Investigação de marcadores de resposta a quimioterapia neoadjuvante em pacientes com carcinoma de orofaringe / Investigation of molecular biomarkers to predict neoadjuvant chemotherapy response in patients with oropharyngeal carcinoma

A resistência a quimioterapia é um dos principais fatores para falhas no tratamento dos pacientes com carcinoma epidermóide de orofaringe (CCEO). O regime mais frequentemente utilizado nestes casos é a quimioterapia de indução (IC) com taxano, platina e 5-fluorouracil. Apesar da maioria dos pacientes responderem satisfatoriamente ao tratamento, uma parcela deles apresenta resposta insatisfatória podendo ocorrer progressão tumoral. Outro fator crítico é a alta taxa de toxicidade, especialmente no grupo de pacientes que não se beneficia do tratamento. Até o momento, não há marcadores moleculares capazes de auxiliar na predição da resposta e evolução da doença disponíveis na prática clínica desses tumores. Este estudo teve como objetivo desenvolver um painel de marcadores para predizer a resposta da quimioterapia de indução. Para isso, investigamos o perfil de expressão gênica (22 CCEO) e proteica (20 CCEO) e comparamos os grupos de acordo com a resposta a IC (resposta satisfatória, RS vs insatisfatória, RI). A análise de transcritos revelou 200 genes diferencialmente expressos entre os grupos, sendo 87 com expressão diminuída e 113 com aumento de expressão nos pacientes não respondedores em relação aos respondedores. A partir desses genes desenvolvemos um modelo de predição com cinco marcadores (GPSM2, CPNE2, FOXRED2, BCHE e KLKB1), o qual foi capaz de classificar 100% dos pacientes de acordo com a resposta a IC. Esse algoritimo foi aplicado aos dados de expressão do TCGA e apresentou bom desempenho como marcador de prognóstico independente do tratamento. Os genes com aumento de expressão foram utilizados para identificar proteínas potencialmente secretadas possíveis de serem utilizadas como marcadores detectáveis em biópsia líquida. Esta análise resultou em quatro potenciais marcadores secretados em RI (CR1, KLKB1, FBLN1 e MOB1A) e cinco em RS (PCSK5, RET, PRPH2, CST6 e BCHE). A análise proteômica por espectrometria de massas revelou 183 proteínas diferencialmente expressas entre os grupos, sendo 127 com expressão diminuída e 56 com expressão aumentada nos pacientes RI em relação ao grupo RS. A partir dessas proteínas, desenvolvemos um classificador de predição de IC com quatro marcadores (CDKN2A, HNRNPA0, MYO1B e TXNL1), os quais foram capazes de classificar corretamente todas as amostras de acordo com a resposta ao tratamento. As proteínas com aumento de expressão nos tumores foram investigadas quanto ao potencial de serem secretadas, sendo possível identificar oito potenciais marcadores secretados em RI e 19 em RS. A análise integrada dos transcritos e proteínas diferencialmente expressas revelou apenas uma molécula em comum, o MOB1A. Uma análise in silico das vias biológicas associadas às moléculas entre os grupos em ambas as análises moleculares revelou diversas vias de regulação comuns entre os grupos de proteínas e transcritos. As principais vias canônicas alteradas estão associadas a regulação do ciclo celular, incluindo ciclo celular, transição G1/S e fase S. Este estudo revelou diversos marcadores com potencial para ser aplicado na prática clinica, auxiliando na tomada de decisões terapêuticas de forma mais personalizada. Esses achados embora promissores necessitem ser validados em uma coorte maior de pacientes (AU)

Resistance to chemotherapy is one of the main causes for treatment failure in patients with oropharyngeal squamous cell carcinoma (OSCC). The induction to chemotherapy treatment with taxane, platinum and 5-fluoracil has been widely used. Although most patients shows good response to treatment (RS), a set of cases present unsatisfactory response (RI) and tumor progression may occur. An additional critical issue is the high toxicity rate, especially for patients who will not benefit from the treatment. To date, there are no molecular markers available in the clinical practice capable to predict response and disease progress. This study aimed to develop a panel of markers capable of predicting induction to chemotherapy response. We investigated gene and protein expression profile of 22 and 20 OSCC, respectively, and compared the groups according to the response to IC (satisfactory response vs. unsatisfactory response). Gene expression data analysis from a previous study of our group, revealed 200 differentially expressed genes, 87 downregulated and 113 genes with overexpression in nonresponders compared to responders cases. Using these genes, we developed a prediction model with five markers (GPSM2, CPNE2, FOXRED2, BCHE and KLKB1) able to classify 100% of the patients according to the response to IC. This algorithm was applied to the TCGA expression data and presented good performance as a prognostic marker independent of the treatment. Overexpressed genes were used to identify potentially secreted proteins with potential to be used as detectable markers in liquid biopsy. This analysis revealed four potencial markers in RI (CR1, KLKB1, FBLN1 and MOB1A) and five in RS (PCSK5, RET, PRPH2, CST6 and BCHE). Proteomic analysis using mass spectrometry revealed 183 differentially expressed proteins between the groups, 127 downexpressed and 56 overexpressed in RI patients compared to RS group. Using these proteins, we developed a prediction algorithm using four biomarkers (CDKN2A, HNRNPA0, MYO1B and TXNL1) able to correctly classify all tumors according to the response to treatment. Overexpressed proteins with potential to be secreted were investigated revealing eight potential markers secreted in IR and 19 in RS. The integrative analysis of differentially expressed transcripts and proteins revealed one molecule in common, MOB1A. In silico pathway analysis resulted in common biological pathways in both group of cases. The major altered canonical pathways are associated with cell cycle regulation, being Cell cycle, G1 / S Transition and S Phase. Our study revealed several candidate markers with potential to be applied in the clinical practice, assisting in therapeutic decisions. Although promisor, these findings need to be validated in a larger cohort of patients (AU)

Complexos triazenidos de platina (II): Avaliação in vitro da atividade antibacteriana e citotóxica frente a bactérias e células de medula óssea de pacientes leucêmicos de um hospital escola / Triazenidos complexes of platinum (II): In vitro evaluation of antibacterial and cytotoxic activity against bacteria and bone marrow cells from leukemic patients in a university hospital

Atualmente, apesar da ampla gama de substâncias ativas existentes, progressivamente tem se limitado o arsenal terapêutico disponível na prática clínica, isto se deve, especialmente, pelo surgimento da resistência aos agentes terapêuticos utilizados no tratamento de tumores e infecções bacterianas. Em virtude das diversas propriedades farmacológicas demonstradas pelos triazenos (TZCs), avaliaram-se compostos inéditos na busca de novos agentes biologicamente ativos, estes foram denominados C1 e C2. A atividade antibacteriana foi realizada pelo método convencional da microdiluição em caldo, através da técnica da Concentração Inibitória Mínima (CIM), frente a cepas bacterianas de referência American Type Culture Collection (ATCC) e isolados clínicos com resistência múltipla as drogas (RMD). A citotoxicidade foi analisada através do ensaio colorimétrico baseado na redução do brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5?difeniltetrazólio frente a células da medula óssea de dois pacientes (P1 e P2) atendidos no Hospital Universitário de Santa Maria. Os dois compostos testados apresentaram atividade antibacteriana em 26,08% (6/23) das cepas testadas, sendo ativos em 38,46% (5/13) das cepas ATCC e 10% (1/10) dos isolados clínicos RMD, apenas em espécies caracterizadas como Gram positivas. Os resultados foram satisfatórios para ambos os compostos frente à amostra P2, células mononucleares de Leucemia Mielóide Crônica, pois demonstraram indução da morte celular. Pode-se concluir que os resultados obtidos desses compostos demonstraram a existência de atividade antibacteriana, bem como, atividade antileucêmica promissora. Pesquisas complementares relacionadas a esses compostos estão em andamento.(AU)

Currently, despite the wide range of existing active substances has been progressively limited therapeutic arsenal available in clinical practice, this is, in particular, the emergence of resistance to therapeutic agents used in treating tumors and bacterial infections. Because of the diverse pharmacological properties demonstrated by triazenes (TZCs) - evaluated whether unpublished compounds in the search for new biologically active agents, they were called C1 and C2. The antibacterial activity was performed by the conventional method of broth microdilution, using the technique of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) against the bacterial strains reference American Type Culture Collection (ATCC) and clinical isolates with multiple drug resistance (MDR). Cytotoxicity was analyzed by colorimetric assay based on the reduction of the bromide of 3 - (4,5- dimethylthiazol-2- yl) -2,5- diphenyltetrazolium against bone marrow cells from two patients (P1 and P2) seen at the Hospital university of Santa Maria. The two compounds tested showed antibacterial activity in 26.08% (6/23) of the strains, being active in 38.46 % (5/13) of the ATCC strains and 10 % (1/10) of clinical isolates MDR only characterized in species such as Gram positive. The results were satisfactory for both the sample compounds front P2, mononuclear cells from chronic myeloid leukemia, as demonstrated induction of cell death. It can be concluded that the results demonstrated the existence of these compounds to antibacterial activity, as well as promising antileukemic activity. Additional research related to these compounds are in progress.(AU)

A abordagem historiográfica dos séculos XIX e XX sobre a atuação de médicos e boticários jesuítas na América platina no século XVIII / The historiographical approach taken in the nineteenth and twentieth centuries to the work of Jesuit doctors and apothecaries in the a Plata region in the eighteenth century

Analisam-se as posições de Pedro Arata, Moisés Santiago Bertoni, Carlos Leonhardt e Guillermo Furlong no debate sobre o papel da Companhia de Jesus na introdução e no desenvolvimento das ciências na América platina. Escritas entre 1890 e fins de 1950, as obras desses autores tanto analisam o conhecimento médico, farmacêutico e botânico dos missionários jesuítas nos séculos XVII e XVIII quanto avaliam a contribuição da Companhia para o pensamento científico nos países de colonização ibérica. Suas posições antecipam o debate historiográfico sobre o reacionarismo da ordem jesuíta e as reflexões sobre a contribuição dos saberes indígenas sobre a farmacopeia americana para o conhecimento que os missionários levaram aos continentes em que atuaram.

The positions of Pedro Arata, Moisés Santiago Bertoni, Carlos Leonhardt and Guillermo Furlong in the debate about the role of the Society of Jesus in the introduction and development of science in the La Plata region are investigated. Written between 1890 and the late 1950s, these authors’ works not only analyze the medical, pharmaceutical and botanical knowledge of the Jesuit missionaries in the 1600s and 1700s, but also evaluate their contribution to scientific thinking in the countries colonized by Spain and Portugal. Their positions foretaste the historiographical debate about the reactionary nature of the Jesuit order and reflections about the contribution made by indigenous knowledge of American pharmacopeia to the knowledge the missionaries took to the continents where they were active.

Carboplatin: molecular mechanisms of action associated with chemoresistance

Carboplatin is a derivative of cisplatin; it has a similar mechanism of action, but differs in terms of structure and toxicity. It was approved by the FDA in the 1980s and since then it has been widely used in the treatment of several tumor types. This agent is characterized by its ability to generate lesions in DNA through the formation of adducts with platinum, thereby inhibiting replication and transcription and leading to cell death. However, its use can lead to serious inconvenience arising from the development of resistance that some patients acquire during treatment, limiting the scope of its full potential. Currently, the biochemical mechanisms related to resistance are not precisely known. Therefore, knowledge of pathways associated with resistance caused by carboplatin exposure may provide valuable clues for more efficient rational drug design in platinum-based therapy and the development of new therapeutic strategies. In this narrative review, we discuss some of the known mechanisms of resistance to platinum-based drugs, especially carboplatin.

A carboplatina é um derivado da cisplatina, possuindo mecanismo de ação similar, diferindo em estrutura e toxicidade. Este fármaco foi aprovado pelo FDA em meados de 1980 e, desde então, tem sido amplamente usado no tratamento de diversos tipos de tumores. Este agente é caracterizado por sua habilidade em gerar lesões no DNA através da formação de adutos com a platina, inibindo a replicação e a transcrição, levando à morte celular. Entretanto, seu uso pode levar a graves inconvenientes, advindos do desenvolvimento de resistência que alguns pacientes adquirem durante o tratamento, limitando o alcance de seu potencial. Até então, os mecanismos bioquímicos relacionados ao problema da resistência não são precisamente conhecidos. Dessa forma, o conhecimento das vias associadas à resistência causada pela exposição à carboplatina pode prover valiosas informações para o planejamento racional de fármacos com base em platina mais eficiente e para o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas. Nesta revisão narrativa, serão discutidos alguns mecanismos de resistência a fármacos com base em platina, especialmente ao antitumoral carboplatina.

Antropometría del Estribo en Humanos: Un Estudio Anatómico Directo / Human's Stape Anthropometry: A Direct Anatomic Study

Es modesta la base de datos morfológicos del estribo en humanos. Su caracterización morfométrica es importante cuando se compara con estribos de otras épocas ancestrales e igualmente en el estudio de una biomecánica oscicular compleja. Las características estructurales y dimensionales y pareadas del estribo fueron registradas en 23 huesos de población mestiza adulta Colombiana. Las medidas registradas involucraron el área de la articulación lenticular incudo-estapedial, la platina del estribo y los procesos anterior y posterior del estribo, en diferentes sentidos. Cinco de los dieciséis registros tomados en este estudio pudieron ser comparados concienzudamente con otros estudios. Las cinco medidas comparables fueron: el largo total de la platina con 2,87 mm DE 0,09; el ancho mayor de la platina con 1,36 mm DE 0,09; el largo del estribo con 3,18 DE 0,15 y la distancia interna interpilar con 1,65 DE 0,17; y la altura del arco con 1,82 DE 0,19. La angulación de los procesos anterior y posterior del estribo resulto en 29.01 grados DE 2.93. Conforme a la población estudiada no se logro encontrar variación individual o pareada en la anatomía del estribo, haciéndolo un hueso morfométricamente uniforme y estable.

There is a modest database about morphological data for the stapes in humans. Its preliminary characterization is important when compared with other ancestral times and also in the study of a complex oscicular biomechanics. Paired and structural characteristics of the stapes were registered in 23 bones of Colombian adult mestizo population. Registered measures involved the lenticular incudo-stapedial joint; the anterior and posterior processes of the stapes; and the footplate dimensions. Five of the sixteen records taken in this study could be carefully compared to other results. The five comparable measures were: the total length of the footplate with 2.87 SD 0.09 mm; the widest footplate zone with 1.36 SD 0.09 mm; the stape's total length with 0.15 SD 3.18 and internal interprocesses length with 1.65 SD 0.17; and the arc height with 1,82 SD 0,19. Anterior and posterior angulation of the stape processes was 29.01 SD 2.93 degrees. In accordance with the studied population the measures cannot show individually or paired variations in the anatomy of the stapes, making it a uniform and morphometrically stable bone.

Discovery of Euglossa (Euglossa) cognata Moure (Apidae: Euglossini) in the Platina Basin, Mato Grosso state, Brazil / Descoberta de Euglossa (Euglossa) cognata Moure (Apidae: Euglossini) na Bacia Platina, Mato Grosso, Brasil

By attracting male orchid bees with eight chemical baits in the gallery forest of the Parque Nacional da Chapada dos Guimarães, southern Mato Grosso state, Brazil, I found several males belongs to all Euglossini bee genera. Male euglosine bees were collected monthly using an entomological net as they arrived at the baits. From September 2003 to July 2005, the baits were applied to absorbent paper pads from 8:00 AM to 4:00 PM. From 24 collections, a total of 264 males were captured, spread throughout the five genera of the tribe and belonging to 30 valid species. Of all the males collected, only one was Euglossa cognata Moure, reported to occur from Costa Rica to southern Brazil, and herein recorded to the Platina Basin for the first time. The results clarify the distributional gap and amplified the geographic distributional range of E. cognata in South America.

Oito iscas-odores foram utilizadas para atrair machos das abelhas Euglossini na floresta de galeria do Parque Nacional da Chapada dos Guimarães, sul de Mato Grosso. De setembro de 2003 a julho de 2005, uma vez por mês, das 08:00 às 16:00 horas, os machos foram capturados conforme chegavam às iscas-odores. Durante as 24 coletas, foram capturados 264 machos, distribuídos pelos cinco gêneros da tribo e pertencentes a 30 espécies válidas. Do total de machos coletados, apenas um era de Euglossa cognata Moure, espécie com distribuição geográfica desde a Costa Rica até o sudeste do Brasil, todavia sem registro anterior para a Bacia Platina. O resultado aqui apresentado amplia a distribuição geográfica de E. cognata na América do Sul.