Eficacia protectora de una vacuna inactivada contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 preparada a partir de un aislado local en Egipto / Protective efficacy of an inactivated vaccine against Rabbit hemorrhagic disease virus 2 prepared from a local isolate in Egypt

Rabbit hemorrhagic disease is a contagious viral disease of rabbits controlled by vaccination. The present study was aimed to diagnose rabbit hemorrhagic disease from 11 infected farms from Qalubia governorate during 2019 and to prepare homologous vaccine against rabbit hemorrhagic disease virus 2. For this purpose, 11 liver samples were collected from suspected cases and subjected to detection and identification of circulating rabbit hemorrhagic disease virus. Ten samples were confirmed to be rabbit hemorrhagic disease virus using hemagglutination test, animal inoculation and reverse transcriptase polymerase chain reaction. Sequencing and phylogenetic analysis of two isolates (R5&R6) revealed the presence of rabbit hemorrhagic disease virus 2 (A/Qalubia/2019 and B/Qalubia/2019) under accession number MT07629 and MT067630 respectively. The inactivated rabbit hemorrhagic disease virus vaccines were prepared using Montanide ISA 206 oil or aluminum hydroxide gel adjuvants. Prepared vaccines were inoculated subcutaneously in susceptible rabbits and submitted to sterility, safety and potency tests. Obtained results showed that mean hemagglutination inhibition titer for aluminum hydroxide gel vaccine was 6,7.7,8.9 and 9.1 log2 while, Montanide vaccine reached to 6.7,8.7,9.2 and 9.5 log2 at 1st, 2nd, 3rd, and 4th weeks post vaccination, respectively. Immunized rabbits with Montanide vaccine showed better protection reach to 70 percent, 90 percent percent, 100 percent and 100 percent when compared to aluminum hydroxide gel vaccine 60 percent, 70 percent, 90 percent and 90 percent at 1st, 2nd, 3rd and 4th weeks post vaccination respectively. It was concluded that newly emerged rabbit hemorrhagic disease virus 2 was isolated from suspected cases. The two prepared vaccines were sterile, safe and potent. The oily adjuvanted rabbit hemorrhagic disease virus 2 vaccine stimulated an earlier and higher humoral immune response than the aluminum hydroxide gel adjuvanted vaccine. This humoral immune response achieved significant level of protection(AU)

La enfermedad hemorrágica del conejo es una enfermedad viral contagiosa de los conejos que se controla mediante vacunación. El presente estudio tuvo como objetivo diagnosticar la enfermedad hemorrágica del conejo en 11 granjas infectadas de la provincia de Qalubia, durante 2019 y preparar una vacuna homóloga contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2. Para este propósito, se recolectaron 11 muestras de hígado de casos sospechosos y se sometieron a detección e identificación de virus circulante de la enfermedad hemorrágica del conejo. Se confirmó que diez muestras eran positivas al virus de la enfermedad hemorrágica del conejo, utilizando para ello la prueba de hemaglutinación, inoculación en animales y Reacción en cadena de la polimerasa con transcriptasa inversa. La secuenciación y el análisis filogenético de dos aislamientos (R5 y R6) revelaron la presencia del virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 (A/Qalubia/2019 y B/Qalubia/2019) con los números de acceso MT07629 y MT067630 respectivamente. Las vacunas inactivadas del virus de la enfermedad hemorrágica del conejo se prepararon usando adyuvantes de gel de hidróxido de aluminio o aceite Montanide ISA 206. Las vacunas preparadas se inocularon por vía subcutánea en conejos susceptibles y se sometieron a pruebas de esterilidad, seguridad y potencia. Los resultados obtenidos mostraron que el título medio de inhibición de la hemaglutinación para la vacuna en gel de hidróxido de aluminio fue de 6; 7,7; 8,9 y 9,1 log2, mientras que la vacuna de Montanide alcanzó 6,7; 8,7; 9,2 y 9,5 log2 en la 1ª, 2ª, 3ª y 4ª semanas después de la vacunación, respectivamente. Los conejos inmunizados con la vacuna Montanide tuvieron una mejor protección, alcanzándose niveles de 70 por ciento, 90 por ciento, 100 por ciento y 100 por ciento en comparación con la vacuna en gel de hidróxido de aluminio 60 por ciento, 70 por ciento, 90 por ciento y 90 por ciento en la 1ª, 2ª, 3ª y 4ª semanas después de la vacunación, respectivamente. Se concluyó que el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 de reciente aparición se aisló de los casos sospechosos. Las dos vacunas preparadas fueron estériles, seguras y potentes. La vacuna contra el virus de la enfermedad hemorrágica del conejo tipo 2 con adyuvante oleoso estimuló una respuesta inmune humoral más temprana y mayor que la vacuna con adyuvante en gel de hidróxido de aluminio. Esta respuesta inmune humoral confirió un nivel significativo de protección(AU)

Neutralización de la actividad letal del veneno de serpiente Bothrops atrox por suero hiperinmune de llama (Lama glama) / Neutralization of the lethal activity from Bothrops atrox venom by hyperimune llama serum (Lama glama)

RESUMEN Objetivos: Evaluar la capacidad del suero hiperinmune de llama (Lama glama) para neutralizar la letalidad del veneno de la serpiente Bothrops atrox en ratones de laboratorio. Materiales y métodos: Se calculó la dosis letal media (DL50) de un pool de venenos de serpientes de Bothrops atrox de Perú, y se midieron los títulos de anticuerpos por ensayo ELISA; así como la potencia de neutralización del suero inmune por el cálculo de la dosis efectiva media (DE50) durante el periodo de inmunización. Resultados: La DL50 del veneno fue de 3,96 µg/g, similar a otros trabajos realizados en Bothrops atrox en Perú. Los títulos de anticuerpos contra el veneno se incrementan rápidamente en la llama mostrando una rápida respuesta inmune; sin embargo, la capacidad de neutralización se incrementa más lentamente y requiere de varias dosis y refuerzos de las inmunizaciones alcanzado una DE50 de 3,30 µL/g ratón y una potencia de neutralización 3,6 mg/mL después de 15 inmunizaciones. Conclusiones: El suero hiperinmune de llama es capaz de neutralizar la letalidad del veneno de la serpiente Bothrops atrox de Perú en ratones de laboratorio.

ABSTRACT Objectives: To evaluate the capacity of the hyperimmune llama serum (Lama glama) to neutralize the lethal activity of Bothrops atrox venom in laboratory mice. Materials and methods: Mean lethal dose (LD50) was calculated from a Bothrops atrox venom sample pool from Peru. The antibody titers were measured by ELISA assay; and the immune serum neutralization potency was measured by calculating the mean effective dose (ED50) during the immunization period. Results: The venom's LD50 was 3.96 μg/g; similar to what was found in other studies about Bothrops atrox carried out in Peru. The titers of antibodies against the venom increased rapidly in the llama, demonstrating a fast immune response; however, the neutralization capacity increased slowly and required several doses and immunization reinforcements, obtaining a ED50 of 3.30 μL/g mouse and a neutralization potency of 3.6 mg/mL after 15 immunizations. Conclusions: The hyperimmune llama serum is able to neutralize the lethality of the Bothrops atrox venom from Peru in laboratory mice.

Efecto letal agudo de los insecticidas en formulación comercial Imidacloprid, Spinosad y Thiocyclam hidrogenoxalato en obreras de Bombus atratus (Hymenoptera: Apidae) / Acute lethal effect of the commercial formulation of the insecticides Imidacloprid, Spinosad y Thiocyclam hidrogenoxalate in Bombus atratus (Hymenoptera: Apidae) workers

Resumen:Los efectos de los insecticidas sobre las abejas han cobrado gran atención a nivel mundial, sin embargo, son pocos los estudios sobre el efecto de estos agroquímicos en abejas Neotropicales. Bombus atratus es una especie neotropical, distribuida ampliamente en los Andes y es considerado un polinizador importante de ecosistemas y agroecosistemas altoandinos. Sin embargo, al igual que muchas especies silvestres, se desconoce el efecto de los insecticidas en B. atratus. Teniendo en cuenta lo anterior, el presente trabajo determinó la dosis letal media aguda (DL50) por exposición tópica y oral de las formulaciones comerciales de los insecticidas con los ingredientes activos Imidacloprid, Spinosad y Thiocyclam hidrogenoxalato, ampliamente utilizados para el control de plagas de cultivos importantes en Colombia. Las pruebas DL50 se realizaron a partir de modificaciones de los lineamientos establecidos por la EPPO y OEDE para estas pruebas en Apis mellifera. Se evaluaron 5 dosis para cada insecticida y exposición. Se evaluaron 25 obreras de tamaño medio en cada dosis por duplicado. La mortalidad se registró a las 24, 48 y 72 horas después del experimento. Los datos fueron analizados con el modelo de regresión Probit. Para el Imidacloprid la DL50 tópica y oral fue de 0.048 µg/abeja y 0.010 µg/abeja respectivamente. Para el Thiocyclam hidrogenoxalato la DL50 tópica y oral fue de 0.244 µg/abeja y de 0.056 µg/abeja respectivamente. Para el Spinosad, la DL50 por exposición oral correspondió a 0.28 µg/abeja. No fue posible establecer la DL50 por exposición tópica. A partir del cálculo del Cociente de Riesgo (HQ) e Índice de Toxicidad Relativa, los tres ingredientes activos son altamente tóxicos. Se analiza y discute el riesgo debido al uso de los productos evaluados a partir de la naturaleza química de los insecticidas.

Abstract:The effect of insecticides on bees has gained great attention, however, there are few studies that explore this issue on Neotropical bees. Bombus atratus is a neotropical species broadly distributed in Colombia and is considered an important pollinator of both Andean ecosystems and agroecosystems. However, as for many wild bees species, the effect of insecticides on B. atratus is unknow. In this study we determined the acute median lethal dose (LD50) of commercial formulations of insecticides Imidacloprid, Spinosad and Thiocyclam hydrogen oxalate, widely used in Colombia to control several pests of important crops. The LD50 was carried out by oral and contact routes, following and modifying the EPPO and OECD guidelines to perform LD50 on A. mellifera. We evaluated five doses for each route and insecticide, in a total of 25 medium-size workers for each dose by duplicate. Mortality was registered at 24, 48 and 72 hours after the experiment; and data were analyzed with the Probit regression model. For Imidacloprid, contacts and oral LD50 were 0.048 µg/bee and 0.010 µg/bee, respectively. For Thiocyclam hydrogen oxalate, topical and oral LD50 were 0.244 µg/bee and 0.056 µg/bee, respectively. For Spinosad, the oral LD50 corresponded to 0.28 µg/bee; it was not possible to establish the LD50 for the contact route. The Hazard Quotient (HQ) and Index of Relative Toxicity indicated that all three active ingredients are highly toxic. We discussed the risk of the insecticides use on B. atratus, considering their chemical nature. Rev. Biol. Trop. 64 (4): 1737-1745. Epub 2016 December 01.

Efecto antitumoral in vitro del aceite esencial de Piper aduncum L. (matico) y su toxicidad oral en ratones / Piper aduncum L. (matico) essential oil in vitro antitumoral effect and oral toxicity in mice

Introducción: Piper aduncum (matico) es una especie utilizada por sus propiedades medicinales en desórdenes gastrointestinales y genitourinarios. Objetivos: Evaluar el efecto antitumoral del aceite esencial de Piper aduncum (matico) in vitro en siete líneas celulares tumorales humanas y determinar la toxicidad oral en ratones. Diseño: Experimental. Institución: Facultad de Medicina, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú. Material biológico: Líneas celulares tumorales humanas H460, DU-145, ME-180, K562, HT-29, MCF 7, M14, K562; fibroblastos normales de ratón 3T3 y ratones albinos machos Balb/C53. Intervenciones: Las líneas celulares fueron expuestas a cuatro concentraciones del aceite esencial de P. aduncum y 5-fluorouracilo (5-FU). Para la toxicidad oral se utilizó ratones albinos machos Balb C/53 de 40 días post destete, a cinco dosis de tratamiento, evaluándose el número de muertes en cada dosis. Principales medidas de los resultados: Porcentaje de inhibición del crecimiento celular (IC50), dosis letal 50 (DL50). Resultados: El aceite esencial mostró IC50 mayor a 250 ug/mL para las líneas celulares M-14 (r = -0,99; p < 0,01), DU-145 (r = 0,99; p < 0,01), ME-180 (r = -0,99; p < 0,01). Para líneas celulares tumorales H460 (r = -0,99; p < 0,01), MCF-7 (r = -0,99; p < 0,01), K562 (r = -0,99; p < 0,01), HT-29 (r = -0,99; p < 0,01), los niveles de IC50 estuvieron entre 20 ug/mL y 250 ug/mL. DL50 > 2 000 mg/kg. Conclusiones: El aceite esencial de P. aduncum no presentó efecto antitumoral in vitro para las siete líneas celulares tumorales humanas y no fue tóxico.

Introduction: Piper aduncum (matìco) is a medicinal plant used for gastrointestinal and genitourinary disorders. Objectives: To determine the in vitro antitumoral effect of Piper aduncum (matico) essential oil on seven human tumoral cell lines and its oral toxicity in mice. Design: Experimental. Setting: Faculty of Medicine, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Peru. Biologic material: Human tumoral cell lines HT-29, H-460, MCF-7, M-14, ME-180, DU-145, K-562; and 3T3 fibroblasts and male 40 days post weaning Balb C/53 mice. Interventions: The cell lines HT-29, H-460, MCF-7, M-14, ME-180, DU-145, K-562, and 3T3 were exposed to four different concentrations of Piper aduncum essential oil, and to different 5-fluorouracil concentrations used as a positive control. Cell lines growth inhibition (IC50) was determined using linear regression analysis and DL50 by the number of deaths with each dose. Main outcome measures: Antitumor effect. Results: Piper aduncum essential oil showed cytotoxic activity at IC50 levels > 250 ug/mL on cell lines M-14 (r = -0.99; p < 0.01), DU-145 (r = -0.99; p < 0.01), ME-180 (r = -0.99; p < 0.01). IC50 was between 20 ug/mL and 250 ug/mL on cell lines H-460 (r = -0.99; p < 0.01), MCF-7, (r = -0.99; p < 0.01), K562 (r = -0.99; p < 0.01), HT-29 (r = -0.99; p < 0.01). DL50 was > 2 000 mg/kg. Conclusions: P. aduncum essential oil did not show antitumoral effect on seven human tumoral cell lines and it was non toxic.

Ofidismo: incidencia y complicaciones, estudio realizado en el hospital “Dr. Verdi Cevallos Balda”, de Portoviejo, Provincia Manabí / Ophidian: general aspects and incidences research done at Dr. Verdi Cevallos Balda Hospital in Portoviejo, Province Manabí

Tipo de estudio: Retrospectivo realizado en el hospital provincial Dr. Verdi Cevallos Balda de Portoviejo, desde enero de 1998 a diciembre 2000, se tomó una muestra de 41 pacientes de un universo de 125.Objetivo: Demostrar que en Manabí la incidencia de mordeduras de ofidios es alta comparándola con otros países.Resultados: La especie involucrada en todos los casos fue la X perteneciente al género Bothrops. La incidencia y la tasa de letalidad fue de 0.52 y 7.69 en 1998; 2.01 y 3.85 en el 2000, cifras que son mayores que en Nicaragua y Costa Rica donde la misma especie de serpiente causó accidentes. Se evidenció una disminución en la tasa de letalidad en el último año. Las complicaciones dieron valores semejantes a los presentados en otros países; ocurrió la muerte de 1 paciente (11.11%) después de haberle realizado fasciotomía.Conclusión: Los accidentes fueron causados por serpientes del género Bothrops; la mayoría de personas afectadas trabajan en agricultura.

Type of research: It is a research done at Dr. Verdi Cevallos Balda hospital in Portoviejo, during January 1998 to December 2000. 41 patients were studied out of 125 that were observed.Objective: The objective of this research was to demonstrate that in the province of Manabi the incidence of snake bites is higher in comparison to other countries. Results: the species involved is X with belongs to the Bothrops species. The Incidence and the lethal rate was in 1998 0.52 and 7.69; 2.01 and 3.85 in 2000 these numbers are higher than in countries like Costa Rica and Nicaragua where the same species causes a lot of accidents. The Lethal rate has gone done this past year.