Expresión como proteínas de fusión de las subunidades PB1 y PB2 de la polimerasa del virus de la influenza / Expression how proteins of fusion of the subunits PB1 and PB2 of the influenza viral of polymerase

Los cADNs de los genes que codifican las proteínas PB1 y PB2 de la ARN polimerasa del virus de la influenza, se clonaron en fase en un sitio distal del ATG que codifica la proteína 10 del bacteriógafo T7, en el vector de expresión pAR3040, bajo el control de un promotor de la ARN polimerasa de T7. Los plásmidos recombinantes se introdujeron en la cepa bacteriana. E coli BL21 (DE3)plysS, que contiene en su genoma el gen de la ARN polimerasa del fago T7, bajo el control de un promotor (lac uv5) inducible por IPTG. La inducción de la ARN polimerasa del fago T7 en las células hospederas, resultó en la expresión de las proteínas PB1 y PB2 en forma de proteínas de fusión. Las proteínas expresadas se acumularon en grandes cantidades en el interior de las células bacterianas y fueron recuperadas de los lisados en forma de precipitados insolubles.