Sodium fluoroacetate poisoning: A case report / Intoxicación por fluoroacetato de sodio, un reporte de caso

Abstract Introduction: Sodium fluoroacetate, known as compound 1080, was discovered in Germany during the Second World War. It is usually used as a rodenticide, it is an odorless and tasteless substance, with a lethal dose in humans of 2 mg / kg that is why it was withdrawn from the market in some countries, including Colombia; however, it is obtained illegally. This substance has biochemical and physiological effects at the cellular level that alter the transport of citrate at the mitochondrial level, generating accumulation of lactic acid and alteration of the glucose use. The clinical manifestations are nonspecific since there is no any cardinal symptom. Therefore, its diagnosis is made due to high clinical suspicion associated with establishment of exposure to the compound in view of the difficulty to obtain paraclinical confirmation in a timely manner. Methods: We present a case report of intentional ingestion of sodium fluoroacetate in an adolescent that is associated with an infection added to the bloodstream by methicillin- sensitive Staphylococcus aureus (MSSA). The patient developed multiple complications that lead to support in the Intensive Care Unit (ICU) with a satisfactory outcome. In view of the lack of a specific antidote, she was treated with ethanol in order to increase the level of acetate; thus, offering an alternative substrate to the Krebs cycle. It is suggested that the ethanol offers benefits in the acute treatment of these patients. Results: The patient with sodium fluoroacetate poisoning and kidney failure received renal replacement therapy with a favorable evolution and survival at discharge from the intensive care unit of a third-level hospital in the city of Pereira, Risaralda, Colombia. Conclusions: Sodium fluoroacetate poisoning is relatively rare and can cause acute kidney injury and multi-organ failure with a high rate of complications and death. A case of self-inflicted poisoning that received a timely manner continuous renal replacement therapy with a favorable outcome in terms of ICU survival was presented.

Resumen Introducción: El fluoroacetato de sodio ⎯conocido como compuesto 1080⎯, fue descubierto en Alemania durante la segunda guerra mundial, suele ser utilizado como raticida y se caracteriza por ser una sustancia inodora e insabora. En humanos, una dosis de 2 a mg/kg es letal; debido a su toxicidad fue retirado del mercado en algunos países, incluyendo Colombia, no obstante, se consigue de forma ilegal. Esta sustancia tiene efectos bioquímicos y fisiológicos a nivel celular que altera el transporte del citrato a nivel mitocondrial, generando acumulación de ácido láctico y alteración en la utilización de la glucosa. Las manifestaciones clínicas son inespecíficas y no existe un síntoma cardinal. Por ende, su diagnóstico se realiza por alta sospecha clínica, asociado al establecimiento de la exposición al compuesto, ya que la confirmación paraclínica es difícil de realizar oportunamente. Métodos: Se presenta un reporte de caso de ingestión intencional en un adolescente, asociado con infección agregada al torrente sanguíneo por Estafilococos Aureos Meticilino Sensible (EAMS). El paciente desarrolló múltiples complicaciones y requirió asistencia en Unidad de Cuidados Intensivos (UCI) con desenlace satisfactorio. Ya que no se cuenta con antídoto específico , se le dio tratamiento con etanol para aumentar el nivel de acetato, ofreciendo así un sustrato alterno al ciclo de Krebm. Se estima que el etanol puede ofrecer beneficios en el tratamiento agudo de estos pacientes. Resultados: Paciente con intoxicación por fluoroacetato de sodio e insuficiencia renal, recibe terapia de reemplazo renal con un evolución favorable y supervivencia al alta de la Unidad de Cuidados Intensivos de un hospital de tercer nivel en la ciudad de Pereira, Risaralda, Colombia. Conclusiones: La intoxicación por fluoroacetato de sodio es relativamente poco frecuente y puede causar injuria renal aguda y falla multiorgánica con alta tasa de complicaciones y muerte. Se presentó un caso de intoxicación autoinfligida que recibió terapia de reemplazo renal continua temprana con un desenlace favorable en términos de supervivencia en la UCI.

Anthelmintic activity of nanoencapsulated carvacryl acetate against gastrointestinal nematodes of sheep and its toxicity in rodents / Atividade anti-helmíntica do acetato de carvacrila nanoencapsulado sobre nematoides gastrintestinais de ovinos e toxicidade em roedores

Abstract The objective of this study was to evaluate the efficacy of carvacryl acetate (CVA) and nanoencapsulated CVA (nCVA) on gastrointestinal nematodes of sheep. The CVA was nanoencapsulated with chitosan/gum arabic and the efficacy of nanoencapsulation (EE), yield, zeta potential, nanoparticle morphology and release kinetics at pH 3 and 8 were analyzed. Acute and subchronic toxicity were evaluated in rodents and reduction of egg counts in the faeces (FECRT) of sheep. The sheep were divided into four groups (n = 10): G1, 250 mg/kg CVA; G2, 250 mg/kg nCVA; G3, polymer matrix and G4: 2.5 mg/kg monepantel. EE and nCVA yield were 65% and 57%, respectively. The morphology of the nanoparticles was spherical, size (810.6±286.7 nm), zeta potential in pH 3.2 (+18.3 mV) and the 50% release of CVA at pHs 3 and 8 occurred at 200 and 10 h, respectively. nCVA showed LD50 of 2,609 mg/kg. CVA, nCVA and monepantel reduced the number of eggs per gram of faeces (epg) by 57.7%, 51.1% and 97.7%, respectively. The epg of sheep treated with CVA and nCVA did not differ from the negative control (P>0.05). Nanoencapsulation reduced the toxicity of CVA; however, nCVA and CVA presented similar results in the FECRT.

Resumo O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia do acetato de carvacrila (ACV) e do ACV nanoencapsulado (nACV) sobre nematóides gastrintestinais de ovinos. O ACV foi nanoencapsulado com quitosana/goma arábica e foi analisada a eficácia de nanoencapsulamento (EE), o rendimento, potencial zeta, morfologia das nanopartículas e cinética de liberação em pH 3 e 8. Foram avaliadas as toxicidades aguda e subcrônica em roedores e a redução da contagem de ovos nas fezes (RCOF) de ovinos. Os ovinos foram divididos em quatro grupos (n = 10): G1, 250 mg/kg ACV; G2, 250 mg/kg de nACV; G3, matriz polimérica e G4: 2,5 mg/kg de monepantel. A EE e o rendimento de nACV foram de 65% e 57%, respectivamente. A morfologia das nanopartículas foi esférica, tamanho (810,6±286,7 nm), potencial zeta no pH 3,2 (+18,3 mV) e a liberação de 50% de CVA nos pHs 3 e 8 ocorreu às 200 e 10 h, respectivamente. nACV apresentou DL50 de 2.609 mg/kg. ACV, nACV e o monepantel reduziram a contagem de ovos por grama de fezes (opg) em 57,7%, 51,1% e 97,7%, respectivamente. A contagem de opg de ovelhas tratadas com ACV e nCVA não diferiu do controle negativo (P>0,05). O nanoencapsulamento reduziu a toxicidade do AVC; no entanto, nACV e ACV apresentaram resultados semelhantes na RCOF.

Avaliação toxicológica da exposição à Cannabis e cocaína na gravidez em cordão umbilical humano: validação de método analítico e prospecção de biomarcadores proteicos de toxicidade / Toxicological assessment of Cannabis and cocaine exposure during pregnancy in human umbilical cord tissue: analytical method validation and prospection of protein biomarkers related to fetotoxicity

O abuso de drogas atinge aproximadamente 35 milhões de pessoas em todo planeta, sendo um problema alarmante em decorrência de graves danos à saúde, como a dependência química e intoxicações fatais. No Brasil, o número de usuários tem crescido principalmente para o consumo de produtos da Cannabis e cocaína, drogas amplamente consumidas, inclusive entre mulheres em período gestacional, trazendo à tona um novo grupo de risco. A exposição gestacional a drogas de abuso está diretamente relacionada a malformações fetais e complicações de saúde para mãe e bebê nos períodos pré- e pós-natal. Tradicionalmente, a avaliação toxicológica da exposição é realizada pela detecção da droga parental e de seus produtos de biotransformação em matrizes materno-fetais por meio de métodos bioanalíticos. Entretanto, estes ensaios não fornecem informações acerca dos impactos fisiológicos ocasionados pela exposição, deixando uma lacuna no que tange às informações sobre os mecanismos e moléculas subjacentes envolvidos em processos de toxicidade. Desse modo, o desenvolvimento de análises toxicológicas mais robustas utilizando tecnologia de ponta, que possam comprovar o uso drogas e também elucidar aspectos de toxicidade é de suma importância, pois auxiliam na compreensão do impacto biológico relativo à exposição humana a xenobióticos. Neste trabalho foram desenvolvidos ensaios bioanalíticos, utilizando o tecido do cordão umbilical para a avaliação da exposição in utero à canabinoides. Foi desenvolvido e validado método QuECheRS adaptado como preparo de amostra, no qual etapas simultâneas de extração e hidrólise alcalina de canabinoides são alcançadas, utilizando cromatografia em fase gasosa acoplada a espectrômetro de massas para detecção de delta-9-tetraidrocanabinol (THC), canabinol (CBN), 11-hidroxi-delta-9-tetraidrocanabinol (11-OHTHC) e 11-nor-9-carboxi-tetrahidrocanabinol (THC-COOH). Também foram desenvolvidas metodologias utilizando LC-MS/MS e Trapped Ion Mobility Mass Spectrometry para análise de proteoma de cordão umbilical humano em diferentes regiões, no intuito de identificar biomarcadores proteicos relativos à fetotoxicidade do uso de drogas na gravidez. Até o presente momento, QuECheRS é utilizado pela primeira vez como abordagem bioanalítica para avaliação de drogas ilícitas em matrizes teciduais materno-fetais e mostrou-se satisfatório para detecção de produtos da Cannabis. Nos ensaios proteômicos, foram identificados potenciais biomarcadores de fetotoxicidade, como as moléculas ACTA 2, Collagen alpha-1 (XVIII), SMC1A, KNL1, KMT2A, em tecidos expostos à Cannabis e/ou cocaína. Tais macromoléculas estão correlacionadas a malformações embriogênicas e complicações de saúde na vida intra-uterina. As metodologias desenvolvidas neste trabalho podem ser úteis para uma melhor avaliação da toxicidade do uso de drogas na gravidez, fornecendo novas pistas sobre a exposição e/ou efeitos tóxicos significativos considerados na avaliação de risco

Drug abuse affects approximately 35 million people worldwide and can be considered a significant burden on society due to severe health problems, e.g. drug addiction and fatal poisonings. In Brazil, the number of users has been growing related to Cannabis and cocaine products, drugs widely used, including among women in gestational period, bringing up a new risk group. Gestational exposure to drugs of abuse is directly related to fetal malformations and health complications for mother and babies in the pre- and postnatal periods. Traditionally, toxicological assessment of exposure is performed by detecting the parent drug and its biotransformation products in maternal-fetal matrices using bioanalytical methods. However, these assays do not provide information about the physiological impacts caused by exposure, leaving a lack of information about the pathways and molecules involved in toxicity processes. Thus, the development of robust toxicological analyzes using cutting-edge technologies in order to prove drug use and also elucidate aspects of toxicity is very important, as they help in understanding the biological impact of human exposure to xenobiotics. Herein, bioanalytical methods using umbilical cord tissue to assess in utero exposure to cannabinoids were developed. A QuECheRS method was developed fully validated as a sample preparation technique for simultaneous extraction and alkaline hydrolysis of cannabinoids, using gas chromatography coupled to mass spectrometry to detect the analytes delta-9-tetrahydrocannabinol (THC), cannabinol (CBN), 11-hydroxydelta-9-tetrahydrocannabinol (11-OH-THC) and 11-nor-9-carboxy-tetrahydrocannabinol (THC-COOH). LC-MS/MS based proteomics and Trapped Ion Mobility Mass Spectrometry were also developed in order to identify protein biomarkers related to fetotoxicity of drug use in pregnancy. Our works represents the first use of QuECheRS for evaluation of illicit drugs in maternal-fetal tissue and was suitable for detection of Cannabis products. In the proteomic assays, potential biomarkers of fetotoxicity were identified in the exposed tissues, such as ACTA 2, Collagen alpha-1 (XVIII), SMC1A, KNL1, KMT2A. These proteins are related to embryogenic malformations and health complications in intrauterine life. The methodologies developed in this project may be useful for a better assessment of the toxicity of drug use in pregnancy, providing new clues about exposure and/or significant toxic effects that should be considered in the risk assessment

Avaliação da presença de cocaína e anfetamina em amostras de sangue post mortem e de indivíduos vivos, utilizando técnica de microextração em fase líquida (HF-LPME) / Amphetamine, cocaine and tetrahydrocannabinol evaluation in blood samples of living people and post mortem blood samples using microextraction technique in liquid phase (HF-LPME)

Estima-se atualmente que mais de 5% da população mundial vem fazendo uso recreativo de algum tipo de substância psicoativa, sendo que o direito a esse uso é tema recorrente da sociedade contemporânea. Por apresentar riscos associados à saúde e a segurança das populações, o uso abusivo dessas substâncias tem instigado a toxicologia social na busca de respostas, com as quais se possa caracterizar, analisar e gerenciar esses riscos. Drogas de grande consumo no Brasil são a anfetamina, cocaína e Cannabis sativa. Esta tese desenvolveu uma nova metodologia para detectar e quantificar anfetamina, cocaína e tetrahidrocanabinol em sangue total, com uso de microextração em fase líquida via fibra de polipropileno (HF-LPME), seguida de cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massa (GC-MS). Trata-se de uma técnica que apresenta vantagens sobre as tradicionais, uma vez que demanda quantidades menores de solvente orgânico, diminuindo riscos e custos de processo. Também propôs um estudo com a aplicação dos métodos em 69 amostras de sangue de vivos e de post mortem, as quais foram obtidas por convênio com a superintendência da polícia técnica científica de São Paulo (SPTC/SP). Os métodos desenvolvidos foram validados de acordo com diretrizes internacionais de interesse forense. Como resultado da validação, os métodos desenvolvidos se mostraram precisos e exatos para anfetamina e cocaína. O limite de detecção da cocaína foi de 5 ng . mL-1 e o limite de quantificação de 10 ng . mL-1. Quanto a anfetamina, os limites de detecção e de quantificação foram de 5 ng . mL-1. A técnica de HF-LPME não foi aplicável ao tetraidrocanabinol (Δ9-THC). Como resultado da análise das amostras, 40% delas apresentaram resultados positivos para cocaína. Desses positivos, 35% foram oriundos das matrizes de sangue de vivos e 64% oriundos de sangue post mortem. Nenhuma delas apresentou resultado quantificável para anfetamina

It is currently estimated that more than 5% of the world's population has been doing recreational use of some kind of psychoactive substances and the legal right to such use is a recurring theme debated by contemporary society. Due to the risks associated with populations health and safety, the abusive use of these substances has been instigating by social toxicology to search for answers to characterize, analyze and manage these risks. Drugs of great consumption in Brazil are, amphetamine cocaine and marijuana. This thesis proposes to develop a new methodology to detect and quantify psychoactive drugs in whole blood with the use of liquid phase microextraction by polypropylene fiber (HFLPME), followed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS). It is a technique that presents advantages compared with traditional ones, because of the smaller amounts demands of organic solvent, reducing risks and process costs. It also proposes a study with 69 blood samples taken from living persons and post mortem blood samples, which were obtained by agreement with the Superintendency of São Paulo Scientific Technical Police (SPTC / SP). The methods developed were validated according to international guidelines of forensic interest. As a result of the validation, the methods developed were precise and accurate for amphetamine and cocaine. The limit of cocaine detection was 5 ng . mL-1 and the limit of quantification was 10 ng . mL-1. As for amphetamine, the limits of detection and quantification were 5 ng . mL-1. The HF-LPME technique was not applicable to tetrahydrocannabinol (Δ9-THC). As a result of the sample analysis, 40% of them presented positive results for cocaine. Of these, 35% were from blood samples taken from living persons and 64% from the post mortem blood samples. None of the samples presented quantifiable results for amphetamine

Investigação do teor de nitrito em amostras de mortadelas comercializadas em Luziânia-GO e Brasília-DF / Nitrite level assessment for bologna products commercialized in Luziânia-GO and Brasília-DF

Objetivo ­ Investigar a concentração de nitritos presentes em mortadelas produzidas e comercializadas para o público infantil, avaliando a adequação destas com legislação brasileira. Para tal, foram analisadas seis amostras de produtos adquiridas em diferentes pontos de venda: três em Luziânia (GO) e outro em Brasília (DF). Métodos ­ As amostras foram analisadas em triplicata, utilizando o método de Griess-Ilosvay. Todas as amostras analisadas apresentaram teores de nitrito dentro dos limites exigidos. Resultados ­ Contudo, é preciso considerar a possibilidade de combinação destes, com substâncias presentes na matriz alimentar e consequente formação de nitrosaminas, cujo elevado potencial mutagênico e carcinogênico são conhecidos. Conclusão ­ Sendo assim, o monitoramento do teor de nitrito, principalmente dessa categoria de alimentos, deve ser permanente no intuito de assegurar aos consumidores produtos seguros e de qualidade.

Objective ­ To investigate the concentration of nitrite present in bologna produced and marketed for children, assessing their adequacy to the Brazilian law. In order to proceed with this investigation, it has been analyzed six samples of products acquired in different groccery stores: three from Luziânia (GO) and one from Brasília (DF). Methods ­ The samples were analyzed in triplicate using the Griess-Ilosvay method. The results have shown that all samples were within the standards set by law. Results ­ However, it must be considered that nitrites can combine with some food matrix substances generating nitrosamines, which are known to have a high mutagenic and carcinogenic potential. Conclusion ­ Therefore, the level of nitrites, particularly in foods targeted for children, must be constantly monitored.

Controle sanitário de agrotóxicos no Brasil: o caso do Metamidofós / Sanitary pesticides control in Brazil: the case of methamidophos / Control Sanitario de los pesticidas en Brasil: el caso de Metamidofos

Neste trabalho foram analisados os riscos à saúde relacionados ao uso do agrotóxico Metamidofós no Brasil e as principais dificuldades que a autoridade sanitária enfrenta na realização da avaliação destes riscos e de seu gerenciamento. A partir dos dados sobre o cancelamento do registro do Metamidofós procedeu-se uma busca sobre todo o processo da sua reavaliação toxicológica. Os fatos relacionados à reavaliação e cancelamento do Metamidofós mostraram a importância da existência do controle sanitário, bem como a necessidade de constantes reavaliações das tecnologias empregadas na produção agrícola brasileira. Os agricultores se acostumaram ao uso do Metamidofós e a sua reavaliação ameaçou interesses econômicos. Porém a legislação específica dá aos poderes públicos competências para realizarem seu controle sanitário e a reavaliação sistemática de seu uso. O controle sanitário identifica distorções e os conhecimentos trazem informações e evidências sobre os riscos para a saúde e ambiente.

The objective this work was gather and analyze information about the health risks related to use of the Methamidophos pesticide in Brazil and the main difficulties facing the health authority in performing the assessment and control these risks. From the data on the registration cancellation of Methamidophos was carried out a search on the whole process of its toxicological revaluation. The facts related to revaluation and cancellation of Methamidophos showed the importance of sanitary control and the need for constant review of the technologies employed in Brazilian agricultural production. Farmers accustomed to using Methamidophos, saw in the revaluation, a threat to of them economic interests. However, the specific legislation gives government powers to carry out sanitary control and systematic revaluation of pesticide use. The sanitary control identifies distortions and the knowledge provides information and evidence about the risks to health and environment.

El objetivo de este trabajo fue recopilar y analizar información sobre los riesgos para la salud con el uso del plaguicida metamidofos en Brasil y las principales dificultades de la autoridad sanitaria en la realización de la evaluación y el control de estos riesgos. Desde los datos de la cancelación de la inscripción de metamidofos se llevó una búsqueda en todo el proceso de su revalorización toxicológica. Los hechos relacionados con la revalorización y la cancelación de metamidofos mostraron la importancia del control sanitario y la necesidad de una revisión constante de las tecnologías empleadas en la producción agrícola brasileña. Los agricultores acostumbrados a utilizar metamidofos, han visto en la revalorización, una amenaza de los intereses económicos para ellos. Sin embargo, la legislación de los poderes públicos para el control sanitario y la revaluación sistemática del uso de plaguicidas. El control sanitario identifica las distorsiones y el conocimiento proporciona información y pruebas sobre los riesgos para la salud y el medio ambiente.

Perfil de pacientes atendidos por tentativa de suicídio em um centro de assistencia toxicológica / Profile of patients treated for attempted suicide in toxicology assistance center / Perfil de los pacientes tratados por intento de suicidio en un centro de atención toxicológica

Objetivo: Caracterizar os pacientes atendidos por tentativa de suicídio, no Centro de Assistência Toxicológica de um hospital de Fortaleza, Ceará, Brasil. Material e método: Estudo retrospectivo realizado com 409 Fichas de Notificação e de Atendimento dos pacientes atendidos em um Centro de Assistência Toxicológica no ano de 2010. A análise se deu por meio de comparação entre proporções, seguindo o nível de significância de 5%. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa. Resultados: Evidenciou-se a predominância do ato suicida no sexo feminino (58,2%) e nos adultos jovens (62,8%), procedentes da zona urbana (87,8%) e estudantes (16,1%) em relação à ocupação. As tentativas de suicídio ocorreram na própria residência do indivíduo (89,5%), utilizando a autointoxicação por medicamentos (51,8%), seguidos pelos agrotóxicos de uso agrícola (31,2%). Foram identificados sete casos (1,7%) em que os pacientes possuíam transtorno mental. O tratamento dos pacientes atendidos por tentativa de suicídio foi baseado em sua maioria na assistência clínica (98,8%), sem suporte psicológico ou psiquiátrico durante o período de internação ou encaminhamento para instituição psiquiátrica após a melhora do quadro clínico da intoxicação. Identificou-se que houve uma forte relação entre o grau de envenenamento dos pacientes e a variável sexo (p<0,001). Conclusão: Percebe-se a necessidade de se desempenhar uma maior integralidade na assistência aos indivíduos que tentam suicídio, realizando ações de promoção e prevenção, uma vez que esse agravo pode e deve ser evitado.

Objective: This study aimed to characterize the patients treated for attempted suicide at the Center for Toxicological Assistance a hospital in Fortaleza, Ceará, Brazil. Method: Retrospective study of 409 Sheets Notification and Call of patients attended in a Toxicological Assistance Center in 2010. The analysis was done by comparing proportions, following the significance level of 5%. The study was approved by the Research Ethics Committee. Results: Revealed the prevalence of suicide attempt among females (58.2%) and young adults (62.8%), coming from urban areas (87.8%), students (16.1%) compared to the occupation. Suicide attempts occurred in the individual's own residence (89.5%), autointoxication by using the medications (51.8%), followed by agricultural pesticides (31.2 %). We identified seven cases (1.7 %) in which patients had mental disorder. Treatment of patients treated for attempted suicide was based mostly on clinical care (98.8%), with no psychological or psychiatric support during hospitalization or referral to a psychiatric institution after clinical improvement of intoxication. It was identified that there was a strong relationship between the degree of poisoning of patients and gender (p< 0.001). Conclusion: There is the need to perform a more comprehensive assistance to individuals who attempt suicide, conducting promotion and prevention, since this injury can and should be avoided.

Objetivo: Caracterizar pacientes asistidos por intento de suicidio en el Centro de Atención Toxicológica de un hospital de Fortaleza, Ceará, Brasil. Material y método: Estudio retrospectivo, con 409 fichas de notificación y llamadas de pacientes atendidos en un Centro de Atención Toxicológica en 2010. El análisis se realizó mediante comparación de proporciones, siguiendo el nivel de significación de 5%. Estudio aprobado por el Comité de Ética en Investigación. Resultados: Predominio de acto suicida en el sexo femenino (58,2%) y en adultos jóvenes (62,8%), procedentes de zonas urbanas (87,8%) y estudiantes (16,1%) en relación a la ocupación. Los intentos de suicidio ocurrieron en la casa de la persona (89,5%), utilizándose autointoxicación por medicamentos (51,8%), seguidos por pesticidas agrícolas (31,2%). Fueron identificados siete casos (1,7%) cuyos pacientes poseían trastorno mental. El tratamiento de los pacientes asistidos por intento de suicidio fue basado en su mayoría en la atención clínica (98,8%), sin apoyo psicológico o psiquiátrico durante el período de hospitalización o encaminamiento a la institución mental después de la mejora del cuadro clínico de la intoxicación. Hubo fuerte relación entre el grado de envenenamiento de los pacientes y la variable sexo (p<0,001). Conclusión: Hay necesidad de desarrollar mayor atención integral a personas que intentan suicidarse, realizándose acciones de promoción y prevención, ya que este daño puede y debe evitarse.

Alternative methods in toxicity testing: the current approach

Alternative methods are being developed to reduce, refine, and replace (3Rs) animals used in experiments, aimed at protecting animal welfare. The present study reports alternative tests which are based on the principles of the 3Rs and the efforts made to validate these tests. In Europe, several methodologies have already been implemented, such as tests of irritability, cell viability, and phototoxicity as well as in vitro mathematical models together with the use of in silico tools. This is a complex process that spans from development to regulatory approval and subsequent adoption by various official entities. Within this regulatory framework is REACH, the European Community Regulation for chemicals and their safe use. In Brazil, the BraCVAM (Brazilian Center for the Validation of Alternative Methods) was recently established to validate alternative methods and stimulate incorporation of new methodologies. A new vision of toxicology is emerging for the 21st century (Tox-21), and the subsequent changes are shaping a new paradigm.

Métodos alternativos estão sendo desenvolvidos para a redução, o refinamento e a substituição (3R) do número de animais utilizados em experimentos, visando ao seu bem-estar. Esses testes alternativos baseiam-se no princípio dos 3R e esforços têm sido empregados para que sejam validados. Na Europa, diversas metodologias já foram implantadas tais como: testes de irritabilidade, testes de viabilidade celular, testes de fototoxicidade e modelos matemáticos in vitro, além do uso de ferramentas in silico. Esse é um processo complexo, que abrange desde o seu desenvolvimento até a aceitação regulatória e posterior adoção por diversas organizações oficiais. No contexto regulatório está o REACH, o Regulamento da Comunidade Européia, para produtos químicos e sua utilização segura. No Brasil, o BraCVAM (Centro Brasileiro de Validação de Métodos Alternativos) foi recentemente estabelecido para validação de métodos alternativos e estímulo à incorporação de novas metodologias. Uma nova visão de toxicologia vem surgindo para o século XXI (Tox-21) e as mudanças ocasionadas promoverão um novo paradigma.

Avaliação fitoquímica e atividade antioxidante, antimutagênica e toxicológica do extrato aquoso das folhas de Ocimum gratissimum L / Phytochemical Assessment And Antioxidant, Antimutagenic And Toxicological Activity Of Ocimum gratissimum L. Leaf aqueous extract

A espécie Ocimum gratissimum L., popularmente conhecida como alfavaca, é uma planta muito usada na medicina tradicional brasileira, à qual são atribuídas diversas atividades terapêuticas quando usada na forma de infuso de suas folhas. Neste estudo foi realizada a caracterização fitoquímica, a avaliação da ação antioxidante e a investigação dos efeitos antimutagênico e antigenotóxico, além do efeito mutagênico e genotóxico potencial do extrato aquoso liofilizado a parir das folhas de O. gratissimum (EAOG). O conteúdo de polifenóis totais no extrato foi determinado pelo método Folin-Ciocalteu, sendo encontrado 11,3 µg EAG/mg de EAOG. A atividade antioxidante foi avaliada pelo teste do 1,1-difenil-2-picril hidrazil (DPPH•), apresentando IC50 de 83,0 µg/mL. A antimutagenicidade e mutagenicidade foram avaliadas em cepas de Salmonella typhimurium (TA98 e TA100) utilizando o teste Salmonella/microssoma (Salmonella typhimurium/microssomas) em diferentes concentrações. EAOG induziu a atividade antimutagênica para a cepa TA98. A mutagenicidade não foi observada para o extrato em ambas as linhagens. Adicionalmente, a ação antigenotoxica avaliada pelo teste de clivagem do DNA-plasmidial também foi observada para EAOG. Os resultados também demonstraram que o extrato não foi capaz de induzir a genotoxicidade pelo teste empregado. Este estudo relata, pela primeira vez, as propriedades antimutagênica e antigenotóxica do extrato aquoso de O. gratissimum.

The species Ocimum gratissimum L., popularly known as Clove Basil, is a plant widely used in traditional Brazilian medicine, and several therapeutic activities are attributed to it when used as infusion of its leaves. In this study, we carried out a phytochemical characterization and the assessment evaluation and investigation of the antioxidant action of the antimutagenic and antigenotoxic effects and the potential mutagenic and genotoxic effects of the freeze-dried aqueous extract of the O. gratissimum (EAOG) leaves. The total polyphenol content in the extract was determined by the Folin-Ciocalteu method, and we found 11.3 µg EAG/mg of EAOG. The antioxidant activity was assessed by the 1,1-diphenyl-2-picryl hidrazil (DPPH·), with IC50 of 83.0 µg/mL. Antimutagenicity and mutagenicity were assessed in Salmonella typhimurium (TA98 and TA100) strains using the Salmonella/microsome (Salmonella typhimurium/microsome) test in different concentrations. EAOG induced antimutagenic activity for strain TA98. Mutagenicity was not observed for the extract in both strains. Additionally, antigenotoxic action, assessed by cleavage of the DNA-damage, was also observed for EAOG. The results also show that the extract was not able to induce genotoxicity by the test used. This study reports for the first time the antimutagenic and antigenotoxic properties of the O. gratissimum aqueous extract.

Aflatoxin M1 in the urine of non-carriers and chronic carriers of hepatitis B virus in Maringa, Brazil

Exposure to aflatoxins (AFs) in the diet may favour the development of hepatocellular carcinoma (HCC) and the acute exacerbation of hepatitis in chronic hepatitis B virus (HBV) carriers. Measurement of biomarkers such as aflatoxin M1 (AFM1), a metabolite of aflatoxin B1 (AFB1), in urine allows for the assessment of populations exposed to aflatoxins. The aim of this study was to investigate the occurrence of aflatoxin M1 in the urine of HBV carrier and non-carrier patients. One group included 43 randomly selected HBV carriers treated at two hospitals in the city of Maringa, Brazil, from March to June 2008. Control group consisted of 29 healthy adult volunteers with anti-HBs positive and HBsAg negative test results. Detection of AFM1 was performed by fluorescence using high performance liquid chromatography (HPLC) and post-column derivation with the Kobra Cell®. Of the 72 samples analysed, 05/29 (17.2%) AFM1 positive samples were from HBV non-carriers, and 16/43 (37.2%) of samples were from chronic HBV carriers. This study showed AFM1 in the urine of the two surveyed population. However, there is evidence that the chronic HBV carriers have a higher risk of developing HCC due to additive interaction between AFs and HBV.

A exposição às aflatoxinas (AFs) na dieta é um fator de risco para o desenvolvimento do carcinoma hepatocelular (CHC) e a exacerbação da hepatite aguda em indivíduos portadores do vírus da hepatite B (VHB). O uso de biomarcadores, como a aflatoxina M1 (AFM1) na urina, produto de biotransformação da aflatoxina B1 (AFB1), permite avaliar se a população está exposta às AFs. O objetivo do presente estudo foi investigar ocorrência de AFM1 na urina de portadores e não portadores crônicos do VHB. Foi selecionado um grupo, de forma aleatória, representado por 43 portadores do VHB atendidos em dois hospitais da cidade de Maringá, Brasil, no período de Março a Junho/2008. O grupo controle foi composto por 29 voluntários adultos saudáveis anti-HBs positivo e HBsAg negativo. A determinação de AFM1 foi realizada por meio de detecção por fluorescência em sistema de cromatografia a líquido de alta eficiência com derivação pós-coluna utilizando Kobra Cell®. Das 72 amostras analisadas, 05/29 (17,2%) foram positivas para AFM1 em indivíduos não portadores do VHB, e 16/43 (37,2%) de pacientes portadores do VHB. Este estudo demonstrou a ocorrência de AFM1 na urina dos dois grupos estudados. Entretanto, há evidências de que os portadores do VHB possuam alto risco no desenvolvimento do CHC devido ao efeito aditivo pela interação entre aflatoxinas e VHB.

Assessment of sperm production and reproductive organs of Wistar rats to long-term exposure of Caesalpinia ferrea

Caesalpinia ferrea Mart (Leguminosae) is a medicinal plant used to treat diabetes, among other therapeutic properties, but which is also reported to have hepatotoxic effects. Although it contains substances such as flavonoids and coumarin, which are known to have antifertility activity, no studies have apparently been conducted to evaluate the potential adverse side effects of this plant on the function of the reproductive system after a chronic treatment. Therefore, this investigation was carried out to evaluate the effect and safety of the long-term exposure to C. ferrea on male Wistar rats' vital organs, reproductive system and sperm production. Adult and immature male rats were treated with an aqueous extract of C. ferrea at a dose level of 300 mg/kg of body weight, administered during one or two spermatogenic cycles of this species. The reproductive and vital organs were analyzed, and sperm was collected from the epididymal secretion of the right epididymis cauda. The long-term administration of C. ferrea did not significantly alter the body, vital and reproductive organs weights. Gamete production was not affected either. The chronic assessment of C. ferrea suggests that this plant does not affect the normal functioning of the Wistar rat reproductive system.

Caesalpinia ferrea Mart (Leguminosae) é uma planta medicinal utilizada principalmente no tratamento do diabetes, dentre outras propriedades terapêuticas, mas que também apresenta relatos de hepatotóxicos. Embora apresente em sua constituição substâncias capazes de interferirem na fertilidade, como flavonóides e cumarina, nenhum estudo foi ainda realizado para avaliar os efeitos adversos dessa planta no funcionamento do sistema reprodutor após tratamento de longa duração. Portanto, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar a utilização segura e os efeitos de C. ferrea nos órgãos vitais, no sistema reprodutor e na produção de espermatozóides de ratos Wistar submetidos a tratamento crônico. Animais imaturos e adultos foram tratados com o extrato aquoso de C. ferrea na dose de 300 mg/kg de peso corporal, administrado durante um ou dois ciclos espermatogênicos dessa espécie. Os órgãos reprodutores e vitais foram analisados e os espermatozóides foram coletados na secreção epididimária proveniente da cauda do epidídimo direito. A administração crônica de C. ferrea não alterou significativamente o peso corporal e nem o peso dos órgãos reprodutores e vitais. A produção de gametas também não foi afetada. Os dados sugerem que a utilização crônica de C. ferrea não interfere com o funcionamento normal do sistema reprodutor do rato Wistar.

Estudo dos mecanismos de ação da hidroquinona e fenol sobre o recrutamento leucocitário em respostas inflamatórias / Study of mechanisms of action of hydroquinone and phenol on leukocyte recruitment in inflammatory response

Hidroquinona (HQ) é um dos metabólitos do benzeno responsáveis pelos efeitos tóxicos da exposição ao solvente, além de ser componente da dieta, medicamentos, cigarro e poluente do meio ambiente. Considerando a imunotoxicidade desta substância, o grupo de pesquisa do laboratório investiga o papel da exposição à HQ por período prolongado de tempo sobre respostas inflamatórias agudas (RIA). Neste contexto, o presente trabalho avaliou os efeitos desta exposição sobre os mecanismos vasculares e celulares da RIA de diferentes doses diárias de HQ (5, 10 ou 50 mg/kg) em ratos Wistar machos, via i.p., por 17 ou 22 dias, uma vez ao dia, com intervalos de 2 dias a cada 5 doses. Animais controles receberam o veículo (salina com 5% etanol). A resposta inflamatória aguda inata foi induzida pela administração de glicogênio de ostra (1% em PBS, 5 mL) na bolsa subcutânea dorsal ou pela instilação de lipopolissacarídeo de Salmonella abortus (LPS; 100 µL de solução 100 µg/mL); A resposta inflamatória aguda adquirida foi provocada pela inalação de ovalbumina (10 mL de solução de OA 1% PBS, 15 min) em animais previamente sensibilizados (10 µ/100mg AI(OH)3 no décimo dia de exposição). Os resultados obtidos mostraram que: 1) o aumento do número de leucócitos na bolsa dorsal de animais expostos a 50 mg/kg de HQ é dependente, pelo menos em parte, da maior interação de leucócitos circulantes à parede vascular da microcirculação, mas não é decorrente de alterações na reatividade microvascular; o aumento de expressão de moléculas de adesão (ß2 integrina), que pode ser a responsável pelo aumento de interaçãoleucócito-endotélio e migração celular; 2) a redução da migração de leucócitos para o pulmão inflamado pelo LPS em animais expostos a HQ, nas menores doses, não foi decorrente de modificações na interação leucócito-endotélio, nem da expressão de moléculas de adesão nos leucócitos circulantes ou na célula endotelial do tecido pulmonar; 3) a redução da migração celular para o pulmão durante a RIA alérgica em animais expostos a 5, 10 ou 50 mglkg de HQ é dependente, pelo menos em parte, da menor concentração de anticorpos anafiláticos circulantes e conseqüentemente da desgranulação reduzida de mastócitos teciduais, visualizados no leito mesentérico após desafio in situ pela OA. A menor produção de anticorpos anafiláticos pode ser decorrente da ação da HQ em diferentes tipos celulares, uma vez que foi observada expressão reduzida de moléculas co-estimulatórias em linfócitos do baço (CD45R e CD6), menor atividade microbicida de macrófagos peritoniais frente a Candida albicans e menor secreção de interferon-γ por células do peritônio. Em conjunto, os resultados apresentados mostram os mecanismos da HQ sobre a resposta do organismo ao trauma de diferentes origens, interferindo com tipos celulares distintos envolvidos nas reações

Hydroquinone (HQ) is one of the metabolites of benzene responsible for the toxic effects of exposure to solvent, as well as being part of the diet, medicines, tobacco and polluting the environment. Considering the immunotoxicity of this substance, our laboratory has investigated the role of exposure to HQ by prolonged period of time on acute inflammatory responses (AIR). In this context, this study evaluated the effects of this exposure on the vascular and cellular mechanisms of AIR of different daily doses of HQ (5, 10 or 50 mg/kg) in male rats, via ip, for 17 or 22 days, a once a day, with intervals of 2 days every 5 doses. Control animais received the vehicle (saline with 5% ethanol). Innate AIR was induced by the administration of oysters glycogen (1% in PBS, 5 mL) into subcutaneous back pouch or by instillation of lipopolysaccharide of Salmonella aborius (LPS, 100 µL of solução100 µg/mL); Allergic AIR gained was caused by inhalation of ovalbumin (10 mL solution of 1% OA in PBS, 15 min) in previously sensitized animal (10 µ/100mg AI (OH)3 on the tenth day of exposure). Results showed that: 1) the increased number of white blood cells back into the pouch of animais exposed to 50 mg/kg of HQ is dependent, at least in part, of higher interaction of circulating leukocytes to the vascular wall of the microcirculation, but is not due to changes in microvascular reactivity; an increase of expression of molecules of accession (ß2 integrin), which may be responsible for the enhanced interaction of leukocyteendothelial and cell migration 2) the reduced migration of leukocytes into the lung inflamed by LPS in animals exposed to 5 or 10 mg/kg was not due to changes in the interactions of leukocyte to endothelium, either the expression of adhesion molecules in circulating white blood cells or in cell endothelial lung tissue, 3) the reduced cell migration to the lungs during the AIR allergic to animais exposed to HQ, in lower doses, is dependent on lower concentration of· circulating anaphylactics antibodies which may be responsible for the mast cell desgranulation. The lower amount of anaphylatic antibodies in the circulation may be due to action of HQ in different cells, as reduced expression of co-stimulatory molecules by Iymphocytes (CD45R and CD6), lower microbicide activity of macrophages and reduced secretion of interferon-γ by peritoneal cells were detected. Together, the results show the toxicity of HQ on the body's response to trauma from different sources, interfering with different cell types involved in the reactions

Harmonização e classificação toxicológica de agrotóxicos em 1992 no Brasil e a necessidade de prever os impactos da futura implantação do GHS / Harmonization and toxicological classification of pesticides in 1992 in Brazil and the need to foresee the impacts from the forthcoming introduction of GHS

Em 1992, o Brasil modificou seus critérios de classificação toxicológica de agrotóxicos adequando-os à recomendação de classificação de periculosidade da Organização Mundial da Saúde (OMS). Em 2002, o Sistema Globalmente Harmonizado de Classificação e Rotulagem de Produtos Químicos (GHS) foi adotado pela Organização das Nações Unidas. Em decorrência, a OMS está adequando ao GHS sua recomendação de classificação de agrotóxicos, o que também deverá ser feito pelo Brasil. Considerou-se oportuno estimar o impacto da alteração de critérios, ocorrida em 1992, na reclassificação toxicológica dos produtos comerciais que se encontravam registrados na ocasião. Encontrou-se que 58,6 por cento do total dos agrotóxicos então registrados (74,9 por cento das formulações líquidas e 31,0 por cento das sólidas) podem ter sofrido reclassificação para classes toxicológicas consideradas de me-nor periculosidade, sofrendo mudanças na comunicação de riscos expressa na rotulagem. Isto pode ter ocasionado conseqüências negativas devido a confusões de interpretação pelos agricultores. Nos países que já dispõem de sistemas de classificação de periculosidade de agrotóxicos, como o Brasil, recomenda-se estimar, antes da implantação, os impactos das mudanças que poderão decorrer da adoção do GHS.

In 1992, Brazil modified its toxicological classification criteria for pesticides. This modification aimed to follow the guidelines of the World Health Organization (WHO) hazard classification of pesticides. In 2002, the United Nations adopted the "Globally Harmonized System for the Classification and Labelling of Chemicals" (GHS). As a result, the WHO is reviewing its classification and Brazil will probably follow the example. Therefore it seems timely to estimate the impact of the changes in the criteria adopted in 1992 in the toxicological reclassification and labelling of the commercially available products registered at that time. It is estimated that 58.6 percent of the total of registered pesticides (74.9 percent liquid and 31.0 percent solid formulations) might have been reclassified to less hazardous classes. The hazard warnings on the labels may have caused negative consequences due to misinterpretations by farmers or rural workers. For countries already having a hazard classification system, it is therefore recommendable to estimate the possible impact of the changes before implanting the GHS.

Avaliação toxicológica e reprodutiva de camundongos machos adultos tratados com femproporex / Fenproporex treatment in male mice: behavior and toxicology reproductive analysis

O femproporex é utilizado no mundo todo como potente anorexígeno. Este estudo visa esclarecer se o uso diário de femproporex provoca toxicidade comportamental e/ou reprodutiva em camundongos machos adultos. Para tanto, foram utilizados 40 camundongos, divididos em quatro grupos experimentais, cada um contendo dez animais. Um dos grupos recebeu, via gavage, apenas água, e os outros foram tratados diariamente com femproporex, nas doses de 7,5, 15 e 30 mg kg-1, por um período de 40 dias. Como resultados, verificou-se que o femproporex não alterou a evolução normal da massa dos animais analisados, e concluiu-se que a utilização da droga não promoveu toxicidade comportamental, verificada nos testes de natação forçada e de campo aberto; e reprodutiva, quando verificados genotoxicidade, síntese de testosterona, morfologia de espermatozóides e histologia testicular. Assim sendo, concluiu-se que o femproporex, na concentração e delineamentos experimentais propostos por este trabalho, não apresentou potencial toxicológico

Fenproporex is used worldwide as a powerful anorectic drug. This study was designed to evaluate whether daily intake of fenproporex would lead to behavioral and/or reproductive toxicity in adult male mice. Fourty male mice were used, divided into 4 groups of 10 animals each. The control group received only water by gavage, whereas the experimental groups were treated daily with fenproporex in the doses of 7.5, 15 and 30 mg kg-1, for a period of 40 days. The results demonstrated that fenproporex did not alter the normal evolution of the animals' body mass; it also showed that the use of the drug did not promote behavioral toxicity (open- and forced-swimming tests) or reproductive toxicity (genotoxicity, changes in the morphology of spermatozoa and testicular histology). Thus, the present results indicate that fenproporex, in the evaluated dose and experimental conditions, does not present behavioral and reproductive toxic potential in mice.

Avaliação toxicológica aguda e screening hipocrático da epiisopilosina, alcalóide secundário de Pilocarpus microphyllus Stapf / Toxicological screening failure and the Hippocratic epiisopilosina, alkali secondary Pilocarpus microphyllus Stapf

A espécie Pilocarpus microphyllus Stapf. recebe a designação geral de jaborandi, fonte industrial de pilocarpina, utilizada no tratamento do glaucoma. O jaborandi contém vários alcalóides secundários. A epiisopilosina foi submetida a testes farmacológicos para determinação da DL50’ screening hipocrático e determinação do peso corporal dos animais sobreviventes da DL50. A análise dos resultados revelou que a epiisopilosina apresentou DL50 duas vezes maior que a pilocarpina. Os animais que sobreviveram à determinação da DL50 ganharam peso no período de 14 dias de observação. A eplisopilosina demonstrou ser um estimulante periférico do sistema nervoso parassimpático, semelhante à pilocarpina, somente em altas doses.

Pilocarpus microphyllus Stapf. (Rutaceae) is a source for industrial isolation of pilocarpine, alkaloid used in the treatment of glaucoma. It contains several secondary alkaloids; one of them being eplisopilosine. Pharmacological evaluation showed DL50 value of epiisopilosine two times higher than of pilocarpine. Epiisopilosine also showed to be a pilocarpine-like peripheric stimulant of parasympatic nervous system, although in higher dosis.

Estudo toxicológico e farmacológico dos extratos fluídos de Cissus sicyoides L.

Os extratos fluidos obtidos de Cissus sicyoides L., conhecido popularmente como "anil-trepador", "cipó- pucá e "insulina", foram caracterizados farmacológica e toxicologicamente. Os resultados preliminares apresentaram uma atividade hipoglicemiante não significativa e ausencia de atividade tóxica.

The fluid extracts obtained from Cissus sicyoides L., commonly known as "cipó-pucá" and "insulina", were tested pharmacologically and toxicologically. The extracts show some hypoglycemic activity, but the results were not significant. No toxic activity was observed.