Alteraciones hemostáticas provocadas por el veneno de la culebra mapanare (Porthidium lansbergii hutmanni) en pacientes venezolanos / Haemostatic alterations caused by the venom of Lansberg's hognosed pitviper (Porthidium lansbergii hutmanni) in Venezuelan patients

Objective: to describe the haemostatic characteristics of the venom as well as the potency appraisal of the polyvalent antiophidic serum against haemotoxicity from Porthidium lansbergii hutmani experimental envenomation. Methods: Evaluation was performed of the venom's lethality, haemorrhagic activity, effects on coagulation and platelet aggregation, proteolytic activity, and neutralization by the commercial antivenom available in the country. Results: Several components with haemostatic activities were found in Porthidium l. hutmanni venom when a study of fibrinogenolytic, haemorrhagic and proteolytic activities was conducted of a pool of P.l.h venom. Porthidium l. hutmanni venom lacked the coagulant and defibrinating activities that are characteristic of bothropic venoms. Porthidium l. hutmanni venom showed very high haemorrhagic and anticoagulant activities. These findings could be related to the presence of multiple metalloproteases, which was evidenced in this study, and also the possible presence of phospholipases or other anticoagulant activity proteins that were not defined here. They inhibited platelet aggregation, suggesting that the venom had some proteins with marked effects on haemostasis. The commercial antivenom proved to be of little effectiveness in neutralizing the crude venom haemorrhagic activity. Conclusions: These toxins cause many physiopathological alterations in bitten patients, creating a clinical picture characterized by oedema, local and systemic haemorrhages, and even necrosis, comparable to that seen in bothropic envenomation. Porthidium l. hutmanni venom has no in vitro procoagulant activity, typical of bothropic venoms, suggesting there are variances in its protein conformation. Porthidium l. hutmanni venom is used for horse immunization. However, in order to preserve the patient's life, it is necessary to improve the immunization process to produce antivenom containing high avidity and specificity antibodies against the major toxins present in this venom. Porthidium l. hutmanni venom has demonstrated being a venom with high lethal, haemorrhagic, proteolytic and procoagulant activities, whose description will have enormous utility among clinicians who deal with these accidents in its geographical distribution areas(AU)

Objetivo: Describir las características hemostáticas del veneno y evaluar la potencia del suero polivalente antiofídico contra la hemotoxicidad provocada por el envenenamiento experimental por Porthidium lansbergii hutmanni. Métodos: Se realizó una evaluación de la letalidad, actividad hemorrágica, efectos en la coagulación y agregación plaquetaria, actividad proteolítica y neutralización por el antiveneno disponible comercialmente en el país. Resultados: Se encontraron varios componentes con actividad hemostática en el veneno de Porthidium l. hutmanni al realizarse un estudio de la actividad fibrinogenolítica, hemorrágica y proteolítica de una muestra de veneno de Porthidium l. hutmanni. El veneno de Porthidium l. hutmanni no mostró la actividad coagulante o defibrinante característica de los venenos botrópicos. El veneno de Porthidium l. hutmanni mostró una elevada actividad hemorrágica y anticoagulante. Estos resultados podrían estar relacionados con la presencia de múltiples metaloproteasas, la que quedó demostrado en el estudio, y también a la posible presencia de fosfolipasas u otras proteínas de actividad anticoagulante que no se definen en el mismo. La inhibición de la agregación plaquetaria sugiere que el veneno contiene algunas proteínas con un marcado efecto sobre la hemostasis. El antiveneno comercial mostró poca efectividad en la neutralización de la actividad hemorrágica del veneno crudo. Conclusiones: Estas toxinas provocan muchas alteraciones fisiopatológicas en las víctimas de mordeduras, creando un cuadro clínico caracterizado por edema, hemorragias locales y sistémicas e incluso necrosis comparable con la que ocurre en el envenenamiento botrópico. El veneno de Porthidium l. hutmanni no tiene la actividad procoagulante in vitro típica de los venenos botrópicos, lo que apunta a variaciones en su conformación proteica. El veneno de Porthidium l. hutmanni de utiliza en la inmunización de los caballos. Sin embargo, para preservar la vida del paciente, es necesario mejorar el proceso de inmunización con vistas a producir un antiveneno que contenga anticuerpos de elevada avidez y especificidad contra las principales toxinas presentes en el veneno. El veneno de Porthidium l. hutmanni ha mostrado ser un veneno de elevada actividad letal, hemorrágica, proteolítica y procoagulante, cuya descripción tendrá una enorme utilidad para los médicos que atienden esos accidentes en sus áreas de distribución geográfica(AU)

Preclinical efficacy against toxic activities of medically relevant Bothrops sp. (Serpentes: Viperidae) snake venoms by a polyspecific antivenom produced in Mexico / Eficacia de un antiveneno poliespecífico producido en México para neutralizar, a nivel preclínico, las actividades tóxicas de venenos de Bothrops sp (Serpentes: Viperidae) de importancia médica

Abstract:The assessment of the preclinical neutralizing ability of antivenoms in Latin America is necessary to determine their scope of efficacy. This study was aimed at analyzing the neutralizing efficacy of a polyspecific bothropic-crotalic antivenom manufactured by BIRMEX in Mexico against lethal, hemorrhagic, defibrinogenating and in vitro coagulant activities of the venoms of Bothrops jararaca (Brazil), B. atrox (Perú and Colombia), B. diporus (Argentina), B. mattogrossensis (Bolivia), and B. asper (Costa Rica). Standard laboratory tests to determine these activities were used. In agreement with previous studies with bothropic antivenoms in Latin America, a pattern of cross-neutralization of heterologous venoms was observed. However, the antivenom had low neutralizing potency against defibrinogenating effect of the venoms of B. atrox (Colombia) and B. asper (Costa Rica), and failed to neutralize the in vitro coagulant activity of the venom of B. asper (Costa Rica) at the highest antivenom/venom ratio tested. It is concluded that, with the exception of coagulant and defibrinogenating activities of B. asper (Costa Rica) venom, this antivenom neutralizes toxic effects of various Bothrops sp venoms. Future studies are necessary to assess the efficacy of this antivenom against other viperid venoms. Rev. Biol. Trop. 65 (1): 345-350. Epub 2017 March 01.

ResumenEs necesario estudiar a nivel preclínico la capacidad neutralizante de los antivenenos producidos en América Latina, para conocer su espectro de cobertura. En este estudio se analizó la eficacia preclínica de un antiveneno poliespecífico botrópico-crotálico producido por BIRMEX, en México, para neutralizar los efectos letal, hemorrágico, desfibrinogenante y coagulante in vitro de los venenos de Bothrops jararaca (Brasil), B. atrox (Perú y Colombia), B. diporus (Argentina), B. mattogrossensis (Bolivia) y B. asper (Costa Rica). Se emplearon metodologías de laboratorio estándar en los análisis. En consonancia con estudios anteriores con diversos antivenenos botrópicos en América Latina, se observó un amplio patrón de neutralización de estos venenos heterólogos en la mayoría de los efectos estudiados. Sin embargo, el antiveneno mostró una baja capacidad neutralizante contra el efecto desfibrinogenante de los venenos de B. atrox (Colombia) y B. asper (Costa Rica) y no neutralizó la actividad coagulante in vitro del veneno de B. asper (Costa Rica) a la máxima razón antiveneno/ veneno empleada.

Susceptibilidad de trypanosoma cruzi a diferentes venenos de serpientes de Costa Rica / Susceptibility of Trypanosoma cruzi to different Costa Rican snake venoms

Se evaluaron los efectos tóxicos de los venenos de cinco serpientes costarricenses en cuanto a su capacidad tripanocida contra dos cepas de trypanosoma cruzi y sus efectos en cuanto a los mecanismos de muerte celular. Los venenos de bothrops asper, bothriechis schlegelii, crotalus durissus durissus, atropoides nummifer y A. picadoi, mostraron actividad tripanocida contra las formas de epimastigoto, amastigoto y tripomastigoto. Los venenos de b. asper y de A. nummifer presentaron la más alta citotoxicidad para las células Vero. Los de b. asper y b. schlegelii presentaron la más alta actividad en los epimastigotos de la cepa CL, mientras que los venenos de b. asper y el de A. nummifer fueron más eficientes contra los epimastigotos de la cepa Jennifer. El veneno de b. schlegelii produce un efecto proliferativo en las células Vero; mientras que el de C. d. durissus produce el mismo efecto en los epimastigotos de la cepa CL, ambos a la concentración de 2,5 Ig/mL. Los valores de CI50 mostraron que se requieren menores cantidades contra los amastigotos en relación con los epimastigotos. Los venenos de b. asper y B. schlegelii presentan la más alta actividad contra los amastigotos de ambas cepas. Con los tripomastigotos sanguíneos de la cepa GA, los cinco venenos ocasionaron una disminución de la motilidad en los diferentes tiempos de exposición, pero el veneno de A. nummifer, en las concentraciones más bajas, mostró una actividad más marcada en comparación con los otros veneno. En cuanto a los efectos de los venenos, mediados por los grados de apoptosis, necrosis o proliferación celular, se observó que estos fenémenos se presentan y tienen relación con el tipo de veneno, su concentración y el tiempo de exposición.

The trypanocide effect of venoms from five Costa Rican species of snakes was evaluated against two strains of trypanosoma cruzi and their cellular toxic effects were likewise observed. The venoms of Bothrops asper, bothriechis schlegelii, crotalus durissus durissus, atropoide nummifer and A. picadoi showed evident trypanocide action against epimastigotes, amastigotes and trypomastigotes. The venoms of b. asper and b. schlegelii were shown to be the most active against the epimastigotes of the CL strain, whereas those of b. asper and A. nummifer were more effective against the epimastigotes of the Jennifer strain. The venoms of b. schlegelii and C.d. durissus, at the lowest concentrations of 2.5 Ig/mL, were able to trigger a proliferative effect on Vero cells and epimastigotes of the CL strain, respectively. The IC50 values showed that lower amounts of venoms are necessary in order to inhibit amastigotes as compared to epimastigotes. The venoms of b. asper and b. schlegelii exhibited the highest activity against amastigotes of both T. cruzi strains. All venoms were able to arrest motility of blood trypomastigotes of the GA strain at different times and the most active in this case was A. nummifer venom. The toxic effects of the venoms measured by the degree of apoptosis, necrosis and cell proliferation that they produced showed that all these events occur and are related to the type of venom, its concentration and exposure time.