Prevalence of bovines persistently infected with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy cattle herds in Paraná State, Brazil / Prevalência de bovinos persistentemente infectados com o vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em rebanhos leiteiros no estado do Paraná, Brasil

This study aimed to establish the prevalence of animals persistently infected (PI) with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy farms at Parana State, Brazil. Samples were collected from 6,465 female Holstein Friesian Dairy Cattle, including animals less than two years old, females over two years old who had not given birth at the farm, and mothers of calves diagnosed as persistently infected. The cattle came from 40 dairy herds distributed in 10 municipalities in the State of Paraná. The samples were obtained from May 2015 to August 2018. The diagnosis of PI animals was made with an antigen-capture ELISA test. We detected PI animals in fifteen herds sampled (37.5%), ranging from one to sixteen animals per herd. The prevalence in Parana State's municipalities was 1.78%, ranging from 0.3 to 8.9% at positive herds. The analysis of the individual herds shows significant dissemination of the BVDV in Parana's municipalities, including endemic areas. With this, we highlight the need for measures to raise awareness among producers about the existence and importance of bovine viral diarrhea (BVD) in dairy herds, reinforcing the PI animals' role in disease epidemiology and the economic impact caused by the maintenance of these farm animals.(AU)

Com o intuito de se estabelecer a prevalência de animais persistentemente infectados (PI) com o BVDV em propriedades leiteiras no estado do Paraná. Foram coletadas amostras de 6.465 bovinos, fêmeas, da raça Holandês Preto e Branco (HPB). Amostraram-se animais com idade inferior a dois anos, fêmeas com mais de dois anos que não haviam tido partos na propriedade, e mães de bezerros que foram diagnosticados como persistentemente infectados. Os bovinos foram provenientes de 40 rebanhos leiteiros, distribuídos em 10 municípios no Estado do Paraná. A coleta deu-se no período de maio de 2015 a agosto de 2018. O diagnóstico dos animais PI foi feito por meio do teste de ELISA de captura de antígeno. Animais PI foram detectados em quinze rebanhos amostrais (37,5%), oscilando entre um e dezesseis animais por rebanho. A prevalência nos municípios do estado Paraná foi de 1,78%, oscilando entre 0,3 a 8,9% nos rebanhos positivos. Com a alta prevalência de animais PI observada, quando analisados os rebanhos amostrais individualmente, é possível afirmar que há uma disseminação importante do BVDV em municípios paranaenses, destacando inclusive áreas endêmicas. Com isso, vê-se a necessidade de medidas de conscientização dos produtores sobre a existência e importância da BVD nos rebanhos, destacando o papel dos animais PI na epidemiologia da doença, bem como o impacto econômico causado pela manutenção desses animais nos rebanhos.(AU)

Prevalence of bovines persistently infected with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy cattle herds in Paraná State, Brazil

ABSTRACT: This study aimed to establish the prevalence of animals persistently infected (PI) with bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy farms at Parana State, Brazil. Samples were collected from 6,465 female Holstein Friesian Dairy Cattle, including animals less than two years old, females over two years old who had not given birth at the farm, and mothers of calves diagnosed as persistently infected. The cattle came from 40 dairy herds distributed in 10 municipalities in the State of Paraná. The samples were obtained from May 2015 to August 2018. The diagnosis of PI animals was made with an antigen-capture ELISA test. We detected PI animals in fifteen herds sampled (37.5%), ranging from one to sixteen animals per herd. The prevalence in Parana States municipalities was 1.78%, ranging from 0.3 to 8.9% at positive herds. The analysis of the individual herds shows significant dissemination of the BVDV in Paranas municipalities, including endemic areas. With this, we highlight the need for measures to raise awareness among producers about the existence and importance of bovine viral diarrhea (BVD) in dairy herds, reinforcing the PI animals role in disease epidemiology and the economic impact caused by the maintenance of these farm animals.

RESUMO: Com o intuito de se estabelecer a prevalência de animais persistentemente infectados (PI) com o BVDV em propriedades leiteiras no estado do Paraná. Foram coletadas amostras de 6.465 bovinos, fêmeas, da raça Holandês Preto e Branco (HPB). Amostraram-se animais com idade inferior a dois anos, fêmeas com mais de dois anos que não haviam tido partos na propriedade, e mães de bezerros que foram diagnosticados como persistentemente infectados. Os bovinos foram provenientes de 40 rebanhos leiteiros, distribuídos em 10 municípios no Estado do Paraná. A coleta deu-se no período de maio de 2015 a agosto de 2018. O diagnóstico dos animais PI foi feito por meio do teste de ELISA de captura de antígeno. Animais PI foram detectados em quinze rebanhos amostrais (37,5%), oscilando entre um e dezesseis animais por rebanho. A prevalência nos municípios do estado Paraná foi de 1,78%, oscilando entre 0,3 a 8,9% nos rebanhos positivos. Com a alta prevalência de animais PI observada, quando analisados os rebanhos amostrais individualmente, é possível afirmar que há uma disseminação importante do BVDV em municípios paranaenses, destacando inclusive áreas endêmicas. Com isso, vê-se a necessidade de medidas de conscientização dos produtores sobre a existência e importância da BVD nos rebanhos, destacando o papel dos animais PI na epidemiologia da doença, bem como o impacto econômico causado pela manutenção desses animais nos rebanhos.

Co-infection by Neopora caninum and bovine viral diarrhea virus in cattle from Rio Grande do Sul, Brazil, destined to exportation / Coinfecção por Neospora caninum e vírus da diarreia viral bovina em bovinos do Rio Grande do Sul, Brasil, destinados à exportação

Reproductive tests in cattle are of great economic importance, given the impact it can have on the production system and may be caused by agents. Neospora caninum and Bovine Viral Diarrhea virus (BVDV) are considered of great importance as reproductive and should be considered responsible for keeping animals persistently infected. The present study included 479 calf serum samples for export in the state of Rio Grande do Sul (RS). All samples were screened for BVDV by an ELISA antigen. BVDV antigen-positive ELISA samples were isolated from BVDV in cell culture. An indirect immunofluorescence (IFT) technique was used to detect anti-N. caninum antibodies. Of the 479 export-treated serum samples, 361 were positive for BVDV antigens by ELISA and/or viral isolation test (361/479-75.36%), and 109 IFT-positive samples for N. caninum (109/479-22.75%). Despite detection of antibodies anti-N. caninum did not differ statistically between naturally infected BVDV and non-BVDV infected animals suggesting that there is no interference of BVDV infection on infection or detection rate of animals with N. caninum, positive animals in viral isolation and high DO in BVDV-Ag ELISA. may present active disease and consequent immunosuppression, contributing to a potential reactivation of N. caninum.(AU)

Testes reprodutivos em bovinos são de grande importância econômica, dado o impacto que podem ter no sistema de produção e podem ser causados por agentes. O Neospora caninum e o vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) são considerados de grande importância como reprodutivos e devem ser considerados responsáveis por manter os animais persistentemente infectados. O presente estudo incluiu 479 amostras de soro de bezerro para exportação no estado do Rio Grande do Sul (RS). Todas as amostras foram rastreadas para BVDV por um antígeno ELISA. As amostras de ELISA positivas para o antigénio BVDV foram isoladas a partir de BVDV em cultura de células. Uma técnica de imunofluorescência indireta (IFT) foi utilizada para detectar anticorpos anti-N caninum. Das 479 amostras de soro tratadas para exportação, 361 foram positivas para antígenos de BVDV por ELISA e/ou teste de isolamento viral (361/479-75,36%) e 109 amostras positivas para IFT para N. caninum (109/479-22,75%). Apesar da detecção de anticorpos anti-N. caninum não diferiu estatisticamente entre animais infectados naturalmente BVDV e não BVDV sugerindo que não há interferência da infecção pelo BVDV na infecção ou taxa de detecção de animais com N. caninum, animais positivos em isolamento viral e alta DO em BVDV-Ag ELISA, pode apresentar doença ativa e consequente imunossupressão, contribuindo para uma potencial reativação de N. caninum.(AU)

Pestivirus spillover effect: molecular detection of bovine viral diarrhea virus in domestic and feral pigs / Efeito spillover de pestivírus: detecção molecular do vírus da diarreia viral bovina em suínos domésticos e javalis

Pestivirus infections are important in the livestock industries, with infection occurring in cattle, sheep and pigs. The Pestivirus genus of the family Flaviviridae, includes four recognized species: bovine viral diarrhea virus 1 (BVDV-1), bovine viral diarrhea virus 2 (BVDV-2), border disease virus (BDV), and classical swine fever virus (CSFV). All pestivirus species can infect pigs, therefore accurate and specific pestivirus detection and differentiation is of great importance to assure control measures in swine populations. The aim of the study was the molecular detection of different pestiviruses in domestic and feral pigs. A total of 527 samples (92 pigs and 435 wild boars) were tested for pestiviruses detection using molecular assays. Eleven positive samples (6 wild boars and 5 domestic pigs) were identified using panpestivirus primers targeting the 5'- UTR region of the pestivirus RNA genome. Further all the positive samples were sequentially tested for detection of CSFV, BVDV-1 and BVDV-2 using specific primers. All RNAs were identified as positives for BVDV-1 and no amplification signals were obtained from BVDV-2 and CSFV. The current detection of BVDV-1 in clinical swine specimens highlights the important risk factor of swine population as reservoir and consequently carrier for BVDV.(AU)

As infecções por pestivírus são importantes nas indústrias pecuárias, com infecções em bovinos, ovinos e suínos. O gênero Pestivirus da família Flaviviridae inclui quatro espécies reconhecidas: vírus da diarreia viral bovina 1 (BVDV-1), vírus da diarreia viral bovina 2 (BVDV-2), vírus da doença de fronteira (VDF) e vírus da peste suína clássica (VPSC). Todas as espécies de pestivírus podem infectar porcos, portanto a detecção e diferenciação precisas e específicas de pestivírus são de grande importância para garantir medidas de controle nas populações suínas. O objetivo do estudo foi a detecção molecular de diferentes pestivírus em suínos domésticos e javali. Um total de 527 amostras (92 porcos e 435 javalis) foram testados para detecção de pestivírus usando ensaios moleculares. Onze amostras positivas (6 javalis e 5 porcos domésticos) foram identificadas usando iniciadores de panpestivírus visando a região 5'-UTR do genoma do RNA do pestivírus. Além disso, todas as amostras positivas foram testadas sequencialmente para detecção de VPSC, BVDV-1 e BVDV-2 usando iniciadores específicos. Todos os RNAs foram identificados como positivos para BVDV-1 e nenhum sinal de amplificação foi obtido do BVDV-2 e CSFV. A detecção atual do BVDV-1 em amostras clínicas de suínos destaca o importante fator de risco da população suína como reservatório e consequentemente portador do BVDV.(AU)

Identification and characterization of pestiviruses isolated from individual fetal bovine serum samples originated in Rio Grande do Sul state, Brazil / Identificação e caracterização de pestivírus isolados de amostras individuais de soro fetal bovino originárias do Rio Grande do Sul, Brasil

The identification of diversity of bovine pestiviruses circulating in the field is fundamental for continuous evaluation of diagnostic tests and vaccine composition. In this article we performed the genetic and antigenic characterization of twelve bovine pestiviruses isolated in the western region of Rio Grande do Sul, Brazil. The viruses were isolated from sera of bovine fetuses or from animals with clinical presentations suggestive of pestivirus infection. Genetic characterization by sequencing and phylogenetic analysis of the 5'UTR region of the viral genome allowed for the identification of bovine viral diarrhea virus (BVDV-1a, 4/12, 33.3%), BVDV-1b (6/12, 50%) and BVDV-2 (2/12, 16.7%). The reactivity of the isolates with a panel of monoclonal antibodies raised against envelope proteins (Erns, E1 and E2) demonstrated a high antigenic variability among isolates. Thus, the active circulation of bovine pestivirus infection, with high genetic and antigenic variability, in cattle on the western border of RS was confirmed, demonstrating the importance of continuous characterization of the pestiviruses circulating in the cattle herds to keep the diagnostic and control measures up to date.(AU)

A identificação da diversidade de pestivírus bovinos que circulam no campo é fundamental para a avaliação contínua dos testes de diagnóstico e composição de vacina. Neste artigo, realizamos a caracterização genética e antigênica de doze pestivírus bovinos isolados na região oeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Os vírus foram isolados de soros de fetos bovinos ou de animais com apresentações clínicas sugestivas de infecção por pestivírus. A caracterização genética por sequenciamento e análise filogenética da região 5'UTR do genoma viral permitiu a identificação do vírus da diarréia viral bovina (BVDV-1a, 4/12, 33,3%), BVDV-1b (6/12, 50%) e BVDV-2 (2/12, 16,7%). A reatividade dos isolados com um painel de anticorpos monoclonais criados contra proteínas do envelope (Erns, E1 e E2) demonstrou uma alta variabilidade antigênica entre os isolados. Assim, confirmou-se a circulação ativa da infecção por pestivírus bovino, com alta variabilidade genética e antigênica, em bovinos na fronteira oeste do RS, demonstrando a importância da contínua caracterização dos pestivírus circulantes em bovinos para manter atualizadas as medidas de diagnóstico e controle.(AU)

Serological response against bovine herpesvirus and bovine viral diarrhea virus induced by commercial vaccines in Holstein heifers / Resposta sorológica contra herpesvírus bovino e vírus da diarreia viral bovina induzida por vacinas comerciais em novilhas Holandesas

Vaccination is a strategy to the prevention and control of reproductive diseases caused by bovine viral diarrhea virus (BVDV) and bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1), however the various compositions of commercial vaccines should be evaluated for their ability to induce protection mediated by antibodies. The objective of this research was to evaluate the production of specific neutralizing Abs against BVDV-1 and 2, and BoHV-1 induced by commercial vaccines composed by different adjuvants. Holstein heifers were vaccinated and distributed in three experimental groups: Group I (G1) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1, BVDV-2 and BoHV-1 diluted in alum hydroxide as adjuvant (n=9); Group II (G2) was vaccinated with an product containing inactivated strains of BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 and BoHV-5 diluted in oil emulsion as adjuvant (n=10); Group III (G3) was vaccinated with a commercial vaccine containing inactivated BVDV-1 and BVDV-2, besides live modified thermosensitive BoHV-1, diluted in Quil A, amphigen and cholesterol (n=10); A control, non-vaccinated group (n=6) was mock vaccinated with saline. Heifers received two subcutaneous doses of 5mL of each commercial vaccine on the right side of the neck, with 21 days interval. Humoral immune response was assessed by the virus neutralization test (VN) against BVDV-1 (NADL and Singer strains), BVDV-2 (SV253 strain) and BoHV-1 (Los Angeles strain) in serum samples collected on vaccination days zero (D0), 21 (D21) and 42 (D42; 21 days after boosting). Neutralizing Abs against BVDV-1 NADL was detected only in D42, regardless of the vaccine used. Similar geometric mean titers (GMT) for BVDV-1 NADL were observed between G1 (log2=5.1) and G3 (log2=5.1). The seroconversion rate (%) was higher in G1 (78%) when compared to G2 (10%) and G3 (40%). For BVDV-1 Singer, it was also possible to detect Abs production in G1 (log2=5.8, 100% seroconversion rate) and G3 (log2=3.5, seroconversion rate = 60%), only after the booster dose (D42). Neutralizing Abs to BVDV-2 (SV253) were detected only in G3, observing 90% seroconversion associated with high titers of Abs (log2=6.7) after the 2nd dose of vaccine (D42). Heifers from G1 and G3 responded to BoHV-1 after the first dose (D21): G1 (log2=2.5, seroconversion rate = 67%) and G3 (log2=0.7, seroconversion rate = 80%). In D42, a higher magnitude response was observed in the heifers from G3 (log2=6.1, 100%) compared with G1 (log2=4.3, 100%) and G2 (log2=2.7, 60%). Based on the data obtained, it can be concluded that the commercial vaccine contained aluminum hydroxide (G1) was most effective in the induction of antibodies against BVDV-1. On the other hand, this vaccine did not induce the production of neutralizing Abs against BVDV-2. Only the heifers from G3 (Quil A, amphigen and cholesterol) generated neutralizing Abs against BVDV-2. The animals that received commercial vaccine containing oil emulsion as adjuvant (G2) had a weak/undetectable response against BVDV-1 and BVDV-2. The best protective response against BoHV-1 was observed in heifers vaccinated with the live modified thermosensitive virus.(AU)

A vacinação é utilizada como estratégia para a prevenção e controle das doenças reprodutivas, causadas pelos vírus da diarreia viral bovina (BVDV) e herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1), entretanto, as diversas composições de vacinas comerciais devem ser avaliadas quanto a sua eficiência protetiva mediada por anticorpos (Acs). O objetivo desta pesquisa foi avaliar a produção Acs neutralizantes específicos para cepas de BVDV-1 e 2, e BoHV-1 induzida por vacinas comerciais contendo diferentes tipos de adjuvantes. Para tal, novilhas Holandesas foram vacinadas e distribuídas em três grupos experimentais: Grupo I (G1) foi vacinado com uma vacina comercial composta por cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2 e BoHV-1 diluídas em hidróxido de alumínio como adjuvante (n=9); Grupo II (G2) foi vacinado com produto contendo as cepas inativadas de BVDV-1, BVDV-2, BoHV-1 e BoHV-5 em uma emulsão oleosa como adjuvante (n=10); O Grupo III (G3) foi vacinado com uma vacina comercial contendo BVDV-1 e BVDV-2 inativado, além do BoHV-1 vivo modificado e termosensivel, diluídos em adjuvante contendo Quil A, Amphigem e colesterol (n=10); O Grupo Controle não vacinado (n=6) foi inoculado com solução salina. As novilhas receberam duas doses das respectivas vacinas ou solução salina (5mL), com intervalo de 21 dias, por via subcutânea, na tábua do pescoço do lado direito. A resposta imune humoral foi avaliada pelo teste de vírus neutralização (VN) contra o BVDV-1 (cepas NADL e Singer), BVDV-2 (cepa SV253) e BoHV-1 (cepa Los Angeles) em amostras de soro coletadas nos dias (D) de vacinação zero (D0), 21 dias após 1ª dose (D21)e 42 (D42; 21 dias após A 2ª dose). Os anticorpos neutralizantes contra o BVDV-1 NADL foram detectados apenas em D42, independentemente da vacina utilizada. Os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos foram semelhantes entre G1 (log2=5,1) e G3 (log2=5,1). A taxa de soroconversão foi maior no G1 (78%) quando comparado ao G2 (10%) e G3 (40%). Para o BVDV-1 Singer, somente após D42 foi observada a produção de Acs no G1 (log2=5,8; taxa de soroconversão de 100%) e G3 (log2=3,5; taxa de soroconversão = 60%). Os anticorpos contra BVDV-2 (SV253) foram detectados apenas nas novilhas do G3, observando-se taxa de soroconversão de 90% com altos títulos de anticorpos neutralizantes (log2=6,7) em D42. Novilhas G1 e G3 responderam ao BoHV-1 após a primeira dose (D21): G1 (log2=2,5; taxa de seroconversão = 67%) e G3 (log2=0,7; taxa de seroconversão = 80%). Em contrapartida, foi observada uma maior magnitude de resposta para as novilhas G3 (log2=6,1; 100%) em D42, em relação aos animais G1 (log2=4,3; 100%) e G2 (log2=2,7; 60%). Com base nos dados obtidos, foi possível concluir que a vacina composta por hidróxido de alumínio (G1) foi mais eficaz na produção de anticorpos contra o BVDV-1, em contrapartida esse produto não induziu anticorpos contra o BVDV-2. Apenas as novilhas do G3 (Quil A, amphigen e colesterol) geraram Acs neutralizantes contra o BVDV-2. Os animais que receberam a vacina em emulsão oleosa (G2) como adjuvante apresentaram uma resposta fraca/indetectável contra o BVDV-1 e BVDV-2. A melhor resposta protetiva contra o BoHV-1 foi observada nas novilhas vacinadas com a vacina viva modificada termosensível.(AU)

Prevalencia de algunas enfermedades infecciosas en bovinos de resguardos indígenas del cauca, colombia, 2017 / Prevalence of some infectious diseases in cattle of the indigenous resguards in cauca, colombia 2017

RESUMEN La zona del Cauca posee resguardos indígenas que han presentado diferentes problemáticas asociadas a la lucha armada en Colombia, lo que ha limitado que las entidades puedan realizar programas de control de enfermedades bovinas. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue determinar la prevalencia de algunas enfermedades infecciosas, de carácter reproductivo, en el ganado bovino, de tres resguardos indígenas del Cauca, 2017. Se recolectaron muestras sanguíneas de 30 vacas, para determinar la prevalencia de Neospora caninum, Brucella abortus, diarrea viral bovina (DVB), rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR) y Leptospira sp. serovares Hardjo prajitno, bovis y Pomona. Las pruebas, se realizaron por ELISA, rosa de bengala y microaglutinación. Mediante el software R, se efectuó un análisis descriptivo y se determinaron las prevalencias para cada enfermedad, se estimaron las co-infecciones y se realizó un modelo de regresión logística, para determinar el efecto del hato, resguardo, componente racial, grupo etario, número de animales y tamaño del hato, sobre la positividad a las enfermedades. Se encontró una prevalencia del 36%, para N. caninum; 60%, DVB; 30%, IBR; 0%, B. abortus; Leptospira spp. serovares Harjo prajitno, 26%; Hardjo bovis, 12% y Pomona, 10%. De acuerdo con el análisis de riesgo, la seropositividad para DVB e IBR estuvo asociada con el resguardo donde habitaban los animales, en este caso, Tacueyó tuvo más riesgo y estuvo directamente relacionado con el área de los hatos; entre mayor área más animales fueron positivos. En general, se encontró que la situación de la zona es similar a la de otros lugares de Colombia.

ABSTRACT The Cauca region in Colombia has indigenous reservations that have presented different problems associated with the armed conflict, which has limited the entities to carry out bovine disease control programs. Therefore, the aim of this work was to determine the prevalence of some infectious diseases of reproductive traits in cattle of three indigenous resguards in Cauca, 2017. Blood samples of 30 cows were collected to determine the prevalence of Neospora caninum, Brucella abortus, bovine viral diarrhea (BVD), Infectious bovine rhinotracheitis (IBR) and Leptospira sp. serovars Hardjo prajitno, bovis and Pomona. The tests were performed by ELISA, rose bengal and microscopic agglutination. Using R software, a descriptive analysis was carried out and the frequencies for each disease were estimated. In addition, coinfections between diseases were estimated and a logistic regression model was performed to determine the effect of the herd, reservation, racial component, age group, number of animals and size of the farm on the disease positivity. The prevalence was N. caninum 36%, BVD 60%, IBR 30%, B. abortus 0%, Leptospira spp. serovars Hardjo prajitno 26%, Hardjo bovis 12%, y Pomona 10%. According to the risk analysis, the seropositivity for BVD and IBR were associated with the place where the animals lived, in this case Tacueyó, but this was directly related to the size of the herds, since the greater, the area more animals were positive. In general, it was found that the situation in the region is similar to that of other sites in Colombia.

Evidence of bovine viral diarrhea virus transmission by back pond water in experimentally infected piglets / Evidência da transmissão do vírus da diarreia viral bovina através da lâmina d'água em leitões experimentalmente infectados

Swine can be infected by bovine viral diarrhea virus (BVDV). However, transmission routes among pigs are still unknown. The objective of the present study was to induce experimental infection of BVDV-1 in weaned piglets and to assess the potential transmission through pen back pond water, used to facilitate heat exchange of the pigs housed in barns. Two repetitions (BP1 and BP 2) were performed using 12 piglets proven to be free BVDV (n=6 per repetition) allocated into three groups: control, sentinels and infected with two piglets each. The piglets were placed in stainless steel isolators. The infected group received an inoculum containing BVDV-1, Singer strain. The piglets remained in the cabinets for 25 days, during which samples of nasal swab were collected daily and blood sampled weekly. At the end, the piglets were euthanized, necropsied and organ fragments were collected for histopathology, immunohistochemistry and RT-PCR. In the first experiment (BP1) the infected animals shed the virus between days 6 and 21 post-infection. Regarding the sentinel group, shedding occurred in only one piglet, on the 20th day after infection, and seroconversion was observed on the 25th day post-infection. In BP2, infected piglets I3 and I4 shed the virus on days 4 and 21 post-infection, respectively. Only one sentinel piglet (S3) she the virus on day 13 post-infection. Therefore, it was concluded that pigs can become infected with BVDV-1 and shed potentially infectious viral particles consequently, being able to transmit the virus to other pigs through back pond water.(AU)

Os suínos podem ser infectados pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV). No entanto, as vias de transmissão entre os suínos são ainda desconhecidas. O objetivo do presente estudo foi induzir a infecção experimental de BVDV-1 em leitões desmamados e avaliar a potencial transmissão pela lâmina d'água, que ajuda na troca de calor dos suínos alojados em baias. Duas repetições do experimento (BP1 e BP2) foram realizadas com 12 animais comprovadamente livres de BVDV (n=6 por repetição) alocados em três grupos: controle, sentinelas e infectados, com dois animais cada. Os animais foram mantidos em isoladores de aço inoxidável. O grupo infectado recebeu um inóculo contendo BVDV-1, estirpe Singer. Os animais permaneceram nos isoladores durante 25 dias e, durante esse período, amostras de suabe nasal foram coletadas diariamente e sangue coletado semanalmente. No final, os animais foram eutanasiados, necropsiados e fragmentos de órgãos foram coletados para histopatologia, imuno-histoquímica e RT-PCR. No primeiro experimento (BP1), os animais infectados excretaram partículas virais entre os dias 6 e 21 pós-infecção. Quanto ao grupo sentinela, a excreção ocorreu apenas em um animal, no 20º dia pós-infecção, e a soroconversão foi observada no 25º dia pós-infecção. Na BP2, os animais infectados I3 e I4 excretaram partículas virais nos dias 4 e 21 pós-infecção, respectivamente. Apenas um animal sentinela (S3) apresentou excreção no dia 13 pós-infecção. Concluiu-se que os suínos podem se infectar com BVDV-1 e excretar partículas virais potencialmente infecciosas, sendo capazes de transmitir o vírus a outros suínos através da lâmina d'água.(AU)

Identificación de factores asociados con la exposición al virus de la diarrea viral bovina (VDVB) en terneras de hatos lecheros de la sabana de Bogotá / Identification of factors associated with exposure to bovine viral diarrhea virus (BVDV) in dairy-herd calves in the Bogotá savanna / Identificação de fatores associados com a exposição ao vírus da diarreia viral bovina (VDVB) em bezerras de fazendas de gado leiteiro da savana de Bogotá

Resumen El virus de la diarrea viral bovina (VDVB) es un patógeno que afecta la salud bovina; produce signos clínicos como bronconeumonía, diarrea, teratogenia y pérdidas reproductivas. El objetivo del estudio fue determinar la seroprevalencia y algunos factores asociados con la exposición al VDVB en un total de 930 terneras provenientes de 31 hatos lecheros de la sabana de Bogotá. Los datos de los hatos se obtuvieron a través de una encuesta epidemiológica, así como la información individual de las terneras. Se utilizó una prueba de ELISA para la detección de anticuerpos contra VDVB p80. Los datos se analizaron con estadística de frecuencias, descriptiva, análisis univariado y con un modelo de regresión logística binaria en el que se evaluaron factores de confusión a través de la comparación entre los odds ratio (OR) crudos y ajustados. La seroprevalencia promedio de VDVB fue del 27,1 % (rango 0-90 %); adicionalmente, en el 83,9 % de los hatos se observaron anticuerpos contra VDVB. Los factores asociados con la exposición a VDVB fueron: 1) la edad en animales menores de 4 meses (OR = 4,9; IC 95 %: 2,52-9,56), 2) histórico de aborto de la madre (OR = 6,4; IC 95 %: 3,91-10,46; p = 0,001) y 3) la presentación histórica de diarrea (OR = 2,6; IC 95 %: 1,58-4,46; p = 0,010). Este estudio permitió confirmar la alta exposición al virus en los hatos e identificar de algunos factores asociados, lo cual contribuye al conocimiento de la epidemiología de la enfermedad.

Abstract Bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a pathogen that affects bovine health; it produces clinical signs such as bronchopneumonia, diarrhea, teratogenicity, and reproductive losses. This study aimed to determine seroprevalence and some other factors associated with exposure to BVDV in a total of 930 calves from 31 dairy herds in the Bogotá savanna. The data of the herds, as well as individual information of the calves, were collected through an epidemiological survey. An ELISA test was used to detect antibodies to BVDV p80. Data were analyzed with frequency and descriptive statistics, univariate analysis, and a binary logistic regression model, in which confounding factors were evaluated through a comparison between crude and adjusted odds ratios (OR). The average seroprevalence of BVDV was 27.1% (range 0-90%); additionally, antibodies against BVDV were observed in 83.9% of the herds. The factors associated with exposure to BVDV were: 1) age of animals under 4 months (OR = 4.9; 95% CI: 2.52-9.56); 2) records of abortion of the mother (OR = 6.4; 95% CI: 3.91-10.46; p = 0.001); and 3) records of diarrhea (OR = 2.6; 95% CI: 1.58-4.46; p = 0.010). This study allowed confirming a high exposure to the virus in these herds and identifying some associated factors, which contributes to a better understanding of the epidemiology of the disease.

Resumo O vírus da diarreia viral bovina (VDVB) é um patógeno que afeta a saúde bovina; produz sinais clínicos como broncopneumonia, diarreia, teratógena e perdas reprodutivas. O objetivo do estudo foi determinar a soro prevalência e alguns fatores associados com a exposição ao VDVB em um total de 930 bezerras provenientes de 31 fazendas de gado leiteiro da savana de Bogotá. Os dados dos rebanhos foram obtidos através de uma enquete epidemiológica, assim como a informação individual das bezerras. Utilizou-se uma prova de ELISA para detecção de anticorpos contra VDVB p80. Os dados foram analisados com estatística de frequências, descritiva, análise uni variada e com um modelo de regressão logística binária no qual foram avaliados fatores de confusão através da comparação entre os odds ratio (OR) crus e ajustados. A soro prevalência média de VDVB foi do 27,1 % (rango 0-90 %); adicionalmente, no 83,9 % dos rebanhos se observaram anticorpos contra VDVB. Os fatores associados com a exposição a VDVB foram: 1) a idade em animais menores de 4 meses (OR = 4,9; IC 95 %: 2,52-9,56), 2) histórico de aborto da madre (OR = 6,4; IC 95 %: 3,91-10,46; p = 0,001) e 3) a apresentação histórica de diarreia (OR = 2,6; IC 95 %: 1,58-4,46; p = 0,010). Este estudo permitiu confirmar a alta exposição ao vírus nos rebanhos bovinos e identificar de alguns fatores associados, fator que contribui para o conhecimento da epidemiologia da doença.

Primera evidencia del Virus de Diarrea Viral Bovina (VDVB) genotipo 2 en Colombia / First evidence of Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) genotype 2 in Colombia

RESUMEN El Virus de la Diarrea Viral Bovina (VDVB) es un patógeno que afecta los hatos bovinos. El virus ha sido clasificado en dos biotipos (citopático y no citopático) y en 3 genotipos (1, 2 y 3) según su secuencia nucleotídica. El propósito de este estudio fue determinar la presencia del VDVB genotipo 2 (VDVB-2) en Colombia, mediante el estudio de cuatro zonas representativas de producción ganadera por medio de RT-PCR en muestras de suero y cartílago de oreja. Para ello, se recolectaron los sueros preparto de 379 vacas, de 274 terneros precalostrales (antes de que se les diera calostro), y de 145 terneros de 25 días post-nacimiento. Adicionalmente, se tomaron 181 biopsias de cartílago de oreja de estos terneros. Se realizó RT-PCR a todas las muestras para determinar la presencia o ausencia del VDVB. Aquellas muestras que resultaron positivas se evaluaron adicionalmente mediante dos métodos para determinar su genotipo: a) una nueva RT-PCR con primers específicos para el VDVB-2, y b) una PCR diferente con la que se obtuvo un producto de 296 pb, el cual se sometió a digestión enzimática. Los resultados mostraron que 17 (4,48%) muestras de suero preparto fueron positivas para Pestivirus, de las cuales 6 correspondieron al VDVB-2 (1,58%). Ninguna de las muestras de suero obtenidas de los terneros resultó positiva para el VDVB-2. Finalmente, 18 (9,9%) biopsias de cartílago de oreja fueron positivas al VDVB, 14 (7,7%) de las cuales resultaron positivas para el VDVB-2. El presente estudio es la primera evidencia documentada de la presencia del VDVB-2 en bovinos de Colombia.

ABSTRACT The bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a pathogen that affects cattle. The virus has been classified into two biotypes (cytopathic and non-cytopathic) and three genotypes (1, 2 or 3) according to their nucleotide sequence. The objective of this study was to determine the presence of the BVDV genotype 2 (BVDV-2) in Colombia, through the study of four representative areas of cattle production by means of RT-PCR conducted on serum and ear notches. For this purpose, sera were collected from 379 prepartum cows, 274 calves born to these cows (before they were given colostrum), and 145 25-day- old calves. Additionally, 181 ear notches were taken from these calves. RT-PCR was performed on all samples to determine the presence or absence of BVDV. Tha samples that tested positive were further assessed by two methods to determine their genotype: a) a new RT-PCR with specific primers for BVDV-2, and b) a different PCR obtaining a product of 296 bp, which was further subjected to enzymatic digestion. The results showed that 17 (4.48%) prepartum sera samples were positive for Pestiviruses, from which 6 corresponded to BVDV-2 (1.58%). None of the sera obtained from the calves were positive for BVDV-2. Finally, 18 (9.9%) ear notches were positive for BVDV, 14 (7.7%) of which were positive for BVDV-2. The present study is the first documented evidence of the presence of the BVDV-2 in cattle from Colombia.

Potencial antiviral e virucida da melitina e apamina contra herpesvírus bovino tipo 1 e vírus da diarreia viral bovina / Antiviral and virucidal potential of melittin and apamin against bovine herpesvirus type 1 and bovine viral diarrhea virus

A busca por alternativa aos fármacos sintéticos têm revelado descobertas no campo da farmacologia e, nesse sentido, melitina e apamina, dois constituintes do veneno de abelhas, foram descritas com várias ações farmacológicas. Este estudo objetivou avaliar in vitro as capacidades antiviral e virucida destes componentes. Para tanto, células MDBK (Madin Darby Bovine Kidney), após verificação das respectivas doses tóxicas por ensaio MTT ((3-(4,5 dimetiltiazol-2yl)-2-5-difenil-2H tetrazolato de bromo), foram cultivadas em microplacas e tratadas com diferentes concentrações de apamina, melitina e sua associação. Esse tratamento ocorreu antes e após a infecção com 0,1 MOI (multiplicidade de infecção) de cepas citopatogênicas de herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) cepa Los Angeles e vírus da diarreia viral bovina (BVDV) cepa NADL. Após incubação por 72 horas, 37oC, as células foram submetidas ao ensaio MTT para estimativa da viabilidade celular. Em experimento paralelo, placas que foram submetidas ao mesmo procedimento sofreram ciclo de congelamento e descongelamento das células, para rompimento das mesmas e mensuração dos títulos virais. O ensaio virucida foi realizado incubando-se suspensões de BoHV-1 e BVDV com as soluções de apamina, melitina e associação por 24 horas a 37oC e 22oC. O título viral foi avaliado às 0 horas, 1, 2, 4, 8 e 24 horas de incubação. A concentração citotóxica para 50% das células (CC50) de melitina foi 2,32 μg/ml e apamina não demonstrou toxicidade à maior concentração testada (100μg/ml). Houve efeito antiviral da melitina sobre BoHV-1, especialmente na concentração de 2μg/ml, onde observou-se 85,96% de viabilidade celular quando o tratamento foi realizado antes da infecção e 86,78% de viabilidade quando o tratamento foi realizado após a infecção. Houve ainda redução de 90% das partículas virais de BoHV-1. Em menores concentrações (1 e 1,5μg/ml) de melitina não houve atividade antiviral, pois a viabilidade celular foi baixa, demonstrando efeito citopático do vírus. Na associação das duas substâncias houve queda no título de BVDV e observou-se maior viabilidade celular quando comparados à ação isolada dos composto sobre este vírus. Isso se confirma na atividade virucida, uma vez que houve decréscimo de 90% das partículas virais de BVDV com a associação dos dois compostos do veneno de abelhas. Atuando individualmente, melitina apresentou efeito antiviral e virucida frente ao BoHV-1, zerando seu título em apenas 2 horas a 37oC. Conclui-se que melitina tem ação antiviral e virucida frente ao BoHV-1 e sua associação com apamina potencializou seus efeitos frente ao BVDV.(AU)

The search for an alternative to synthetic drugs have revealed discoveries in the field of pharmacology and, according to melittin and apamin, two components of bee venom which have been described were with various pharmacological actions.This study aimed to evaluate the in vitro antiviral and virucidal capabilities of these components. Therefore, after verification of their toxic doses by MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) assay, MDBK cells (Madin Darby Bovine Kidney) have been cultivated in microplates and treated with different concentrations of apamin, melittin and its association. This treatment occurred before and after infection with MOI (multiplicity of infection) 0.1 of cytopathogenic strains of bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) strain Los Angeles and bovine viral diarrhea virus (BVDV) strain NADL. After incubation for 72 hours, 37°C, the cells were submitted to MTT assay to estimate cell viability. In parallel experiments, plates were subjected to the same procedure suffered freezing and thawing cycle the cells to rupture the same and measurement of viral titers. The virucidal assay was performed by incubating suspension of bovine herpesvirus type-1 and BVDV with apamin solutions, melittin and association for 24 hours at 37°C and 22°C. The viral titer was evaluated at 0 hours, 1, 2, 4, 8 and 24 hours of incubation. The cytotoxic concentration to 50% of the cells (CC50) of melittin was 2.32g/mL and apamin did not show toxicity at the greater concentration tested (100μg/mL). There was antiviral effect of melittin on bovine herpesvirus type-1, especially at a concentration of 2μg/mL, where was observed 85.96% cell viability when treatment was performed before the infection and 86.78% viability when the treatment was carried out after infection. There was also a 90% reduction of viral particles of bovine herpesvirus type-1. In lower concentrations (1 and 1.5μg/mL) melittin no antiviral activity because cell viability was low, showing cytopathic effect of the virus. At the association two substances there were a decrease in the title of BVDV and there was higher cell viability when compared to the isolated action of the compounds of this virus. This is confirmed in the virucidal activity, since there was a decrease of 90% of the viral particles of BVDV with the combination of the two compounds of bee venom. Acting individually, melittin showed antiviral effect and virucidal against for BoHV-1, zeroing its title in just 2 hours at 37°C. It is concluded that melittin has antiviral and virucidal action against the BoHV-1 and its association with apamin potentiate its effects against BVDV.(AU)

Transferência de imunidade passiva (TIP) e dinâmica de anticorpos específicos em bezerros naturalmente expostos para as viroses respiratórias / Passive immune transfer (PIT) and dynamics of specific antibodies in calves naturally exposed to the respiratory viruses

Esta pesquisa avaliou a TIP e a dinâmica de anticorpos (ACs) específicos em bezerros naturalmente expostos aos agentes causadores da doença respiratória bovina (DRB). Foram selecionados 19 bezerros Holandeses alimentados com colostro proveniente de doadoras vacinadas para DRB. Amostras de soro foram obtidas antes e após a ingestão do colostro (48h) para a soroneutralização (SN). Os valores médios (log2) detectados após colostragem foram de 11,5±1,6 (BVDV), 8,8±1,3 (BoHV-1), 5,5±1,6 (BRSV) e 8,4±1,5 (BPIV-3). Cinco bezerros foram criados do nascimento aos 240 dias de vida, observando-se decréscimo nos títulos de ACs para BVDV, BoHV-1 e BPIV-3 ao longo do tempo (P≤0,001). As taxas de infecções detectadas entre o D14 e o D240 foram de 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5), e 60% (3/5), respectivamente, para BVDV, BoHV-1, BRSV e BPIV-3. A maioria dos bezerros manifestou broncopneumonia após as infecções virais. Os bezerros apresentaram ACs para todas as viroses às 48 horas de vida, porém os títulos adquiridos para o BRSV foram baixos. A susceptibilidade para as infecções variou de acordo com os níveis e a duração dos títulos de ACs maternos.(AU)

This research evaluated the PIT and the dynamics of specific antibody (Ab) for calves naturally exposed to the viral agents involved in Bovine Respiratory Disease (BRD). Nineteen Holstein calves fed colostrum from vaccinated donors for DRB. Serum samples were obtained before and after colostrum intake (48h) for serum neutralization (SN). Mean values (log2) detected after colostrum feeding were 11.5±1.6 (BVDV), 8.8 ±1.3 (BoHV-1) 5.5±1.6 (BRSV) and 8.4±1.5 (BPIV-3). Five calves were raised from birth to 240 days of life and presented a decrease in Ab titers for BVDV, BoHV-1 and BPIV-3 over time (P≤ 0.001). Infection rates from D14 to D240 were of 40% (2/5), 20% (1/5), 80% (4/5) and 60% (3/5), respectively for BVDV, BoHV-1, BRSV and BPIV-3. Most of the calves presented bronchopneumonia after seroconversion to the virus. Calves presented Ab for all viruses at 48 hours of life, however BRSV Ab titer were low. Levels and persistence of maternal antibody titers determined the susceptibility to viral infections.(AU)

Atividade antiviral e virucida de extratos hidroalcoólicos de própolis marrom, verde e de abelhas Jataí (Tetragonisca angustula) frente ao herpersvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e ao vírus da diarreia viral bovina (BVDV) / Antiviral and virucidal activity of hydroalcoholic extracts of propolis brown, green and jataí bees (Tetragonisca angustula) against Bovine Herpesvirus Type-1 (BoHV-1) and Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV)

Dentre as propriedades biológicas da própolis, a atividade antimicrobiana tem merecido destacada atenção. No presente trabalho, descreve-se a ação antiviral e virucida de três extratos hidroalcoólicos de própolis (marrom, verde e de abelhas jataí (Tetragonisca angustula), frente ao Herpesvírus Bovino tipo (BoHV-1) e ao Vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV). Os três extratos hidroalcoólicos foram obtidos de extração etanólica e são oriundos do sul do Brasil. A composição química dos extratos de própolis foi determinada pela cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a espectrômetro de massas (UFLC-PDA-ESI-TOF/MS) que identificou e quantificou compostos como: ácido cafeico e ácido p-cumárico, ácido clorogênico, ácido ferúlico, além de flavonoides como a rutina. A toxicidade celular bem como a atividade antiviral dos extratos de própolis em monocamadas de células MDBK (Madin-Darby Bovine Kidney) foi avaliada através de observação microscópica e quantificada pelo teste de MTT (3-(4,5 dimetiltiazol-2yl)-2-5-difenil-2H tetrazolato de bromo). O extrato de própolis de abelhas jataí demonstrou ser menos citotóxico (1,57µg/mL), quando comparado aos extratos verde (0,78µg/mL) e marrom (0,39µg/mL). Quanto a atividade antiviral, a própolis verde demostrou maior eficácia em ambos os tratamentos celulares (pós e pré-exposição) frente ao BoHV-1 em relação aos outros extratos, ou seja, houve maior viabilidade celular quando comparada aos controles de células e vírus. Já a de jataí apresentou atividade frente aos dois vírus (BoHV-1 e BVDV) no método pré-infecção, enquanto a própolis marrom demonstrou ação apenas frente ao BoHV-1 também no método pré-infecção. Para determinação da atividade virucida foram utilizadas diferentes diluições dos vírus, bem como temperaturas e tempos distintos de incubação. A própolis verde a 37°C propiciou a maior redução no título viral (4,33log) em relação a marrom (log = 3,5log) e de jataí (log = 3,24log). No entanto, frente ao BVDV a própolis jataí apresentou os melhores resultados em ambas as temperaturas (22oC e 37oC). Portanto, os extratos avaliados apresentaram atividade antiviral e virucida frente ao BoHV-1 e BVDV, o que os torna alvo para o desenvolvimento de novos biofármacos como alternativa ao uso de antivirais comerciais em Medicina Veterinária.(AU)

Among the biological properties of propolis, the antimicrobial activity has received prominent attention. In this paper, we describe the antiviral and virucidal effect of three hydroalcoholic extracts of propolis (brown, green and jataí bees (Tetragonisca angustula), against bovine herpesvirus type-1 (BoHV-1) and bovine viral diarrhea Virus (BVDV). All hydroalcoholic extracts were obtained from ethanol extraction. The chemical composition of propolis extracts was determined by high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometer (UFLC-PDA-ESI-TOF/MS) to identify and quantify compounds such as caffeic acid and p-coumaric acid, chlorogenic acid, ferulic, and flavonoids such as rutin. Cell toxicity and antiviral activity of propolis extracts in monolayers of MDBK cells (Madin-Darby Bovine Kidney) were assessed by microscopic observation and quantified by the MTT assay (3- (4.5 dimethylthiazol-2yl) -2- 5-diphenyl-2H-tetrazolato bromine). Propolis extract from Jataí bees proved to be less cytotoxic (1.57mg / ml) when compared to green extracts (0.78mg / ml) and brown (0.39mg/mL). Regarding antiviral activity, propolis has shown greater efficacy in both cellular treatments (post and pre-exposure) against BoHV-1 when compared to other extracts, ie, there was increased cell viability compared to cell and virus controls. Extracts from Jataí showed activity against both viruses (BoHV-1 and BVDV) infection in the pre-test, whereas brown propolis demonstrated action only against the BoHV-1 in the pre-infection method. To determine the virucidal activity, it were used different dilutions of virus, as well as different temperatures and incubation times. The green propolis at 37°C led to a greater reduction in viral titer (4.33log) compared to brown (3.5log) and jataí (3.24log). Jataí propolis showed the best results in both temperatures (22oC and 37oC) when tested against BVDV. In summary, the evaluated extracts showed antiviral and virucidal activity against BoHV-1 and BVDV, and may be important targets for the development of new compounds as an alternative to commercial antivirals.(AU)

Bovine viral diarrhea virus infections in pigs: why is this situation important for Brazilian herds? / A infecção pelo vírus da diarreia viral bovina em suínos: por que essa situação é importante para os rebanhos brasileiros?

Swine can be infected by the bovine viral diarrhea virus (BVDV) under natural conditions. For this reason, further information and divulgation are needed regarding the pathogenicity of this virus in swine. This infection is practically unknown in the realm of pig farming, and, as it shares some similarities with the classical swine fever virus (CSFV), its diagnosis becomes a challenge for official sanitary programs. Studies have shown the absence of clinical signs in piglets and reproductive problems in sows due to BVDV infections. There is little research on the prevalence, risk factors, preventive measures and control of BVDV in pigs around the world. And in Brazil, the data is practically non-existent. At the time of diagnosis, comparing the most efficient laboratory tests such as virus neutralization, ELISA, RT-PCR, and immunofluorescence so as to minimize the risk of cross serological reactions when dealing with a persistent or transient infection, can be an important tool. Moreover, the practical implications for CSFV eradication programs are a main reason for the development of further research against this infection. Therefore, this paper aims to review various aspects of BVDV infection in pigs, and how this information can be important for Brazilian herds.(AU)

O suíno pode ser infectado pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em condições naturais, por isso são necessárias maiores informações e mais divulgação sobre a ação deste vírus nos suínos. Esta infecção é praticamente desconhecida na suinocultura e, devido a algumas semelhanças com vírus da peste suína clássica (VPSC), torna-se um desafio para os programas sanitários oficiais. Estudos revelam a ausência de sinais clínicos em leitões ao mesmo tempo em que evidenciam problemas reprodutivos em porcas devido à infecção do BVDV. Poucas são as pesquisas sobre a prevalência, fatores de riscos, medidas de prevenção e controle do BVDV em suínos no mundo e, no Brasil, os dados são praticamente inexistentes. No diagnóstico, comparar os exames laboratoriais mais eficientes como a virusneutralização, ELISA, RT-PCR e imunofluorescência, diante de uma infecção persistente ou transitória, e assim minimizar o risco de reações sorológicas cruzadas pode ser uma ferramenta fundamental. Ademais, as implicações práticas em programas de erradicação da PSC são um grande motivo para o desenvolvimento de mais pesquisas frente a esta infecção. Portanto, este trabalho pretende revisar diversos aspectos da infecção do BVDV em suínos evidenciando o quanto essa situação pode ser importante para os rebanhos brasileiros.(AU)

Seroprevalence and risk factors of several bovine viral diseases in dairy farms of San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colombia / Seroprevalencia y factores de riesgo para varias enfermedades virales en bovinos de hatos lecheros de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colombia / Soroprevalência e fatores de risco para várias doenças virais em bovinos de rebanhos leiteiros do Município de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colômbia

Bovine viral diarrhea virus (BVDV), Bovine herpesvirus-1 (BoHV-1) and enzootic bovine leucosis (EBL) are viral infections that cause three of the most important cow diseases in the world. Antibody detection is the quickest and most cost-effective method to detect exposition to the virus. The aim of this study was to determine the seroprevalence and risk factors associated with these diseases in cows from the town of San Pedro de los Milagros, Antioquia. A total of 791 bovines of 24 dairy farms were sampled for blood between may and june of 2014, and analized for antibodies against BVDV and BoHV-1. These 24 farms plus other five were analized for antibodies against EBL for a total of 1003 bovines from 29 farms sampled. All tests were done with ELISA kits commercially available. The risk factors for farm and cow selected were evaluated to analize their relation with the serological state of these three diseases using logistic regression. In general, seroprevalence at the animal level for BVDV BoHV-1 and EBL was 75.7% (95% CI: 68.7-82.6%), 31.1% (95% CI: 22.1-40.1%) and 47.8% (95% CI: 40-55.7%), respectively. The odds ratio of being seropositive for BoHV-1 was significantly higher (OR=3.0) in animals older than 3 years in comparison to bovines younger than a year. Not using disposable needles was associated with prevalence of EBL. In conclusion there was a high seroprevalence of EBL and BVDV, and a lower one for BoHV-1. Seropositivity to BoHV-1 was associated with cows older than 3 years and seropositivity to EBL was associated with not using disposable needles in the farm.

Las infecciones por virus de la diarrea viral bovina (BVDV), el herpes virus bovino-1 (BoHV-1) y la leucosis enzoótica bovina (EBL) causan tres de las enfermedades más importantes de la vaca a nivel mundial. La detección de anticuerpos es el método más rápido y costo-efectivo para detectar la exposición a estos virus. El objetivo de este estudio fue determinar la seroprevalencia y los factores de riesgo asociados a estas enfermedades en vacas del municipio de San Pedro de los Milagros, Antioquia. Un total de 791 bovinos de 24 hatos lecheros no vacunados fueron muestreados para sangre entre mayo y junio de 2014 y analizados para anticuerpos contra BVDV y BoHV-1. Estos 24 hatos más otros cinco fueron analizados para anticuerpos contra EBL para un total de 1003 bovinos de 29 hatos. Todas las pruebas fueron efectuadas con kits de ELISA disponibles comercialmente. Los factores de riesgo de hato y de vaca seleccionados fueron evaluados para analizar su relación con el estado serológico de estas tres enfermedades por medio de regresión logística. En general, la seroprevalencia a nivel de animal para BVDV, BoHV-1 y EBL fue 75,7% (95% CI: 68,7-82,6), 31,1% (95% CI: 22,1-40,1) y 47,8% (95% CI: 40-55,7), respectivamente. La relación de disparidad de ser seropositivo para BoHV-1 fue significativamente más alto (OR=3,0) en animales mayores de 3 años en comparación con bovinos menores de un año. No usar agujas desechables en la granja estuvo asociada con la prevalencia a EBL. En conclusión hubo una alta seroprevalencia de EBL y BVDV y una baja para BoHV-1. La seropositividad a BoHV-1 estuvo asociada con vacas mayores a tres años y la seropositividad a EBL estuvo asociada con el no uso de agujas desechables en la granja.

As infecções por vírus da diarreia viral bovina (BVDV), herpes vírus bovino-1 (BoHV-1) e leucose enzoótica bovina (EBL) causam três das doenças mais importantes da vaca no mundo todo. A detecção de anticorpos é o método mais rápido e custo-efetivo para detectar a exposição a estes vírus. O objetivo desta pesquisa foi determinar a soroprevalência e os fatores de risco associados a estas doenças em vacas de diferentes rebanhos leiteiros do município de San Pedro de los Milagros, Antioquia, Colômbia. Um total de 791 bovinos pertencentes a 24 rebanhos leiteiros não vacinados foram amostrados para sangue entre os meses de maio e junho de 2014 e analisados para anticorpos contra BVDV e BoHV-1. Estes 24 rebanhos mais outros cinco foram analisados para anticorpos contra EBL para um total de 1003 bovinos de 29 rebanhos. Todos os testes foram feitos com kits de ELISA disponíveis comercialmente. Os fatores de risco do rebanho e do animal selecionados foram avaliados para analisar sua relação com o estado sorológico de estas três doenças por médio de regressão logística. Em geral, a soroprevalência no animal para BVDV, BoHV-1 e EBL foi 75,7% (95% CI: 68,7-82,6), 31,1% (95% CI: 22,1-40,1) e 47,8% (95% CI: 40-55,7), respetivamente. A relação de disparidade de ser soropositivo para BoHV-1 foi significativamente maior (OR=3,0) em animais maiores de três anos em comparação com os menores de um ano. O fato de não utilizar agulhas descartáveis na fazenda, esteve associada com a prevalência a EBL. Em conclusão, houve uma alta soroprevalência de EBL e BVDV e a sua vez, uma baixa para BoHV-1. A soropositividade a BoHV-1 esteve associada com vacas maiores a três anos e a soropositividade a EBL esteve associada com a não utilização de agulhas descartáveis na fazenda.

Presence of IgG antibodies against reproductive infections in breeding bulls of Magdalena Medio, Colombia / Presencia de anticuerpos tipo IgG contra infecciones reproductivas en toros reproductores de la región del Magdalena Medio, Colombia / Presença de anticorpos IgG contra infecções reprodutivas de touros reprodutores do Magdalena Médio, Colômbia

Background: cattle farming is an important economic activity in several regions of Colombia. However, farmers are unaware of their cattle health status, and particularly of bacterial, parasitic, and viral diseases, which affect reproduction and profitability. Objective: to assess the presence of IgG antibodies against infectious bovine rhinotracheitis (IBR), bovine viral diarrhea (BVD), bovine leukosis, leptospirosis, brucellosis, and Neospora caninum in breeding bulls in the Magdalena Medio of Colombia, according to age, breed, and origin. Methods: a descriptive, cross-sectional study was conducted with 174 male breeding cattle from several subspecies. Animals were above 18 months of age and belonged to dual-purpose farms in the Magdalena Medio region. Presence of IgG anti-IBR, BVD, brucellosis, neosporosis, and leukosis antibodies were determined with an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A sample of 156 males was assessed for leptospirosis using a microscopic agglutination test (MAT) in a dark field. Results: IgG anti-IBR antibodies were found in 92.5% of the animals, anti-BVD in 62.6%, anti-Neospora caninum in 79.3%, anti-Brucella abortus in 4.02%, anti-Leptospira pomona in 8.33%, and anti-L. hardjo in 15.38%, with >1:100 titres. Besides, 64.94% prevalence was observed for bovine leukosis. Conclusions: a high prevalence of IgG anti-IBR, IgG anti-BVD, IgG anti- Neospora caninum, IgG anti-leukosis, and IgG anti-lepstospirosis antibodies were observed in Magdalena Medio bulls. With respect to B. abortus, confirmatory and competitive ELISA test should be performed and sanitary standards need to be established. Detection of IgG antibodies among bulls reveals poor sanitary conditions, absent of protective-vaccination antibodies and an urgent need for health control measurements.

Antecedentes: la ganadería bovina es una importante actividad económica desarrollada en varias regiones del país, sin embargo, los ganaderos desconocen el estado sanitario de los bovinos con respecto a enfermedades bacterianas, parasitarias y virales, lo que afecta la reproducción y la rentabilidad. Objetivo: evidenciar la presencia de anticuerpos tipo IgG anti-rinotraqueitis infecciosa bovina (IBR), diarrea viral bovina (BVD), leucosis bovina, leptospirosis, brucelosis y Neospora caninum en los toros reproductores del Magdalena Medio colombiano, en asociación con variables de edad, raza y procedencia. Métodos: se realizó un estudio descriptivo de corte transversal en un grupo poblacional de 174 machos reproductores bovinos de diferentes subespecies. Los animales eran mayores de 18 meses en fincas destinadas a ganadería doble propósito ubicadas en la región del Magdalena Medio. Mediante un ensayo de inmunoabsorción enzimática (ELISA) se determinó la presencia de anticuerpos tipo IgG anti-IBR, BVD, brucelosis, neosporosis y leucosis. Para el caso de la leptospirosis, a 156 de los machos se les realizó la prueba de microaglutinación en campo oscuro (MAT). Resultados: se hallaron anticuerpos tipo IgG anti-IBR en un 92,5%, anti-BVD en el 62,6%, anti-Neospora caninum 79,3%, anti-Brucella abortus 4,02%, anti-Leptospira pomona 8,33% y anti-L. hardjo 15,38%, con títulos >1:100. Además, para leucosis bovina se obtuvo una prevalencia del 64,94%. Conclusión: se observaron altos porcentajes de casos con presencia de anticuerpos IgG anti-IBR, BVD, N. caninum, leucosis y lepstospirosis en el ganado bovino del Magdalena Medio colombiano. Para B. abortus debe realizarse la prueba confirmativa ELISA competitiva y aplicar la norma sanitaria. La determinación de anticuerpos tipo IgG permitió conocer el delicado estado sanitario de los reproductores bovinos, teniendo en cuenta que no han recibido ningún esquema de vacunación y se hace necesario un adecuado control sanitario.

Antecedentes: a pecuária é uma atividade econômica importante em várias regiões do país, no entanto, os agricultores não têm conhecimento do estado de saúde do gado em relação adoenças bacterianas, parasitárias e virais. É por esta razão que as perdas econômicas aumentam e diminuem a qualidade de reprodução. Objetivo: demonstrar a presença de anticorpos IgG para rinotraqueíte-viral bovina (IBR), diarréia viral bovina (BVD), leucose bovina, leptospirose, brucelose e Neospora caninum. Nos machos reprodutores do Magdalena Medio tendo em conta as variáveis idade, raça e origens. Métodos: i foi realizada estudo descritivo transversal em duas populações de 174 machos reprodutores de diferentes subespécies de gado com mais de 18 meses de edad procedentes de fazendas utilizadas para a pecuária de duplo propósito, localizadas na região do Madalena Médio. Para detectar a presença de anticorpos IgG anti-IBR, BVD, brucelose, e enzoótica, neosporose foi determinada pela técnica de ensaio imunoenzimático (ELISA). Para o caso de leptospirose foi realizado teste de microaglutinação em campo escuro (MAT). Resultados: anticorpos IgG anti-IBR foram encontrados em 92,5%, anti-BVD num 62,6%, anti-Neospora caninum num 79,3%, anti-Brucella abortus 4,02%, anti-Leptospira pomona num 8,33% e anti-L. hardjo 15,38% com títulos > 1:100. Para leucose bovina, uma percentagem de 64,94%, foi obtido. Conclusão: foram observados altos percentagens de casos na presença de anticorpos IgG anti-IBR, BVD, N. caninum, lepstospirosis e leucose nos bovinos do Madalena Médio colombiano, o teste confirmatorio ELISA competitivo. Para a determinação de B. abortus deve ser realizado e dar cumplimento a normatividade sanitaria. A determinação de anticorpos IgG tem permitido conhecer o delicado estado sanitario dos reprodutores bovinos, considerando que eles não receberam qualquer vacinação é necessário um adequado controle de saúde.

Detección molecular de coinfección con los virus de la diarrea viral bovina (BVDV) en búfalos de agua (Bubalus bubalis) serológicamente negativos / Molecular analyses detect natural coinfection of water buffaloes (Bubalus bubalis) with bovine viral diarrhea viruses (BVDV) in serologically negative animals

La infección de los búfalos de agua (Bubalus bubalis) con los virus de la diarrea viral bovina (BVDV) ha sido confirmada mediante técnicas serológicas y moleculares en trabajos anteriores. Con el fin de determinar la presencia de animales persistentemente infectados y las especies y subtipos circulantes de BVDV en esta especie animal se realizó un estudio sobre una manada de búfalos de producción mixta con ganado bovino (Bossp.). Nuestros resultados serológicos mostraron un alto nivel de positividad frente a BVDV-1 y BVDV-2 dentro de la manada de búfalos. El análisis molecular sobre muestras de sangre de los animales serológicamente negativos reveló la presencia de ácido nucleico viral, lo que confirma la existencia de búfalos persistentemente infectados. El clonado y la secuenciación de la región 5 'UTR de algunas de las muestras obtenidas de búfalo reveló la presencia de coinfección natural con al menos dos subtipos diferentes de BVDV (1a y 1b) y con las especies virales BVDV-1 y BVDV-2

Infection of water buffaloes (Bubalus bubalis) with bovine viral diarrhea viruses (BVDV) has been confirmed in several studies by serological and molecular techniques. In order to determine the presence of persistently infected animals and circulating species and subtypes of BVDV we conducted this study on a buffalo herd, whose habitat was shared with bovine cattle (Bossp.). Our serological results showed a high level of positivity for BVDV-1 and BVDV-2 within the buffalo herd. The molecular analyses of blood samples in serologically negative animals revealed the presence of viral nucleic acid, confirming the existence of persistent infection in the buffaloes. Cloning and sequencing of the 5' UTR of some of these samples revealed the presence of naturally mix-infected buffaloes with at least two different subtypes (1a and 1b), and also with both BVDV species (BVDV-1 and BVDV-2)

Seroprevalencia de la diarrea viral bovina en rebaños lecheros de dos municipios del estado Barinas, Venezuela / Seroprevalence of bovine viral diarrhea in milk producing herds at Barinas State, Venezuela

Este estudio tuvo como objetivo determinar la seroprevalencia de la diarrea viral bovina (DVB) en bovinos lecheros, sin antecedentes de vacunación, representativos de los municipios Pedraza y Barinas del estado Barinas, Venezuela, durante el periodo comprendido entre mayo y noviembre 2007. Se determinó la presencia de anticuerpos (Acs) específicos contra el virus de la DVB (VDVB) en suero, mediante la prueba de ELISA indirecta, asociando la seropositividad entre sexos, grupos etarios y número de partos, mediante la prueba de Chi cuadrado. Un total de 223 de 353 sueros resultaron positivos a la presencia de Acs específicos contra el VDVB, indicando una alta prevalencia (63,2%). La proporción de seropositivos en ambos municipios analizados demostró ser no significativa (p=0,1572). Con respecto a la proporción de hembras que resultaron seropositivas (63,1%) y la de machos seropositivos (63,6%), revelan que el sexo no está relacionado con la infección por el virus (p=1,0000). La mayor edad y número de partos mostraron una mayor seropositividad (p=0,0111 y p=0,0086, respectivamente). La presencia de actividad viral en la zona aunada al manejo inadecuado de los animales contribuyen a la difusión y transmisión de la enfermedad.

The purpose of this study was to determine seroprevalence of bovine viral diarrhea (BVD) in milk producing bovines with no vaccination background, representative of Pedraza and Barinas municipalities at Barinas State, during the May-November 2007 period. The presence of specific antibodies (Abs) against the BVD virus (BVDV) in serum through the indirect ELISA test was determined, associating seropositivity to sex, age group, and number of births with the Chi square test. A total of 223 from 353 sera were positive for Abs against the BVDV, indicating a high prevalence (63.2%). The difference of the ratio of seropositives between both municipalities was not significant (p=0.1572). The rates of seropositive females (63.1%) and seropositive males (63.6%) reveal that sex is not related to the viral infection (p=1.0000). Older age and larger number of births showed greater positivity (p=0.0111 and p=0.0086 respectively). The presence of viral activity in the area together with the inadequate handling of the animals contribute to the diffusion and transmission of the disease.

Perfil da infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em um rebanho bovino leiteiro de alta produção e com programa de vacinação contra o BVDV / Bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection profile in a high production dairy herd with vaccination program against BVDV

A infecção pelo vírus da diarreia viral bovina (BVDV) foi avaliada em um rebanho bovino leiteiro de alta produção com histórico de problemas reprodutivos e de vacinação regular contra o BVDV. A identificação do vírus foi realizada por RT-PCR em soro sanguíneo e o perfil sorológico por vírus-neutralização. Inicialmente, 100% (n=692) dos animais do rebanho foram avaliados com relação à presença de infecção ativa pelo BVDV por meio da RT-PCR. Quatro meses após, todos os animais positivos (n=29) na primeira avaliação foram avaliados novamente pela RT-PCR, assim como todos os animais que nasceram (n=72) e os que apresentaram problemas reprodutivos (n=36) no intervalo entre a primeira e a segunda colheita de sangue. Os resultados finais do estudo possibilitaram identificar 27 animais transitoriamente infectados e três animais persistentemente infectados (PI). A sorologia, realizada apenas nos animais positivos na primeira avaliação pela RT-PCR e nas vacas que apresentaram problemas reprodutivos entre a primeira e a segunda RT-PCR, demonstrou grande flutuação nos títulos de anticorpos neutralizantes, além de soroconversão na maioria dos animais. Foram identificados aumentos nos títulos de anticorpos neutralizantes que variaram entre 3 e 8 log2, indicando infecção ativa no rebanho. A circulação viral no rebanho avaliado foi responsável pela expressão de sinais clínicos da esfera reprodutiva em animais com baixo título de anticorpos e consequente falha na proteção fetal. Os resultados demonstram que o controle da infecção pelo BVDV apenas por meio da vacinação regular em rebanhos com animais PI pode não ser eficaz na profilaxia dessa virose.

The profile of bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection was studies in a high production dairy herd selected based on a history of reproductive failures and regular vaccination against BVDV. Virus identification was performed by RT-PCR and serological profile was determined by virus-neutralization (VN). Initially, 100% (n=692) of the animals in the herd were monitored for identification of an active infection by RT-PCR in sera. Four months later, all positive animals (n=29) were retested by RT-PCR, along with newly born animals (n=72), or those that had reproductive failures (n=36) in the interval. The RT-PCR assay identified 27 transiently infected animals and three persistently infected (PI). Serology performed only in positive animals in the first RT-PCR and in cows with reproductive failures between the first and second RT-PCR analysis, showed large variation VN antibody titers and seroconversion in most animals. Increases in VN titers were demonstrated, with variation between 3 and 8 log2, indicating virus circulation within the herd. Virus circulation in the vaccinated herd evaluated in this study was likely responsible for reproductive failures observed in cows with low VN titers and for fetal infections. These results demonstrate that control of BVDV infection by regular vaccination in dairy cattle herds with PI animals represents a great challenge for the prophylaxis of this infection.

Presencia del virus de la diarrea viral bovina y su asociación con otros cuadros patológicos en ganado en corral de engorda / Presence of bovine virus diarrhea in association with other pathologies in feedlot cattle

Bovine feedlots are intensive production systems of significant importance in Mexico. The present study describes the presence of bovine virus diarrhea (BVD) causing subacute to chronic lesions in feedlot cattle, associated with other pathologies. Animals included in this study were discarded after they received therapy several times due to chronic pneumonia, or anaplamosis. Bovine virus diarrhea antigen was identified by immunohistochemistry in small intestine and myocardium in six cases of chronic suppurative bronchopneumonia with extensive areas of casseous necrotic bronchiectasis, previously diagnosed as Mycoplasma bovis pneumonias (retrospective group, n = 6). Furthermore, based on characteristic histopathologic lesions other nine cases were included (prospective group, n = 9). Bovine virus diarrhea antigen was recognized in two animals with pneumonic lesions, including a case with fibrinous bronchopneumonia as well as suggestive lesions of infectious bovine rinotracheitis (1/9), and another one with suppurative bronchopneumonia and myocarditis suggestive of Histophilus somni (1/9). In addition, one positive case was associated to anaplasmosis (1/9). Other two positive cases showed a conspicuous fibrinous peritonitis (2/9). The rest of the animals in this group resulted negative (4/9). Histopathological characteristics of the lesions and their association with the antigen in situ confirm the presence of BVD. This presentation is compatible with the acute infection syndrome. This is the first report of BVD infection and concomitant pathologies in feedlot cattle in Mexico.

El ganado en corral de engorda es un sistema de producción intensivo de gran importancia en México. En este trabajo se describe la infección por diarrea viral bovina (DVB), ocasionado por lesiones subagudas y crónicas en bovinos en corral de engorda, y su asociación con otras patologías. Los animales de este estudio fueron considerados de rechazo después de ser tratados en diferentes ocasiones por enfermedad respiratoria, o bien anaplasmosis. El antígeno de DVB fue identificado por inmunohistoquímica (IHQ) en intestino delgado y miocardio en seis casos de bronconeumonía supurativa crónica con extensas áreas de bronquiectasia con necrosis caseosa, los cuales habían sido previamente diagnosticados como neumonías por Mycoplasma bovis (grupo retrospectivo, n = 6). Además, se incluyeron otros nueve casos con base en las características histopatológicas de las lesiones (grupo prospectivo, n = 9). El antígeno de DVB se reconoció en dos animales con lesiones neumónicas, uno de ellos con bronconeumonía fibrinosa, incluyendo además lesiones probables de rinotraqueítis infecciosa bovina (1/9), y el otro con bronconeumonía supurativa y también miocarditis probable por Histophilus somni (1/9). Adicionalmente, un caso positivo estuvo asociado a anaplasmosis (1/9). Otros dos casos positivos presentaron una distintiva peritonitis fibrinosa (2/9). El resto de los animales de este grupo resultaron negativos a DVB (4/9). Las características histopatológicas de las lesiones y su asociación con el antígeno in situ, confirman la presencia de DVB. Esta presentación es compatible con el síndrome denominado infección aguda. Este es el primer informe de infección por DVB y otras patologías concomitantes en ganado de engorda en México.