Mapeando a leishmaniose visceral e tegumentar americana em Birigui-Sp: uma análise epidemiológica retrospectiva e geoespacial / Mapping american visceral and tegumentary leishmaniasis in Birigui-Sp: a retrospective and geospatial epidemiological analysis / Mapeo de la leishmaniasis visceral y tegumentaria americana en Birigui-Sp: un análisis epidemiológico retrospectivo y geoespacial

A leishmaniose é uma doença tropical infecciosa negligenciada com dois espectros clínicos, a Leishmaniose Visceral (LV) e a Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA). O objetivo foi determinar a evolução epidemiológica e a distribuição espacial de LV e LTA em Birigui/SP, entre 2010 a 2020. Foi realizado um estudo retrospectivo e observacional, de LV e LTA registrados pelo Serviço de Vigilância Epidemiológica e os endereços foram utilizados para a análise espacial e distribuição dos casos dentro do município. Identificaram-se 233 casos de LV, com maior número em 2012 (15,45%) e 14 óbitos por LV (letalidade de 6,0%), com predomínio de indivíduos do sexo masculino (60,1%), brancos (71,7%), com idades entre 40 e 59 anos (28,8%), ensino médio completo (8,58%) e alta taxa de cura (65,7%) após tratamento. Verificou- se 25 casos de LTA sendo 2015 o ano com maior número de casos (22,2%) e com predomínio em homens (63%), maiores de 60 anos (44,4%), brancos (92,6%) e com ensino fundamental incompleto (18,5%). A manifestação clínica mais observada foi a forma cutânea (59,3%) com mais de 77% de cura após tratamento. Padrões significativos de agregação espacial foram detectados e áreas de cluster acumulam-se na região oriente do município de Birigui, com maior frequência em bairros mais periféricos. Conclui-se que, apesar de ser observada uma leve diminuição nos casos de LV e LTA, reforça-se a necessidade do monitoramento frequente, principalmente nas regiões com maior número de casos.

Leishmaniasis is a neglected tropical infectious disease with two clinical spectrums, Visceral Leishmaniasis (VL) and American Cutaneous Leishmaniasis (ACL). The objective was to determine the epidemiological evolution and spatial distribution of VL and ATL in Birigui/SP, between 2010 and 2020. spatial analysis and distribution of cases within the municipality. A total of 233 cases of VL were identified, with the highest number in 2012 (15.45%) and 14 deaths from VL (6.0% mortality), with a predominance of males (60.1%), whites (71.7%), aged between 40 and 59 years (28.8%), complete high school (8.58%) and high cure rate (65.7%) after treatment. There were 25 cases of ACL, with 2015 being the year with the highest number of cases (22.2%) and with a predominance of men (63%), over 60 years old (44.4%), white (92.6%) and with incomplete primary education (18.5%). The most observed clinical manifestation was the cutaneous form (59.3%) with more than 77% of cure after treatment. Significant patterns of spatial aggregation were detected, and cluster areas accumulated in the eastern region of the municipality of Birigui, with greater frequency in more peripheral neighborhoods. It is concluded that, despite a slight decrease in cases of VL and ATL, the need for frequent monitoring is reinforced, especially in regions with a higher number of cases.

La leishmaniasis es una enfermedad infecciosa tropical desatendida con dos espectros clínicos, la leishmaniasis visceral (LV) y la leishmaniasis cutánea americana (LCA). El objetivo fue determinar la evolución epidemiológica y distribución espacial de la LV y LCA en Birigui/SP, entre 2010 y 2020. análisis espacial y distribución de los casos dentro del municipio. Fueron identificados 233 casos de LV, con el mayor número en 2012 (15,45%) y 14 muertes por LV (6,0% de mortalidad), con predominio del sexo masculino (60,1%), raza blanca (71,7%), edad entre 40 y 59 años (28,8%), enseñanza media completa (8,58%) y alta tasa de cura (65,7%) después del tratamiento. Hubo 25 casos de LCA, siendo 2015 el año con mayor número de casos (22,2%) y con predominio de hombres (63%), mayores de 60 años (44,4%), blancos (92,6%) y con estudios primarios incompletos (18,5%). La manifestación clínica más observada fue la forma cutánea (59,3%) con más del 77% de curación tras el tratamiento. Se detectaron patrones significativos de agregación espacial, acumulándose áreas de conglomerados en la región este del municipio de Birigui, con mayor frecuencia en barrios más periféricos. Se concluye que, a pesar de una leve disminución de los casos de LV y ATL, se refuerza la necesidad de monitoreo frecuente, especialmente en las regiones con mayor número de casos.

Leishmaniasis tegumentaria y flebótomos en la localidad de Colonia Santa Rosa del norte de Argentina / Tegumentary leishmaniasis and sandflies in Colonia Santa Rosa locality in northern Argentina

Resumen La leishmaniasis tegumentaria (LT) es causada por parásitos del género Leishmania y transmitida por especies de flebótomos, insectos pertenecientes al orden Diptera, familia Psychodidae. El objetivo de este trabajo fue analizar la presencia de casos de LT y su variación temporal entre 1985 y 2019, las formas clínicas, la ubicación de las lesiones en los pacientes y la presencia de flebótomos en la localidad de Colonia Santa Rosa, del norte de Argentina. Los pacientes se diagnosticaron mediante frotis e intradermorreacción de Montenegro. Se colocaron trampas CDC en 14 sitios en el horario de 19 a 7. Se diagnosticaron 120 casos de LT y la prevalencia global fue del 0,75% (^16.000 habitantes). Los pacientes presentaron formas cutáneas simples y múltiples (88,79%) y mucocutáneas (10,83%). Las lesiones cutáneas fueron más frecuentes en extremidades inferiores. Del total de flebótomos, Nyssomyia neivai fue la especie predominante (95%), y, en menor proporción, estuvieron presentes Migonemyia migonei (1,9%), complejo cortelezzii (1,3%) y Evandromyia sallesi (0,09%). La persistente ocurrencia de casos y la presencia de flebótomos en la citada localidad nos sugiere la transmisión endémica en la zona. Esto senala la necesidad de planificar medidas preventivas y de control de la LT en el norte de Argentina.

Abstract Tegumentary leishmaniasis (TL) is caused by parasites of the genus Leishmania and transmitted by the sandfly species, insects belonging to the order Diptera, family Psychodidae. Historically, the most endemic area of TL in Argentina has been the northern region. The aim of this work was to analyze the presence and temporal variation of TL cases reported between 1985 and 2019 in Colonia Santa Rosa locality, northern Argentina. Furthermore, its clinical forms were characterized and sandflies were captured. Patients were diagnosed by smear and the Montenegro skin test. For sampling, CDC light traps were placed at 14 sites from 7pm to 7am. The correlation between vegetation cover and sandfly abundance was also studied. One hundred and twenty TL cases were diagnosed and the overall prevalence was 0.75% (M6 000 inhabitants). Patients presented simple and multiple cutaneous leishmaniasis (88.79%) and the mucocutaneous form (10.83%). Skin lesions were more frequent on the lower extremities (46.73%). Of the total number of sandflies, Nyssomyia neivai (95%) was the predominant species followed by Migonemyia migonei (1.9%), cortelezzii complex (1.3%) and Evandromyia sallesi (0.09%). The persistent occurrence of cases and the presence of sandflies in the locality suggest the existence of endemic transmission in the area. This highlights the need to design prevention and control measures for TL in northern Argentina.

Persistent cutaneous canine leishmaniasis caused by Leishmania (Viannia) braziliensis in an area with predominance of Nyssomyia neivai in the state of São Paulo, Brazil / Leishmaniose cutânea canina persistente causada por Leishmania (Viannia) braziliensis em uma área com predomínio de Nyssomyia neivai no estado de São Paulo, Brasil

Abstract American cutaneous leishmaniasis (ACL) is a neglected zoonotic disease caused mainly by Leishmania (Viannia) braziliensis, which is endemic throughout Brazil. Canine ACL cases were investigated in a rural area of Monte Mor, São Paulo, where a human ACL case had been confirmed. Dogs were evaluated through clinical and laboratory diagnosis including serology, cytological tissue preparations and PCR on skin lesions, lymph node and bone marrow samples. Entomological investigations on sandflies trapped in the surroundings of the study area were performed for 14 months. Nyssomyia neivai was the predominant phlebotomine species, comprising 94.65% of the captured specimens (832 out of 879). This species was the most abundant in all trapping sites, including human homes and dog shelters. Ny. whitmani, Migonemyia migonei, Pintomyia monticola, Evandromyia cortellezzii, Pi. fischeri and Expapilata firmatoi were also captured. Two of the three dogs examined were positive for anti-Leishmania IgG in ELISA using the antigen Fucose mannose ligand and skin samples were positive for L. (V.) braziliensis in PCR, but all the samples collected were negative for L. (L.) infantum. One of the dogs had a confirmed persistent infection for more than one year.

Resumo A leishmaniose tegumentar Americana (LTA) é uma doença zoonótica negligenciada, causada principalmente por Leishmania (Viannia) braziliensis, sendo endêmica em todo o Brasil. Foram investigados casos de LTA canina em uma área rural da cidade de Monte Mor, São Paulo, onde foi confirmado um caso humano de LTA. Os cães foram avaliados por diagnóstico clínico e laboratorial, incluindo sorologia, esfregaços microscópicos e PCR de amostras em lesões de pele, linfonodos e medula óssea. Também foram realizadas investigações entomológicas durante 14 meses, usando-se armadilhas luminosas para flebotomíneos nas proximidades da área de estudo. Nyssomyia neivai foi a espécie de flebotomíneo predominante com 94,65% dos espécimes capturados (832 de 879). Essa espécie foi a mais abundante em todos os locais de captura, incluindo-se abrigos para humanos e cães. Foram também capturadas as espécies Ny. whitmani, Migonemyia migonei, Pintomyia monticola, Evandromyia cortellezzii, Pi. fischeri e Expapilata firmatoi. Dos três cães examinados, dois apresentaram IgG anti-Leishmania positivo no ELISA, usando-se o antígeno "Fucose mannose ligand", PCR da lesão de pele positivo para L. (V.) braziliensis e negativo em todas amostras para L. (L.) infantum. Um dos cães apresentou infecção persistente por mais de um ano.

An overview of the sandfly fauna (Diptera: Psychodidae) followed by the detection of Leishmania DNA and blood meal identification in the state of Acre, Amazonian Brazil

BACKGROUND In Acre state, Brazil, the dissemination of cutaneous leishmaniasis has increased in recent years, with limited knowledge of the potential Leishmania spp. vectors involved. OBJECTIVES Here, data concerning the sandfly fauna of Brasiléia municipality, Leishmania DNA-detection rates and the identification of blood meal sources of insects captured in 2013-2015 are presented. METHODS Parasite detection in female sandflies was performed individually by multiplex polymerase chain reaction (PCR) (Leishmania kDNA/sandfly cacophony-gene), with the identification of Leishmania spp. by hsp70-PCR and sequencing. The identification of blood gut-content from fed females was performed by cyt b-PCR and sequencing. FINDINGS A total of 4,473 sandflies were captured. A subgroup of 864 non-blood-fed females evaluated for the presence of Leishmania DNA showed 2.9% positivity for Leishmania (Viannia) braziliensis and L. (V.) guyanensis. The identification of blood meal sources was performed in 96 blood-fed females, allowing the identification of 13 vertebrate species. In nine/96 fed females, DNA from L. (V.) shawi, L. (V.) guyanensis, L. (V.) braziliensis and Endotrypanum sp. was detected. MAIN CONCLUSIONS In Brumptomyia sp. and Evandromyia termitophila, the first report of Leishmania DNA-detection is provided in Acre; Nyssomyia shawi is implicated as potential vector of L. (V.) braziliensis and L. (V.) guyanensis for the first time in Brazil.

Eco-epidemiological study on sandflies and environmental aspects related to the transmission of leishmaniasis in a municipality of Minas Gerais, Brazil, 2015-2016 / Estudo eco-epidemiológico da fauna flebotomínica e dos aspectos ambientais relacionados à transmissão das leishmanioses em um município de Minas Gerais, Brasil, 2015 - 2016

Diante da escassez de dados sobre a topografia e a sintopia das vísceras abdominopélvicas do tamanduá-bandeira (Myrmecophage tridactyla - Linnaeus, 1758), o presente estudo teve como objetivo elucidar essas características e compará-las com as demais espécies animais, mormente as domésticas. Utilizaram-se três espécimes, dois machos e uma fêmea, provenientes de doação da Polícia Militar Ambiental de Franca ao Laboratório de Anatomia Veterinária da Universidade de Franca, após óbitos por atropelamentos. Os animais foram fixados e mantidos em solução aquosa de formaldeído a 10%, seguidos de dissecação convencional das cavidades abdominopélvicas para posterior inspeção direta e descrição topográfica das vísceras, visando a análises comparativas com outras espécies, cujo posicionamento e cujas particularidades já são bem estabelecidos na literatura. Observou-se que a maioria das vísceras dessas cavidades possuem localização e sintopia similares aos animais domésticos, exceto os rins e os testículos. Diante da metodologia estabelecida e dos resultados obtidos, admite-se que mais espécimes de tamanduás-bandeiras, de ambos os gêneros, devam ser avaliados e registrados cientificamente, visando à confirmação dos dados da atual pesquisa e à preconização anatômica da cavidade abdominopélvica, visto que variações anatômicas individuais são passíveis entre animais da mesma espécie.(AU)

Objetivou-se avaliar a fauna vetorial e os aspectos ambientais e climáticos relacionados à transmissão das leishmanioses. Foi realizado um estudo eco-epidemiológico prospectivo de coleta sistemática de flebotomíneos e inquérito censitário sorológico canino em áreas de um município do Brasil. Para determinar a taxa de prevalência de LVC, foram examinadas amostras de sangue de 1752 cães. Na avaliação entomológica, foram instaladas 24 armadilhas luminosas em 12 residências distribuídas, instaladas no ambiente de peridomicílio e intradomicílio durante 12 meses. Para análise dos aspectos climáticos, utilizou-se a correlação simples de Spearman e para análise espacial foram utilizadas a Lógica Fuzzy e a Função K. A taxa de prevalência em cães foi de 4,1% e 7,1%. No estudo entomológico, foram capturados 431 flebotomíneos. A maior parte (74%) dos espécimes foi capturada no peridomicílio. Em relação à infecção natural, 5,6 % das amostras analisadas por biologia molecular apresentaram positividade à infecção por Leishmania spp.. Em 100% das amostras positivas, encontrou-se infecção por Leishmania infantum. Na análise espacial uma Área apresentou maior concentração de pontos de sobreposição de alta densidade de Lutzomyia longipalpis e cães sororreagentes, indicando maior risco na ocorrência concomitante dos dois eventos. Os resultados mostram que a interface parasito-reservatório-vetor está ativa nas áreas estudadas.(AU)

Epidemiological aspects of the first human autochthonous visceral leishmaniosis cases in Porto Alegre, Brazil

ABSTRACT Human visceral leishmaniasis is a growing anthropozoonosis in Brazil, and particularly in the southern region of the country. It is an infectious disease transmitted to humans, dogs and other animals in urban and rural areas of the Americas, mainly due to the bite of Lutzomya longipalpis infected with Leishmania infantum. This article aims to portray the current epidemiological situation of the human visceral leishmaniasis arrival in Porto Alegre city, located in the southern region of Brazil. It is a descriptive study, a case series and a critical review. Six human cases with human visceral leishmaniasis were notified by the date of conclusion of the study, all human visceral leishmaniasis cases were diagnosed at late stage, leading to four deaths.

A new species of phlebotomine sandfly, Pintomyia (Pifanomyia) duckei (Diptera: Psychodidae) from Manaus, State of Amazonas, Brazil / Uma nova espécie de flebotomíneo, Pintomyia (Pifanomyia) duckei (Diptera: Psychodidae) de Manaus, Estado do Amazonas, Brasil

Pintomyia (Pifanomyia) duckei Oliveira, Alencar and Freitas sp. n. from Adolpho Ducke Reserve, Manaus, Amazonas state, Brazil, is described and illustrated based on three male specimens, the holotype and two paratypes. The paratypes have abnormalities in the external genitalia, one with asymmetric bilateral anomaly (different anomalies in each of certain paired structures) and the other with unilateral anomaly (anomaly in one of the paired structures). The new species probably belongs to the Serrana Series, integrating the list of the species whose males possess gonostylus with two stout spines (one apical and other subapical), as well as a small and very thin spine on the inner surface of the basal half.

Pintomyia (Pifanomyia) duckei Oliveira, Alencar e Freitas sp. n. da Reserva Florestal Adolpho Ducke, Manaus, Estado do Amazona, Brasil, é descrita e ilustrada com base em três espécimes machos, o holótipo e dois parátipos. Os parátipos possuem anomalias na genitália externa, sendo um com anomalia bilateral assimétrica (anomalias diferentes em cada uma das estruturas pareadas) e outro com anomalia unilateral (anomalia em uma das estruturas pareadas). A nova espécie provavelmente pertence à Série Serrana, integrando a lista das espécies, cujos machos possuem gonóstilo com dois espinhos robustos (um apical e outro subapical), bem como um espinho delgado e muito curto na superfície interna da metade basal.

Genetic variability of populations of Nyssomyia neivai in the Northern State of Paraná, Brazil

ABSTRACT The genetic study of sandfly populations needs to be further explored given the importance of these insects for public health. Were sequenced the NDH4 mitochondrial gene from populations of Nyssomyia neivai from Doutor Camargo, Lobato, Japira, and Porto Rico, municipalities in the State of Paraná, Brazil, to understand the genetic structure and gene flow. Eighty specimens of Ny. Neivai were sequenced, 20 from each municipality, and 269 base pairs were obtained. A total of 27 haplotypes and 28 polymorphic sites were found, along with a haplotypic diversity of 0.80696 and a nucleotide diversity of 0.00567. Haplotype H5, with 33 specimens, was the most common among the four populations. Only haplotypes H5 and H7 were present in all four populations. The population from Doutor Camargo showed the highest genetic diversity, and only this population shared haplotypes with those from the other municipalities. The highest number of haplotypes was sheared with Lobato which also had the highest number of unique haplotypes. This probably occurred because of constant anthropic changes that happened in the environment during the first half of the twentieth century, mainly after 1998. There was no significant correlation between genetic and geographical distances regarding these populations. However, the highest genetic and geographical distances, and the lowest gene flow were observed between Japira and Porto Rico. Geographical distance is a possible barrier between these municipalities through the blocking of haplotype sharing.

A probable hybrid female Psychodopygus sp. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) specimen from Amazonas State, Brazil / Un híbrido probable en una hembra Psychodopygus sp. (Diptera, Psychodidae, Phlebotominae) en el estado de Amazonas, Brasil

Phlebotomine sand flies are vectors of several important etiological agents. Sand fly cibaria and genitalia exhibit morphological characters that are essential for species identification. A morphologically anomalous female sand fly of the subgenus Psychodopygus Mangabeira was found in a faunistic survey of a forested area near Manaus, Amazonas State, Brazil. This specimen possesses two pairs of spermathecae and a cibarium with supernumerary rows of teeth. Most morphological anomalies in sand flies occur in the number and arrangement of spines in structures associated with the male genitalia. In females, the number of cibarial teeth is the most common form of anomaly. The specimen described here constitutes a rare anomalous record.

Los flebótomos son importantes vectores de varios agentes etiológicos. En flebótomos, los caracteres morfológicos del cibario y la genitália, son esenciales para la correcta identificación de las especies. Una hembra morfológicamente anómala del subgénero Psychodopygus Mangabeira, fue encontrada en un levantamiento faunístico en un área de bosque cerca de Manaus, estado de Amazonas, Brasil. Este espécime tiene dos pares de espermatecas y un cibario como hileras de dientes supranumerários. La mayoria de las anomalías morfológicas en los flebótomos ocurre en el número y disposición de las espinas en las estruturas de la genitália masculina. En las hembras, el número de dientes del cibario es la forma mas común de anomalía. El espécimen aqui descrito constituye un raro registro de anomalía.

Phlebotomine sandfly (Diptera: Psychodidae) diversity and their Leishmania DNA in a hot spot of American Cutaneous Leishmaniasis human cases along the Brazilian border with Peru and Bolivia

In this study, we identified the phlebotomine sandfly vectors involved in the transmission of American Cutaneous Leishmaniasis (ACL) in Assis Brasil, Acre, Brazil, which is located on the Brazil-Peru-Bolivia frontier. The genotyping of Leishmania in phlebotomines was performed using polymerase chain reaction (PCR) and PCR-restriction fragment length polymorphism. A total of 6,850 sandflies comprising 67 species were captured by using CDC light traps in rural areas of the municipality. Three sandfly species were found in the state of Acre for the first time: Lutzomyia georgii, Lu. complexa and Lu. evangelistai. The predominant species was Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi and Lu. davisi (total 59.27%). 32 of 368 pools were positive for the presence of Leishmania DNA (16 pools corresponding to Lu. davisi, and 16 corresponding to Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi), with a minimal infection prevalence of 1.85% in Lu. davisi and 2.05% in Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi. The Leishmania species found showed maximum identity with L. (Viannia) guyanensis and L. (V.) braziliensis in both phlebotomine species. Based on these results and similar scenarios previously described along the Brazil/Peru/Bolivia tri-border, the studied area must take into consideration the possibility of Lu. davisi and Lu. auraensis/Lu. ruifreitasi as probable vectors of ACL in this municipality.

Changing clinical scenario in Chandipura virus infection.

Chandipura virus (CHPV) (Vesiculovirus: Rhabdoviridae) garnered global attention as an emerging neurotropic pathogen inflicting high mortality in children within 24 h of commencement of symptoms. The 2003-2004 outbreaks in Central India witnessed case fatality rates ranging from 56-75 per cent in Andhra Pradesh and Gujarat with typical encephalitic symptoms. Due to the acute sickness and rapid deterioration, the precise mechanism of action of the virus is still unknown. Recent studies have shown increased expression of CHPV phosphoprotein upto 6 h post infection (PI) demonstrating CHPV replication in neuronal cells and the rapid destruction of the cells by apoptosis shed light on the probable mechanism of rapid death in children. Phlebotomine sandflies are implicated as vectors due to their predominance in endemic areas, repeated virus isolations and their ability to transmit the virus by transovarial and venereal routes. Significant contributions have been made in the development of diagnostics and prophylactics, vaccines and antivirals. Two candidate vaccines, viz. a recombinant vaccine and a killed vaccine and siRNAs targeting P and M proteins have been developed and are awaiting clinical trials. Rhabdomyosarcoma and Phlebotomus papatasi cell lines as well as embryonated chicken eggs have been found useful in virus isolation and propagation. Despite these advancements, CHPV has been a major concern in Central India and warrants immediate attention from virologists, neurologists, paediatricians and the government for containing the virus.

Sandfly fauna (Diptera: Psychodidae) from caves in the state of Rondônia, Brazil / Fauna de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae) em cavernas do estado de Rondônia, Brasil

Abstract This study had the aim of ascertaining the sandfly fauna and possible presence ofLeishmania in these insects, collected in caves in the state of Rondônia, Brazil. Collections were conducted in eight caves located in two different areas of this state. Leishmania in the sandflies collected was detected using the polymerase chain reaction (PCR). This was the first study on sandflies from caves in Rondônia and, among the total of 1,236 individuals collected, 24 species and 10 genera were identified. The speciesEvandromyia georgii was collected for the first time in Rondônia and the most abundant species were Trichophoromyia ubiquitalis with 448 individuals (36.2%), followed by T. octavioi with 283 (22.9%) and E. georgii with 179 (14.5%). For the PCR, 17 pools were analyzed and five pools were positive (forT. auraensis in three pools and for Nyssomyia shawi and N. antunesi in one pool each). The kDNA region was amplified and the presence of Leishmania DNA was confirmed. The sandfly fauna in these caves can be considered diverse in comparison with similar studies in other regions. It may be that some species use caves as a temporary shelter and breeding site, while other species live exclusively in this environment. The detection of LeishmaniaDNA indicates that this pathogen is circulating in cave environments and that further studies are needed in order to ascertain the risks of infection by leishmaniasis in these locations with high touristic potential.

Resumo O objetivo deste estudo foi conhecer a fauna de flebotomíneos, e possível presença de Leishmania nestes insetos, coletados em cavernas do Estado de Rondônia. As coletas foram realizadas em oito cavernas localizadas em duas áreas diferentes do Estado. A detecção de Leishmania nos flebotomíneos foi realizada por reação em cadeia da polimerase (PCR). Este foi o primeiro trabalho com flebotomíneos em cavernas de Rondônia e um total de 1,236 indivíduos foram coletados e identificados em 24 espécies e 10 gêneros.Evandromyia georgii foi coletada pela primeira vez em Rondônia, e as espécies mais abundantes foram Trichophoromyia ubiquitalis com 448 indivíduos (36.2%) seguida por T. octavioi com 283 (22.9%) e E. georgii com 179 (14.5%). No estudo de PCR, 17 pools foram analisados, sendo cinco positivos (T. auraensis - 3, Nyssomyia shawi eN. antunesi - 1 cada). A região do kDNA foi amplificada confirmando a presença de DNA de Leishmania. A fauna de flebotomíneos nestas cavernas foi considerada diversa quando comparada com estudos semelhantes de outras regiões. É possível que algumas espécies utilizem cavernas como abrigo temporário e local de procriação e outras sejam exclusivas deste ambiente. A detecção de DNA de Leishmania indica que este patógeno está circulando no ambiente cavernícola, sendo necessários mais estudos para conhecer o risco de transmissão de leishmanioses nestes locais com alto potencial turístico.

Papel da saliva de flebotomos como marcador de exposição e seu efeito na proteção contra Leishmania braziliensis / Role of saliva from sandflies as an exposure marker and its effect on protection against Leishmania braziliensis

A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

INTRODUÇÃO. A Leishmaniose Tegumentar (LT) é uma importante patologia causada pelo protozoário Leishmania braziliensis, o principal agente etiológico nas Américas. Esse parasita é transmitido aos hospedeiros através durante a alimentação sanguínea do vetor. Comumente encontrados em área endêmica de LT, os flebótomos Lutzomyia intermedia e Lutzomyia whitmani, foram incriminados como vetores da L. braziliensis. Apesar dos amplos estudos acerca da saliva dos vetores e do papel dos flebótomos na transmissão, muito pouco se sabe sobre o envolvimento de L. whitmani na LT. OBJETIVO. Este trabalho visou avaliar o papel de L. whitmani em etapas críticas da transmissão da L. braziliensis, como a avaliação do vetor na área endêmica, a exposição de animais no peridomicílio humano ao flebótomo e o papel da saliva do vetor no estabelecimento da L. braziliensis em infecção experimental murina. MATERIAIS E MÉTODOS. Para a obtenção dos dados, foram realizados testes sorológicos como ELISA e Western blot no monitoramento das galinhas da área endêmica e nos camundongos mantidos em laboratório. Também foram realizadas coletas e identificação dos flebótomos da área endêmica e ensaios de estimulação celular para análise da resposta celular dos camundongos. RESULTADOS. Os resultados mostraram que galinhas no peridomicílio humano produziram anticorpos anti-saliva de L. whitmani, apresentando reconhecimento específico à saliva desta espécie. Também foi observado que a imunização de camundongos com saliva de L. whitmani é capaz de induzir proteção contra a infecção por L. braziliensis em camundongos imunizados. CONCLUSÃO. Estudos envolvendo a participação de importantes vetores em área endêmica são fundamentais para o entendimento da dinâmica da cadeia epidemiológica e futuros estudos envolvendo o desenvolvimento de vacinas eficazes contra a doença.

Insecticidal effect of plant extracts on Phlebotomus argentipes (Diptera: Psychodidae) in Bihar, India.

Background & objectives: Phlebotomus argentipes (Diptera: Psychodidae), the established vector for kala-azar is presently being controlled by indoor residual spray of DDT in kala-azar endemic areas in India. Search for non-hazardous and non-toxic biodegradable active molecules from botanicals may provide cost-effective and eco-friendly alternatives to synthetic insecticides. The present study was aimed at evaluating various plant extracts from endemic and non-endemic areas of Bihar for their insecticidal activity against sandfly to identify the most effective plant extract. Methods: Bio-assay test was conducted with larvae and adult of P. argentipes with different plant extracts collected in distilled water, hexane, ethyl acetate, acetone and methanol. Thin layer chromatography (TLC), column chromatography and high performance liquid chromatography (HPLC) were conducted for detection of active molecules. Results: Adults and larvae of sandflies exposed to the aqueous extract of Nicotiana tabacum resulted in 100 per cent mortality. The hexane extract of Clerodendrum infortunatum was found to kill 77 per cent adults but was ineffective against larvae. Bio-assay test of the ninth fraction (hexane extract-methanol phase) separated by column chromatography was found to be 63 per cent effective. The purple spot on the TLC of this fraction indicated the presence of a diterpenoid. HPLC of this fraction detected nine compounds with two peaks covering 20.44 and 56.52 per cent areas with retention time of 2.439 and 5.182 min, respectively supporting the TLC results. Interpretation & conclusions: The column separated 9th fraction of C. infortunatum extract was found to be effective in killing 63 per cent of adult P. argentipes. Compounds of this fraction need to be evaluated further for identification and characterization of the active molecule by conducting individual bio-assay tests followed by further fractionation and HPLC. Once the structure of the active molecule is identified and validated, it may be synthesized and formulated as a product.

REGISTROS NUEVOS DE ESPECIES DE Lutzomyia (DIPTERA: PSYCHODIDAE) EN EL DEPARTAMENTO DE CESAR, COLOMBIA / New Records of Species of Lutzomyia (Diptera: Psychodidae) From the Department of Cesar, Colombia

El estudio de los insectos asociados a la epidemiología de la leishmaniasis, en la costa Caribe colombiana, se ha concentrado en los departamentos de Sucre y Córdoba, por consiguiente existe un escaso conocimiento de la fauna de flebotomíneos del resto de la región. En la presente nota se presentan cuatro nuevos registros de Lutzomyia spp., para el departamento de Cesar. Los insectos fueron colectados con dos trampas de luz tipo CDC, equipadas con LED de color azul, en el Balneario Hurtado de la ciudad de Valledupar, Cesar. Se recolectaron en total 50 flebotomíneos, los cuales estuvieron representados por las especies Lutzomyia cayennensis cayennensis (38 %), L. evansi (28 %), L. trinidadensis (14 %), L. venezuelensis (10 %), L. micropyga (6 %) y L. rangeliana (2 %). Como primeros registros para el departamento sobresalen L. evansi, L. venezuelensis, L. micropyga y L. rangeliana, con lo que se eleva a ocho el número de especies reportadas hasta la fecha en el Cesar. Entre los nuevos registros se destaca el hallazgo de L. evansi, reconocido vector de Leishmania spp. en la costa Caribe de Colombia.

Studies of the insects associated with the epidemiological cycle of leishmaniasis on the Caribbean coast of Colombia have been focused on the departments of Sucre and Córdoba. The phlebotomine sand fly fauna of the rest of the Caribbean region remains little known. In the present study four species of the genus Lutzomyia are reported from the department of Cesar for the first time. Sand flies were sampled using two CDC light traps with blue color LEDs at Balneario Hurtado, a tourist area in the city of Valledupar. A total of 50 phlebotomine sand flies were collected, of which the species Lutzomyia cayennensis cayennensis (38 % of the sample) and L. trinidadensis (14 %) were already known from the departament. Specimens of L. evansi (28 %), L. venezuelensis (10 %), L. micropyga (6 %) and L. rangeliana (2 %) represent the first records of these species for Cesar, raising the number of known occurrences from the department to eight species. Noteworthy among the new records is the sandfly L. evansi, recognized vector de Leishmania spp. in the Colombian Caribbean coast.

Identification of sandflies (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) blood meals in an endemic Leishmaniasis area in Brazil / Identificação do repasto sanguíneo de flebotomíneos (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) provenientes de área endêmica de Leishmaniose no Brasil

SUMMARYThe aim of this study was to identify blood meals of female sandflies captured in the municipality of Governador Valadares, an endemic area of visceral and cutaneous leishmaniasis, in the State of Minas Gerais, Brazil. From May 2011 to January 2012, captures were performed using HP light traps in four districts. There were 2,614 specimens (2,090 males and 524 females) captured; 97 engorged females were identified belonging to the species Lutzomyia longipalpis(82.1%) and Lutzomyia cortelezzii(17.9%). Considering simple and mixed feeding, the enzyme-linked immunosorbent assay revealed a predominance of chicken blood (43.6%) in Lutzomyia longipalpis, showing the important role that chickens exert around the residential areas of Governador Valadares. This finding increases the chances of sandflies contact with other vertebrates and consequently the risk of leishmaniasis transmission.

RESUMOO objetivo deste estudo foi identificar o repasto sanguíneo de fêmeas de flebotomíneos capturadas no município de Governador Valadares, área endêmica de leishmaniose visceral e tegumentar no Estado de Minas Gerais, Brasil. Entre maio de 2011 e janeiro 2012 foram realizadas capturas com armadilhas luminosas HP em quatro bairros. Foram capturados 2.614 exemplares (2.090 machos e 524 fêmeas). Noventa e sete fêmeas ingurgitadas foram identificadas como pertencentes às espécies Lutzomyia longipalpis(82,1%) e Lutzomyia cortelezzii(17,9%). Considerando a alimentação simples e a mista, o ensaio imunoenzimático revelou em Lutzomyia longipalpisuma predominância de sangue de galinhas (43,6%), mostrando o importante papel que galinhas podem exercer no peridomicílio, aumentando a chance de contato dos flebotomíneos com outros vertebrados e, consequentemente, o risco de transmissão da leishmaniose.

Use and trends of molecular markers in sandflies (Diptera: Psychodidae) / Usos y tendencias de marcadores moleculares en flebotomíneos (Diptera: Psychodidae)

The subfamily Phlebotominae is principally composed of the Lutzomyia and Phlebotomus genera: the main vectors of several protozoan, bacterial and viral pathogens. Since the 1990’s molecular markers have enabled us to effectively address many issues concerning this taxon by, for example, solving systematic conflicts, increasing our understanding of speciation and host-parasite co-evolution, and determining the genetic structure of populations. In this paper we review the research undertaken using molecular markers in this taxonomic group. We hope that this will make it easier for scientists to identify markers and data analyses appropriate to their particular research interests. The principal trends we found are a move towards the use of mitochondrial DNA as molecular markers, DNA sequencing as the characterization method of choice, and phylogenetic analysis for analyzing the data. Most of the studies reviewed center on Lutzomyia longipalpis, the main vector for visceral leishmaniasis in the American tropics and Phlebotomus papatasi, the main vector for cutaneous leishmaniasis in Europe, Asia and Africa. Taxonomic problems and the description of genetic structure are the issues most addressed by researchers, followed by resolving systematic conflicts. Future research using molecular markers in the study of sandflies should be aimed towards: a) the development of genetic barcoding as a complementary tool for morphological identification and b) genome sequencing to increase our understanding of host-parasite interactions.

La subfamilia Phlebotominae está compuesta principalmente por los géneros Lutzomyia y Phlebotomus, vectores principales de patógenos virales, bacterianos y protozoarios. Desde los años 90 marcadores moleculares han ayudado a abordar problemas dentro del taxón, como por ejemplo: determinar la estructura genética, resolver conflictos sistemáticos, especiación, co-evolución de parasito y vector. Esta revisión pretende crear un compendio de la investigación realizada con marcadores moleculares en este grupo taxonómico, para así facilitar el trabajo de investigadores que pretenda identificar marcadores y el análisis de datos apropiados para responder sus preguntas. La tendencia principal encontrada fue el uso de ADN mitocondrial como marcador molecular, la secuenciación de ADN como técnica de caracterización y el análisis filogenético como método de análisis predilecto. La mayoría de los estudios revisados se centran en la especie Lutzomyia longipalpis, vector principal de leishmaniosis visceral en las regiones tropicales de América, y Phlebotomus papatasi vector principal de leishmaniosis cutánea en Europa, Asia y América. Los problemas taxonómicos y las descripciones de estructura genética fueron los problemas más abordados por los investigadores, seguidos por la resolución de conflictos sistemáticos. La investigación a futuro empleando marcadores moleculares en flebotomíneos deben apuntar hacia: el desarrollo de barcoding genético como técnica complementaria a la identificación morfológica y la secuenciación de genomas para así avanzar en el área de relaciones parasito-vector.

Phlebotomine fanna (diptera: psychodidae) in anarea of fishing tourism in centtral-western Brazil / Fauna flebotomínea (Diptera: Psychodidae) em área de turismo pesqueiro no Centro-Oeste do Brasil

The aim of this study was to identify behavioral aspects of the sandfly fauna of a fishing tourism area in the municipality of Bonito (MS). Monthly captures were undertaken from December 2009 to November 2010, using automatic CDC type light traps, from 18h00 to 06h00, in a forested area, a savannah area, peridomiciles and animal shelters near peridomiciliary areas. Nyssomyia whitmani was the most frequent out of a total of 6,699 specimens collected, belonging to 16 species, followed by Psathyromyia bigeniculata and Lutzomyia longipalpis, found in all the environments investigated, though in their greatest numbers in the animal shelters. Ny. whitmani exhibited its highest frequencies during the dry months, coincident with the fishing season, when the risk of transmission of cutaneous leishmaniasis for tourists and inhabitants increases. Noteworthy was the finding of two species naturally infected by flagellates: Ny. whitmani and Pa. bigeniculata. The local population and visiting tourists should be warned of the threat posed by leishmaniasis and the health authorities alerted to the need for adopting environmental sanitary measures, especially regarding such animal shelters as they seem to provide favorable conditions to the proliferation, maintenance and breeding opportunities of phlebotomines.

O objetivo deste estudo foi identificar aspectos do comportamento da fauna flebotomínea de área de turismo pesqueiro localizada no município de Bonito (MS). Foram realizadas capturas mensais no período de dezembro de 2009 a novembro de 2010, utilizando armadilhas luminosas automáticas do tipo CDC das 18:00h às 6:00h, em matas, área de cerrado, peridomicílios e abrigos de animais próximos a áreas peridomiciliares. De um total de 6.699 espécimes coletados, pertencentes a 16 espécies, Nyssomyia whitmani foi a mais frequente, seguida de Psathyromyia bigeniculata e Lutzomyia longipalpis, encontradas em todos os tipos de ambientes, porém com maior expressão em abrigos de animais. Ny. whitmani apresentou frequências mais elevadas nos meses mais secos, coincidentes com a estação da pesca, o que eleva o risco de transmissão da leishmaniose tegumentar a turistas e moradores da área. Importante ressaltar o encontro de duas espécies naturalmente infectadas por flagelados: Ny. whitmani e Pa. bigeniculata. A população local e turistas devem ser advertidos da ameaça que representam as leishmanioses e as autoridades de saúde alertadas para adoção de medidas de saneamento ambiental, principalmente com relação aos abrigos de animais, que parecem fornecer condições favoráveis para a proliferação, manutenção e reprodução de flebotomíneos.

Sandfly (Diptera: Psychodidae: Phlebotominae) species diversity in an urban area of the municipality of Tapachula, Chiapas, Mexico

Monitoring phlebotomine sandflies in urban areas is key for epidemiological studies in susceptible populations. This paper describes sandfly fauna that were present in an urban area of the municipality of Tapachula, Chiapas, Mexico, and were captured with Shannon and CDC light traps. During February and March of 2014, 1,442 sandflies were captured, specifically Lutzomyia cruciata (Coquillet) (98.8%), Lutzomyia cayennensis cayennensis (Floch and Abonnenc) (0.8%), Lutzomyia chiapanensis (Dampf) (0.3%) and Lutzomyia atulapai (De León) (0.1%). Lu. cruciata was the most abundant and the most frequently trapped species. This is the first record of its remarkable ability to adapt to urban green areas. The three other species trapped represent new records of geographic distribution for the study region. These results indicate the need to establish measures for reducing both human contact with this vector and the risk of possible sites of infection.

Effect of mouse antisera targeting the Phlebotomus papatasi midgut chitinase PpChit1 on sandfly physiology and fitness

In sandflies, the absence of the peritrophic matrix (PM) affects the rate of blood digestion. Also, the kinetics of PM secretion varies according to species. We previously characterised PpChit1, a midgut-specific chitinase secreted in Phlebotomus papatasi (PPIS) that is involved in the maturation of the PM and showed that antibodies against PpChit1 reduce the chitinolytic activity in the midgut of several sandfly species. Here, sandflies were fed on red blood cells reconstituted with naïve or anti-PpChit1 sera and assessed for fitness parameters that included blood digestion, oviposition onset, number of eggs laid, egg bouts, average number of eggs per bout and survival. In PPIS, anti-PpChit1 led to a one-day delay in the onset of egg laying, with flies surviving three days longer compared to the control group. Anti-PpChit1 also had a negative effect on overall ability of flies to lay eggs, as several gravid females from all three species were unable to lay any eggs despite having lived longer than control flies. Whereas the longer survival might be associated with improved haeme scavenging ability by the PM, the inability of females to lay eggs is possibly linked to changes in PM permeability affecting nutrient absorption.