In vitro genotoxicity and cytotoxicity in murine fibroblasts exposed to EDTA, NaOCl, MTAD and citric acid

The aim of the present study was to evaluate the capacity of some root canal irrigants to induce genetic damage and/or cellular death in vitro. Murine fibroblast cells were exposed to ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA), sodium hypochlorite (NaOCl), MTAD™ and citric acid in increasing concentrations for 3 h at 37ºC. The negative control group was treated with vehicle control (phosphate buffer solution - PBS) for 3 h at 37°C, and the positive control group was treated with methylmetanesulfonate, 1 μM. for 3 h at 37°C. Cytotoxicity was assessed by the trypan blue test and genotoxicity was evaluated by the single cell gel (comet) assay. The results showed that exposure to 2.5% and 5% NaOCl and 8.5% citric acid resulted in a significant cytotoxic effect. NaOCl, EDTA and citric acid did not produce genotoxic effects with respect to the comet assay data for all evaluated concentrations. Although MTAD was not a cytotoxic agent, it showed significant genotoxic effects at all tested concentrations (ANOVA and Tukey's test; p<0.05). NaOCl, EDTA and citric acid were found to be cytotoxic in a dose-dependent manner, but they were not genotoxic. MTAD did not cause cell death, but presented genotoxic effects.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de alguns irrigantes endodônticos em induzir danos genéticos e/ou morte celular in vitro. Células de fibroblastos murinos foram expostas ao ácido etilenodiaminotetracético (EDTA), hipoclorito de sódio (NaOCl), MTAD™ e ácido cítrico em concentrações crescentes durante 3 h a 37°C. O grupo controle negativo foi tratado com solução tampão fosfato - PBS por 3 h a 37° C e o grupo controle positivo foi tratado com metilmetanesulfonato a 1 μM por 3 h a 37° C. A citotoxicidade foi testada pelo azul de tripan e a genotoxicidade foi avaliada pelo teste do cometa. Os resultados apontaram que a exposição ao NaOCl a 2,5% e 5%, e ácido cítrico a 21% resultou em efeitos citotóxicos significativos. O NaOCl, EDTA e o ácido cítrico não produziram efeitos genotóxicos no que diz respeito aos dados obtidos pelo ensaio do Cometa em todas as concentrações testadas. Embora o MTAD não tenha sido um agente citotóxico, mostrou efeitos genotóxicos significativos em todas as concentrações testadas (ANOVA e teste de Tuckey; p<0,05). O NaOCl, o EDTA e o ácido cítrico mostraram-se citotóxicos de maneira dose-dependente, mas não genotóxicos. Por outro lado, apesar do MTAD não ter causado a morte celular, foi genotóxico em todas as concentrações testadas.

impact of pH on cytotoxic effects of three root canal irrigants

Cytotoxicity of root canal irrigants is important due to their close contact with host tissues. This study was to assess the possible impact of pH on cytotoxic effects of MTAD, 17% EDTA, and 2.6% NaOCl on the human gingival fibroblasts using MTT assay. Human gingival fibroblasts were exposed to the irrigants and their viability was assessed after 1, 6, and 12 h. The pH of the medium was measured in each interval. Light absorption values were measured for each culture medium using Elisa Reader device. NaOCl had significantly less cytotoxicity than EDTA and MTAD. Also irrigants cytotoxicity decreased in 12, 1, and 6 h, respectively. It seems that variation of the pH resulted in variation in the cytotoxicity of solutions; i.e., it follows the pattern of the pH variation

Biocompatibility of EDTA, EGTA and citric acid

Este estudo in vivo avaliou o potencial irritativo do EDTA, EGTA, ácido cítrico e soro fisiológico (controle) durante a fase exsudativa do processo inflamatório. Aplicou-se, intravenosamente na veia caudal lateral de 32 ratos machos da linhagem "Wistar", variação albina, 20 mg/kg de azul de Evans 2%. Em seguida, no tecido subcutâneo da região dorsal dos animais injetou-se 0,01 mL das soluções testes. Após os intervalos de ½, 1, 3 e 6 horas, os animais foram sacrificados, suas peles dorsais foram excisadas e submetidas à análise do corante extravasado pela espectrofotometria de absorção de luz. Os dados obtidos foram avaliados pela análise de variância a 2 critérios e teste de Tukey. Em todos os períodos de tempo estudados, os maiores valores de corante extravasado foram observados no grupo do EDTA seguido pelos grupos do EGTA e ácido cítrico, em comparação ao grupo controle. Houve diferença estatisticamente significante entre todas as soluções testadas (p<0.01). Quando considerado o fator tempo, notou-se diferença significante entre os grupos de 3 e 6 horas (p<0.05). Entretanto, não houve diferença entre os grupos de tempo de ½ e 1 hora. Dentre os ácidos orgânicos avaliados, os resultados demonstraram que o ácido cítrico apresentou o menor potencial irritativo.

Avaliação do efeito tóxico do PM10 no desenvolvimento embrionário do Gallus domesticus / Evaluation of the toxic effect of PM10 in the embrionary development of Gallus domesticus

Partículas atmosféricas urbanas têm sido associadas a danos fetais. Neste estudo avaliamos o potencial embriotóxico do PM10, o período de desenvolvimento de maior suscetibilidade e a participação de metais hidrossolúveis na determinação do efeito lesivo da partícula, no modelo experimental do embrião de galinha. Ovos fertilizados de galinha foram inoculados com extratos aquosos de PM10 (3 µg e 0,03µg) em 4 momentos do desenvolvimento embrionário (24, 48, 72 e 96 h de incubação). Os embriões foram também tratados com a solução combinada de PM10 (3µg) e o agente quelante de metal EDTA. Os resultados apontam o 3º e 4º dias de incubação como os períodos do desenvolvimento embrionário mais sensível às partículas tóxicas (p=0,001). A embriotoxicidade do PM10 foi dose-dependente e promoveu danos significativos no desenvolvimento embrionário e menor viabilidade dos embriões (p=0,001). Ambos efeitos foram reduzidos (p=0,006 e p=0,02, respectivamente) pelo uso do quelante de metal (EDTA). Tais observações respaldam o conceito do ar e sugerem que metais podem Ter um papel importante na indução embiotóxica de partículas / Airborn urban particles have been shown to be associated with adverse foetal outcomes. In this study we evaluated the potential embryotoxity of the PM10, the period of development with greater susceptibility and the participation of metals in determinang particle hazardous efecct in a chicken embryo model. Chicken fertilized eggs were inoculated with PM10 aqueous extracts (3µg and 0,03µg) at 4 moments of embryo development (24, 48, 72 na 96 hr of inoculation). Embryos were also treated with the combined solution of PM10 (3µg) plus the metal chelating agent EDTA. The results pointed the 3rd and the 4th days of incubation as the most sensitive embryo developmental period to particles toxicity (p=0,001). The embryotoxicity of PM10 was dose-dependent and promoted significant impairment of embryo development and low embryo viability (p=0,001). Both effects were reduced (p=0,006 and p=0,02) by the use of metal chelation. These observations are supportive of the concept that foetuses may represent a target of air contaminants and suggests that metals play a role in particle-induced embryotoxicity...

Interaction of EDTA with tributyltin induced cellular toxicity.

Tributyltin inhibited the growth of cells in concentration dependent manner. The inhibitory effect of tributyltin on E. coli was enhanced in the presence of metal ion chelator, EDTA. This was due to EDTA induced increase of permeability of bacterial cell envelope to tributyltin. In case of EDTA treated cells the rate of uptake of tributyltin was more pronounced as compared to control.