RESUMEN
Among the fungus that attack the common bean crop there is Fusarium solani f.sp. phaseoli (Fsp), causing major losses. Taking into account its importance, the objective of this work was to determine the secondary metabolites class and the potential fungicide of the Pouteria ramiflora leaves on Fsp. The ethanol extract was dissolved in methanol/water and partitioned successively with hexane, dichloromethane, chloroform, ethyl acetate and butanol, subjected to the chemical profile. The solutions were prepared in concentrations of 800, 1200, 1600, 2000 and 2400 µ g/mL and poured into Petri dishes; then, 0.5 cm disc of diameter with spores and mycelia of Fsp was deposited. These dishes were incubated in temperature of 25 ± 2 °C and the evaluations, performed by measuring the colonies diameter (five replications) until reaching the dishes border (three days) with a completely randomized experimental design. Through the Mycelial Index Growth Speed (MIGS) data, analysis of variance was performed and when significant, applied the regression analysis. The results indicated that all fractions and the extract have the phenolic compounds and/or derivatives as one of the major constituents except the hydroethanolic fraction. The extract and its fractions decreased the Fsp MIGS, in the same proportion in which concentrations were increased; the greatest reduction occurred in the butanol fraction at the concentration of 2400 µg/mL, with growth close to zero, indicating its potential use for the Fsp control, probably due to the presence of anthraquinones.
Entre os fungos que acometem a cultura do feijão está Fusarium solani f.sp. phaseoli, causando perdas na produtividade. Levando-se em consideração sua importância, o objetivo deste trabalho foi determinar a classe de metabólitos secundários e o potencial fungicida das folhas de curriola (Pouteria ramiflora) sobre F. solani, em condições de laboratório. O extrato etanólico foi dissolvido em metanol/água e particionado sucessivamente com hexâno, diclorometano, clorofórmio, acetato de etila e butanol, submetidos ao perfil químico. As soluções foram preparadas nas concentrações de 800, 1200, 1600, 2000 e 2400 µ g/mL evertidas em placas de petri (10 mL); em seguida, foi depositado um disco de 0,5 cm de diâmetro com esporos e micélio de F. solani. As placas foram incubadas a temperatura de 25 ± 2 °C e as avaliações, realizadas por meio da medição do diâmetro das colônias (cinco repetições) até atingir a borda da placa (três dias), com delineamento experimental inteiramente casualizado. Através dos dados do Índice de Velocidade de Crescimento Micelial (IVCM), foi realizada a análise de variância e quando significativa, aplicada a análise de regressão. Os resultados indicaram que todos as frações e o extrato possuem os compostos fenólicos e/ou derivados como um dos constituintes majoritários, exceto a fração hidrometanólica. O extrato e suas frações diminuíram o IVCM de F. solani, à medida que se aumentava as concentrações; a maior redução ocorreu na fração butanolica para a concentração de 2400 µ g/mL, com crescimento próximo a zero, indicando seu potencial de uso para controle de F. solani, provavelmente devido a presença de antraquinonas em sua composição.
Asunto(s)
Flavonoides , Phaseolus , Fitoquímicos , HongosRESUMEN
A análise de características morfológicas e culturais podem não ser suficientes para uma caracterização precisa das espécies de Trichoderma e Fusarium. Objetivou-se, neste trabalho, caracterizar a região do Espaço Interno Transcrito (ITS) do rDNA dos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma spp. utilizados no biocontrole de Fusarium oxysporum f. sp. chrysanthemi (isolado) UFSMF6. A extração de DNA de cada isolado foi realizada a partir de micélio produzido em meio líquido Batata-Dextrose. As amostras de DNA genômico foram submetidas à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) com os oligonucleotídeos iniciadores universais ITS1 e ITS4 e o produto gerado foi sequenciado. Os fragmentos gerados pela amplificação da PCR foram tratados com as enzimas de restrição HaeIII, HinfI e MboI. As regiões ITS1, ITS2 e 5.8S do rDNA desses isolados fúngicos foram amplificadas com sucesso. A região ITS dos isolados UFSMT15.1, UFSMT16 e UFSMT17 de Trichoderma e o isolado UFSMF6 de Fusarium apresentaram uma banda simples com um fragmento de aproximadamente 600 pares de base (pb). As enzimas de restrição HaeIII, HinfI e MboI geraram polimorfismo de bandas entre os isolados. Com base nas análises da sequência de DNA, os isolados UFSMT15.1, UFSMT16, UFSMT17 e UFSMF6 apresentaram maior similaridade com as espécies Trichoderma koningiopsis, Hypocrea virens, Hypocrea lixii e Fusarium oxysporum, respectivamente.
The analysis of morphological and cultural characteristics may not enough for the characterization of the species of Trichoderma and Fusarium. The aim of this work was to characterize the Internal Transcribed Spacer (ITS) region of the rDNA of UFSMT15.1, UFSMT16 and UFSMT17 isolates of Trichoderma spp. used in the biocontrol of Fusarium oxysporum f. sp. chrysanthemi UFSMF6. DNA extraction of each isolate was accomplished starting from hyphae produced in liquid medium Potato-Dextrose-Agar. The samples of genomic DNA were submitted to the Polymerase Chain Reaction (PCR) with the primers ITS1 and ITS4, and the product was sequenced. The fragments generated from PCR amplification were digested with the restriction enzymes HaeIII, HinfI and MboI. The ITS region of the Trichoderma's isolates UFSMT15.1, UFSMT16 and UFSMT17 and the Fusarium UFSMF6 isolate showed a simple band with a fragment with 600 base pairs (bp) approximately. The restriction enzymes HaeIII, HinfI and MboI generated band polymorphism among the isolates. The isolates UFSMT15.1, UFSMT16, UFSMT17 and UFSMF6 showed high similarity whit Trichoderma koningiopsis, Hypocrea virens, Hypocrea lixii and Fusarium oxysporum species, respectively.