Immunofluorescent distribution of SIRT1, SIRT2, SIRT6 protein in the skin of SKH1 mouse after ultraviolet B irradiation for 10 Weeks / Distribución inmunofluorescente de la proteína SIRT1, SIRT2, SIRT6 en la piel del ratón SKH1 después de la irradiación ultravioleta B durante 10 semanas

SUMMARY: The skin, located on the outermost part of the body, is always exposed to external stimuli such as sunlight. The exposure of skin to ultraviolet B (UVB) radiation from sunlight is known to be a major environmental factor in inducing photoaging. After exposure to UVB, an increase in reactive oxygen species can affect the expression and activity of many critical proteins depending on the duration and dose of the UVB radiation. Mammalian sirtuins (SIRTs), which are nicotinamide dinucleotide-dependent protein deacetylases, are well known for playing a role in cellular longevity. However, little is known about SIRT protein alterations in keratinocytes upon UVB irradiation according to SIRT subtypes. Therefore, in this study, the distribution of non-mitochondrial SIRT1, SIRT2, and SIRT6 proteins was investigated by immunofluorescence (IF) staining of the skin of SKH-1 mice (n=12) after UVB irradiation for 10 weeks. After UVB irradiation for 10 weeks, the IF of both SIRT1 and SIRT6 was significantly increased in the UVB-irradiated mice group (UG), but the difference in SIRT2 IF was not statistically significant between the control group (CG) and the UG. The translocation of both SIRT1 and SIRT6 IF from the nucleus to the cytoplasm of keratinocytes was observed in the upper epidermis of the UG, whereas SIRT2 IF was localized in the cytoplasm of keratinocytes in the epidermis in both the CG and the UG. The translocation of SIRT1 and SIRT6 IF from the nucleus to the cytoplasm of keratinocytes may account for the physiologically protective action of keratinocytes against UVB irradiation. However, the exact role of SIRT1 and SIRT6 translocation in keratinocytes, where SIRT1 and SIRT6 shuttle from the nucleus to the cytoplasm, is not well known. Therefore, further studies are needed to understand the molecular mechanisms of SIRT1 and SIRT6 translocation in keratinocytes upon UVB irradiation.

La piel, situada en la parte más externa del cuerpo, está siempre expuesta a estímulos externos como la luz solar. Se sabe que la exposición de la piel a la radiación ultravioleta B (UVB) de la luz solar es un factor ambiental importante en la inducción del fotoenvejecimiento. Después de la exposición a los rayos UVB, un aumento en las especies reactivas de oxígeno puede afectar la expresión y la actividad de muchas proteínas críticas según la duración y la dosis de la radiación UVB. Las sirtuinas de mamíferos (SIRT), que son proteínas desacetilasas dependientes de dinucleótidos de nicotinamida, son bien conocidas por desempeñar un papel en la longevidad celular. Sin embargo, se sabe poco sobre las alteraciones de la proteína SIRT en los queratinocitos tras la irradiación UVB según los subtipos de SIRT. Por lo tanto, en este estudio, se investigó la distribución de las proteínas SIRT1, SIRT2 y SIRT6 no mitocondriales mediante tinción de inmunofluorescencia (IF) de la piel de ratones SKH-1 (n = 12), después de la irradiación con UVB durante 10 semanas. Posterior a la irradiación, el IF de SIRT1 y SIRT6 aumentaron significativamente en el grupo de ratones irradiados con UVB (UG), pero la diferencia en SIRT2 IF no fue estadísticamente significativa entre el grupo control (CG) y el UG. La translocación de SIRT1 y SIRT6 IF desde el núcleo al citoplasma de los queratinocitos se observó en la epidermis superior de la UG, mientras que SIRT2 IF se localizó en el citoplasma de los queratinocitos en la epidermis, tanto en el GC, como en la UG. La translocación de SIRT1 y SIRT6 IF del núcleo al citoplasma de los queratinocitos puede explicar la acción protectora fisiológica de estos contra la radiación UVB. Sin embargo, el papel exacto de la translocación de SIRT1 y SIRT6 en los queratinocitos, donde SIRT1 y SIRT6 se trasladan desde el núcleo al citoplasma, no se conoce bien. Por lo tanto, se necesitan más estudios para comprender los mecanismos moleculares de la translocación SIRT1 y SIRT6 en los queratinocitos tras la irradiación UVB.

Algunas consideraciones sobre la patología ultraestructural de los queratinocitos en leucoplasia bucal del tipo clínico homogéneo

La leucoplasia bucal es una lesión predominantemente blanca de la mucosa bucal que no puede ser caracterizada como ningún otro tipo lesión definida(1). Constituye una lesión potencialmente maligna cuya tasa de transformación varía entre 3 y 18%(2). Clínicamente se distinguen dos tipos de leucoplasia: homogénea y no homogénea. La leucoplasia homogénea se ha relacionado con un menor potencial de transformación. Sin embargo, el estudio ultraestructural de estas lesiones pudiera revelar cambios morfológicos iniciales como marcadores de malignidad. En este estudio se tomaron 5 biopsias de leucoplasia bucal en pacientes atendidos en el Servicio de Clínica Estomatológica de la Facultad de Odontología de la Universidad Central de Venezuela (U.C.V). Las muestras fueron procesadas por técnicas convencionales para microscopía electrónica de transmisión. Los resultados fueron los siguientes: interrupciones y laminaciones de la membrana basal, , disminución en el número de desmosomas y ampliación de los espacios intercelulares. Los queratinocitos mostraron variaciones en número y distribución de tonofilamentos, núcleos alargados con una cantidad variable de heterocromatina, siendo escasa en algunos, en tanto que en otros se apreciaron áreas condensadas de heterecromatina. Los núcleos presentaron más de un nucléolo con un aspecto reticular. En general, el citoplasma del queratinocito exhibió proliferación de organelos. Las alteraciones mencionadas sugieren anormalidades en el plan organizacional de los queratinocitos, indicando un grado de actividad metabólica y proliferativa similar a lo observado en displasias y carcinomas bucales.

Leucoplasia oral é um ferimento predominante branco do oral mucosa que não pode ser caracterizada como nenhum outro tipo ferimento definida(1). Constitui um ferimento potencial malignant da cuja taxaa transformação varia entre 3 e 18%(2). Clìnica dois tipos de leucoplasia são distintos: homogenous e non homogenous. Leucoplasia homogenous foi relacionado a um menor do potencial de transformação. Não obstante, o estudo ultrastructural destes ferimentos podia revelar a inicial mudanças morfologicas como marcadores do malignidade Neste estudo 5 os biopsies foram feitos exame do leucoplasia oral dentro pacientes tomados cuidado no serviço da clínica de Estomatologia do Faculdade de Odontologia da Universidade Central de Venezuela(U.C.V) As amostras foram processadas por técnicas convencionais para eletrônico microscópio da transmissão. Os resultados eram seguintes: interruptions e laminações da membrana basal, diminution no número dos desmosomas e na extensão do espaços intercellular. Os queratinocitos mostraram às variações no número e nadistribuição detonofilamentos, os núcleos estenderam com uma quantidade variável de heterocromatina, estando pouco em algum, visto que em outras as áreas condensadas de heterecromatina appraised. Os núcleos presentes mais do nucléolo com um reticular aspecto. No general, o cytoplasm do queratinocito exibiu o proliferation de organelos. As alterações mencionadas sugerem abnormalitys no organizacional planta dos queratinocitos, indicando um grau de atividade metabolic e de proliferativa similares a observado nos displasias e nos carcinomas orais.

Oral leukoplakia is a predominantly white lesion non characterized as any other established definite lesion. It constitutes a potentially malignant lesion, with a transformation rate that varies between 3 and 18%. Clinically, there are homogeneous and non homogeneous leukoplakia. Homogeneous leukoplakia is related with a minor transformation potential. However, the ultrastructural study of these lesions could reveal initial morphological changes as malignancy markers not detected by histopathological studies. In this study 5 biopsies of oral leukoplakia were taken from patients attending in the Service of Estomatological Clinics, Dental school, Universidad Central de Venezuela. Samples were processed by routine techniques for transmission electron microscopy. Results were as follows: disruptions and lamination of basement membrane, decrease of desmosome member and widening of intercellular spaces. Keratinocytes showed variations in number and distribution of tonofilaments, elongated nuclei with variable amount of heterochromatin, some showing scarce heterochomatin other exhibiting condensed areas of it. Nuclei presented more than one nucleolus with reticular aspect. In general keratinocyte cytoplasm showed proliferation of organelles. Mentioned alterations suggest abnormalities in the organizational plan of ripeness of keratinocytes indicating metabolic and proliferative activities similar to these observed in oral carcinomas.