efecto terapéutico del Streptococcinum.

Antimalarial potential of Nosode 30 and 200 against Plasmodium berghei infection in BALB/c mice.

Background & objectives: Homeopathy is considered as an emerging area of alternative medicine which could be established for the global health care. One of the greatest objections to this science lies in its inability to explain the mechanism of action of the micro doses based on scientific experiments and proofs. The present study has been undertaken to screen in vivo antimalarial activity of Malaria Co Nosode 30 and Nosode 200 against Plasmodium berghei infection in BALB/c mice. Methods: Peter’s 4-day test was used to evaluate the in vivo schizontocidal effect of Nosode 30 and Nosode 200. One month follow-up study was done to calculate the mean survival time of mice in each group. Biochemical analysis was carried out to assess the liver and kidney function tests using diagnostic kits. Results: Nosode 30 and 200 exhibited 87.02 and 37.97% chemosuppression on Day 7 and mean survival time (MST) of 18.5 ± 2.16 and 16.5 ± 1.37 days respectively, which were extremely statistically significant when compared to MST of infected control (8.55 ± 0.83 days). The safety of Nosode 30 was also confirmed by the comparable levels of ALP, SGOT, SGPT activities, concentration of bilirubin, urea and creatinine to CQ treated group. Conclusion: Nosode 30 possesses considerable in vivo antiplasmodial activity against P. berghei infection as compared to Nosode 200 as evident from the chemosuppression obtained using Peter’s 4-day test. Further, studies on the drug can be carried out to establish its antimalarial potential in monotherapy or in combination with other homeopathic drug formulations.

In vitro behavior of Mycoplasmagallisepticumlive-type nosode / Comportamento in vitro do bioterápico tipo nosódio vivo mycoplasmagallisepticum / Conducta in vitro de nosodio vivo de mycoplasmagallisepticum

As a step of a doctoral research project, in this study a live-type nosode was prepared from microorganism Mycoplasmagallisepticum strain R (ATCC 93-08/19610) according to Costa model and the rules by Brazilian Homeopathic Pharmacopoeia. Live nosode was tested in vitro to assess safety when used to immunize domestic fowl (Gallus gallus) against infection by this microorganism and to investigate its behavior under laboratory conditions. M. gallisepticum was not shown to grow in fluid (broth) and solid (plate) modified Frey medium with dilutions 11d, 12d, 20d and 30d. Inhibition halos about 2.0 mm were observed around paper disks impregnated with live-type nosode in microorganism-sown Petri dishes, whereas disks impregnated with conventional antibiotic oxytetracycline exhibited 8.0 mm inhibition halos. Protein assessment by Folin-Lowry method showed protein absence in dilutions 12d and 30d and neither microbial DNA traces were found in PCR assay in dilutions 12d, 20d and 30d.

Una etapa de un proyecto de doctorado, en este estudio fue preparado un nosode vivo del microorganismo Mycoplasmagallisepticumcepa R (ATCC 93-08/19610) según el modelo de Costa y las normas de la Farmacopea Homeopática Brasileña. El nosode vivo fue testeado in vitro para determinar su seguridad cuando utilizado para inmunizar aves domésticas (Gallus gallus) contra la infección por este microorganismo e investigar su conducta en condiciones de laboratorio. Fue observado que M. gallisepticum no creció en medio modificado de Frey líquido (caldo) y sólido (placa) con las diluciones 11d, 12d, 20d y 30d. Fueron observados halos de inhibición de aproximadamente 2,0 mm alrededor de discos de papel impregnados con el nosode vivo en placas de Petri sembradas con el microorganismo, mientras fueron observados halos de inhibición de 8,0 mm en los discos impregnados con el antibiótico convencional oxitetraciclina. La medición de proteínas mediante el método de Folin-Lowry evidenció ausencia de proteínas con las diluciones 12d y 30d y ausencia de vestigios de DNA microbiano por PCR con las diluciones 12d, 20d y 30d.

Como parte do experimento de uma tese de doutorado, um bioterápico do tipo nosódio vivo utilizando o microrganismo Mycoplasmagallisepticum estirpe R (ATCC 93-08/19610) foi preparado de acordo com o paradigma desenvolvido por Costa, observando as normas da Farmacopeia Homeopática Brasileira. O nosódio vivo foi testado in vitro com a finalidade de avaliar a segurança de sua utilização para imunizar galinhas domésticas (Gallus gallus) contra a infecção pelo microrganismo M.gallisepticum, e também conhecer seu comportamento sob condições de laboratório. Não houve crescimento de M. gallisepticum no cultivo em meio de Frey modificado líquido (caldo) e sólido (placa) das diluições 11d, 12d, 20d e 30d, enquanto que as diluições 1d e 10d mostraram crescimento do microrganismo. Foram observados halos de inibição de cerca de 2,0 mm em torno de discos de papel impregnados com o nosódio vivo em placas de Petri cultivadas com o microrganismo, enquanto os discos impregnados com o antimicrobiano convencional oxitetraciclina apresentaram halos de inibição de 8,0 mm. A dosagem de proteína pelo método de Folin-Lowry identificou a ausência de proteínas nas diluições 12d e 30d, assim como também não foram encontrados traços de DNA microbiano na prova de PCR para as diluições 12d, 20d e 30d.