RESUMEN
This study aimed to determine the antioxidant capacity of the Leucaena leucocephala aqueous shoot tips plus young leaves (LL-spl) extracts among three different fractions (LL-spl 10, 20, and 40 min) and to examine its acute toxicity on male reproductive parameters. The amount of the total phenolics in LL-spl extract was determined using a Folin-Ciocalteu reagent method and its antioxidant capacity was analyzed using 1, 1-diphenyl l-2-picrylhydrazyl radical scavenging and ferric reducing antioxidant powder methods. The LL-spl extract fraction with highest antioxidant capacity was used in animal treating. Male rats were divided into three groups (n= 5); control and groups treated with LL-spl 400 and 600 mg/Kg body weight for consecutive 40 days. The results showed that the LL-spl 40 min fraction possessed the highest antioxidant capacity. In addition, the LL-spl 400 and 600 groups showed no differences in weights of body, testis and epididymis, serum testosterone levels, and expression of testicular steroidogenic acute regulatory (StAR) protein. Significantly, LL-spl extract reduced the weight of seminal vesicle, sperm concentration, and seminiferous diameters compared with control. Moreover, LL-spl extract had adverse effect on testicular histology in inducing of seminiferous atrophy and degeneration including dilated blood vessels in interstitial tissue. It was concluded that although LL-spl extract possessing antioxidant capacity, in short term consumptions, it could be toxic to some male reproductive organs especially damaging testicular tissues.
El objetivo fue determinar la capacidad antioxidante del extracto de brotes acuosos con hojas nuevas de Leucaena leucocephala (LL-spl) en tres fracciones diferentes (LL-SPL 10, 20 y 40 min), además de examinar su toxicidad aguda sobre los parámetros reproductivos masculinos. Se determinó la cantidad de los fenoles totales en el extracto de LL-spl utilizando un método reactivo de Folin-Ciocalteu. La capacidad antioxidante se analizó por medio de 1-difenil-2-picrilhidracilo y/o métodos de reducción férrica de la capacidad antioxidante. La fracción de extracto LL-spl con mayor capacidad antioxidante fue utilizada en el tratamiento de los animales. Ratas macho fueron divididas en tres grupos (n= 5): el control y los grupos tratados con LL-spl 400 y 600 mg/kg peso corporal por 40 días consecutivos. El resultado mostró que la fracción LL-spl 40 min poseía la mayor capacidad antioxidante. Además, los grupos 400 y 600 LL-spl no mostraron diferencias según el peso corporal, testículos y epidídimo, niveles de testosterona y la expresión de proteínas testiculares. El extracto de LL-spl redujo de manera significativa el peso de la vesícula seminal, la concentración de espermatozoides y los diámetros de los túbulos seminíferos en comparación con el control. Por otra parte, el extracto de LL-spl tuvo un efecto adverso sobre la histología testicular por la inducción de atrofia y degeneración de los túbulos seminíferos, incluyendo a vasos sanguíneos dilatados en el tejido intersticial. Si bien el extracto LL-spl posee una capacidad antioxidante, ésta podría ser tóxica en el consumo a corto plazo para algunos órganos reproductores masculinos y especialmente dañino para los tejidos testiculares.
Asunto(s)
Animales , Masculino , Ratas , Antioxidantes/farmacología , Fabaceae , Extractos Vegetales/farmacología , Hojas de la Planta/química , Testículo/efectos de los fármacos , Peso Corporal/efectos de los fármacos , Genitales Masculinos/efectos de los fármacos , Fenoles/análisis , Ratas Sprague-Dawley , Túbulos Seminíferos , Testosterona/análisis , Pruebas de Toxicidad AgudaRESUMEN
Las Zamiaceas son plantas relictuales consideradas fósiles vivientes. En Colombia, el 65% de esta familia se encuentra en alguna categoría de amenaza, por la destrucción del hábitat e intensa recolección. Teniendo en cuenta que entre las ventajas de la propagación in vitro está la conservación ex situ de germoplasma, el presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el potencial de regeneración de plantas de Z. incognita a partir de explantes foliares y embriones cigoticos. Se evaluó el efecto de diferentes combinaciones de Auxinas (2,4-D y ANA) y citoquininas (KIN, BAP y TDZ) sobre la formación de callo y la regeneración de brotes (directa o indirecta), utilizando como medio basal MS (MB1) y medio basal B5 modificado (MB2). La formación de callo se presentó sobre un amplio rango de concentraciones de 2,4-D con KIN y 2,4-D con BAP, independientemente del medio basal, pero no en los explantes tratados con ANA más KIN o TDZ. Para los explantes foliares no hubo respuesta a la formación de embriones somáticos y/o brotes con las combinaciones y concentraciones hormonales evaluadas, no obstante los callos inducidos en MB2 con 2,4-D (0,22 mg/l) y BAP (0, 1, 2, 3 mg/l) fueron diferentes, su aspecto nodular, color crema y apariencia proembriogénica coincidió con una gran cantidad de células meristemáticas potenciales para el proceso de regeneración. A partir de embriones cigoticos inmaduros se logró la formación de embriones somáticos en el medio MB2 exento de reguladores o conteniendo 2,4-D solo (0,22 mg/l) y en combinación con BAP (1 mg/l), sin lograr el proceso de conversión a plántulas.
Zamiaceas are relict plants considered living fossils. In Colombia, 65% of this family is under some threat category due to their habitat destruction and their intense collection. Given that the advantages of in vitro propagation is ex situ conservation of germoplasm, this study aimed to evaluate the regeneration potential of Z incognita plants from leaf explants and zygotic embryos. The effect of different combinations of auxin (2.4-D and NAA) and cytokinins (KIN, BAP and TDZ) was evaluated on the formation of callus and shoot regeneration (direct or indirect), using MS (MB1) basal medium and B5 (MB2) basal modified medium. The callus formation was presented over a wide concentration range of 2.4-D with KIN and 2.4-D with BAP, regardless of the basal medium, but not in explants treated with ANA more TDZ or KIN. For leaf explants there was no response to the formation of somatic embryos or shoots with hormonal combinations and concentrations evaluated; however, MB2 calluses induced with 2.4-D (0.22 mg / l) and BAP (0. 1 , 2. 3 mg / l) were different, their nodular aspect, cream color and pro-embryogenic appearance coincided with a lot of potential meristematic cells for the regeneration process. From immature zygotic embryos, somatic embryo formation in the MB2 medium was achieved without growth regulators or containing 2.4-D alone (0.22 mg /l) or 2.4-D in combination with BAP (1 mg/l) without achieving the conversion process to seedlings.