Autologous platelet-rich plasma action on skin autografts in horses / Ação do plasma rico em plaquetas autólogo em autoenxertos de pele em equinos

ABSTRACT: This study evaluated the action of autologous platelet-rich plasma (PRP) on cutaneous wounds, containing skin autografts, in the gluteal region of horses. Seven healthy horses were used. Two 6 x 6cm cutaneous wounds were produced on each side of the gluteal region. Eight days after wound induction, grafts were performed with skin fragments harvested from the neck, as well as the application of PRP, prepared by double-centrifugation protocol. Wounds with autografts on the left side received PRP (group T), and those with autografts on the right side did not receive treatment (group C). Macroscopic and microscopic evaluations were performed, considering the integration of autografts and retraction of wound edges, as well as neovascularization, inflammatory infiltrate, young fibroblasts, collagenization, reepithelization and autografts integration. There was no difference between the groups (P > 0.05) in relation to most macroscopic and microscopic variables. However, neovascularization was significantly greater (p = 0.0191) in group T, on the 14th day after grafting. It is concluded that PRP favors the process of skin repair with autografts in horses, since it increases the neovascularization in the initial phase of wound healing. Furthermore, the PRP seems to positively influence the integration of the skin autografts and the retraction of the wound edges.

RESUMO: Este estudo avaliou a ação do plasma rico em plaquetas (PRP) autólogo em feridas cutâneas, contendo autoenxertos de pele em equinos. Foram utilizados sete equinos hígidos, nos quais foram produzidas duas feridas cutâneas de 6 x 6cm, em cada um dos lados da região glútea. Oito dias após a indução das feridas, foram realizados enxertos com fragmentos de pele colhidos do pescoço, assim como a aplicação do PRP, preparado através de protocolo de dupla centrifugação. As feridas com autoenxertos do lado esquerdo receberam PRP (grupo T), e as com autoenxertos do lado direito não receberam tratamento (grupo C). Foram realizadas avaliações macroscópica e microscópica, considerando as variáveis integração dos autoenxertos e retração das bordas da ferida, além de neovascularização, infiltrado inflamatório, fibroblastos jovens, colagenização, reepitelização e integração dos autoenxertos. Não houve diferença entre os grupos (p > 0,05) em relação à maioria das variáveis macroscópicas e microscópicas. Contudo, a neovascularização foi significativamente maior (P = 0,0191) no grupo T, no 14º dia após a realização da enxertia. Conclui-se que o PRP favorece o processo de reparo da pele com autoenxertos em equinos, já que aumenta a neovascularização na fase inicial da cicatrização da ferida. Ainda, o PRP parece influenciar positivamente a integração dos autoenxertos de pele e a retração das bordas da ferida.

Cirurgia do periápice para remoção de lesões granulomatosas: relato de caso / Periapical surgery to remove granulomatous lesion

Periapical granuloma is a histological term that refers to the formation of a mass of granulomatous tissue around the apex of a tooth resulting from inflammation and necrosis of the pulp tissue. It consists of an infiltrate of inflammatory cells such as macrophages, plasmocytes and lymphocytes, as well as fibroblasts, collagen fibers and capillaries. Periapical surgery is an alternative for preserving the tooth in the oral cavity in cases where periapical inflammation is persistent even after treatment of root canals. The objective of this study was to report a clinical case in which the surgical technique was used to remove granulomatous lesions from a patient, female, with a history of recurrent periapical abscess without painful symptomatology in the region of the anterior 11,12 and 13 teeth. The histopathological exam demonstrated the presence of a granulomatous tissue with intense inflammatory infiltrate mixed, permeated with lymphocytes and high number of plasmocytes, confirming the diagnosis of periapical granuloma. The treatment was considered successful since the patient remained asymptomatic and there was incorporation of the inorganic bovine bone graft and initiation of bone neoformation in the periapical region.

Granuloma periapical é um termo histológico que refere-se à formação de uma massa de tecido granulomatoso ao redor do ápice de um dente, decorrente da inflamação e necrose do tecido pulpar. É constituído por um infiltrado de células inflamatórias como macrófagos, plasmócitos e linfócitos, além de fibroblastos, fibras colágenas e capilares. A cirurgia do periápice é uma alternativa para preservação do dente na cavidade bucal nos casos em que a inflamação periapical é persistente mesmo após tratamento dos canais radiculares. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico no qual a técnica cirúrgica do periápice foi utilizada para remoção de lesões granulomatosas de uma paciente, do sexo feminino, com histórico de abscesso periapical recidivante sem sintomatologia dolorosa na região dos dentes anteriores superiores 11, 12 e 13. O exame histopatológico demonstrou a presença de um tecido granulomatoso com intenso infiltrado inflamatório misto, permeado com linfócitos e elevado número de plasmócitos, confirmando o diagnóstico de granuloma periapical. O tratamento foi considerado exitoso, visto que a paciente se manteve asintomática e houve incorporação do enxerto ósseo bovino inorgânico e início da neoformação óssea na região periapical.

Endoscopic observation of different repair patterns in human traumatic tympanic membrane perforations / Observação endoscópica de diferentes padrões de reparo em perfurações humanas traumáticas da membrana timpânica

Abstract Introduction: In the last decade, there has been an increasing use of biomaterial patches in the regeneration of traumatic tympanic membrane perforations. The major advantages of biomaterial patches are to provisionally restore the physiological function of the middle ear, thereby immediately improving ear symptoms, and act as a scaffold for epithelium migration. However, whether there are additional biological effects on eardrum regeneration is unclear for biological material patching in the clinic. Objective: This study evaluated the healing response for different repair patterns in human traumatic tympanic membrane perforations by endoscopic observation. Methods: In total, 114 patients with traumatic tympanic membrane perforations were allocated sequentially to two groups: the spontaneous healing group (n = 57) and Gelfoam patch-treated group (n = 57). The closure rate, closure time, and rate of otorrhea were compared between the groups at 3 months. Results: Ultimately, 107 patients were analyzed in the two groups (52 patients in the spontaneous healing group vs. 55 patients in the Gelfoam patch-treated group). The overall closure rate at the end of the 3 month follow-up period was 90.4% in the spontaneous healing group and 94.5% in the Gelfoam patch-treated group; the difference was not statistically significant (p > 0.05). However, the total average closure time was significantly different between the two groups (26.8 ± 9.1 days in the spontaneous healing group vs. 14.7 ± 9.1 days in the Gelfoam patch-treated group, p < 0.01). In addition, the closure rate was not significantly different between the spontaneous healing group and Gelfoam patch-treated group regardless of the perforation size. The closure time in the Gelfoam patch-treated group was significantly shorter than that in the spontaneous healing group regardless of the perforation size (small perforations: 7.1 ± 1.6 days vs. 12.6 ± 3.9, medium-sized perforations: 13.3 ± 2.2 days vs. 21.8 ± 4.2 days, and large perforations: 21.2 ± 4.7 days vs. 38.4 ± 5.7 days; p < 0.01). Conclusion: In the regeneration of traumatic tympanic membrane perforations, Gelfoam patching not only plays a scaffolding role for epithelial migration, it also promotes edema and hyperplasia of granulation tissue at the edges of the perforation and accelerates eardrum healing.

Resumo Introdução: Na última década, houve um uso crescente de placas biomateriais na regeneração de perfurações traumáticas da membrana timpânica. As principais vantagens das placas de biomateriais são restaurar provisoriamente a função fisiológica da orelha média, assim melhoram imediatamente os sintomas da orelha e atuam como um suporte para a migração do epitélio. No entanto, não se sabe se há efeitos clínicos adicionais na regeneração do tímpano em relação ao fragmento de material biológico. Objetivo: Avaliar a resposta de cicatrização para diferentes padrões de reparo em perfurações de membrana timpânica traumáticas humanas por meio de observação endoscópica. Método: Foram alocados 114 pacientes com perfurações de membrana timpânica traumáticas sequencialmente para dois grupos: o de cicatrização espontânea (n = 57) e o tratado com esponja de Gelfoam (n = 57). A velocidade de fechamento, o tempo de fechamento e a taxa de otorreia foram comparados entre os grupos aos três meses. Resultados: Foram analisados 107 pacientes nos dois grupos (52 no de cicatrização espontânea e 55 no tratado com esponja de Gelfoam). A velocidade global de fechamento no fim do período de seguimento de três meses foi de 90,4% no grupo de cicatrização espontânea e de 94,5% no grupo tratado com esponja de Gelfoam; a diferença não foi estatisticamente significativa (p > 0,05). No entanto, o tempo total médio de fechamento foi significativamente diferente entre os dois grupos (26,8 ± 9,1 dias no de cicatrização espontânea versus 14,7 ± 9,1 dias no tratado com esponja de Gelfoam, p < 0,01). Além disso, a velocidade de fechamento não foi significativamente diferente entre o grupo de cicatrização espontânea e o grupo tratado com esponja de Gelfoam, independentemente do tamanho da perfuração. O tempo de fechamento no grupo tratado com esponjas de Gelfoam foi significativamente menor do que no grupo de cicatrização espontânea, independentemente do tamanho da perfuração (pequenas perfurações: 7,1 ± 1,6 dias vs. 12,6 ± 3,9, perfurações de tamanho médio: 13,3 ± 2,2 dias vs. 21,8 ± 4,2 dias e grandes perfurações: 21,2 ± 4,7 dias vs. 38,4 ± 5,7 dias; p < 0,01). Conclusão: Na regeneração de PMT traumáticas, a esponja de Gelfoam não só desempenha um papel de estrutura para a migração epitelial, mas também promove edema e hiperplasia de tecido de granulação nas bordas da perfuração e acelera a cicatrização do tímpano.

Criocirurgia no tratamento do tecido de granulação hipetrófico nas feridas cutâneas / Cryosurgery in the treatment of hypertrophic granulation tissue in cutaneous wounds

Introdução: A criocirurgia é uma forma segura e eficaz de tratamento que utiliza o nitrogênio líquido para destruição tecidual. Objetivo: Demonstrar a eficiência da criocirurgia no tratamento do tecido de granulação hipertrófico nas feridas cutâneas. Métodos: As feridas com tecido de granulação hipertrófico foram tratadas com o nitrogênio em spray aplicado a uma distância de 5cm da área em ângulo de 90º.O tempo de congelamento foi de 02 ciclos de 05 segundos e o número de sessões variou de 01 ou 03. A avaliação dos resultados foi feita através de comparação semanal, clínica e fotográfica, alem de mensuração da área das feridas e do tecido de granulação hipertrófico, através de um planímetro, até que se completasse o processo de cicatrização. Os resultados foram analisados estatisticamente. Resultados: Foram tratados 20 pacientes com feridas cutâneas localizadas na cabeça, tronco e membros. A média do percentual de redução semanal em relação à área inicial foi de 32,5%. Os resultados tiveram significância estatística. Conclusões: A criocirurgia é um método prático, de baixo custo e pouco invasivo, podendo ser indicada para o tratamento do tecido de granulação hipertrófico nas feridas cutâneas.

Introduction: Cryosurgery is a safe and effective treatment modality that uses liquid nitrogen for tissue destruction. Objective: To demonstrate the effectiveness of cryosurgery in the treatment of hypertrophic granulation tissue in cutaneous wounds. Methods: Cutaneous wounds with hypertrophic granulation tissue were treated with the nitrogen spray applied from a distance of 5cm from the area to be treated, at a 90º angle. The freezing time was two 5-second cycles and the number of sessions ranged from 1 to 3. The assessments of results were based on weekly clinical and photographic comparisons, as well on the measurement of the wound's and hypertrophic granulation tissue's areas using a planimeter, up until the healing process was completed. The results were statistically analyzed. Results: Twenty patients with cutaneous wounds located on the head, trunk and limbs were treated. The average weekly percentage reduction compared to the baseline area was 32.5%. The results were statistically significant. Conclusions: Cryosurgery is a practical, cost effective and non-invasive method and can be indicated for the treatment of hypertrophic granulation tissue in cutaneous wounds.

Comparing open wound measuring methods popularly used in experimental studies / Estudo comparativo de métodos de avaliação de contração de feridas cutâneas abertas

Tissue repair is a response reaction to lesions and aggressions that constitutes a dynamic process to maintain the integrity of the organism. Wound healing experiments have used several approaches in order to assess and compare treatment methods, and these discrepancies hamper comparisons among assays. This study assessed three different methods of wound measurement commonly used in healing assays: clock method, graph paper method, and computer-assisted image analysis. We used 30 Wistar rats, kept in appropriate conditions for animal well-being. After anesthesia, and using an eight-millimeter punch, two lesions were made in the back region of each rat. The wounds were assessed on days four, seven, and 14 after infliction. At four days, all methods generated similar results. By day seven, the clock method had lost precision, likely due to wound shrinkage, and yielded greater means compared to the other two methods. On the last assessment, the computer-assisted method appeared to have more precise results, with the other two generating statistically higher means. Computer-assisted image analysis seems to have maintained wound measuring precision throughout this experiment, even when faced with small lesions. Considering these results, the authors recommend the use of computer-assisted measurements in future experiments.

O reparo tecidual surge em resposta às lesões e constitui-se de um processo dinâmico para manutenção da integridade do organismo. Nos estudos sobre cicatrização de feridas, tem se utilizado várias técnicas buscando-se uma avaliação da eficácia de meios de tratamento local. Sendo assim, o presente trabalho objetivou comparar três métodos de avaliação experimental de áreas de feridas, sendo eles: o método do relógio, papel milimetrado e avaliação computadorizada. Para realização do experimento, foram utilizados 30 ratos Wistar em condições de bem-estar. Após realizada a anestesia, foram confeccionadas duas lesões no dorso de cada animal com punch de 8 mm, sendo as feridas avaliadas após quatro, sete e 14 dias de tratamento. Observou-se que aos quatro dias de tratamento, todos os métodos apresentaram o mesmo desempenho, enquanto aos sete e 14 dias, o método do relógio, apresentou maior média de área, perdendo precisão, e aos 14 dias, a avaliação computadorizada apresentou resultados mais precisos em relação a ambos os outros métodos. Concluiu-se que a avaliação computadorizada através de software de áreas de feridas cutâneas apresenta resultados mais precisos em relação aos métodos do relógio e papel milimetrado, principalmente em lesões menores.

A double and paradoxical role for angiogenesis

Fibrogenesis and fibrolysis are constant and important features occurring during the pathology of schistosomiasis. New findings have recently indicated that granulation tissue (angiogenesis) is a dominating feature on both occasions. This review article discusses this apparently paradoxical feature displayed by angiogenesis (granulation tissue) during the pathology of schistosomiasis...

Um duplo e paradoxal papel para a angiogêneseFibrogênese e fibrólise são características constantes e importantes que ocorrem durante a patologiada esquistossomose. Novos achados têm indicado que o tecido de granulação (angiogênese) éuma característica dominante em ambas as ocasiões. Este artigo de revisão discute este papel,aparentemente paradoxal, desempenhado pela angiogênese (tecido de granulação), durante apatologia da esquistossomose...

Alterações no reparo tecidual cutâneo em um modelo de resistência à insulina / Resistant mice cutaneous wound healing alterations in insulin

A obesidade associada às alterações metabólicas, tais como a resitência à insulina, provoca significativas modificações no decorrer do processo de cicatrização. O objetivo desse estudo foi inicialmente avaliar os efeitos da resistência à insulina induzida por uma dieta com elevado teor de gordura durante o reparo tecidual. E, em seguida, investigar o papel dos macrófagos neste processo. Observamos que os animais submetidos à dieta hiperlipídica (RHL) tornaram-se intolerantes à glicose e resistentes à insulina, além de aumentarem as taxas plasmáticas de colesterol e triglicerídeos em relação aos animais alimentados com ração padrão (RP). O grupo RHL apresentou uma menor taxa de contração da lesão e reepitelização em relação ao grupo RP. Observamos ainda maior quantidade de células inflamatórias (células NOS 2-positivas, macrófagos, e neutrófilos), menor densidade de fibras do sistema colágeno e maior densidade de miofibroblastos e vasos sanguíneos no grupo RHL. O dano oxidativo estava maior no grupo RHL bem como a expressão proteica do fator de crescimento transformante-β1 (TGF-β1) e α-actina de músculo liso (α-SMA). O grupo RHL apresentou altos níveis plasmáticos de TNF-α quando comparado com o grupo RP. Além disso, a proporção das células M1 (macrófagos ativados classicamente) e M2 (macrófagos ativados alternativamente) foi a mesma em ambos os grupos. Em relação a síntese e liberação de citocinas e fatores de crescimento avaliados através dos ensaios in vitro, observamos ainda que os níveis do fator de necrose tumoral-α (TNF-α) e interleucina-1β (IL-1β) estavam maiores no meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RHL (MCRHL) em relacão ao meio condicionado de macrófagos isolados dos animais do grupo RP (MCRP). Além disso, os nossos resultados demonstraram claramente que os fatores solúveis produzidos por macrófagos isolados a partir de animais resistentes à insulina inibem a proliferação e a migração de fibroblastos. Através ...

Obesity associated with with metabolic alterations such as insulin resistance causes significant modifications during the healing process. Our aim was initially to analyse the effects of insulin resistance induced by a high- significant changes in skin combined fat diet during cutaneous wound healing. And then investigate the role of macrophages in this process. We observed that animals subjected to a high-fat diet (HFC) became glucose intolerant and insulin resistant and increased plasma cholesterol and triglycerides levels when compared to animals fed with a standard chow (SC). The HFC group had a lower rate of wound contraction and re-epithelialization than the SC group. Besides, HFC group presented a greater number of inflammatory cells (NOS 2- and F4/80-positive cells, and neutrophils), lower density of collagen fibers and higher density of myofibroblasts and blood vessels. Oxidative damage was greater in the HFC group as well as the protein expression of TGF-β1 and α-smooth muscle actin (α- SMA). The HFC group presented higher levels of plasma TNF-α when compared to RP group. Furthermore, the proportion of M1 cells (classically activated macrophages) and M2 (alternatively activated macrophages) was the same in both groups. Regarding to the synthesis and release of cytokines and growth factors evaluated by in vitro assays, we also observed that the levels of TNF-α and IL-1β were higher in conditioned medium of macrophages isolated from animals of HFC (MCHFC) group when compared to the conditioned medium of macrophages isolated from animals in of RP (MCSC) group. Furthermore, our results clearly demonstrate that soluble factors produced by macrophages isolated from insulin resistant animals inhibit the proliferation and migration of fibroblasts. Thus, we can show that insulin resistance delays wound healing process and suggest that the macrophages are involved in this delay

Avaliação da aspirina e do ácido cafeico fenetil ester sobre o reparo tecidual cutâneo / Assessment of aspirin and caffeic acid phenethyl ester on the cutaneous tissue repair

Numerosos modelos in vitro e in vivo foram desenvolvidos para estudar o reparo de lesões e identificar os mecanismos chave deste processo. Visando avaliar o processo de cicatrização utilizamos um modelo de lesão excisional total e um modelo de queimadura promovida por escaldamento. No estudo utilizando o modelo de lesão excisional total, abordamos o uso da aspirina (um inibidor não seletivo da COX) e seu efeito diferenciado sobre os sexos na cicatrização cutânea de camundongos. Observamos que os grupos fêmea controle e tratado apresentaram contração atrasada comparado aos grupos macho controle e tratado, respectivamente. Entre os grupos fêmea e macho controles, as fêmeas apresentaram menor atividade da mieloperoxidase e menor quantidade de células MIF-positivas do que os machos controle. Já entre os grupos fêmea e macho tratados, foi observado que nas fêmeas tratadas, a atividade da mieloperoxidase e a quantidade de macrófagos F4/80-positivos estavam maiores do que no grupo macho tratado. Ainda entre os grupos tratados, as fêmeas apresentaram menores níveis de hidroxiprolina e maior expressão proteica de vWF e VEGF comparado aos machos. No estudo das lesões causadas por queimadura, avaliamos as propriedades anti- inflamatórias e antioxidantes do ácido cafeico fenetil ester (CAPE) no reparo destas lesões e observamos que em 7, 14, 21 e 70 dias após a queimadura, o grupo queimado+CAPE apresentou menor área lesada, além de menor atividade da mieloperoxidase e dos níveis de nitrito do que o grupo queimado. Também foi observado que no grupo queimado+CAPE a expressão proteica de CD68 e de PECAM-1 estava reduzida comparada ao grupo queimado. Analisando os parâmetros de dano oxidativo foi observado que os níveis de MDA e de proteínas carboniladas estavam menores no grupo queimado+CAPE do que no grupo queimado, tanto no plasma quanto na lesão. Em suma, nosso estudo avaliou o processo de cicatrização de dois modelos de lesão, em roedores de diferentes espécies ...

Several in vitro and in vivo models have been developed to study wound healing and to identify key mechanisms of this process. The most of these studies use animals models to reproduce the human physiology and possible therapeutic treatments. In order to evaluate the wound healing process in different wound models, we use a full-thickness excisional wound model and a burn model promoted by scalding. In the full-thickness excisional wound study, we approach the aspirin use (COX non-selective inhibitor) and its distinct effect on the gender in cutaneous wound healing on mice. It was observed that both female control and treated groups presented smaller wound area than male control and treated groups, respectively. Between female and male control groups, the females presented smaller myeloperoxidase activity and MIF-positive cells than control males. Comparing female and male treated groups it was observed that in female treated group, the myeloperoxidase activity and the F4/80-positive macrophages amount were greater than male treated group. Also between the treated groups, the females presented smaller hydroxyproline levels and greater vWF and VEGF protein expression compared to the males. In study of the burns performed by scalding, it was evaluated the caffeic acid phenethyl ester (CAPE) anti-inflammatory and antioxidant properties on repair of these lesions. It was observed that at 7, 14, 21 and 70 days after burning, the burn+CAPE group presented smaller wound area, beyond smaller myeloperoxidase activity and nitrite levels than burn group. It was also observed that the burn+CAPE group presented smaller CD68 and PECAM-1 protein expression compared to burn group. Analyzing the oxidative damage parameters, it was observed that the MDA and carbonilated proteins levels were greater in the burn group compared to burn+CAPE group. In conclusion, our study evaluated the wound healing process in 2 wound models on distinct rodent species with distinct approaches ...

Tecido de granulação e granuloma: dois termos com significados muito diferentes / Granulation tissue and granuloma: two terms with very different meanings

A confusão conceitual e o diagnóstico microscópico equivocado são comuns no emprego dos termos tecido de granulação e granuloma. Quando as áreas lesadas estão livres do agente agressor, o tecido de granulação, um tecido quase embrionário, forma-se no local para dar lugar a um novo tecido conjuntivo, restabelecendo-se a normalidade e/ou preenchendo espaços. Por outro lado, a persistência do agressor promove a continuidade da inflamação com macrófagos e células derivadas circunscrevendo-os, limitando sua agressividade. Esses aglomerados de macrófagos ao redor do persistente agressor recebem o nome de granulomas, um sinônimo de inflamação crônica. Apesar da sonoridade parecida, os termos granuloma e tecido de granulação representam fenômenos distintos e não devem ser utilizados como sinônimos nas análises microscópicas, pois isso induz a interpretações equivocadas.

The conceptual confusion and the mistaken microscopical diagnosis are often when using the terms granulation tissue and granuloma. When the wounded areas are free of the aggressor agent, the granulation tissue, an almost embryonic tissue, is formed on the area to give place to a new conjunctive tissue, reestablishing the normality and/or filling the spaces. On the other hand, the aggressor persistence promotes the inflammation continuation with macrophages and derived cells, limiting its aggressiveness. These macrophages agglomerated around thepersistent aggressor receive the name of granulomas, synonym of chronicle inflammation. Despite of the similar sonority, the terms granuloma and granulation tissue represent different phenomena and must not be used as synonyms in the microscopical analyses because this would lead to mistaken interpretations.