Concomitant infection of Neospora caninum and Bovine Herpesvirus type 5 in spontaneous bovine abortions / Infecção simultânea de Neospora caninum e Herpesvirus bovino tipo 5 em casos espontâneos de aborto bovino

Bovine Herpesvirus type 5 (BoHV-5) has not been conclusively demonstrated to cause bovine abortion. Brain lesions produced by Neospora caninum and Bovine Herpesvirus type 1 (BoHV-1) exhibit common features. Therefore, careful microscopic evaluation and additional diagnostic procedures are required to achieve an accurate final etiological diagnosis. The aim of the present work was to investigate the occurrence of infections due to BoHV-1, BoHV-5 and N. caninum in 68 cases of spontaneous bovine abortions which showed microscopic lesions in the fetal central nervous system. This study allowed the identification of 4 (5.9%) fetuses with dual infection by BoHV-5 and N. caninum and 33 (48.5%) cases in which N. caninum was the sole pathogen identified. All cases were negative to BoHV-1. The results of this study provide evidence that dual infection by BoHV-5 and N. caninum occur during pregnancy in cattle; however, the role of BoHV-5 as a primary cause of bovine abortion needs further research. Molecular diagnosis of BoHV-5 and N. caninum confirmed the importance of applying complementary assays to improve the sensitivity of diagnosing bovine abortion.

Não está demonstrado até ao momento, que o Herpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) seja um agente causal de aborto bovino. Uma vez que as lesões cerebrais tanto de Neospora caninum como de Herpesvírus bovino tipo 1(BoHV-1) têm características similares, é necessária uma avaliação microscópica cuidadosa, bem como exames laboratoriais adicionais, para obter um diagnóstico final preciso. O objetivo do presente trabalho foi investigar a presença de infeções por BoHV-1, BoHV-5 e N. caninum em 68 casos de aborto espontâneo, nos quais se verificaram lesões microscópicas no sistema nervoso central. Foram encontrados 4 (5,9%) fetos com infeção simultânea de BoHV-5 e N. caninum e 33 (48,5%) casos com infeção exclusiva de N. caninum. Todos os casos foram negativos a BoHV-1. Os resultados deste estudo demonstram que a infeção dual por BoHV-5 y N. caninum está presente durante a gestçao dos bovinos. Apesar disso, o papel de BoHV-5 como agente primário causal de aborto, carece de mais investigaçao. O diagnóstico molecular de BoHV-5 e N. caninum confirmou a importância de se aplicar ensaios complementares para melhorar a sensibilidade do diagnóstico de aborto bovino.

Avaliação genética das vacinas contra a brucelose bovina comercializadas no Brasil / Genetic evaluation of vaccine against bovine brucellosis marketed in Brazil

A prevenção contra infecções causadas por Brucella abortus em bovinos é realizada por meio da administração das amostras vacinais B19 e RB51. Existem relatos de que estas vacinas podem causar aborto em fêmeas vacinadas. Portanto, toda a ocorrência de aborto em animais vacinados merece um estudo aprofundado sobre a causa. No Brasil, não há registro sobre a origem das amostras B19 e RB51 utilizadas na produção das vacinas comerciais. Assim, um estudo para verificar possíveis mutações em relação às amostras referência USDA B19 e USDA RB51 de B. abortus se faz necessário, devido às amostras vacinais poderem reverter a sua virulência. Objetivou-se com este estudo caracterizar genotipicamente as amostras vacinais B19 e RB51 comercializadas no Brasil. A metodologia utilizada foi a genotipagem de genes marcadores destas amostras vacinais, por meio da amplificação pela reação em cadeia da polimerase. Os resultados obtidos permitiram a identificação do genótipo das vacinas comerciais B19 e RB51 disponíveis e utilizadas em bovinos no Brasil. A ausência de mutações nas vacinas testadas corrobora com a qualidade genética das mesmas, quanto à estabilidade dos genes analisados.

Vaccine strains B19 and RB51 are administered to cattle for prevention against infection by Brucella abortus. However, there are reports that these vaccines can cause miscarriages. Thus, every miscarriage among vaccinated animals should be thoroughly studied to determine the cause. In Brazil, there are no records on the origin of B19 and RB51 samples used in the preparation of commercial vaccines. Therefore, a study is needed to determine possible mutations in relation to the USDA reference samples of B. abortus due to the fact that vaccine samples could revert to the virulence of the disease. The aim of the present study was to perform a genotype analysis of vaccine strains B19 and RB51 used in Brazil. The methodology was based on the genotyping of marker genes of these vaccine strains by amplification using polymerase chain reaction. The results allowed the identification of the genotype of the B19 and RB51 commercial vaccine available for use on cattle in Brazil. The absence of mutations in the samples tested confirmed the genetic quality of the vaccines and stability of genes analyzed.

Antibody dynamics during gestation in cows naturally infected with Neospora caninum from four dairy herds in Brazil / Dinâmica de anticorpos durante a gestação em vacas naturalmente infectadas com Neospora caninum de quatro rebanhos leiteiros no Brasil

Neospora caninum has been described as an important cause of abortion in bovine worldwide. The objective of the present study was to characterize patterns of antibody dynamics during gestation in dairy cows naturally infected with N. caninum. Twelve N. caninum naturally infected cows were selected from four dairy herds from Brazil and blood samples were monthly collected during pregnancy. Serum were tested for antibodies against N. caninum by Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT). During this period, all cows remained clinically normal and gave birth to healthy calves. The cows remained seropositives during the study and N. caninum IFAT titers ranged from 100 to 12,800; only animal 234 presented one negative result in the first month of pregnancy. Significant differences of N. caninum IFAT titers were found between months from 1 to 9 of pregnancy bythe Friedman Test (P<0.001). The statistical analysis showed an increase of N. caninum antibody titers from second and third trimester of pregnancy in relation to first trimester. High titers were observed in few cows after month fifth of pregnancy. This study showed a variation of specific antibody levels in seropositive cows during different gestational periods. The highest values were observed during the second and third trimester. The antibody increase after the fifth month of gestation was not associated to abortion.

Neospora caninum é descrito como uma importante causa de abortamento em bovinos por todo o mundo. O objetivo do presente estudo foi caracterizar o padrão da dinâmica de anticorpos durante a gestação em vacas leiteiras infectadas naturalmente por N. caninum. Doze vacas gestantes infectadas naturalmente com N.caninum foram selecionadas de quatro rebanhos leiteiros do Brasil e amostras de sangue foram mensalmente colhidas da concepção até o parto das vacas. Soros foram testados para anticorpos contra N. caninum pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Durante a gestação, todas as vacas permaneceram clinicamente normais e geraram bezerros saudáveis. As vacas permaneceram soropositivas durante o estudo e títulos de anticorpos anti-N.caninum variaram de 100 a 12.800; somente o animal 234 apresentou um resultado negativo no primeiro mês de gestação. Diferenças significativas dos títulos da RIFI para N. caninum foram encontradas entre os meses de 1 a 9 de gestação pelo Teste de Friedman (P<0,001). As análises estatísticas mostraram um aumento dos títulos de anticorpos anti-N. caninum no segundo e terceiro trimestre de gestação em relação ao primeiro trimestre. Altos títulos de anticorpos foram observados em algumas vacas após o mês cinco de gestação. Este estudo mostrou variação dos níveis de anticorpos em vacas soropositivas durante diferentes períodos gestacionais. Altos títulos foram observados durante o segundo e terceiro trimestre e o aumento dos títulos de anticorpos após o quinto mês de gestação não foi associado a abortamentos.

Neosporosis bovina: conceptos generales, inmunidad y perspectivas para la vacunación / Bovine neosporosis: general concepts, immunity and perspectives for vaccination

Neospora caninum es agente causal de aborto en bovinos de regiones ganaderas de todo el mundo. Su ciclo de vida es heteroxeno siendo el perro (Canis familiaris) y el coyote (Canis latrans) los hospedadores definitivos reconocidos hasta el presente. La infección transplacentaria es un eficiente mecanismo de transmisión de la enfermedad pero existe evidencia que demuestra la transmisión postnatal en los bovinos. Debido a las pérdidas económicas que causa la neosporosis, diversas técnicas diagnósticas han sido desarrolladas. La fisiopatología del aborto causado por N. caninum no ha sido completamente esclarecida. La modulación del sistema inmune por efecto de la preñez ocasiona un período de susceptibilidad al aborto por N. caninum. Aunque la resistencia al parásito ha sido asociada con una respuesta de linfocitos T tipo 1, dicha respuesta inmune es incompatible con una preñez exitosa. Sin embargo, los mecanismos inmunes presentes en animales crónicamente infectados protegen del aborto ante una segunda exposición al protozoo. La comprensión de esa respuesta inmune adquirida constituye un desafío para el desarrollo de inmunógenos. Este trabajo menciona conceptos generales de la neosporosis bovina haciendo énfasis en los mecanismos inmunes y las perspectivas para la vacunación.

Neospora caninum causes abortions in cattle worldwide. The Neospora-cycle of life is heteroxenous. Dogs (Canis familiaris) and coyotes (Canis latrans) are the definitive hosts known at present. Although, transplacental infection is an efficiently mode of transmission in cattle; there are also experimental and field data that prove horizontal transmission. Several techniques are available for diagnosis since neosporosis is recognized as a disease that causes economic losses in cattle. The mechanisms that produce the abortion are not completely understood. The immunomodulation observed during the pregnancy, is associated with a susceptible period where Neospora-abortion can occur. Resistance to the parasite is dependent on T helper cell 1 cytokine responses. This has important repercussions for pregnant female bovine because strong T helper cell 1 cytokine responses are incompatible with successful pregnancy. However, it was demonstrated that chronically infected cows develop immune mechanisms against the abortion caused by a second Neospora-exposure. The comprehension of those mechanisms is needed for the formulation of Neospora-vaccines that prevent bovine neosporosis. General concepts about neosporosis with emphasis in the immune response and perspectives for vaccination are mentioned in the present review.