Teste do soro autólogo em urticária crônica espontânea na criança / Autologous serum skin test in children with chronic spontaneous urticaria

Objetivos: Verificar a reatividade ao teste do soro autólogo em crianças com urticária crônica espontânea e analisar a relação entre o teste do soro autólogo, as características clínicas e o tratamento utilizado nesses pacientes. Método: Este estudo transversal analisou resultados de testes cutâneos com soro autólogo dos pacientes. Foram incluídas crianças com urticária crônica espontânea nos últimos 12 meses, submetidas ao teste do soro autólogo entre agosto/2001 a junho/2012. Soro autólogo (0,05 mL) foi injetado via intradérmica e reações interpretadas após 30 minutos. Medicações que pudessem suprimir a resposta cutânea foram suspensas por 7 dias antes da realização do teste cutâneo. Todos os pacientes foram investigados detalhadamente para urticária crônica e outras doenças. As crianças foram consideradas não responsivas ao tratamento se submetidas ao uso oral de anti-histamínicos em doses habituais, com persistência dos sintomas por no mínimo 3 meses. Resultados: Foram incluídos 57 pacientes (61,4% meninos), com mediana de 10,6 anos (3,7-17,1 anos). Trinta pacientes (53%) apresentaram teste do soro autólogo positivo e 21 destes (70%) não responderam ao tratamento habitual (p < 0,001). Pacientes com teste do soro autólogo positivo apresentaram maior frequência de sintomas, com 1,5 episódios/mês (p = 0,04). Quatorze por cento das crianças apresentaram níveis altos de anticorpo antiperoxidase e 16,6% níveis altos de anticorpo antitireoglobulina. Houve relação significativa entre os altos títulos de anticorpo antiperoxidase com a positividade ao teste do soro autólogo (p = 0,02). Conclusões: A frequência de reatividade ao teste do soro autólogo foialta, sugerindo que o teste deve ser realizado rotineiramente em crianças com urticária crônica espontânea. Pacientes com teste do soro autólogo positivo apresentaram maior chance de não responder ao tratamento habitual.

Objectives: To investigate reactivity to the autologous serum skin test in children with chronic spontaneous urticaria and to analyze the relationship between test results and clinical characteristics and treatment response in these patients. Method: This cross-sectional study analyzed the results of skin tests performed with autologous serum obtained from the patients. Children showing chronic spontaneous urticaria in the past 12 months and subjected to autologous serum skin testing between August 2001 and June 2012 were included. Autologous serum (0.05 mL) was injected intradermally and reactions interpreted after 30 minutes. Medications that could suppress skin response were with held for 7 days prior to skin testing. All patients underwent a thorough workup for chronic urticaria and other illnesses. Children were considered non-responsive if chronic spontaneous urticaria persisted for at least 3 months under regular doses of oral anti-histamines. Results: Fifty seven children were included (61.4% males), with a median age of 10.6 years (3.7-17.1 years). Thirty patients (53%) had positive autologous serum skin tests; of these, 21 (70%) did not respond to treatment (p < 0.001). Patients with a positive autologous serum skin test showed.

Comparison of autologous serum with a commercial product as an adjunct in the treatment of uncomplicated corneal ulceration in dogs / Comparación de suero autólogo con un producto comercial como complemento en el tratamiento de úlceras corneales no complicadas en caninos / Comparação de soro autólogo com um produto comercial, como adjuvante no tratamento de úlcera de córnea não complicada em cães

Corneal ulcers are among the most common presentations of ocular ailments in dogs. Objective: this study compares the efficacy of a commercial ointment based on vitamin A, E and hydrolyzed casein, with the use of autologous serum eyedrops in the re-epithealization of uncomplicated corneal ulcers. Methods: forty-one dogs with superficial corneal ulcers, and otherwise healthy, were enrolled in the study and randomly allocated into two groups. They all received standard therapy based on antimicrobial eye drops of ciprofloxaxin and use of an Elizabethan collar. With prior owner consent, blood samples were taken from group A, allowed clotting, and serum separated and stored in sterile containers for use topically on the affected eye. In addition to the standard therapy, patients received either 2 drops of autologous serum (group A) or 1 cc of the re-epitelializing ointment (group B) every hours 6 hours, and 10 minutes following the antimicrobial drops. Healing was monitored by measuring the wound size with calipers on days 3 and 7 of the follow-up, and a Mann-Whithey test was used to compare both groups (SAS, version 9.1). Results: no significant differences were observed between groups in the re-epithelization process. On day 3, the reduction of the disepithelialized area was 1.47 ± 1.42 and 1.26 ± 0.99 mm for groups A and B, respectively. By day 7, the average decrease was 0.94 ± 0.77 and 1.42 ± 1.21 mm for groups A and B, respectively. Conclusion: autologous serum was as effective as a commercial re-epithelializing ointment to treat uncomplicated corneal ulcer in dogs.

Las afecciones del globo ocular son frecuentes en pequeños animales, siendo la úlcera corneal una de las presentaciones más comunes. Objetivo: en este trabajo se comparó la eficacia del suero autólogo frente a un ungüento oftálmico a base de vitaminas A, E y caseína hidrolizada, en el tiempo de reepitelización de ulceras no complicadas en caninos. Métodos: para el estudio se formaron dos grupos aleatorios de 21 pacientes cada uno, que presentaban ulceras superficiales en grado I y II. Previo consentimiento del propietario, al grupo A se extrajo sangre para obtención del suero que posteriormente se aplicaría en forma de gotas tópicas en el ojo afectado. Ambos grupos recibieron terapia estándar antimicrobiana en forma de gotas de ciprofloxaxina y uso de collar isabelino. A los 10 minutos de instalar el antimicrobiano, se hicieron aplicaciones tópicas cada 6 horas, de 2 gotas de suero autólogo (grupo A) o de 1 cc del ungüento reepitelizante (grupo B). La respuesta se evaluó mediante dos mediciones del tamaño de la úlcera a los 3 y 7 días de iniciar el tratamiento. Como método estadístico se empleó el contraste de Mann Whithey con base en un 95% de confiabilidad para las variables de disminución de la úlcera corneal y el tiempo de curación (SAS versión 9.1). Resultados: no hubo diferencias significativas al día 3 con respecto a la disminución del tamaño de la úlcera corneal, que fue del 1.47 ± 1.42 mm y 1.26 ± 0.99 mm para los grupos A y B, respectivamente. Al día 7, la media de disminución fue de 0.94 ± 0.77 mm para el grupo A, y de 1.42 ± 1.21 mm para el B, sin haber diferencias estadísticas. Conclusión: los resultados permiten concluir que el suero autólogo es igual de efectivo que el ungüento comercial epitelizante como complemento en el tratamiento de la úlcera corneal no complicada en caninos.

As afecções dos olhos são comuns na prática de pequenos animais, das quais a úlcera de córnea é uma das apresentações mais comuns. A pesquisa consistiu em comparar um produto comercial com o soro autólogo como coadjuvante no tratamento de úlcera de córnea, e determinar após a pesquisa qual sería o tratamento mais adequado. Além disto, esperava-se determinar qual tratamento permitía reduzir mais o tamanho das úlceras de córnea não complicada em cães. Métodos: formaram-se dois grupos de 21 indivíduos cada um; o grupo A recebeu antibiótico tópico mais soro autólogo, e o B recebeu o mesmo antibiótico mais a preparação comercial (epitelizante). A resposta ao tratamento foi avaliada através de duas medidas do tamanho da úlcera. O método estatístico utilizado foi o teste de Mann-Whitney, com uma confiabilidade de 95% para as variáveis de redução da úlcera de córnea e de tempo. Para a análise dos dados foi empregado o software SAS versão 9.1. Resultados: a media no día 3 do tratamento para reduzir o tamanho médio de uma úlcera de córnea foi de 1.47 ± 1.42 mm para o tratamento A e 1.26 ± 0.99 mm para o B, não se encontrou diferença estatística entre os tratamentos (p>0.05); no dia 7 a redução média no tratamento A foi de 0.94 ± 0.77 mm e 1.42 ± 1.21 mm para o B, neste caso, também não houve diferença estatística entre os tratamentos (p>0.05). Em nenhuma das amostras cultivadas encontrou-se contaminação microbiana. Conclusõe: nós concluímos que o soro autólogo é tão eficaz quanto o produto comercial epitelizante como adjuvante no tratamento de úlcera de córnea não complicada em cães. Também foi observado que a preparação do soro autólogo pode ser utilizada por um período máximo de sete días sob refrigeração sem ter problemas de contaminação microbiológica.

CD63 e CD123 expressão, autoanticorpos IgG e acurácia do teste do soro autólogo em pacientes com urticária crônica / CD63 and CD123 expression, IgG autoantibody and accuracy of autologous serum test in patients with chronic urticaria

INTRODUÇÃO: Na urticária crônica (UC), o teste cutâneo do soro autólogo (TCSA) pode sugerir a etiologia autoimune. Recentemente, uma nova técnica laboratorial denominada teste de ativação de basófilos (TAB) vem sendo utilizada para esse diagnóstico. OBJETIVOS: Analisar o TCSA em relação ao TAB, assim como avaliar os receptores da interleucina 3 (IL3) (CD123) e a presença de autoanticorpos da classe de imunoglobulina G (IgG) inespecíficos ligados aos basófilos de pacientes com UC. MÉTODOS: Estudamos 33 adultos com UC espontânea com idade média de 42,5 + 14 anos. Por meio da citometria de fluxo foi feita a análise da expressão das moléculas CD63 em basófilos de um doador atópico após o estímulo pelo soro dos pacientes com UC. Também realizamos a pesquisa da expressão da molécula CD123 e de autoanticorpos IgG inespecíficos. RESULTADOS: O odds ratio (OR) entre o TCSA e o TAB foi de 1 (intervalo de confiança [IC] 95 por cento: 0,22-4,5). O TCSA para o diagnóstico da UC autoimune mostrou acurácia de 54,5 por cento, sensibilidade de 66 por cento, especificidade de 33 por cento, valor preditivo positivo de 63 por cento e valor preditivo negativo de 36 por cento. Não houve diferença estatística entre os grupos estudados quanto à média de expressão dos anticorpos IgG inespecíficos e das moléculas CD123 (para um p < 0,05). DISCUSSÃO: Este estudo demonstrou baixa precisão do TCSA no diagnóstico da UC autoimune; o grupo de pacientes com TCSA positivo não mostrou diferença estatística em relação ao grupo com TCSA negativo nos demais aspectos analisados. CONCLUSÃO: Pelos poucos estudos existentes e pela relevância do assunto, acreditamos na necessidade de mais estudos abordando esses aspectos.

INTRODUCTION: The autologous serum skin test (ASST) may suggest an autoimmune etiology in chronic urticaria (CU). A new laboratory technique called basophil activation test (BAT) has been currently employed for its diagnosis. OBJECTIVE: To analyze ASST in relation to BAT as well as to evaluate interleukin 3 (IL3) receptors (CD123) and non-specific immunoglobulin G (IgG) autoantibodies bound to basophils in patients with chronic urticaria. METHODS: We studied 33 adults with CU and mean age of 42.5 + 14 years. After stimulation by serum from patients with CU, CD63 expression on basophils from one atopic donor was analyzed by flow cytometry. Furthermore, we investigated CD123 and IgG autoantibody expressions. RESULTS: The odds ratio (OR) between ASST and BAT was 1.00 (95 percent confidence interval [CI]: 0.22 to 4.5). The ASST for autoimmune CU diagnosis showed an accuracy of 54.5 percent, sensitivity of 66 percent, specificity of 33 percent, positive predictive value of 63 percent, and negative predictive value of 36 percent. There was no statistical difference between the studied groups as to mean non-specific IgG and CD123 expressions (for a p < 0.05). DISCUSSION: This study demonstrated that ASST has low accuracy in the diagnosis of autoimmune CU. Concerning other analyzed aspects, there was no statistical difference between positive ASST and negative ASST. CONCLUSIONS: Due to insufficient studies in this area and the relevance of this issue, further investigation is required.

Teste do soro autólogo na urticária crônica / Autologous serum skin testing in chronic urticaria

Objetivo: A associação entre urticária crônica e autoimunidade tem sido bem documentada. São encontrados autoanticorpos séricos contra receptores de IgE ou contra IgE aderidos a basófilos e mastócitos cutâneos. O teste do soro autólogo é recomendado nas urticárias idiopáticas, para detecção de tais anticorpos, apresentando cerca de 40% de positividade. A urticária crônica pode ter múltiplos fatores etiológicos. É provável que a autoimunidade atue concomitantemente a estímulos físicos e outras causas, diminuindo o limiar de degranulação de mastócitos. Isso poderia ocasionar doença de maior gravidade. Realizamos um estudo com o objetivo de verificar a frequência de positividade no teste do soro autólogo em um grupo de pacientes com urticária crônica. Métodos: Estudo retrospectivo a partir da avaliação de prontuários de pacientes com urticária crônica, submetidos ao teste do soro autólogo, durante o período de 37 meses (junho de 2003 a junho de 2006). Resultados: Foram avaliados 175 pacientes com urticária crônica. A frequência de positividade foi de 62,4% (111 pacientes), sendo 83 do sexo feminino e 28 do sexo masculino. Entre os pacientes com urticária idiopática, 50/72 (69,5%) apresentaram resultado positivo; entre as urticárias físicas (dermografismo, pressão tardia, calor, frio, colinérgica), 61/103 (59,3%) apresentaram positividade ao teste do soro autólogo. Conclusão: A frequência de positividade ao teste do soro autólogo foi elevada, tanto entre os pacientes com urticária crônica idiopática, sugerindo uma etiologia autoimune, quanto entre aqueles com a etiologia definida, tais como nas urticárias físicas.

Objective: The association between chronic urticaria and autoimmunity has been widelly documented. Auto-antibodies have been found against IgE receptors or against IgE attached to basophils and skin mast cells. The autologous serum skin testing has been recommended in idiopathic urticaria for detection of those antibodies, with approximately 40% positive results. Chronic urticaria may have multiple etiologic factors. Autoimmunity is probably a concurrent factor to physical stimuli, among others causes, in triggering the disease by decreasing the degranulation threshold of mast cells, which could lead to more severe disease. In order to investigate the frequency of positivity in the autologous serum skin testing a trial was carried out in a group of outpatients with chronic urticaria. Methods: Retrospective study based on medicai records assessment of outpatients with chronic urticaria who underwent autologous serum skin testing in a 37-month trial span (June 2003 to June 2006). Results: 175 outpatients with chronic urticaria were evaluated, with 62,4% (111 patients - 83 female and 28 male) positive to the autologous serum sking testing. Among patients with idiopathic urticaria, 50/72 (69.5%) showed positive results; among physical urticarias (dermographism, delayed pressure, heat, cold, cholinergic), 61/103 (59.3%) were positive to the autologous serum skin testing. Conclusion: Positive rates to the autologous serum skin testing were high, among patients with chronic idiopathic urticaria, suggesting an autoimmune etiology, as those with well defined etiology, such as physical urticarias.

Perfil de ativação de basófilos e evidência de fatores liberadores de histamina na urticária crônica idiopática / Basophils activation profile and evidence of histamine release factor in chronic idiopathic urticaria

INTRODUÇÃO: A Urticária Crônica é caracterizada pelo aparecimento de pápulas eritematosas, pruriginosas recorrentes e transitórias que duram por mais de seis semanas. Na maioria dos pacientes a causa é indeterminada, definida como idiopática (UCI), entretanto, um sub-grupo apresentam autoanticorpos contra a cadeia alfa do receptor de alta afinidade para IgE (FceRI), que são expressos na superfície de mastócitos e basófilos, tornando-os células alvo nesta doença. OBJETIVOS: Avaliar em pacientes com UCI, submetidos ao teste intradérmico de soro autólogo (ASST), o perfil de ativação dos basófilos, pela intensidade de expressão de marcadores de ativação/desgranulação e pela capacidade dos basófilos em responder aos estímulo com a IL-3 e anticorpo anti-IgE. Além disto, a presença de fator liberador de histamina foi avaliado nos soros dos pacientes. METODOLOGIA: Pacientes com UCI (n= 37) foram selecionados no Ambulatório de Urticária do Departamento de Dermatologia do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina da USP e submetidos ao ASST. O grupo controle foi constituído por indivíduos saudáveis (n=38). A análise da expressão de FceRI, CD63, CD123 e CD203c em basófilos de sangue periférico foi realizada por citometria de fluxo. No ensaio in vitro de estimulação dos basófilos com anti-IgE, as células foram previamente incubadas com IL-3. O ensaio de liberação de histamina mediada por soros de pacientes com UCI foi realizado com três diferentes doadores de leucócitos e a histamina liberada dosada por ELISA de competição. RESULTADOS: Há um baixo número de basófilos no sangue periférico nos pacientes com UCI, coincidente com o baixo nível sérico de histamina. Os escassos basófilos no sangue periférico mostram elevada expressão de FceRI e uma regulação positiva da expressão de CD203c e CD63, independentemente do ASST. A análise funcional dos basófilos, mostra que somente a incubação com IL-3 recombinante já induz aumento significante da expressão de CD203c...

INTRODUCTION: Chronic Urticaria is characterized by recurrent, transitory, pruritic and erythematous wheals present for at least six weeks. In most patients the cause is unknown, defined as idiopathic (CIU), however, a sub-group has autoantibodies against the alfa chain of the high affinity IgE receptor (FceRIa) expressed on mast cells and basophils surface making it the target cells in this disease. OBJECTIVES: To evaluate in CIU patients, undergone autologous serum skin test (ASST), the activation profile of the basophils assessed by the expression of activation/degranulation markers and by the ability to release histamine in response to IL-3 priming and cross-linking with anti-IgE antibodies. Furthermore, the presence of histamine releasing factor in sera of patients was evaluated. METHODS: CIU patients (n = 37) were selected from the Dermatological Outpatient Clinic of the Hospital das Clínicas de São Paulo (HC-FMUSP) and submitted to the ASST. The control group consisted of healthy subjects (n=38). The analysis of the expression of FceRI, CD63, CD123 and CD203c on basophils from peripheral blood was assessed by flow cytometry. For the in vitro stimulation with anti-IgE antibodies, the cells were previously primed with human recombinant IL-3. The histamine release assay mediated by sera from patients with CIU was performed with three different donors of leukocytes and released histamine measured by competition ELISA. RESULTS: There is a low number of basophils in peripheral blood of patients with CIU, reflecting a low serum levels of histamine. The scarce basophils in peripheral blood show high expression of FceRI and an up-regulation of CD203c and CD63 marker expression, independently of the ASST. The functional analysis of basophils, revealed that recombinant IL-3 per se induces a significant increase in CD203c expression and the histamine release from basophils of patients with CIU, which are enhanced followed for 15 and 40 minutes...