Venenos de serpentes do gênero Bothrops: impacto da glicosilação na complexidade dos proteomas e função de toxinas / Bothrops snake venoms: impact of glycosylation on the complexity of proteomes and toxins function

A variabilidade estrutural é uma característica das proteínas de venenos de serpentes, e a glicosilação é uma das principais modificações pós-traducionais que contribui para a diversificação de seus proteomas. Recentes estudos de nosso grupo demonstraram que venenos do gênero Bothrops são marcadamente definidos pelo seu conteúdo de glicoproteínas, e que a maioria das estruturas de N-glicanos dos tipos híbrido e complexo identificados em oito venenos deste gênero contêm unidades de ácido siálico. Em paralelo, em glicoproteínas do veneno de B. cotiara foi identificada a presença de uma estrutura de N-acetilglicosamina bissecada. Assim, com o objetivo de investigar a variação do conteúdo de glicoproteínas, assim como os mecanismos envolvidos na geração dos diferentes venenos de Bothrops, neste estudo foram analisados comparativamente os glicoproteomas de nove venenos do gênero Bothrops (B. atrox, B. cotiara, B. erythromelas, B. fonsecai, B. insularis, B. jararaca, B. jararacussu, B. moojeni e B. neuwiedi). As abordagens glicoproteômicas envolveram cromatografia de afinidade e ensaio de pull-down utilizando, respectivamente, as lectinas SNA (aglutinina de Sambucus nigra) e MAL I (lectina de Maackia amurensis), que mostram afinidade por unidades de ácido siálico nas posições, respectivamente, α2,6 e α2,3; e cromatografia de afinidade com a lectina PHA-E (eritroaglutinina de Phaseolus vulgaris), que reconhece N-acetilglicosamina bissecada. Ainda, eletroforese de proteínas, blot de lectina, e identificação de proteínas por espectrometria de massas foram empregadas para caracterizar os glicoproteomas. As lectinas geraram frações dos venenos enriquecidas de diferentes componentes, onde as principais classes de glicoproteínas identificadas foram metaloprotease, serinoprotease, e L-amino ácido oxidase, além de outras enzimas pouco abundantes nos venenos. Os diferentes conteúdos de proteínas reconhecidas por essas lectinas, com especificidades distintas, ressaltaram novos aspectos da variabilidade dos subproteomas de glicoproteínas desses venenos, dependendo da espécie. Ainda, considerando que metaloproteases e serinoproteases são componentes abundantes nesses venenos e fundamentais no quadro de envenenamento botrópico, e que estas enzimas contêm diversos sítios de glicosilação, o papel das unidades de ácido siálico na atividade proteolítica das mesmas foi avaliado. Assim, a remoção enzimática de ácido siálico (i) alterou o padrão de gelatinólise em zimografia da maioria dos venenos, (ii) diminuiu a atividade proteolítica de alguns venenos sobre o fibrinogênio e a atividade coagulante do plasma humano de todos os venenos, e (iii) alterou o perfil de hidrólise de proteínas plasmáticas pelo veneno de B. jararaca, indicando que este carboidrato pode desempenhar um papel na interação das proteases com seus substratos proteicos. Em contraste, o perfil da atividade amidolítica dos venenos não se alterou após a remoção de ácido siálico e incubação com o substrato Bz-Arg-pNA, indicando que ácido siálico não é essencial em N-glicanos de serinoproteases atuando sobre substratos não proteicos. Em conjunto, esses resultados expandem o conhecimento sobre a variabilidade de proteomas de venenos do gênero Bothrops e apontam a importância das cadeias de carboidratos contendo ácido siálico nas atividades enzimáticas das proteases desses venenos

Structural variability is a feature of snake venom proteins, and glycosylation is one of the main post-translational modifications that contributes to the diversification of venom proteomes. Recent studies by our group have shown that Bothrops venoms are markedly defined by their glycoprotein content, and that most hybrid and complex N-glycan structures identified in eight venoms of this genus contain sialic acid units. In parallel, the presence of a bisected N-acetylglucosamine structure was identified in B. cotiara venom glycoproteins. Thus, with the aim of investigating the variation in the content of glycoproteins, as well as the mechanisms involved in the generation of different Bothrops venoms, in this study the glycoproteomes of nine Bothrops venoms (B. atrox, B. cotiara, B. erythromelas, B. fonsecai, B. insularis, B. jararaca, B. jararacussu, B. moojeni e B. neuwiedi) were comparatively analyzed. The glycoproteomic approaches involved affinity chromatography and pulldown using, respectively, the lectins SNA (Sambucus nigra agglutinin) and MAL I (Maackia amurensis lectin), which show affinity for sialic acid units at positions, respectively, α2,6 and α2,3, and affinity chromatography with PHA-E (Phaseolus vulgaris erythroagglutinin), which recognizes bisected N-acetylglucosamine. In addition, protein electrophoresis, lectin blot, and protein identification by mass spectrometry were employed for glycoproteome characterization. The lectins generated venom fractions enriched with different components, where the main classes of glycoproteins identified were metalloprotease, serine protease, and L-amino acid oxidase, in addition to other low abundant enzymes. The different contents of proteins recognized by these lectins of distinct specificities highlighted new aspects of the variability of the glycoprotein subproteomes of these venoms, depending on the species. Furthermore, considering that metalloproteases and serine proteases are abundant components of these venoms and essential in Bothrops envenomation, and that these enzymes contain several glycosylation sites, the role of sialic acid units in their proteolytic activities was evaluated. Thus, enzymatic removal of sialic acid (i) altered the pattern of gelatinolysis in zymography of most venoms, (ii) decreased the proteolytic activity of some venoms on fibrinogen and the clotting activity of human plasma of all venoms, and (iii) altered the hydrolysis profile of plasma proteins by B. jararaca venom, indicating that this carbohydrate may play a role in the interaction of proteases with their protein substrates. In contrast, the profile of amidolytic activity of the venoms did not change after removal of sialic acid and incubation with the substrate Bz-Arg-pNA, indicating that sialic acid is not essential in N-glycans of serine proteases acting on small substrates. Together, these results expand the knowledge about the variability of proteomes of Bothrops venoms and point to the importance of carbohydrate chains containing sialic acid in the enzymatic activities of venom proteases

Case report of a coral snake bite (Micrurus ibiboboca) in the state of Pernambuco, northeast Brazil / Relato de caso de picada de cobra coral (Micrurus ibiboboca) no estado de Pernambuco, nordeste do Brasil / Informe de caso de mordedura de serpiente coral (Micrurus ibiboboca) en el estado de Pernambuco, noreste de Brasil

The Elapidae family comprises 35 snake species in Brazil, with Micrurus ibiboboca being widely distributed in the northeast of the country. Despite the high number of Micrurus species in Brazil, there are few cases of human envenomation in literature. This study describes a clinical report of envenomation due to the bite of M. ibiboboca in the State of Pernambuco, Northeast Brazil, that took place in 2017. The patient presented symptoms of muscle paralysis and sweating. He was admitted to the intensive care unit. A total of 10 ampoules of anti-elapidic serum were administered. The patient complained of local pain that extended through the arm, paresthesia in the lower limbs, headache, and chest pain. Changes in the visual, respiratory, and neurological systems were not observed. This clinical case report on coral snake poisoning is useful for increasing the knowledge on the toxicological action of snake poison and its effect on injured individuals, thereby helping in the clinical evaluation and treatment.(AU)

A família Elapidae compreende 35 espécies de serpentes no Brasil, com Micrurus ibiboboca amplamente distribuída no Nordeste. Apesar do elevado número de espécies de Micrurus no Brasil, são poucos os casos de envenenamento humano na literatura. Descrevemos aqui um relato clínico de envenenamento por picada de M. ibiboboca no Estado de Pernambuco, Nordeste do Brasil, ocorrido em 2017. O paciente apresentava sintomas de paralisia muscular e sudorese. Ele foi internado na Unidade de Terapia Intensiva. Um total de 10 ampolas de soro anti-elapídico foi administrado. O paciente queixava-se de dor local que se estendia pelo braço, parestesia em membros inferiores, cefaleia e dor torácica. Não foram observados alterações nos sistemas de visão, respiratório e neurológico. Este relato de caso clínico de intoxicação por cobra coral é útil para aumentar o conhecimento sobre a ação toxicológica da peçonha da serpente e seu efeito sobre os acidentados, auxiliando na avaliação clínica e no tratamento.(AU)

La familia Elapidae comprende 35 especies de serpientes en Brasil como la Micrurus ibiboboca ampliamente distribuidas en el Noreste. A pesar de lo alto número de especies de Micrurus en Brasil, hay pocos casos de envenenamiento humano en la literatura. Describimos aquí un informe clínico de envenenamiento por mordedura de M. ibiboboca en el estado de Pernambuco, Noreste de Brasil, ocurrido en 2017. El paciente presentaba síntomas de parálisis muscular y sudoración. Fue ingresado en la unidad de cuidados intensivos. Se administraron un total de 10 ampollas de suero antielapídico. El paciente se quejaba de dolor local que se extendía por el brazo, parestesias en las extremidades inferiores, cefalea y dolor torácico. No se observaron cambios en los sistemas visual, respiratorio y neurológico. Este informe de caso clínico sobre la intoxicación por serpiente coral es útil para aumentar el conocimiento sobre la acción toxicológica del veneno de serpientes y su efecto en los individuos lesionados, ayudando así en la evaluación clínica y el tratamiento.(AU)

Aspectos clínico-epidemiológicos dos acidentes botrópicos notificados em um hospital de referência de Alagoas / Clinical-epidemiological aspects of bothropic accidents notified in an Alagoas reference hospital

RESUMO: Os acidentes ofídicos configuram um sério transtorno à saúde pública dos países tropicais, em razão da frequência com a qual se apresentam e da magnitude da morbimortalidade que acarretam. No Brasil, observa-se uma prevalência anual entre 19 e 22 mil desses acidentes, e, dentre os casos em que se há notificação da espécie, o gênero Bothrops é responsável por 80,50% dos casos. Objetivo: Descrever os aspectos clínico-epidemiológicos dos acidentes botrópicos notificados em um hospital de referência no estado de Alagoas. Métodos: Estudo observacional, descritivo do tipo transversal e retrospectivo, dos registros clínicos de pacientes internados no Hospital Escola Dr. Hélvio Auto, por acidentes botrópicos de 2010 a 2018. Resultados: A partir da investigação de 694 prontuários médicos, constatou-se a maior prevalência de acidentes no ano 2017. O perfil epidemiológico foi composto por indivíduos de sexo masculino, adultos, de etnia parda, de baixo nível de escolaridade, trabalhadores rurais, e caracterizado por ocorrer majoritariamente na mesorregião Leste Alagoano. Por sua vez, o perfil clínico caracterizou-se por apresentar como região anatômica mais acometida os membros inferiores, manifestações de dor e edema, gravidade leve a moderado e desfecho evolutivo satisfatório. Conclusões: A investigação realizada permitiu traçar o perfil clínico-epidemiológico dos acidentes botrópicos no estado de Alagoas, bem como identificou que o grupo social composto por trabalhadores rurais apresentou certa dificuldade de acesso ao atendimento hospitalar adequa-do em tempo hábil, o que determinou a incidência de casos de maior gravidade nessa população. (AU)

ABSTRACT: Ophidic accidents constitute serious public health in tropical countries, due to the frequency that these events occur and their relevant magnitude of morbidity and mortality. In Brazil, there is an annual prevalence between 19.000 and 22.000 of these accidents, and among the cases that notify the species, it is possible to verify that the Bothropsgenus is responsible for 80.50% of the cases. Objective: Describing the clinical and epidemiological aspects of bothropic accidents reported in a reference hospital in the state of Alagoas. Methods: Observational, descriptive cross-sectional, and retrospective study of the clinical records of patients admitted into the Escola Dr. Hélvio Auto Hospital for bothropic accidents from 2010 to 2018. Results: It shows that the year of 2017 was the most prevalent year of cases, through the investigation of 694 medical records. The epidemiological profile has been composed of male, adult, brown individuals, low education, rural workers, and characterized by occurring mostly in the Eastern Alagoas. Therefore, the clinical profile was characterized by the occurrence of the most affected anatomic region as lower limbs, manifestations of pain and edema, mild to moderate severity, and satisfactory clinical outcome. Conclusions: The investigation allowed to trace the clinical and epidemiological profile of bothropic accidents in the state of Alagoas, and also identify the social group composed of rural workers as the one with some demanding to access the hospital care accurately, and who was the population with the incidence of the highest severity. (AU)

Identification of microchips through diagnostic imaging helps to determine the longevity of the golden lancehead (Bothrops insularis) in captivity / Identificação de microchips por meio de diagnóstico por imagem auxilia a determinar a longevidade da jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) em cativeiro

As serpentes vindas da natureza e encaminhadas para centros de reabilitação ou de pesquisa têm uma idade incerta. Na natureza, esses animais, muitas vezes atingem um tamanho corpóreo menor do que os indivíduos cativos devido a uma menor frequência de alimentação. Assim, a idade de uma cobra recém-chegada da natureza é geralmente estimada com base em seu tamanho corpóreo, o qual é comparado com dados em cativeiro. A utilização dos meios de diagnóstico por imagem tem auxiliado a medicina na análise das serpentes em cativeiro, mediante avaliação da estrutura óssea, dos órgãos e de alterações. Este trabalho relata o uso de diagnóstico por imagem (radiografia e ultrassonografia) para identificar a presença de microchips e, consequentemente, estimar a idade de uma Bothrops insularis em cativeiro.(AU)

Aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor: um estudo histológico dos testículos nos períodos reprodutivos de quiescência e máxima atividade / Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects: the testes histological study in the reproductive periods of quiescence and maximal activity

As serpentes pertencem ao segundo maior grupo dentro dos répteis, podendo apresentar sazonalidade quanto à espermatogênese, com produção descontínua ou contínua. O presente trabalho tem como objetivo caracterizar aspectos da biologia reprodutiva de Boa constrictor constrictor com base nos achados histológicos dos testículos nos períodos de máxima atividade (período de gametogênese) e quiescência. Os testículos de dois espécimes de Boa c. constrictor (7767 e 11752) foram cortados a uma espessura de 3µm em micrótomo, corados com azul de toluidina 1%, fotodocumentados e descritos. A presença de espermatozoides na luz do túbulo seminífero no indivíduo 7767 indica um período de máxima gametogênese, enquanto o lúmen dos túbulos seminíferos pouco evidentes, sem a presença de espermatozoides e de células gaméticas em divisão, caracteriza o indivíduo 11752 em período quiescente. Mediante os achados histológicos descritos no presente estudo, concluiu-se que Boa c. constrictor apresenta sazonalidade em relação à gametogênese, sendo esse padrão de sazonalidade associado ao período de cópulas relatado em literatura característico de serpentes com padrão pré-nupcial.(AU)

These snakes belong to the second largest group within the reptiles, being able to present seasonality regarding spermatogenesis, with discontinuous or continuous production. The present study aims to characterize Boa constrictor constrictor reproductive biology aspects from histological findings in testicles during periods of maximum activity (period of gametogenesis) and quiescence. The testicles of two specimens of Boa c. constrictor (7767 and 11752) were cut to a thickness of 3µm in microtome, stained with 1% toluidine blue, photodocumented and described. The spermatozoa presence in the seminiferous tubule lumen in individual 7767 indicates a period of maximum gametogenesis, whereas the seminiferous tubules lumen is not very evident without spermatozoa and the absence of dividing gametic cells characterizes individual 11752 in the quiescent period. Through the histological findings we concluded that Boa c. constrictor presents seasonality in relation to gametogenesis, and the pattern of reproductive seasonality observed along with the period of copulas reported in the literature resembles the pre-nuptial pattern.(AU)

Potential seed dispersers: a new facet of the ecological role of Boa constrictor constrictor Linnaeus 1758 / Potenciais dispersores de sementes: uma nova faceta do papel ecológico de Boa constrictor constrictor Linnaeus 1758

Abstract: The boa (Boa constrictor) is considered a top predator and its diet includes a wide variety of birds, mammals, and other reptiles, all related directly to their availability in the environment inhabited by the snake. Seven boas were found roadkilled on highways adjacent to conservation units in the semi-arid region of Rio Grande do Norte state, in northeastern Brazil. Their digestive tract was analyzed to identify food items and classify them according to their orientation in the tract. Among the food items found, the white-eared opossum (Didelphis albiventris) and the black-and-white tegu (Salvator merianae) were ingested head-first, while teeth of a punaré (Thrichomys laurentius) and a Spix's yellow-toothed cavy (Galea spixii) and hairs of an unidentified rodent were found in the intestinal tract. In addition, two novel items were identified: the plain-breasted ground-dove (Columbina minuta), which were ingested tail-first, and carnauba palm seeds (Copernicia prunifera). The orientation of the prey (head-first or tail-first) followed what was expected for each type of prey. In addition, the presence of carnauba palm seeds indicates that, while being a top predator, the boa may also be a potential disperser of seeds, which would constitute a previously unrecorded ecological role for this species.

Resumo: A jiboia (Boa constrictor) é considerada um predador de topo e a sua dieta inclui uma grande variedade de aves, mamíferos e outros répteis, todos relacionados diretamente com a sua disponibilidade no ambiente por ela habitado. Sete jiboias foram encontradas atropeladas em estradas no entorno de unidades de conservação da região semiárida do estado do Rio Grande do Norte, no nordeste brasileiro. O seu trato digestivo foi analisado de modo a identificar itens alimentares e a classificá-los de acordo com a sua orientação no trato. De entre os itens alimentares encontrados, o gambá-de-orelha-branca (Didelphis albiventris) e o teju (Salvator merianae) foram ingeridos no sentido ântero-posterior, enquanto que dentes de punaré (Thrichomys laurentius) e de preá (Galea spixii) e pelos de um roedor não identificado foram encontrados do trato intestinal. Dois itens novos foram identificados: a rolinha-de-asa-de-canela (Columbina minuta), que foi ingerida no sentido póstero-anterior, e sementes de carnaúba (Copernicia prunifera). A orientação dos itens (ântero-posterior ou póstero-anterior) seguiu o que era esperado para cada tipo de presa. A presença de sementes de carnaúba indica que, além de ser um predador de topo, a jiboia também pode ser um potencial dispersor de sementes, o que constitui um papel ecológico previamente não descrito para esta espécie.

Occurrence of Dioctophyme renale larvae (Goeze, 1782) (Nematoda: Enoplida) in a new host from southern Brazil / Novo hospedeiro de larvas de Dioctophyme renale (Goeze, 1782) (Nematoda: Enoplida) no extremo sul do Brasil

Abstract Dioctophymatosis is caused by the giant kidney worm Dioctophyme renale which occurs in dogs, cats, and wild mammals. In Brazil, the disease has been diagnosed in dogs from several states around the country. In the present study, the occurrence of D. renale larvae in snakes from southern of Brazil is reported. Three specimens of Philodryas patagoniensis (Serpentes: Dipsadidae) (common names in Brazil: "parelheira", "papa-pinto") roadkill in the county of Capão do Leão, State of Rio Grande do Sul, southern Brazil, were necropsied. Two third-stage larvae of D. renale were found in the coelomic cavity of P. patagoniensis. This study reveals a new host for D. renale larvae in the southern region of the State of Rio Grande do Sul, Brazil. This particular geographic area of the country has stood out as several cases of D. renale infection have been reported in a number of vertebrates from this region including domestic dogs and cats and wild animals such as carnivores, fish, and freshwater turtles.

Resumo Dioctophyme renale, verme gigante do rim, parasita cães, gatos e mamíferos silvestres, sendo que no Brasil, a dioctofimatose canina vem sendo diagnosticada em diversos estados brasileiros. O estudo tem por objetivo registrar larvas de D. renale parasitando serpente no extremo sul do Brasil. Nesse contexto, foram examinados três espécimes de Philodryas patagoniensis (Serpentes: Dipsadidae) encontradas mortas após atropelamento em uma estrada do município de Capão do Leão, Rio Grande do Sul (RS). Duas larvas de terceiro estágio de D. renale foram encontradas na cavidade celomática de P. patagoniensis, a qual representa um novo hospedeiro para larvas de D. renale na região sul do RS, a qual vem se destacando devido aos diversos registros do parasito em cães e gatos domésticos, bem como animais silvestres (carnívoros, peixes, quelônios).

Use of moxibustion as an auxiliary treatment in wound healing of the snake Eunectes murinus (anaconda): case report / Uso da moxabustão como tratamento auxiliar em ferimentos na serpente Eunectes murinus (anaconda): relato de caso

Large snakes of the Boidae family, such as Eunectes murinus, require special techniques to facilitate their care when they are sick. Thus, an acupuncture technique called moxibustion was applied that utilizes burning of the weed Artemisia vulgaris for heating at specific points on the skin without handling the animals. The objective of this case report was to describe the use of moxibustion acupuncture as an auxiliary treatment for snakes. A female, 4.0 meters long and weighing about 30 kg, belonging to a Biological Museum of the Butantan Institute, showed symptoms of weight loss, anorexia and hyperemia in the ventral region. The snake was examined and treated with ciprofloxacin antibiotics and a month showed an area of necrosis that exposed the muscles in the dorsal cranial region. The female was treated with moxibustion and application of silver sulfadiazine cream at the site of the lesion. After seven months of treatment, the animal showed signs of good healing with complete wound closure. This technique of moxibustion could be easily applied without restraint, an important detail given the size of the snake, and with successful closure of the lesion.(AU)

Grandes serpentes da família Boidae, como Eunectes murinus, requerem técnicas especiais para facilitar seus cuidados quando estão doentes. Assim, uma técnica de acupuntura, chamada de moxabustão, foi aplicada utilizando-se a queima da erva Artemisia vulgaris para aquecer pontos específicos na pele, sem manusear os animais. O objetivo deste relato de caso foi descrever o uso da acupuntura moxabustão como um tratamento auxiliar para serpentes. Uma fêmea com 4,0m de comprimento e pesando cerca de 30kg, pertencente ao Museu Biológico do Instituto Butantan, apresentou sintomas de perda de peso, anorexia e hiperemia na região ventral. A serpente foi examinada e tratada com o antibiótico ciprofloxacina e um mês depois mostrou uma área de necrose, que expôs os músculos da região dorsal cranial. A fêmea foi tratada com moxabustão e aplicação do creme de sulfadiazina de prata no local da lesão. Depois de sete meses de tratamento, o animal mostrou sinais de boa cicatrização, com fechamento completo da ferida. Essa técnica de moxabustão pode ser facilmente aplicada sem restrição, um detalhe importante dado o tamanho da serpente, e com fechamento bem-sucedido da lesão.(AU)

Evaluation of sperm quality of Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860) (Serpentes, Dipsadidae) / Avaliação da qualidade seminal de serpentes Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860) (Serpentes, Dipsadidae)

Abstract Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860), is a species widely distributed in the Pampa Domain, occurring in Rio Grande do Sul, Argentina and Uruguay, mainlyin the pampa region. In the coastal region of southern Brazil this is serpent is considered one of the most abundant. The purpose of the present study is to describe the techniques of sperm evaluation in vitro for E. poecilogyrus sublineatus in the coastal plain of Rio Grande do Sul, Brazil. After laparatomy the efferent vases were collected and the semen was diluted in 1ml Beltsville Thawing Solution. The characteristics of motility, membrane integrity, mitochondria, acrosome, DNA, cell viability and cellular functionality were evaluated. Fluorescent probes were used for the evaluation of sperm structure in epifluorescence microscope. With the techniques described, it was possible to identify intact and injured cells, enabling the determination of cell characteristics for the spring season (October and November). It was observed in the analyses that 80% of sperm cells were mobile and that 84.1 ± 8.0% of sperm membranes were intact. The standards found were of 48 ± 13.8% of intact acrosome, 73.6 ± 6.0 of perfect DNA and of 91.8 ± 4.0 of functional mitochondria. Thus, these values from the sperm analysis can be used as standards for the species Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus.

Resumo Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus (Cope, 1860), é uma espécie amplamente distribuída no Domínio Pampa, ocorrendo no Rio Grande do Sul, Argentina e Uruguai, principalmente na região dos pampas. Na região costeira do extremo sul do Brasil essa é uma das serpentes consideradas mais abundantes. O objetivo deste estudo é descrever as técnicas de avaliação espermática in vitro para E. poecilogyrus sublineatus da planície costeira do Rio Grande do Sul, Brasil. Após laparatomia os vasos eferentes foram coletados e o sêmen diluído em 1ml Beltsville Thawing Solution. Foram avaliadas as características de motilidade, integridade de membrana, mitocôndria, acrossoma, DNA, viabilidade celular e funcionalidade celular. Foram utilizadas sondas fluorescentes para avaliação das estruturas espermática em microscópio de epifluoescência. Com as técnicas descritas foram possível identificar células integras e lesadas, podendo determinar as características celulares para o período de primavera (outubro e novembro). Nas análises foi observado que 80% das células espermáticas estavam móveis e que 84,1 ± 8,0% das membranas espermáticas estavam íntegras. Os padrões encontrados para foram de 48 ± 13,8% de acrossoma íntegro, 73,6 ± 6,0 de DNA íntegro e de 91,8 ± 4,0 de mitocôndria funcional. Desta forma, esses valores das análises espermáticas podem ser utilizados como padrão para a espécie Erythrolamprus poecilogyrus sublineatus.

Gross and histologic features of gastritis due to Ophidascaris arndti in tropical rattlesnakes (Crotalus durissus) / Alterações macro e microscópicas da gastrite associadas com Ophidascaris arndti em cascavéis (Crotalus durissus)

The tropical rattlesnake (Crotalus durissus) is a snake of great importance for biomedical industry since its poison is used for the production of antiophidic serum and researches. Several conditions related to animal health, such as diseases and parasites, which can promote the reduction of poison production by these snakes should be investigated. Accordingly, the aim of this study was to characterize the gross and microscopic lesions related to the presence of Ophidascaris arndti in stomachs of tropical rattlesnakes. The gastrointestinal tract of thirty-five South American rattlesnakes captured in Southeastern region of Brazil were analyzed and nineteen animals showed infestation by the parasites, found in the small intestine and, especially, in the stomach of the hosts. Grossly, lesions were characterized by mucosal ulcers occasionally associated with hemorrhage. Microscopic alterations included histiocytic granulomas, fibrosis, necrosis, and hemorrhage. Based on these findings, the diagnosis of a parasitic granulomatous disease was made. The lesions may be related to the cause of death in captivity snakes, since the lesions can promote secondary infections by opportunistic bacteria. Moreover, the intense inflammatory response accompanied by fibrosis may be related to poor functioning of the gastric snakes, which it may exhibit frequent regurgitation of the food.(AU)

A cascavel (Crotalus durissus) é uma serpente de grande importância para a indústria biomédica, uma vez que seu veneno é utilizado para a produção de soro antiofídico e para pesquisas. Condições diversas relacionadas ao estado de saúde do animal, como doenças e parasitoses, que possam promover a diminuição da produção de veneno por essas serpentes, devem ser investigadas. O objetivo deste estudo foi caracterizar os achados macro e microscópicos relacionados à presença de nematódeos Ophidascaris arndti nos estômagos de cascavéis. O trato gastrointestinal de 35 cascavéis capturadas na região Sudeste do Brasil foi avaliado Dessas, 19 apresentavam infestação pelo parasito, que foi encontrado predominantemente no estômago e no intestino delgado dos hospedeiros. Macroscopicamente, as lesões foram caracterizadas por úlceras nas camadas mucosas, ocasionalmente associadas com hemorragia. As alterações microscópicas apresentaram granulomas histiocíticos, fibrose, necrose e hemorragia. Baseado em tais achados, o diagnóstico de doença granulomatosa parasitária foi realizado. As lesões encontradas podem estar relacionadas à causa das mortes das serpentes em cativeiro, uma vez que podem favorecer infecções secundárias por bactérias oportunistas. Além disso, a intensa resposta inflamatória e a fibrose podem estar relacionadas ao mau funcionamento gástrico das serpentes, que podem apresentar frequente regurgitação do alimento.(AU)

Aspectos morfológicos e ultraestruturais de células sanguíneas de Crotalus durissus terrificus / Morphological and ultrastructural aspects of Crotalus durissus terrificus blood cells

A avaliação hematológica, de importância comprovada como um meio auxiliar de diagnóstico ao clínico de pequenos animais domésticos, vem se tornando comum em animais selvagens não apenas para a clínica, mas para a avaliação do manejo e como estudo auxiliar para a fisiologia das várias espécies. Tendo em vista o aumento da demanda para a produção de várias drogas de importância farmacêutica, a criação de serpentes peçonhentas vem se tornando comum a ponto destes animais já serem reconhecidos como sendo de produção. O conhecimento do manejo e da clínica destes animais ainda é escasso e a mortalidade é elevada nos criatórios, tornando urgente a ampliação destes. Embora alguns estudos hematológicos já tenham sido realizados em cascavéis (Crotalus durissus) os dados analisados ainda são insipientes, notadamente em relação à caracterização das células do sangue e poucos estudos em microscopia eletrônica foram realizados em serpentes. Com o objetivo de caracterizar as células sanguíneas morfologicamente, sob microscopia óptica e ultraestrutural, foram coletadas amostras de sangue de 52 de indivíduos da subespécie Crotalus durissus terrificus para a realização de esfregaços sanguíneos e avaliação ultraestrutural. Concluiu-se que a coloração hematológica de Giemsa permite a avaliação morfológica e a diferenciação das células sanguíneas em serpentes assim como a visualização de hemoparasitos. A avaliação ultraestrutural permite evidenciar as organelas celulares e a diferenciação entre as células, inclusive entre os tipos leucocitários, porém ainda são necessários outros estudos para que seja elucidada a hipótese da existência dos eosinófilos na espécie estudada assim como é necessária melhor caracterização dos grânulos dos azurófilos para que se confirme uma possível diferença entre os monócitos típicos e os azurófilos.(AU)

Hematological evaluation, important for the diagnostic by the small domestic animal clinician, has become common in wildlife clinic, and for handling and study of the physiology of various species. Given the increased demand for drug production of pharmaceutical importance, the breeding of venomous snakes has become common and is already recognized as production. Knowledge of the management and clinics of snakes is still insufficient and their mortality is high. Although some hematological studies have already been conducted in the rattlesnake (Crotalus durissus), the analyzed data are still insufficient, especially with respect to the characterization of blood cells, and few electron microscopy studies have been performed on snakes. In order to characterize morphologically blood cells with light and ultrastructural microscopy, blood samples from 52 individuals of subspecies of Crotalus durissus terrificus were collected to perform blood smears and ultrastructural evaluation. It was concluded that hematologic Giemsa staining allows morphological evaluation and differentiation of the blood cells as well as of snake hemoparasites. The ultrastructural evaluation will highlight the cell organelles and differentiation between cells, including leukocyte types; although still further studies are needed to elucidate the hypothesis of eosinophils in the species studied as also is necessary a better characterization of azurophilic beads to confirm a possible difference between the typical monocyte and the azurophilic.(AU)

Comportamiento epidemiológico del accidente ofídico en el Departamento del Magdalena, Colombia (2009-2013) / Epidemiological Behavior of Ophidean Accidents in the Department of Magdalena, Colombia (2009-2013) / Comportamento epidemiológico dos acidentes ofídico no Departamento de Magdalena, Colômbia (2009-2013)

Objetivo: determinar el comportamiento epidemiológico del accidente ofídico en el Departamento del Magdalena, según los eventos notificados durante los años 2009-2013. Materiales y métodos: estudio de tipo descriptivo y retrospectivo. El tamaño muestral fueron 485 casos notificados al Sistema de Vigilancia en Salud Pública. La información fue organizada en Microsoft Excel® y procesada en Epi-info® versión 3.5.4 de 2012. Se realizó análisis bivariado mediante estadística descriptiva, prueba de asociación (OR) y significancia (p<0,05); guardando el rigor ético y metodológico correspondiente. Resultados: el grupo etario más afectado fue el de 10 a 29 años (44,5%), con predominio en el sexo masculino (73%), la mayoría residentes en área rural (59%). Los municipios con mayor incidencia y notificación de casos fueron zona bananera (15,9%), Ciénaga (11,8%), El Banco (10,7%), Pivijay (9,5%) y Ariguaní (8,2%). Se encontró asociación estadística entre el ser mordido por serpiente mapaná y estar realizando tanto labores de agricultura [OR= 0,53 (IC95%: 0,36-0,77; p=0,00116)] como oficios domésticos [OR= 2,29 (IC95%: 1,36 - 3,87; p=0,00148)]. De igual forma, entre el ser mordido por serpiente mapaná y presentar náuseas [OR= 1,60 (IC95%: 1,04-2,44; p=0,029)], como manifestación clínica sistémica. Conclusiones: el accidente ofídico sigue siendo un evento de interés para la salud pública global. Sin embargo, es necesario que exista mayor adherencia al protocolo nacional de vigilancia epidemiológica y se mejore la notificación por parte de las instituciones primarias para evitar subregistros. Además, que se sigan realizando investigaciones entre regiones, que permitan comparar hallazgos y establecer estrategias de control y prevención.

Objective: To determine the epidemiological behavior of snakebite accidents in the Department of Magdalena, in the years between 2009 and 2013. Materials and methods: Descriptive and retrospective study. The sample size was 485 cases reported to the national Public Health Surveillance System. The information was organized in Microsoft Excel® and processed in Epi-INFO program version 3.5.4 of 2012. Bivariate analysis was performed using descriptive statistics, association test (OR) and statistical significance (p <0.05); keeping the corresponding ethical and methodological rigor. Results: The age group between 10 and 29 years was the most affected (44.5%), predominantly males (73%) living in rural areas (59%). The municipalities with the highest incidence and reporting cases were zona bananera (15.9%), Ciénaga (11.8%), El Banco (10.7%), Pivijay (9.5%) and Ariguaní (8.2%). We found statistical association between being bitten by mapana snake and exerting both agricultural work: OR = 0.53 (CI95%: 0.36 - 0.77; p = 0.00116) and housework: OR = 2.29 (CI95%: 1.36 - 3.87; p = 0.00148). It appears similar between being bitten by a mapana snake and having nausea: OR = 1.60 (CI95%: 1.04 - 2.44; p = 0.029) as systemic clinical manifestations. Conclusions: The snakebites continue to be events of interest to global public health. However, it is necessary to encourage adherence to the national epidemiological surveillance protocol and to improve notification in the primary institutions to avoid underreporting. Moreover, it is important to continue the research in different regions in order to compare findings and to establish prevention and control strategies.

Objetivo: determinar o comportamento epidemiológico da ophidism Acidente no Departamento de Magdalena, de acordo com os eventos relatados durante 2009-2013. Materiais e métodos: Descritiva retrospectivo estudo. O tamanho da amostra foi de 485 casos notificados ao sistema de vigilância em saúde pública. A informação foi organizada em Microsoft Excel e processados no Epi-INFO® 2012. Versão 3.5.4 bivariada meio de estatística descritiva, teste de associação (OR) e significância (p <0,05) foi analisada; mantendo o rigor ético e metodológico correspondente. Resultados: A faixa etária mais acometida foi a 10-29 anos (44,5%), predominantemente no sexo masculino (73%), a maioria dos quais vivem em áreas rurais (59%). Os municípios com os maiores casos de incidência e de informação foram: zona bananera (15,9%), Ciénaga (11,8%), El Banco (10,7%), Pivijay (9,5%) e Ariguaní (8,2%). Associação estatística entre ser mordido por serpente encontrada mapaná e estar fazendo tanto trabalho agrícola: OR = 0,53 (IC 95%: 0,36-0,77; p = 0,00116) como o trabalho doméstico: OR = 2,29 (95% CI: 1,36-3,87; p = 0,00148). Da mesma forma, entre ser mordido por cobra e mapaná nauseado: OR = 1,60 (IC 95%: 1,04-2,44; p = 0,029) e as manifestações clínicas sistémicas. Conclusões: O acidente ofídico continua a ser um evento de interesse para a saúde pública global. No entanto, é preciso haver uma maior adesão ao protocolo nacional de vigilância epidemiológica e de notificação por parte das instituições primárias é melhor evitar a subnotificação. Além disso, a contínua pesquisa de implementação entre as regiões, para a comparação de resultados e desenvolvimento de estratégias de prevenção e controle.

First record of Porocephalus cf. clavatus (Pentastomida: Porocephalida) as a parasite on Bothrops asper (Squamata: Viperidae) in Costa Rica / Primeiro registro de Porocephalus cf. clavatus (Pentastomida: Porocephalida) como um parasita em Bothrops asper (Squamata: Viperidae) na Costa Rica

Abstract Pentastomids are parasites that infect respiratory cavities of vertebrates, they are pretty common but poorly known in wildlife veterinary. A Bothrops asper snake (Garman, 1884) was captured in the Caribbean region of Costa Rica and had its lung infested with pentastomids, identified as ca Porocephalus clavatus (Wyman, 1845). This represents the first record of Porocephalus (Humboldt, 1812) on B. asper as well as P. cf. clavatus in Costa Rica. Further studies are needed to clarify their taxonomic position, images and scanning electron microscopy photographs (SEM) of the specimens are given.

Resumo Pentastomídeos sâo parasitas que infectam as cavidades respiratórias dos vertebrados, eles são bastante comuns, mas pouco conhecido nos animais silvestres. Uma Bothrops asper (Garman, 1884) foi capturada na região do Caribe da Costa Rica e teve seu pulmão infestado de pentastomídeos, identificados como ca Porocephalus clavatus (Wyman, 1845). Isto representa o primeiro registro de Porocephalus (Humboldt, 1812) em B. asper, assim como P. cf. clavatus na Costa Rica. Mais estudos detalhados são necessários para esclarecer sua posição taxonómica. Imagens e fotografias de microscopia electrónica de varredura (MEV) dos espécimes são dadas.

Polychromatism of populations of Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) from the southern Amazon Basin, Brazil / Policromatismo das populações de Corallus hortulanus (Squamata: Boidae) ao sul da Bacia Amazônica, Brasil

The Amazon tree boa Corallus hortulanus is known for featuring a wide variation in color pattern and design markings. Although there are studies on its polychromatism, none of them addresses the geographic variation in the color pattern of this species. The aim of this study was to describe the chromatic variation found in the populations of C. hortulanus from the southern Amazon Basin and its relationship with geographic distribution of the species. Analysis of both design markings and color patterns on 112 C. hortulanus specimens from the southern Amazon Basin interfluves resulted in the identification of six distinct morphotypes. Grayish-brown coloration and elongated diamond-shaped patterns were the most frequent patterns. Two morphotypes showed a tendency of correlation with the geographical distribution of those species found in Madeira and Juruá Rivers. The small sample size does not allow for a robust conclusion on the possible cause of geographic variation. The distribution of morphological patterns of C. hortullanus in the Amazon Basin suggest that there is gene flow between populations, regardless of geographical distance and natural barriers. The variation in color pattern and markings may represent a phenotypic response to the characteristics of different habitats occupied by the species.

Corallus hortulanus é uma serpente conhecida por apresentar grande variação no padrão de coloração e desenho. Apesar de estudos relacionados ao seu policromatismo, nenhum deles abordou a variação geográfica no padrão de cor desta espécie. O objetivo deste estudo foi descrever a variação cromática das populações de C. hortulanus na Calha sul do Rio Amazonas e verificar a correlação entre a distribuição geográfica e a variação encontrada. A partir da análise do padrão de desenho e cor de 112 espécimes de C. hortulanus procedentes dos interflúvios (área entre dois rios) da Calha Sul foram descritos seis morfotipos. Dos seis morfotipos descritos, a cor marrom-acinzentado e o padrão de desenho losango alongado foram os mais comuns entre as populações analisadas. Dois morfotipos apresentaram uma tendência de correlação com a distribuição geográfica, estando relacionados aos rios Madeira e Juruá, embora o número de amostras tenha sido pequeno. A distribuição dos padrões morfológicos de C. hortullanus na Bacia Amazônica revelou que existe fluxo gênico entre as populações, independentemente da distância geográfica e das barreiras naturais. Provavelmente, o padrão de cor e desenho seja uma resposta fenotípica às pressões nos diferentes ambientes ocupados pela espécie.

Oral fibrosarcoma in jararaca (Bothrops pubescens): anatomopathological and immunohistochemical aspects / Fibrossarcoma oral em jararaca (Bothrops pubescens): aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos

A 4-year-old female captive-bred snake of the genus Bothrops showed swelling on the left side of the oral cavity, suggesting the development of neoplasia. The mass was removed surgically and sent for pathological examination. Two months later a new increase in volume in the same site was observed, suggesting recurrence. The lesion was completely removed and sent for pathological analysis. Histologically, the two-samples consisted of a mass with highly-cell density composed of spindle-shaped anaplastic cells arranged in interwoven bundles, distributed throughout the tissue extension and, occasionally, polygonal cells arranged in irregular fascicles. The Masson trichrome staining showed modest amount of collagen supporting the neoplastic cells. PAS-positive content was not observed in the cytoplasm of neoplastic cells. Histological and histochemical findings indicated that it was a spindle cell neoplasm, but the classification was not possible. Immunohistochemistry was requested and performed using the streptavidin-biotin-peroxidase method. The markers used were anti-vimentin, anti-PCNA, anti-EMA, anti-melan A and anti-melanosome, anti-desmin, anti-actin, anti-CD68 and anti- S100protein. The neoplastic cells were immunoreactive for vimentin and PCNA and negative for the other antibodies. The morphology characterization, histochemical and immunohistochemical analysis of neoplastic cells allowed the definitive diagnosis of oral fibrosarcoma...

Uma serpente de cativeiro, fêmea, quatro anos de idade, do gênero Bothrops apresentou aumento de volume no lado esquerdo da cavidade oral, sugerindo tratar-se de neoplasma. A massa foi removida cirurgicamente e enviada para exame anatomopatológico. Dois meses depois foi observado novo aumento de volume no mesmo local, sugerindo recidiva. A lesão foi removida por completo e também enviada para análise. Histologicamente, as duas amostras consistiam de massa altamente celular, composta por células anaplásicas fusiformes organizadas em feixes entrelaçados e distribuídos por toda extensão tecidual e, ocasionalmente, células poligonais arranjadas em fascículos irregulares. A coloração de tricrômico de Masson apresentou quantidade modesta de colágeno sustentando as células neoplásicas. Não foi observado conteúdo PAS-positivo no citoplasma das células neoplásicas. Os achados histológicos e histoquímicos indicavam tratar-se de neoplasma de células fusiformes, porém não era possível sua classificação. A imuno-histoquímica foi requisitada e realizada pelo método streptavidina-biotina-peroxidase, utilizando os anticorpos anti-vimentina, anti-PCNA, Anti-EMA, anti-melan A, anti-HMB45, anti-desmina, anti-actina, anti-CD68 e anti-proteína S-100. As células neoplásicas foram imunorreativas para vimentina e PCNA e, negativas para os demais anticorpos. A caracterização morfológica, histoquímica e imuno-histoquímica das células neoplásicas permitiu o diagnóstico definitivo de fibrossarcoma oral...

Determinação das concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro / Determination of proteins and metabolites concentrations in plasma of rattlesnakes in captivity

Para determinar as concentrações plasmáticas de proteínas e metabólitos de cascavéis em cativeiro, foram utilizadas 60 serpentes adultas, sendo 30 machos e 30 fêmeas. O sangue foi coletado através de punção do seio venoso paravertebral cervical e armazenado em tubos com heparina. As análises bioquímicas foram processadas colorimetricamente em Analisador Automático de Bioquímica Chemwell (Awareness Technology®, Inc). Foram calculadas as médias e desvios padrão dos seguintes constituintes: proteínas totais, albumina, globulinas, relação albumina/globulinas, ácido úrico, creatinina, ureia, colesterol, colesterol HDL e triglicérides. Os valores obtidos foram semelhantes aos descritos na literatura para repteis e serpentes, sendo as diferenças observadas provavelmente decorrentes da diferença entre espécies, clima, estação do ano e metodologia utilizada. Não houve diferenças significativas entre machos e fêmeas para os parâmetros estudados. Estes resultados podem ser úteis no estabelecimento de valores de referência para planos de conservação destes ofídios em cativeiro.(AU)

For determining plasma concentrations of proteins and metabolites of rattlesnakes in captivity, 60 adult snakes, 30 males and 30 females were used. Blood was collected by puncture of the cervical paravertebral venous sinus and stored in tubes with heparin. Biochemical analyzes were colorimetrically processed using an Automatic Biochemistry Analyzer Chemwell (Awareness Technology®, Inc). The mean and standard deviation were calculated for the following constituents: total protein, albumin, globulin, albumin/globulin ratio, uric acid, creatinine, urea, cholesterol, HDL cholesterol and triglycerides. The values were similar to those previously reported for reptiles and snakes, with the differences observed probably due to the difference between species, climate, season and the methodology used. There were no significant differences between males and females for the parameters studied. These results may be useful in establishing normal biochemical values for conservation plans for these snakes in captivity.(AU)

The Kraken: when myth encounters science / O Kraken: quando mito e ciência se encontram

Hundreds of years ago, sailors were terrified by the Kraken, a dreadful sea monster capable of sinking ships and with a taste for human flesh. Today we know the legends of this monster were based on sightings of giant squids. This animal belongs to the genus Architeuthis and was the subject of many scientific studies. Despite its enormous size (up to 18m), the giant squid is astoundingly elusive and much of its biology remains unknown. Thus shrouded in mystery, Architeuthis is almost a mythological creature and has a place both in science and in myth: the very last of the legends to persist to this day.

Séculos atrás, marinheiros se amedrontavam com histórias do Kraken, um terrível monstro marinho capaz de afundar embarcações e devorar suas tripulações. Atualmente, sabemos que a lenda desse monstro foi baseada em encontros com lulas-gigantes. Esse animal pertence ao gênero Architeuthis e foi alvo de muitos estudos científicos. Apesar de seu enorme tamanho (pode chegar a 18m), a lula-gigante é incrivelmente elusiva e muito de sua biologia permanece desconhecida. Assim, envolto em mistério, Architeuthis é quase um ser mitológico, ocupando um lugar tanto na ciência como no mito: a última das lendas a persistir nos dias de hoje.

The epidemiology of snakebite accidents in the cities of southeast Goiás from 2007 TO 2011 / Epidemiologia de acidentes ofídicos no sudeste goiano entre 2007 a 2011

Knowing the epidemiology of snakebite poisoning is essential for planning prevention and treatment strategies for such accidents. However, epidemiological data concerning snakebite accidents remain limited, especially in certain regions of Brazil. Thus, this study aimed to understand the epidemiology of snakebites in four cities of Southeast Goiás from 2007 to 2011. In total, 182 snakebites were reported during this time period, resulting in an incident rate ranging between 32 and 74/100,000 inhabitants and a mortality rate of 1.64%. The accidents were most common in men and occurred primarily in the countryside. The genera Bothrops and Crotalus (in this order) were responsible for the most bites, and the lower limbs were the most commonly affected bodily regions. The incidence and mortality rates of snakebites in these cities were high compared with regional and national statistics. Public health agencies require the data obtained in this study to subsidize a strategic plan aimed at preventing these accidents and providing appropriate treatments.

O conhecimento sobre a epidemiologia dos envenenamentos ofídicos é essencial para o planejamento de estratégias de prevenção e tratamento a esses acidentes. Porém, os dados epidemiológicos dos acidentes ofídicos ainda são precários, sobretudo em algumas regiões brasileiras. Neste contexto, o presente estudo objetivou conhecer a epidemiologia dos acidentes ofídicos em quatro municípios do sudeste goiano, durante 2007 a 2011, período em que foram notificados 182 acidentes ofídicos, com incidência entre 32 a 74/100.00 habitantes e letalidade de 1,64%. Os acidentes predominaram em adultos, do sexo masculino, sendo o principal local de ocorrência a zona rural. Os gêneros Bothrops e Crotalus foram, respectivamente, responsáveis pela maior frequência dos casos, sendo os membros inferiores as regiões anatômicas mais atingidas. A incidência e letalidade dos acidentes ofídicos nos municípios estudados foram altas, contrastando com o cenário regional e nacional. Os dados obtidos são essenciais para os órgãos públicos de saúde para subsidiar o tanto o planejamento de ações que visem a prevenção destes acidentes quanto o tratamento adequado.

Parasitological and immunological diagnoses from feces of captive-bred snakes at Vital Brazil Institute / Diagnóstico parasitológico e imunológico em fezes de serpentes cativas do Instituto Vital Brazil

Fecal samples from 56 snakes at the Vital Brazil Institute, in the city of Niterói, Rio de Janeiro, were tested using the sedimentation and flotation techniques to investigate the evolutionary forms of parasites such as helminths and protozoa, and using enzyme immunoassay techniques to detect antigens of Cryptosporidium sp. and Giardia sp. Among the animals tested, 80.3% were positive for parasites. Out of these, there were 16 Bothrops jararaca, 16 B. jararacussu and 13 Crotalus durissus. The prevalence of parasitic nematodes was 41.1%, and nematodes were found in all three snake species. Among these, the most frequent finding was eggs of Kalicephalus sp., which were diagnosed in 25% of the snakes. The positivity for protozoa detected using parasite concentration techniques was 75%, including oocysts of Caryospora sp. in 75%, cysts with morphology similar to Giardia sp. 3.6%, amoeboid cysts in 41.1% and unsporulated coccidia oocysts in 8.9%. Immunoassays for Cryptosporidium sp. antigens produced positive findings in 60.7%. Pseudoparasites were detected in 64.3%. These results show that there is a need to improve the sanitary handling of captive-bred snakes, and also for the animal house that supplies rodents to feed them. The results also highlight that diagnostic tests should be performed periodically on stool specimens from captive-bred snakes.

Foram analisadas amostras fecais de 56 serpentes do Instituto Vital Brazil, Niterói, Rio de Janeiro, por técnicas de sedimentação e flutuação, para pesquisa de formas evolutivas de parasitos como helmintos e protozoários, e imunoenzimáticas para detecção de antígenos de Cryptosporidium sp. e Giardia sp. Dos animais estudados, 80,3% foram positivos para parasitos, dos quais 16 pertenciam à espécie Bothrops jararaca, 16 à B. jararacussu e 13 à Crotalus durissus. A prevalência de nematódeos parasitos foi de 41,1%, sendo evidenciados nas três espécies de serpentes. Dentre estes, o mais frequente foi o encontro de ovos de Kalicephalus sp., diagnosticado em 25% das serpentes. A positividade para protozoários detectados pelas técnicas de concentração foi de 75%, nas quais oocistos de Caryospora sp. foram detectados em 75%, cistos com morfologia similar a Giardia sp. em 3,6%, cistos de amebídeos em 41,1% e oocistos não esporulados de coccídios em 8,9%. Obteve-se positividade para antígenos de Cryptosporidium sp. por imunoensaio em 60,7%. Pseudoparasitos foram detectados em 64,3%. Estes resultados apontam para a necessidade de aprimoramento do manejo sanitário das serpentes cativas, bem como no biotério que fornece roedores para sua alimentação, destacando a realização periódica de diagnóstico nas amostras fecais de serpentes cativas.

Seasonal influence on biochemical profile and serum protein electrophoresis for Boa constrictor amarali in captivity / Influência sazonal sobre o perfil bioquímico e a eletroforese de proteínas séricas de Boa constrictor amarali criada em cativeiro

Similarly to other reptiles, snakes are ectothermic animals and depend exclusively on the environment for the maintenance of their physiological, biochemical and immunological processes. Thus, changes in biochemical values can be expected due to seasonal influence. Twenty-two adult specimens of Boa constrictor amarali kept in captivity were used. Blood collections were done in two different seasons: winter (July 2004) and summer (January 2005) for the following assays: uric acid, aspartate aminotransferase (AST), glucose, cholesterol, total protein, and serum protein electrophoresis. The mean biochemical results found in summer and winter, respectively, were: 6.3 ± 3.4 and 11.3 ± 6.2 mg/dL for uric acid; 28.7 ± 12.4 and 20.7 ± 16.2 UI/L for AST; 26.3 ± 17 and 17.4 ± 6.8 mg/dL for glucose; 67.3 ± 30.2 and 69.7 ± 38.5 mg/dL for cholesterol; and 5.9 ± 1.6 and 5.9 ± 1.4 g/dL for total protein. Results regarding electrophoresis in summer and winter, respectively, were: 1.9 ± 0.7 and 2.4 ± 0.6 g/dL for albumin; 0.7 ± 0.2 and 0.5 ± 0.2 g/dL for α-globulin; 1.5 ± 0.5 and 1.7 ± 0.6 g/dL for β-globulin; and 1.8 ± 0.5 and 1.5 ± 0.5 g/dL for g-globulin. In the summer, there was a significant increase in AST and a decrease in uric acid (p < 0.05). Serum protein electrophoresis showed a significant increase in α-globulin fraction (p < 0.05) in the same season. There were not significant differences between seasons for the remaining variables. Based on these results, the period of the year must be considered in the interpretation of some biochemical values for these animals.

As serpentes, como outros répteis, são animais ectotérmicos e dependem exclusivamente do meio para a manutenção de seus processos fisiológicos, bioquímicos e imunológicos. Desta forma, alterações nos valores bioquímicos podem ser esperadas considerando-se a influência sazonal. Foram utilizadas vinte e duas Boa constrictor amarali adultas mantidas em cativeiro. A coleta de sangue foi realizada em duas estações diferentes: inverno (julho 2004) e verão (Janeiro 2005), para a realização dos exames: ácido úrico, aspartato aminotransferase (AST), glicose, colesterol, proteína total e eletroforese da proteína sérica. As médias dos exames bioquímicos obtidos no verão e inverno, respectivamente, foram: 6.3 ± 3.4 e 11.3 ± 6.2 mg/dL para ácido úrico; 28.7 ± 12.4 e 20.7 ± 16.2 UI/L para AST; 26.3 ± 17 e 17.4 ± 6.8 mg/dL para glicose; 67.3 ± 30.2 e 69.7 ± 38.5 mg/dL para colesterol; e 5.9 ± 1.6 e 5.9 ± 1.4 g/dL para proteína total. Os resultados da eletroforese no verão e inverno, respectivamente, foram: 1.9 ± 0.7 e 2.4 ± 0.6 g/dL para albumina; 0.7 ± 0.2 e 0.5 ± 0.2 g/dL para α globulina; 1.5 ± 0.5 e 1.7 ± 0.6 g/dL β globulina; e 1.8 ± 0.5 e 1.5 ± 0.5 g/dL para g globulina. No verão foi observado aumento significativo da AST (p < 0,05) e diminuição significativa do ácido úrico (p < 0,05). Na eletroforese de proteína sérica, houve um aumento significativo da fração a globulina (p < 0,05) na mesma estação. Para as outras variáveis não foram obtidas diferenças significativas entre as estações. De acordo com os resultados, é importante considerar o período do ano na interpretação de alguns exames bioquímicos desses animais.