Desenvolvimento pós-embrionário de Chrysomya putoria (Calliphoridae) em carne equina e sua importância para a entomologia e veterinária forenses / [Post embryonic development of Chrysomya putoria (Calliphoridae) using horse meat and its importance for forensic entomology and veterinary]

Devido à importância médica, veterinária, ambiental e forense do califorídeo Chrysomya putoria (Diptera), foi avaliado o desempenho apresentado por estágios imaturos criados em carne de cavalo. Os espécimes foram colocados em câmaras aclimatizadas reguladas a 30 ºC, 60 ± 10% UR e 14 horas de fotofase. Os estágios larval e pupal concluíram seu desenvolvimento em 4,16 e 4,12 dias, respectivamente. As larvas pós-alimentação e pupas com 24h de idade pesaram, em média, 58,06 e 40,10mg, respectivamente. As taxas de emergência registradas foram de 65% nas condições experimentais propostas. Como os compostos orgânicos voláteis são diferentes na decomposição de um animal para outro, este trabalho e outros realizados com a mesma dieta são os mais apropriados para estimativa de intervalo post mortem envolvendo cavalos.(AU)

Due to medical, veterinary, environmental and forensic importance of the calliphorid Chrysomya putoria (Diptera), the performance presented by immature stages, reared on horse meat, was evaluated. The specimens were placed in acclimatized chambers regulated at 30 ºC, 60 ± 10% RU and 14 hours of photo phase. The larval and pupal stages completed their development in 4, 16 and 4, 12 days, respectively. Post-feeding larvae and aged 24h pupae weight on average 58, 06 and 40, 10 mg, respectively. The emergence rates recorded were 65% under the experimental conditions proposed. As volatile organic compounds are different in the decomposition of one animal to another, this work and others carried out with the same diet are the most appropriate for estimating post-mortem interval involving horses.(AU)

Estimativa do intervalo pós-morte em um canino (Canis lupus familiaris Linnaeus 1758) pela entomologia forense em Cabedelo-PB, Brasil: relato de caso / Estimate of postmortem interval through forensic entomology in a canine (Canis lupus familiaris Linnaeus 1758) in Cabedelo-PB, Brazil: case report

O intervalo pós-morte (IPM) é um instrumento importante de diagnóstico relacionado à prática forense. O uso de insetos tem sido relatado como um modo eficiente para estimá-lo, quando o cadáver encontra-se em estágio avançado de decomposição. Objetivou-se com este trabalho estimar o IPM com base em evidências entomológicas em um canino. Foram coletadas larvas de moscas no cadáver e encaminhadas ao laboratório de entomologia, onde foram criadas e eclodiram adultos da espécie Chrysomya albiceps (Wiedemann, 1819). Somando-se os dados abióticos de temperatura e umidade relativa do local de coleta e do local de criação, estimou-se um IPM mínimo de 3,34 dias do momento da postura dos ovos pelas moscas até a coleta das larvas. Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a entomologia forense, como ferramenta para estimativa do IPM, mostrou-se eficaz e determinante na elucidação do caso em questão.

The postmortem interval (PMI) is an important tool for diagnosis related to the forensic practice. The use of insects has proved to be an efficient diagnosis tool when the cadaver is in advanced decomposition stage. The objective of this work was to estimate PMI based on entomological evidence in a canine. Fly larvae was collected from the cadaver and forwarded to the Entomology laboratory. The fly larvae were reared and hatched adults of Chrysomya albiceps (Wiedemann 1819). With these insects and the abiotic data of temperature and relative humidity, from the places of collection and rearing larvae, a minimum PMI of 3.34 days from the laying of eggs by the flies until the time that we collected the larvae was obtained. The results show that Forensic Entomology as tool to estimate PMI is decisive and effective in the elucidation of the case.

First record of Chrysomya rufifacies (Macquart) (Diptera, Calliphoridae) from Brazil

First record of Chrysomya rufifacies (Macquart) (Diptera, Calliphoridae) from Brazil. In addition to its native fauna, the Neotropical region is known to be inhabited by four introduced species of blow flies of the genus Chrysomya. Up until now, only three of these species have been recorded in Brazil - Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius), and Chrysomya putoria (Wiedemann). In South America, C. rufifacies (Macquart) has only been reported from Argentina and Colombia. This study records C. rufifacies from Brazil for the first time. The specimens were collected in an area of cerrado (savanna-like vegetation) in the municipality of Caxias in state of Maranhão, and were attracted by pig carcasses.

Primeiro registro de Chrysomya rufifacies (Macquart) (Diptera, Calliphoridae) para o Brasil. A região Neotropical compreende além da fauna nativa, quatro espécies de moscas varejeiras exóticas do gênero Chrysomya. No Brasil, até o momento, foram registradas três espécies desse gênero: Chrysomya albiceps (Wiedemann), Chrysomya megacephala (Fabricius), e Chrysomya putoria (Wiedemann). C. rufifacies (Macquart), na América do Sul, foi registrada somente para a Argentina e Colômbia. Neste estudo, C. rufifacies é registrada pela primeira vez para o Brasil. Os espécimes foram coletados em uma região de cerrado, no município de Caxias, estado do Maranhão, atraídos por carcaças de porcos.

Comparative morphology of the spermathecae of some species of Chrysomya Robineau-Desvoidy and Cochliomyia Townsend (Diptera, Calliphoridae)

Comparative morphology of the spermathecae of some species of Chrysomya Robineau-Desvoidy and Cochliomyia Townsend (Diptera, Calliphoridae). Little is known about the morphology of the chitinized structures of the spermathecae of the Calliphoridae. In this work, the spermathecae of Chrysomya albiceps Wiedemann, 1819, C. megacephala Fabricius, 1794, Cochliomyia macellaria Fabricius, 1775 and C. hominivorax Coquerel, 1858 are described and illustrated. The occurrence in one species of four spermathecae, an atypical form for blow flies, was recorded for the first time. The analysis of these structures will allow a better understanding of this group as well as provide taxonomic characters for future phylogenetic studies.

Morfologia comparada das espermatecas de espécies de Chrysomya Robineau-Desvoidy e Cochliomyia Townsend (Diptera, Calliphoridae). Pouco se conhece sobre a morfologia das estruturas quitinizadas das espermatecas de Calliphoridae. Nesse trabalho as espermatecas de Chrysomya albiceps Wiedemann, 1819, C. megacephala Fabricius, 1794, Cochliomyia macellaria Fabricius, 1775 e C. hominivorax Coquerel, 1858 são descritas e ilustradas. Foi registrada pela primeira vez a ocorrência em uma espécie com quatro espermatecas, uma forma atípica em califorídeos. A análise dessas estruturas possibilitará uma melhor compreensão do grupo e fornecerá caracteres taxonômicos para futuros estudos filogenéticos.

Abundance and seasonality of Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae) in Southern Pantanal, Brazil / Sazonalidade de Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae) no Pantanal Sul-mato-grossense, Brasil

Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae), known as the secondary screwworm, occurs in the Americas and has medical-veterinary and forensic importance. This study aimed to describe the seasonal fluctuation of this species in the Pantanal region, Central-Western Brazil. From December 2004 to November 2007 fly catches using four windoriented traps baited with decaying bovine liver were carried out at the Nhumirim ranch, Nhecolândia subregion, Southern Pantanal. Traps remained active throughout the study period and collections were carried out on a weekly basis. A total of 159,397 Calliphoridae were caught and C. macellaria (57.33 percent) was the most abundant species. C. macellaria occurred all over the year showing a bimodal behavior with peaks in May-July (late autumn/early winter) and October-December (spring).

Cochliomyia macellaria (Diptera: Calliphoridae), conhecida como mosca-varejeira, ocorre no continente americano e apresenta importância médico-veterinária e forense. O presente estudo teve como objetivo conhecer a flutuação sazonal dessa espécie na região do Pantanal. De dezembro/2004 a novembro/2007 foram realizadas coletas de dípteros na fazenda Nhumirim, sub-região da Nhecolândia, Pantanal sul-mato-grossense. Foram utilizadas quatro armadilhas orientadas pelo vento, iscadas com fígado bovino deteriorado. As armadilhas permaneceram ativas durante todo o período de estudo, e coletas foram realizadas semanalmente. Foram capturados 159.397 califorídeos, sendo C. macellaria (57,33 por cento) a espécie mais abundante. C. macellaria foi observada em todos os meses do ano, apresentando comportamento bimodal com picos populacionais em maio/julho (final de outono/início de inverno) e outubro/dezembro (primavera).

Taxa de desenvolvimento de Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae) em dieta artificial acrescida de tecido animal para uso forense / Chrysomya albiceps (Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae) developmental rate on artificial diet with animal tissues for forensic purpose

A entomologia forense utiliza dados biológicos e ecológicos de insetos necrófagos com o objetivo de auxiliar as investigações criminais, na estimativa do intervalo pós-morte (IPM) ou na descoberta da causa da morte. Trabalhos recentes têm demonstrado que a presença de toxinas nos tecidos em decomposição pode alterar a taxa de desenvolvimento de insetos que usam esse recurso. Assim, testes preliminares usando dietas artificiais em laboratório são necessários para a criação de um banco de dados como padrão para investigar e quantificar as possíveis modificações em insetos coletados da cena criminal, para não gerar dados imprecisos sobre o IPM. No presente estudo objetivou-se avaliar a taxa de desenvolvimento de imaturos de Chrysomya albiceps (Wiedemann) criados em diferentes substratos: a) dietas artificiais contendo tecido de origem animal: fígado (D1), músculo moído (D2) e rúmen (D3) bovinos, além de coração de frango (D4); b) dieta sem tecido animal (D5) e; c) um grupo controle (C), somente em carne bovina. A eficiência de cada substrato foi observada pelo ganho de massa dos imaturos, tempo de desenvolvimento larval, sobrevivência larval e pupal, intervalo de emergência e tamanho dos adultos. As dietas D1 a D4 não restringiram o desenvolvimento larval de C. albiceps, no entanto, D1 e D2 apresentaram baixa emergência de adultos. D3 e o grupo controle foram muito similares em relação a alguns fatores de eficiência (taxa e intervalo de emergência). Assim, o uso da dieta D3, dieta artifical mais rúmen de bovinos é o mais recomendado.

Forensic entomology uses biological and ecological aspects of necrophagous insects to help in criminal investigations to estimate the post-mortem interval (PMI) or to determine the cause of death. Recent papers demonstrated that the presence of toxins in decomposing tissues may alter the insect developmental rate of insects exploiting such tissues as food. Thus, preliminary tests with artificial diets in laboratory are necessary to create a database to investigate and quantify the modifications that can occur with the collected insects from a criminal scene, avoiding any errors on the PMI estimates. The present study aimed to evaluate the developmental rate of Chrysomya albiceps (Wiedemann) reared on: a) artificial diets containing animal tissues: bovine liver (D1), raw muscle (D2), stomach (D3), and chicken heart (D4); b) artificial diet without animal tissue (D5); and c) a control group (C), which had only meat. The efficiency of each substrate was assessed by immature weight gain (mg), larval developmental time, larval and pupal survival, emergence interval and adult size. D1 to D4 diets did not restrict C. albiceps development; however, larvae reared on D1 and D2 diets presented a lower adult emergence rate. D3 and control group showed similarities regarding the efficiency parameters (rate and emergence interval). Thus, the use of diet D3, artificial diet with stomach, is the most recommended.

Desenvolvimento e avaliação de novas metodologias para testar a atratividade de Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera: Calliphoridae) a estímulo visual por cores em condições laboratoriais / Development and evaluation of new methodologies to test the attractiveness of Chrysomya megacephala (Fabricius) (Diptera: Calliphoridae) to visual stimulation by colors in laboratory conditions

Avaliaram-se três metodologias para analisar a atratividade de Chrysomya megacephala (Fabricius) a cores (vermelho, verde, preto, branco, azul e verde) utilizando aparatos em forma de arena, leque e retângulo. Realizaram-se 7 a 15 repetições/10 insetos, exceto no 1º experimento da arena (1 inseto/repetição). No 1º experimento-arena, adultos diferiram significativamente no 2º pouso (verde>vermelha) e 3º (vermelho>verde e preto). Nos machos diferiram significativamente preto>vermelho. No 2º experimento-arena diferença apenas para machos. No leque, amarelo e azul para machos e vermelho para fêmeas. No retangular, não houve diferença significativa. Ocorreram atratividades variadas devido influências externas e comportamentais dos dípteros.

Three methodologies evaluated the attractiveness of Chrysomya megacephala (Fabricius) to colors (red, green, black, white, blue and green) using arena, fan and rectangle-shaped devices. Seven to 15 repetitions/10 insects were carried out, except for the arena trial (1 insect/repetition). In the first arena trial, adults showed significant differences in the second (green>red) and third landings (red>green and black). In males black>red were significantly different. In the second arena trial, only males did. In the fan trial, yellow and blue were significantly different for males, and red for females. In the rectangular trial, no significant difference was observed. Varied attractiveness occurred due to external and behavioral influences in dipterans.

Antibacterial activities of multi drug resistant Myroides odoratimimus bacteria isolated from adult flesh flies (Diptera: Sarcophagidae) are independent of metallo beta-lactamase gene / Atividades antibacterianas de Myroides odoratimimus isolada de moscas varejeiras adultas (Diptera: Sarcophagidae) são independentes do gene metalo beta lactamase

Flesh flies (Diptera: Sarcophagidae) are well known cause of myiasis and their gut bacteria have never been studied for antimicrobial activity against bacteria. Antimicrobial studies of Myroides spp. are restricted to nosocomial strains. A Gram-negative bacterium, Myroides sp., was isolated from the gut of adult flesh flies (Sarcophaga sp.) and submitted to evaluation of nutritional parameters using Biolog GN, 16S rRNA gene sequencing, susceptibility to various antimicrobials by disc diffusion method and detection of metallo â-lactamase genes (TUS/MUS). The antagonistic effects were tested on Gram-negative and Gram-positive bacteria isolated from human clinical specimens, environmental samples and insect mid gut. Bacterial species included were Aeromonas hydrophila, A. culicicola, Morganella morganii subsp. sibonii, Ochrobactrum anthropi, Weissella confusa, Escherichia coli, Ochrobactrum sp., Serratia sp., Kestersia sp., Ignatzschineria sp., Bacillus sp. The Myroides sp. strain was resistant to penicillin-G, erythromycin, streptomycin, amikacin, kanamycin, gentamycin, ampicillin, trimethoprim and tobramycin. These strain showed antibacterial action against all bacterial strains except W. confusa, Ignatzschineria sp., A. hydrophila and M. morganii subsp. sibonii. The multidrug resistance of the strain was similar to the resistance of clinical isolates, inhibiting growth of bacteria from clinical, environmental and insect gut samples. The metallo â-lactamase (TUS/MUS) genes were absent, and resistance due to these genes was ruled out, indicating involvement of other secretion machinery.

Moscas varejeiras (Diptera: Sarcophagidae) são causa conhecida de miíase e as bactérias de seus intestinos nunca foram estudadas quanto à atividade antibacteriana. Estudos antimicrobianos de Myroides spp restringem-se à cepas hospitalares. Uma bactéria Gram negativa, Myroides sp, foi isolada do intestino de moscas varejeiras adultas (Sarcophaga sp) e submetida à avaliação de parâmetros nutricionais pelo sistema BIOLOG GN, ao sequenciamento genético 16S rRNA, à sensibilidade a vários antimicrobianos pelo método de difusão de discos e à detecção dos genes de metalo beta lactamases (TUS/MUS). Os efeitos antagonistas foram testados contra bactérias Gram negativas e Gram positivas isoladas de material clínico humano, amostras ambientais e intestino do inseto. As espécies bacterianas incluíram Aeromonas hydrophila, A. culicicola, Morganella morganii subsp sibonii, Ochrobactrum anthropi, Weissella confusa, Escherichia coli, Ochrobactrum sp, Serratia sp, Kestersia sp, Ignatzschineria sp e Bacillus sp. A cepa Myroides sp foi resistente à penicilina G, eritromicina, estreptomicina, amicacina, canamicina, gentamicina, ampicilina, trimetoprim e tobramicina. Esta cepa apresentou atividade antimicrobiana contra todas as cepas exceto W.confusa, Ignatzschineria sp, A. hydrophila e M. morgani subsp sibonii. A resistência múltipla da cepa foi semelhante à de isolados clínicos, inibindo bactérias das amostras clínicas, ambientais e do intestino do inseto. Os genes de metalo beta lactamases (TUS/MUS) estavam ausentes, excluindo-se a resistência mediada por esses genes, o que indica o envolvimento de um mecanismo alternativo de secreção.

Malignant tumor affects the developmental pattern of feeding larvae of Chrysomya albiceps (Wiedemann) and Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera: Calliphoridae)

Larvae of Chrysomya albiceps (Wiedemann) and Chrysomya putoria (Wiedemann) were reared on liver tissues from a rabbit that had a malignant tumor in the thoracic cavity. Larval rearing of both blowfly species was conducted at ambient temperature. Larvae that fed on tissues from the rabbit with the tumor developed at significantly faster rates than those feeding on tissues from the control animal.

Larvas de Chrysomya albiceps (Wiedemann) e Chrysomya putoria (Wiedemann) foram criadas em temperatura ambiente em fígado de coelhos sadios e em fígado de coelho que apresentava tumor na região torácica. Ambas as espécies expostas ao fígado do coelho com patogenia desenvolveram-se significativamente mais rápido que as demais.

Morfologia e duração dos ínstares larvais de Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae), em laboratório / Morphology and duration of larval instars of Chrysomya putoria (Wiedemann) (Diptera, Calliphoridae), in laboratory

Este trabalho visou descrever a morfologia e o tempo de desenvolvimento das larvas de Chrysomya putoria, um importante díptero para saúde pública e medicina legal. As amostras foram coletadas a cada duas horas e, a partir da 56ª hora, as coletas foram realizadas com intervalos de 12 horas até o abandono das larvas maduras do meio de criação. As larvas de C. putoria apresentaram um tempo total de desenvolvimento de 92 horas quando mantidas a 27 °C com comprimento médio de 13,42 mm e características morfológicas peculiares que as diferenciam das outras espécies exóticas e autóctones do Brasil. O esqueleto cefalofaringeano das larvas de terceiro ínstar é robusto e esclerotizado; o gancho labial é completamente pigmentado e curvo, a parte posterior é mais larga que a anterior, mostrando-se levemente pontiagudo. Estas larvas não possuem esclerito oral acessório e o corno dorsal e o ventral apresentam áreas menos pigmentadas. Nota-se uma região não pigmentada em continuação aos cornos, destacando-se no tamanho na região do corno ventral com uma incisão média bem demarcada. Apresentam de 10 a 11 ramificações no espiráculo anterior, peritrema incompleto e presença do botão espiracular, a partir do segundo ínstar.

The objective of this work was to describe the morphology and the developmental time of Chrysomya putoria larvae, a fly of public health and forensic importance. The samples were collected at 2 hr intervals, during the first 56 hr and at 12 hr intervals thereafter, until all mature larvae had abandoned the diet. The total developmental time for Chrysomya putoria larvae at 27 °C was 92 hr, with a mean length of 13.42 mm. The larvae presented unique morphological characteristics which differentiated them from other exotic and autochthonous species found in Brazil. The cephalopharyngeal skeleton of the third instar larvae is robust and sclerotized; the mouth hook is completely pigmented and curved; the posterior end is wider than the anterior, being slightly pointed. The accessory oral sclerit is absent and the dorsal and ventral horns have areas with less pigmentation. It is possible to visualize an area with no pigmentation adjacent to the horns, outstanding in size near the ventral corn with a well delimited medial incision. The anterior spiracles presented 10 to 11 ramifications, open peritrema and the presence of a spiracular bud from the second instar on.