Spleen regeneration after subcutaneous heterotopic autotransplantation in a mouse model

BACKGROUND: Splenectomy may lead to severe postoperative complications, including sepsis and cancers. A possible solution to this problem is heterotopic autotransplantation of the spleen. Splenic autografts rapidly restore the regular splenic microanatomy in model animals. However, the functional competence of such regenerated autografts in terms of lympho- and hematopoietic capacity remains uncertain. Therefore, this study aimed to monitor the dynamics of B and T lymphocyte populations, the monocyte-macrophage system, and megakaryocytopoiesis in murine splenic autografts. METHODS: The model of subcutaneous splenic engraftment was implemented in C57Bl male mice. Cell sources of functional recovery were studied using heterotopic transplantations from B10-GFP donors to C57Bl recipients. The cellular composition dynamics were studied by immunohistochemistry and flow cytometry. Expression of regulatory genes at mRNA and protein levels was assessed by real-time PCR and Western blot, respectively. RESULTS: Characteristic splenic architecture is restored within 30 days post-transplantation, consistent with other studies. The monocyte-macrophage system, megakaryocytes, and B lymphocytes show the highest rates, whereas the functional recovery of T cells takes longer. Cross-strain splenic engraftments using B10-GFP donors indicate the recipient-derived cell sources of the recovery. Transplantations of scaffolds populated with splenic stromal cells or without them afforded no restoration of the characteristic splenic architecture. CONCLUSIONS: Allogeneic subcutaneous transplantation of splenic fragments in a mouse model leads to their structural recovery within 30 days, with full reconstitution of the monocyte-macrophage, megakaryocyte and B lymphocyte populations. The circulating hematopoietic cells provide the likely source for the cell composition recovery.

Splenic implant preservation after conservation in lactated Ringer´s solution / Preservação de implante esplênico autógeno após conservação em solução de Ringer-lactato

ABSTRACT Objective: to evaluate the morphology and function of autogenous splenic tissue implanted in the greater omentum, 24 hours after storage in Ringer-lactate solution. Methods: we divided 35 male rats into seven groups (n=5): Group 1: no splenectomy; Group 2: total splenectomy without implant; Group 3: total splenectomy and immediate autogenous implant; Group 4: total splenectomy, preservation of the spleen in Ringer-lactate at room temperature, then sliced ​​and implanted; Group 5: total splenectomy, ​​spleen sliced and preserved in Ringer-lactate at room temperature before implantation; Group 6: total splenectomy with preservation of the spleen in Ringer-lactate at 4°C and then sliced ​​and implanted; Group 7: total splenectomy and the spleen sliced for preservation in Ringer-lactate at 4°C before implantation. After 90 days, we performed scintigraphic studies with Tc99m-colloidal tin (liver, lung, spleen or implant and clot), haematological exams (erythrogram, leucometry, platelets), biochemical dosages (protein electrophoresis) and anatomopathological studies. Results: regeneration of autogenous splenic implants occurred in the animals of the groups with preservation of the spleen at 4ºC. The uptake of colloidal tin was higher in groups 1, 3, 6 and 7 compared with the others. There was no difference in hematimetric values ​​in the seven groups. Protein electrophoresis showed a decrease in the gamma fraction in the group of splenectomized animals in relation to the operated groups. Conclusion: the splenic tissue preserved in Ringer-lactate solution at 4ºC maintains its morphological structure and allows functional recovery after being implanted on the greater omentum.

RESUMO Objetivo: avaliar morfologia e função de tecido esplênico autógeno, implantado no omento maior, 24 horas após conservação em solução de Ringer-lactato. Métodos: foram estudados 35 ratos machos, distribuídos em sete grupos (n=5): Grupo 1: sem esplenectomia; Grupo 2: esplenectomia total sem implante; Grupo 3: esplenectomia total e implante autógeno imediato; Grupo 4: esplenectomia total, preservação do baço em Ringer-lactato à temperatura ambiente, em seguida, fatiado e implantado; Grupo 5: esplenectomia total, baço fatiado e preservado em Ringer-lactato à temperatura ambiente antes de ser implantado; Grupo 6: esplenectomia total com preservação do baço em Ringer-lactato a 4°C e, em seguida, fatiado e implantado; Grupo 7: esplenectomia total e baço fatiado, para preservação em Ringer-lactato a 4°C antes de ser implantado. Após 90 dias, realizaram-se estudos cintilográficos com estanho coloidal-Tc99m (fígado, pulmão, baço ou implante e coágulo), hematológicos (eritrograma, leucometria, plaquetas), bioquímicos (eletroforese de proteínas) e anatomopatológicos. Resultados: ocorreu regeneração dos implantes esplênicos autógenos nos animais dos grupos com preservação do baço a 4ºC. A captação de estanho coloidal foi superior nos grupos 1, 3, 6 e 7 em relação aos demais. Não houve diferença nos valores hematimétricos nos sete grupos. A eletroforese de proteínas mostrou diminuição da fração gama no grupo de animais esplenectomizados em relação aos grupos operados. Conclusão: o tecido esplênico conservado em solução de Ringer-lactato à temperatura de 4ºC mantém sua estrutura morfológica e permite a recuperação funcional após ser implantado sobre o omento maior.

Phagocytic function of lower spleen pole and autogenous splenic implants in rats

PURPOSE: To investigate whether there are differences between the phagocytic function of the remaining lower spleen pole after subtotal splenectomy and autogenous splenic implants. METHODS: Thirty-six male Wistar rats, weighting 364 ± 60g were used. They were subjected to subtotal splenectomy preserving the lower spleen pole and to autogenous splenic implant in the greater omentum. Its viability was assessed microscopically. Phagocytic function was assessed by splenic uptake of the radioisotope-labeled colloid and by macrophages counting. RESULTS: The viability of the autogenous splenic implant and of the lower spleen pole was found in 33 animals, with no difference between them. The weight of the implants was higher than the lower pole of animals from groups G1, G7, G30, G60 and G120. The implants phagocytic function by radioisotope uptake was higher than the lower pole in G7 and G120 groups and it did not differ from the other groups. The number of macrophages was higher in G1, G60, G90 and G120 and did not differ from the other groups. CONCLUSION: Until the 16th week, the phagocytic function was more pronounced in autogenous splenic implants when compared with the lower spleen pole, but it became similar thereafter. .

Desorganização da polpa branca esplênica está associada com a apresentação clínica mais grave da leishmaniose visceral em cães naturalmente infectados / Disorganization of the splenic white pulp is associated with more severe clinical presentation of visceral leishmaniasis in naturally infected dogs

O baço é o maior órgão linfoide secundário em seres humanos e em cães. Em ambos, a ausência do baço está associada com um risco aumentado de ocorrência de infecções localizadas e disseminadas, incluindo sepse generalizada. A leishmaniose visceral e outras infecções podem alterar a estrutura histológica do baço, o que leva a uma destruição dos microambientes da polpa branca. Trabalhos anteriores mostraram que a uptura da estrutura de polpa branca é mais frequente em cães com marcadores laboratoriais de suscetibilidade à leishmaniose visceral, como a cultura esplênica positiva e LST negativo, do que nos animais em que estes marcadores de susceptibilidade estavam ausentes. Neste estudo, o nosso objetivo é examinar a relação entre a desorganização histológica da polpa branca esplênica e a gravidade da leishmaniose visceral. As amostras e os dados utilizados neste estudo foram coletados de 206 cães de rua provenientes de uma área endêmica para leishmaniose visceral, a cidade de Jequié (Bahia, Brasil). Os animais foram examinados clinicamente e foram realizados os testes ELISA e LST. Aspirados de baço foram coletados para a cultura, e fragmentos de baço foram coletadas para estudos de biologia molecular e de estudos morfológicos. Os animais foram classificados de acordo com o grau de organização estrutural da polpa branca esplênica em grupos com baço (a), bem organizado, (b) ligeiramente desorganizado, (c) a moderadamente a extensivamente desorganizado. Em relação à positividade no ELISA juntamente com a desorganização do baço, conjuntivite ( P= 0,0116), hiperproteinemia (p= 0,021) foram mais frequentes no grupo de animais com ELISA positivo e baço desorganizado, quando comparado com os outros grupos. Os animais polissintomáticos são mais frequentes no grupo com ELISA positivo e baço do tipo 3 (p= 0,004). Os scores clínicos atribuídos à intensidade da conjuntivite (P <0,05), dermatite (P <0,05) e linfadenopatia (P <0,01), alopecia (P <0,01), onicogrifose (P <0,05) foram mais elevados nos animais com ELISA positivo e baço desorganizado do que outros grupos, bem como o número de sinais clínicos atribuíveis à leishmaniose visceral canina (p= 0,0014).Em relação à análise da positividade na cultura esplênica juntamente com a desorganização do baço, a frequência de cães polissintomáticos foi maior em animais com baço ligeiramente desorganizado (P <0,05) e baço desorganizado (P <0,005), do que em animais com baço organizado. Alopecia (P <0,01), conjuntivite (P <0,05), desidratação (P <0,001), dermatite (P <0,05), onicogrifose (p <0,01), anemia (P <0,05), úlcera (P <0,001) e alto escore clínico (P <0,001) foram mais frequentes em animais com cultura esplênica positiva e baço desorganizado, do que nos animais com cultura negativa e baço organizado. Em conclusão, os cães com desorganização do baço associada com leishmaniose visceral têm mais sinais clínicos e pior estado clínico do que os animais com leishmaniose visceral, mas sem desorganização do baço.

Histological aspects of autologous transplantation of different fragments of the spleen in rats / Aspectos histológicos do transplante autólogo de diferentes fragmentos de baço em ratos

PURPOSE: To evaluate macro and microscopically the evolution of autotransplants of fragments of spleen different fragments in the greater omentum, after eight weeks of observation. METHODS: Twenty rats Wistar were used, males and adults, submitted to total splenectomy and divided in two groups. The group I - ten animals with implant of spleen fragment (25% weight of spleen) in the omentum; and group II - ten animals with implant of spleen fragment (30% weight of spleen) in the omentum. It was analyzed macro and microscopically the evolution of the implant. RESULTS: It was observed adherences to the adjacent tissues and vascularization in all of the fragments transplanted. The group I and II presented white pulp with follicular formations and lymphoid tissue preserved, and the red pulp in cordon aspect. The group II presented white pulp more disorganized and red pulp hemorrhagic. The active macrophages were observed in the group I and II. CONCLUSION: The splenic autotransplantation of the group I showed better regeneration.

OBJETIVO: Avaliar macro e microscopicamente a evolução do autotransplante de diferentes fragmentos de baço no omento maior, após oito semanas de observação. MÉTODOS: Foram utilizados 20 ratos Wistar, machos e adultos, submetidos a esplenectomia total e distribuídos em dois grupos. O grupo I - dez animais com implante de fragmento com 25% do peso do baço no omento e o grupo II - dez animais com implante de fragmento com 30% do peso do baço no omento. Foram observados macro e microscopicamente a evolução dos implantes. RESULTADOS: Foi observada no fragmento transplantado aderência aos tecidos adjacentes e vascularização preservada. Os grupos I e II apresentaram polpa branca e vascularização preservada, polpa branca com formação folicular e tecido linfóide preservado, e a polpa vermelha com aspecto cordonal. O grupo II apresentou polpa branca mais desorganizada e polpa vermelha hemorrágica. Os macrófagos ativos foram observados nos grupos I e II. CONCLUSÃO: O autotransplante esplênico do grupo I mostrou melhor regeneração.

Long-term following-up of viability of spleen autotransplants in the Beagle canine model / Avaliação em longo prazo da viabilidade do autotransplante de baço em cães Beagle

PURPOSE: To examine the possible late complications of splenectomy or spleen autotransplantation in large laboratory animal model, in which we need non-invasive or minimal-invasive methods for long-term monitoring of the experimental animals. METHODS: Experimental groups of beagle dogs were: non-operated control, sham-operated control, splenectomy, spleen autotransplantation with 5 or 10 spleen-chips taken into the greater omentum (Furka's technique). Prior to operations, on the 1st postoperative week, monthly till the 6th as well as in the 9th and 12th month, hemorheological examinations were performed. In postoperative 12th month colloid scintigraphy and diagnostic laparoscopy were carried out. At the end of the investigation comparative morphological examinations were performed, too. RESULTS: From the 4th-5th postoperative month filtration function of spleen-autotransplants showed particular restoration compared to splenectomy group. However, the functional results did not reach the values of the control or sham-operated groups. Sham-operated control's scintigraphy nicely showed activity in the spleen. In spleen autotransplantation-groups scintigraphy indicated well the activity of spleen-chips. During diagnostic laparoscopy spleen-chips with their blood supply were found. Histologically, the structure of spleen­autotransplants was similar to normal splenic tissue. CONCLUSIONS: The autotransplants are regenerated, their functions have been partly restored, and thus spleen autotransplantation may prevent the possible complications of splenectomy. These parameters and the presented investigative protocol are suitable for long-term following-up of viability of the spleen-autotransplants.

OBJETIVO: Examinar as possíveis complicações tardias da esplenectomia ou do autotransplante de baço em modelo animal de grande porte, no qual faz-se necessário o uso de métodos não invasivos ou minimamente invasivos para monitorizar os animais de experimentação. MÉTODOS: Grupos experimentais de cães beagle foram: não-operados controle, sham-operados controle, esplenectomia, autotransplante de baço com 5 ou 10 fatias de baço colocados no grande omento (técnica de Furka). Antes das operações, na 1ª semana de pós­operatório, mensalmente até 6o.assim como no 9º. e 12º. mês, foram realizados exames hemorreológicos. No 12º. mês de pós-operatório, cintilografia colóide e laparoscopia diagnóstica foram realizadas. Ao final do experimento, exames morfológicos comparativos foram realizados também. RESULTADOS: A partir do 4º-5º mês pós-operatório, a função de filtração dos baços autotransplantados mostraram particular restauração comparados ao grupo esplenectomia. Entretanto, os resultados funcionais não alcançaram os valores dos grupos controle ou sham-operados. A cintilografia dos controles sham-operados mostraram atividade no baço. Nos grupos de autotransplante, a cintilografia indicou bem a atividade das fatias de baço. Durante a laparoscopia diagnóstica, as fatias de baço com seu suprimento sanguíneo foram encontrados. Histologicamente, a estrutura dos autotransplantes de baço foi similar ao tecido normal de baço. CONCLUSÕES: Os autotransplantes são regenerados, suas funções foram parcialmente restauradas, e então ao autotransplantate esplênico pode prevenir as possíveis complicações da esplenectomia. Estes parâmetros e o protocolo experimental são adequados para o seguimento em longo prazo da viabilidade de autotransplantes esplênicos.

A clinical predictor of varices and portal hypertensive gastropathy in patients with chronic liver disease

BACKGROUND/AIMS: The aim of this study was to identify the parameters that could noninvasively predict the presence of esophageal/gastric varices and portal hypertensive gastropathy (PHG) in patients with chronic liver disease (CLD), and to determine the accuracy of those parameters. METHODS: We retrospectively analyzed 232 patients with CLD who underwent both upper endoscopy and liver CT within an interval of 3 months. The multidimensional index (M-Index) for spleen volume was obtained from the multiplication of splenic length, width, and thickness, as measured by computer tomography. RESULTS: The multivariate analysis revealed that platelet, albumin, and M-Index were independently associated with the presence of varices and PHG. We combined three independent parameters, and developed a varices and portal hypertensive gastropathy (VAP) scoring system (=[platelet count (/mm3)xalbumin (g/dL)]/[M-Index (cm3)]). The area under the receiver operating characteristic curve of the VAP score was 0.850 (95% confidence interval, 0.801-0.899). The VAP cut-off value of 861 had a sensitivity of 85.3%, a positive likelihood ratio of 3.17, and a negative predictive value of 86.4%. For predicting high-risk lesions for bleeding, with a cut-off value of 861 the sensitivity was 92.0%, the positive likelihood ratio was 2.20, and the negative predictive value was 96.4%. CONCLUSIONS: The VAP score can predict the presence of varices and PHG in patients with CLD and may increase the cost-benefit of screening endoscopy in the clinical practice setting. A prospective validation study is necessary in the future.

Subtotal laparoscopic splenectomy in rats with preservation of the inferior pole / Esplenectomia subtotal laparoscópica com preservação do polo inferior em ratos

Purpose: To evaluate the feasibility and safety of subtotal splenectomy by laparoscopy with inferior pole preservation and to determine the viability of the splenic remnant. Methods: Twenty male Wistar rats weighing between 365 g and 474 g (mean 417.92 ± 36.15g SD) were operated and randomly assigned to two groups : Group 1 rats were killed on postoperative day 10 (n = 10), and Group 2 on the postoperative day 80 (n = 10). Both the inferior splenic pole and the superior part of the spleen, which was used as a control to measure inferior pole viability, were weighed and morphologically examined. Results: The technique was feasible in all cases. There were two postoperative deaths on immediate postoperative and one not well defined. The average weight percentage of the inferior pole, measured indirectly on the 10th day, was 53.67 percent ± 11.59 percent and on the 80th day was 62.69 percent ± 6.89 percent. The inferior pole was necrotic, with abscess formation in one case (5.9 percent) and appeared normal in all other cases. Microscopy showed features that were compatible with normality. Conclusions: Subtotal splenectomy with preservation of the inferior pole by laparoscopy was feasible and safety. The lower splenic pole was viable in 94.1 percent of animals.

Objetivo: Avaliar a exequibilidade e a segurança da esplenectomia subtotal com preservação do polo inferior do baço por videolaparoscopia, e a viabilidade do referido polo. Métodos: 20 ratos Wistar, machos, pesando entre 365g e 474g (MA 417,92 ± 36,15g) foram operados e distribuídos em dois grupos de acordo com a época da retirada do polo inferior para estudo: grupo 1 do 10º dia, (n= 10), grupo 2, do 80º dia (n=10). A porção superior do baço que serviu de controle da viabilidade do pólo inferior e esse remanescente, retirados no término do experimento, foram medidos, pesados e enviados para exame morfológico. Resultados: A técnica foi exeqüível em todos os casos. O peso médio percentual do polo inferior avaliado de forma indireta no 10º dia foi 53,67 por cento ± 11,59 por cento, e no 80º dia 62,69 por cento ± 6,89 por cento. Houve dois óbitos após a cirurgia, provavelmente por mal condução da anestesia e/ou do pneumoperitônio, e um tardiamente por causa desconhecida. O exame macro e microscópico do polo inferior nos 17 animais sobreviventes e no que faleceu tardiamente mostrou necrose em um caso (5,9 por cento). Conclusões: A esplenectomia subtotal com preservação do pólo inferior por videolaparoscopia em ratos foi exequível e segura. O polo inferior do baço mostrou-se viável em 94,1 por cento dos animais.

Aspectos morfológicos e funcionais dos autoimplantes esplênicos em ratos tratados com oxigenio hiperbárico / Splenic autoimplant and hyperbaric oxygen therapy in rats

OBJETIVO: Estudar aspectos morfológicos e funcionais dos autoimplantes esplênicos de ratos submetidos ou não à oxigenioterapia hiperbárica (OHB). MÉTODOS: Foram estudados em dois períodos distintos 105 ratos Wistar. No período mediato (n= 56) os animais foram avaliados até o 11º dia de pós-operatório, e no período tardio (n= 49), até o 70º dia. Em cada período os ratos foram distribuídos nos grupos: A- Simulação, B- Autoimplante esplênico, tratados com oxigênio hiperbárico ou não. Nos animais do Grupo A realizou-se apenas manipulação do baço. Nos animais do Grupo B realizou-se esplenectomia total e a seguir quatro fragmentos do baço foram implantados no grande omento. Em todos os animais foram dosados os lípides e imunoglobulinas e contadas as plaquetas e os corpúsculos de Howell-Jolly no pré-operatório e no 11º ou 70º dia de pós-operatório. O baço dos animais do Grupo A e os autoimplantes dos animais do Grupo B foram retirados e enviados para avaliação morfológica. RESULTADOS: No grupo B11nt houve aumento do colesterol total, LDL-colesterol, VLDL-colesterol e triglicérides. No grupo B70nt houve aumento do colesterol total e LDL-colesterol. Nos grupos tratados não houve alterações lipídicas. A IgM caiu nos grupos B e não alterou nos grupos A. Os corpúsculos de Howell - Jolly foram menos freqüentes nos grupos Bt que nos grupos Bnt. As plaquetas aumentaram nos grupos B11t e B11nt e não se alteraram nos demais grupos. A viabilidade microscópica dos grupos Bt foi melhor que a dos grupos Bnt. CONCLUSÃO: Os autoimplantes esplênicos dos animais tratados com OHB apresentaram melhor função e viabilidade do que os autoimplantes dos animais não tratados.

OBJECTIVE: To study the functional and morphological features of splenic autoimplants in rats subjected, or not, to postoperative hyperbaric oxygen therapy. METHODS: One hundred and five male Wistar rats, weighing 251.6 g ± 29.5 g, were studied ot early (11th day) and late (70th day ) postoperative periods. For each period the animals were distributed in the following groups: A (n=40), splenic manipulation; B (n=65),splenic autoimplants, not treated (nt) (A11nt- n=10, B11nt- n=21, A70nt- n= 10, B70nt-n= 18) and treated with hyperbaric oxygen (t) ( A11t- n= 10, B11t- n=15, A70t - n=10, B70t- n=11). Blood was collected for measurement of lipids and immunoglobulins , platelet and Howell-Jolly body count before and after surgery. The spleen and autoimplants were removed for histologic analyses. RESULTS: There was an increase of total cholesterol (p=0.00068), LDL-cholesterol (p=0.002), VLDL-cholesterol and triglycerides (p=0.0033) in B11nt group. There was an increase of total cholesterol (p= 0.0007) and LDL-cholesterol (p=0.0000) in B70nt group, and no alterations were observed in the other groups. IgM decreased in B groups (p=0.0000) and no changes were observed in the splenic manipulation group. Number of Howell-Jolly bodies were lesser in Bt groups than in Bnt groups( p=0.03). Platelets were increased in B11t and B11nt groups (p=0.0000) and remained unchanged in the other groups. Autoimplants microscopic viability was better in Bt groups than in Bnt. CONCLUSION: The splenic autoimplants of rats treated with hyperbaric oxygen therapy showed a better functionality and viability than those subjected to other procedures.

Termografia infravermelha em tempo real como método de avaliação da viabilidade do baço em modelo de esplenectomia parcial em porcos / Real-time infrared thermography as an evaluation method of spleen viability in partial splenectomy in pigs

OBJETIVO: Determinar se a termografia infravermelha é capaz de detectar com precisão a perda de perfusão tecidual em áreas de parênquima esplênico. MÉTODOS: Cinco porcos Landrace pesando entre 12 a 15 kg, após medicação pré-anestésica intramuscular e anestesia por infusão endovenosa, foram submetidos a quatro etapas de ligaduras sequenciais, dos vasos arteriais para o pólo inferior do baço: 1-vasos do ligamento esplênico; 2-ramo da artéria esplênica para o pólo inferior; 3-ramo arterial para o pólo inferior na face visceral do órgão; 4-parênquima esplênico dividindo o órgão. As imagens foram captadas por câmera Therma CAM SC500 instalada a 50 centímetros da superfície do órgão. As temperaturas foram medidas na região proximal (vascularizada) e na região distal (isquêmica), em três áreas circulares distintas de cada região através do software SAT Report, antes e após cada etapa de ligaduras, constituindo cinco grupos de medidas: tempo 0 = antes da etapa 1; tempo 1 = após etapa 1; tempo 2 = após etapa 2; tempo 3 = após etapa 3; tempo 4 = após etapa 4. RESULTADOS: Houve manutenção da temperatura da região proximal (vascularização preservada) durante todos os tempos de desvascularização. A temperatura da região distal (desvascularizada) iniciou queda a partir da primeira ligadura e tornou-se estatisticamente menor que a da região proximal a partir da ligadura 3 (Etapa 3). Houve diferença estatisticamente significativa entre as temperaturas proximais e distais do órgão na medida em que foram sendo realizadas as ligaduras vasculares. CONCLUSÃO: A termografia infravermelha foi capaz de distinguir com precisão áreas de parênquima esplênico com vascularização preservada de áreas isquêmicas e pode contribuir para a avaliação da viabilidade de órgãos sólidos.

OBJECTIVE: To determine if infrared thermography is capable of precisely detecting loss of tissue perfusion in the spleen during a partial splenectomy. METHODS: Five Landrace pigs, weighing between 12 and 15 kg, after intramuscular pre-anesthetic medication and intravascular infusion anesthesia, were submitted to four sequential vascular interruption steps of the arterial vessels to the lower splenic pole: 1-vessels of splenic ligament; 2-splenic artery branch to the lower pole; 3-arterial branch to the lower pole on the organ visceral surface; 4-splenic parenchyma, splitting the organ. The images were captured by a Therma CAM SC500 camera 50 centimeters from the organ surface. The parenchymal temperatures were measured from the proximal (irrigated) areas and from the distal (ischemic) areas in three distinct circle regions of each area using SAT Report software, before and after each vessels interruption step, establishing five groups of measurement times: time 0 = before interruption step 1; time 1 = after interruption step 1; time 2 = after interruption step 2; time 3 = after interruption step 3; time 4 = after interruption step 4. RESULTS: Proximal area temperatures (preserved vessels) remained stable during all the vessel interruption steps. The temperature of the distal area (compromised vessels), as compared to the proximal area, dropped continually throughout the sequential interruption steps and became statistically lower after interruption step 3 (time 3). There was a statistical difference between the proximal and distal temperatures of the organ as the vascular structures were being interrupted in each step. CONCLUSION: Infrared thermography is capable of precisely distinguishing irrigated splenic parenchyma from the ischemic areas and can contribute to the evaluation of solid organ viability.

O pólo inferior do baço de ratos e a oxigenoterapia hiperbárica / The splenic inferior pole of rats and hyperbaric oxygen

OBJETIVO: Estudar aspectos funcionais e morfológicos do pólo inferior do baço de ratos tratados ou não com oxigênio hiperbárico no pós-operatório. MÉTODOS: Foram operados 79 ratos, Wistar, pesando 248,7g ± 27 , distribuídos em dois grupos: A - Simulação (n= 40), B - pólo inferior (n=39), e divididos em dois subgrupos: 11 e 70 dias. Cada subgrupo foi subdividido em não tratado com oxigênio hiperbárico (nt) (A11nt-n=10, B11 nt-n= 13, A70nt-n= 10, B70nt-n= 9) e tratado (t); A11t-n=10, B11t- n=9, A70 t- n= 10, B70t- n= 8). Foram dosados os lípides e imunoglobulinas e contadas as plaquetas e os corpúsculos de Howell-Jolly no pré e no pós-operatório. O baço e o pólo inferior foram retirados para histologia. RESULTADOS: Houve aumento do colesterol total (p=0,002), VLDL-colesterol e triglicérides (p= 0,003), da LDL-colesterol (p=0,013) no subgrupo B11nt e não houve alteração nos demais subgrupos. A IgM caiu nos subgrupos B11t (p=0,007), B11nt (p= 0,0000), B70nt (p=0,0005) e B70t (p=0,02) e não alterou no grupo simulação. O número de plaquetas aumentou nos subgrupos B11nt (p=0,002), B11t (p=0,01) e não alterou nos demais subgrupos. Os corpúsculos de Howell-Jolly foram menos numerosos no subgrupo B70nt que no B11nt (p=0,019). A viabilidade do pólo inferior foi melhor no subgrupo B11t que no B11nt; no subgrupo B70 que no B11 e não diferiu entre os subgrupos B70t e B70nt. CONCLUSÃO: A função e a viabilidade do pólo inferior remanescente melhoraram tardiamente. Os animais submetidos à oxigenoterapia hiperbárica apresentaram melhor viabilidade e função do pólo inferior precocemente, mas não tardiamente.

OBJECTIVE: To study the functional and morphological features of the lower pole of the spleen in rats submitted, or not, to postoperative hyperbaric oxygen therapy. METHODS: Seventy-nine Wistar rats, weighing 248.7 ± 27 g, divided into two groups [group A - simulation (n=40), group B - lower pole (n=39)] underwent surgery and were subdivided into two groups: 11 and 70 postoperative days. Each subgroup was subdivided into animals not treated (nt) (A11nt, n=10; B11nt, n=13; A70nt, n=10; B70nt, n=9) and treated with hyperbaric oxygen (t) (A11t, n=10; B11t, n=9; A70t, n=10; B70t, n=8). Blood was collected for measurement of lipids and immunoglobulins, platelet and Howell-Jolly body count before and after surgery. The spleen and lower pole were removed for histology. RESULTS: There was an increase of total cholesterol (p=0.002), VLDL-cholesterol and triglycerides (p=0.003) and of LDL-cholesterol (p=0.013) in subgroup B11nt, and no alterations were observed in the other subgroups. IgM decreased in subgroups B11t (p=0.007), B11nt (p=0.0000), B70nt (p=0.0005), B70t (p=0.02), and no change was observed in the simulation group. The number of platelets increased in subgroups B11nt (p=0.002) and B11t (p=0.01) and remained unchanged in the other subgroups. Howell-Jolly bodies were less numerous in subgroup B70nt than in subgroup B11nt (p=0.019). Lower pole viability was better in subgroup B11t than in B11nt and in subgroup B70 than in B11, and did not differ between subgroups B70t and B70nt. CONCLUSION: Function and viability of the remaining lower pole improved during the late postoperative period. Viability and function of the lower pole were better during the early but not during the late postoperative period, in animals submitted to hyperbaric oxygen therapy.

Preservative spleen surgery and hyperbaric oxygen therapy

PURPOSE: To assess functional and morphological aspects of spleen auto-implants and of the splenic inferior pole of rats, post-operatively treated or not with hyperbaric oxygen, as well as the survival of these animals, were studied. METHODS: Seventy-eight male Wistar rats, weighing between 192 and 283 g ( 238,3 ± 9,6g), were randomly distributed into three groups: Group1-(n=20), spleen manipulation; group 2-(n=36), spleen auto-implantation; group3-(n= 22), subtotal splenectomy preserving the inferior pole. Each group was subdivided as follows: subgroup a, not submitted to hyperbaric oxygen therapy: 1a(n=10), 2a(n=21), 3a(n= 13); subgroup b, submitted to the therapy: 1b(n=10), 2b(n=15), 3b(n=9). Blood was collected pre-operatively and 11 days after surgery, for the estimation of lipids and immunoglobulins and the counting of platelets and Howell-Jolly corpuscles. The spleen and remains were taken for histological study. RESULTS: The number of surviving animals was significantly higher in groups 1(p<0,01) and 3(p<0,05) relative to those of subgroup 2a. Total cholesterol and the LDL fraction increased significantly in subgroup 2a (p<0,01) and 3a (p<0,05), and remained unaltered in subgroups 2b e 3b. IgM decreased more significantly in subgroup 2 than in subgroup 3 (p<0,001 vs p<0,01). The increase of platelet numbers and the appearance of Howell Jolly corpuscles was smaller in subgroup 2b compared to subgroup 2a , and in group 3 compared to group aqui-> 2. The macro and microscopic appearance in subgroup 2b were more viable than in subgroup 2a, and that of group 3 more viable than in group 2. The survival of the animals carrying their whole spleen or its inferior pole was more frequent than that of the auto-implanted animals. CONCLUSION: Functionality and viability of the whole spleen or of its inferior pole, were better than in the auto-implanted animals. Hyperbaric oxygentherapy contributed to increased survival frequency of auto...

OBJETIVO: Estudar aspectos funcionais e morfológicos dos auto-implantes esplênicos e do pólo inferior do baço de ratos, tratados ou não com oxigênio hiperbárico no pós-operatório, e a sobrevida desses animais. MÉTODOS: Foram operados 78 ratos, machos, Wistar, pesando entre 192 g e 283 g ( M.A 238,3 ± 9,6) , distribuídos aleatoriamente em três grupos : 1-(n=20) , manipulação do baço; 2-(n=36), auto-implante esplênico; 3(n= 22), esplenectomia subtotal com preservação do pólo inferior. Cada grupo foi dividido em dois subgrupos: a- não submetido à oxigenoterapia hiperbárica: 1a(n=10), 2a(n=21), 3a(n= 13); b- submetido: 1b(n=10), 2b(n=15), 3b(n=9). O sangue foi colhido para dosagem dos lípides e imunoglobulinas e contagem das plaquetas e dos corpúsculos de Howell-Jolly no pré-operatório e 11 dias após a cirurgia. O baço e os remanescentes foram retirados para estudo histológico. RESULTADOS: O número de animais sobreviventes foi significantemente maior nos grupos 1(p<0,01) e 3(p<0,05) em relação ao subgrupo 2a. O colesterol total e a fração LDL aumentaram significantemente nos subgrupos 2a (p<0,01) e 3a(p<0,05), e não alteraram nos subgrupos 2b e 3b. A IgM caiu mais significantemente no grupo 2 que no 3. O aumento do número de plaquetas e o aparecimento dos corpúsculos de Howell Jolly foi menor no subgrupo 2b que no 2a, no grupo 3 que no grupo 2. O aspecto macro e microscópico no subgrupo 2b foi mais viável que no subgrupo 2a, e o do grupo 3 mais viável que no grupo 2. A sobrevida dos animais com todo o baço ou com o pólo inferior foi mais freqüente que a dos animais com auto-implantes. CONCLUSÕES: A função e a viabilidade de todo o baço ou do pólo inferior foram melhores que a dos auto-implantes. A oxigenoterapia hiperbárica contribuiu para aumentar a freqüência de sobrevida dos animais com auto-implantes, para melhorar a função e a viabilidade dos auto-implantes e a função do pólo inferior, e não interferiu nos animais com baço íntegro.

The spleen of a specialy adapted mammal: the little hairy armadillo Chaetophractus vellerosus, (Xenarthra, dasypodidae): a light and electron microscopic study / El Bazo de un Mamífero con Adaptaciones Especiales: el "Peludo Chico" Chaetophractus vellerosus, (Xenarthra, Dasypodidae). Estudio con Microscopía de Luz y Electrónica

El bazo es un órgano multipotencial y en su microarquitectura se reflejan tanto la filogenia como la adaptación de cada grupo animal e inclusive de cada especie. Los armadillos son un clado antiguo y geográficamente aislado de mamíferos que muestra una mezcla de estructuras ancestrales y modernas. En este trabajo se estudian la microanatomía y citología del bazo del peludo chico Chaetophractus vellerosus. El material se fijó y procesó según las técnicas de rutina de microscopías óptica y electrónica. Los resultados muestran un órgano mediano, del tipo de acumulación, con la típica segregación de pulpas. La pulpa blanca está bien desarrollada pero menos organizada que en otros armadillos. Se observa la presencia de células morfológicamente similares a las foliculares dendríticas y a las interdigitantes, así como agrupamientos de células inmunocompetentes. Estas características apoyan la importancia del órgano en la función inmune. La pulpa roja es un entramado de espacios vasculares y células libres y fijas. Se reconocen, por primera vez en el Género, la presencia de sinusoides esplénicos. El tejido hemopoyético está presente pero menos desarrollado que en otros Euphractini. Se discute la organización y el tamaño del bazo en contextos filogenético y adaptativo.

The spleen is a multifunctional organ. Its microarchitecture reflects so well the phylogeny as the adaptation to niche in each animal group and inclusive in each species. Armadillos, as ancient and isolated mammals, show a mixture of ancestral and modern structures. In this work the microanatomy and cytology of the spleen of the little hairy armadillo Chaetophractus vellerosus was studied. The material was fixed and processed according to the typical methods for light and electron microscopy. Results show a cumulative medium sized spleen with the typical pulps. The white pulp is well developed but less defined than in other armadillos. The presence of follicular-dendritic-like cells and interdigitant dendritic-like cells, as well as clusters of immunocompetent cells agrees with an active immunological activity. The red pulp is a meshwork of circulatory spaces and cells. The presence of splenic sinusoids is recognized for the first time in the genus. Hemopoietic tissue is less developed than in other Euphractini. The microarchitecture and size of the spleen of C. vellerosus is discussed in a phylogenetic and adaptive context.

Expressão gênica de caspases 3 e 8 em timo e baço de ratas recém-desmamadas e imunossuprimidas por glicocorticóide / Genic expression of caspases 3 and 8 in thymus and spleen of glicocorticoid-immunossupressed weaned rats

Determinou-se a expressão gênica das caspases 3 e 8 mediante transcrição reversa de mRNA total e reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) para avaliar a apoptose em timo e baço de ratas imunossuprimidas por glicocorticóides. Utilizou-se dexametasona para indução da apoptose e atrofia linfóide. Quarenta e cinco fêmeas Wistar recém-desmamadas foram separadas em três grupos: as ratas de A (n=18) e B (n=18) foram tratadas com 250 e 500mg de glicocorticóide, via intramuscular, respectivamente, e as do C (n=9) não foram tratadas. Após 24, 48 e 72 horas, seis animais de cada grupo tratado e três do controle foram anestesiados, pesados e sacrificados. O baço e o timo foram coletados e pesados. Fragmentos dos órgãos foram fixados em formol tamponado a 10 por cento e processados segundo técnica para inclusão em parafina. Os blocos foram seccionados em 5æm, e os cortes corados em hematoxilina e eosina. A análise histopatológica aliada ao peso dos órgãos nas diferentes doses e tempos demonstrou que a dexametasona induziu hipotrofia linfóide, que ocorreu com maior intensidade no tempo de 72 horas em animais do grupo B. Fragmentos de timo e de baço foram imediatamente congelados em nitrogênio líquido para extração de mRNA e DNA. Para a padronização da técnica de RT-PCR, utilizaram-se pool de amostras de mRNA dos animais-controle e pool de mRNA de animais tratados em cada tempo de experimento. A técnica de RT-PCR foi sensível o suficiente para a detecção dos mRNAs que codificam as caspases 3 e 8, e ambas participaram do processo de apoptose induzido por dexametasona.

Estudo da regeneração esplênica autóloga e heterotópica em ratos / Antologus and heterotopic splenic regeneration in rats

OBJETIVO: estudar a regeneração esplênica dos fragmentos de baço autólogos e heterotópicos implantados na cavidade peritoneal e na tela subcutânea em ratos e comparar os seus aspectos histológicos e citológicos com baço normal. MÉTODOS: 44 ratos Wistar foram submetidos a esplenectomia e receberam fragmentos de auto-implante: GA = na tela subcutânea (n=22) e GB na cavidade peritoneal (n=22). GAI (n=11) e GAII (n=11) receberam implante de fragmento único. GBIII (n=11) e GBIV (n=11) receberam implantes de quatro fragmentos. O baço remanescente foi usado como controle. Após 5 semanas de foram submetidos à eutanásia e foram investigados os aspectos macroscópicos e microscópicos (histológicos e citológicos) dos fragmentos nos seus locais de implante. Os resultados foram submetidos a testes estatísticos não paramétricos(p>0,05). RESULTADOS: Não houve diferença estatística significante entre o grupo que recebeu implante na tela subcutânea (n=22) e o grupo da cavidade peritoneal (n=22). Quanto à presença ou ausência de tecidos esplênicos regenerados (p=0,182), também não apresentou diferença com significância estatística. Os estudos histológicos e citológicos do tecido regenerado não evidenciaram diferenças em relação ao grupo controle. CONCLUSÃO: A regeneração do tecido esplênico autólogo e heterotópico em ratos ocorre nas mesmas proporções tanto na tela subcutânea como na cavidade peritoneal. Os aspectos histológicos e citológicos são semelhantes aos do baço normal.

Volumoso cisto esplênico näo parasitário simulando pseudocisto de pâncreas: relato de caso / Voluminous non parasitic splenic cyst simulating pseudocyst of pancreas: case report

Os cistos esplênicos näo parasitários säo entidades raras encontradas principalmente em adultos jovens e säo classificados em primários (epiteliais ou verdadeiros) e secundários, também chamados de pós-traumáticos ou pseudocistos. Devido às constantes evidências na literatura da importância fisiológica do baço na defesa imunológica, o tratamento vem se tornando mais conservador desde a conduta expectante nos cistos pequenos e assintomáticos restando aos grandes cistos potenciais a complicaçäo ou sintomáticos, a esplenectomia total. Nesse estudo, os autores relatam o caso de um paciente de 14 anos com um volumoso cisto esplênico de 27cm no maior diâmetro, cuja imagem tomográfica era sugestiva de pseudocisto pancreático. Além disso, fazem breve revisäo da literatura

Importância da preservação de tecido esplênico para a fagocitose bacteriana / Relevance of splenic tissue preservation to bacterial phagocytosis

OBJETIVO: O baço, como maior órgão linfóide do corpo humano, apresenta funções imunológicas relevantes, tais como depuração de bactérias da corrente sangüínea e produção precoce de anticorpos contra várias partículas antigênicas. Fígado, pulmão e baço apresentam mais de 95 por cento da atividade fagocitária em humanos. MÉTODOS: Ratos jovens e adultos de ambos os sexos foram submetidos a esplenectomia total e comparados com animais não submetidos a tratamento cirúrgico, visando a avaliação dessa função. Após 16 semanas, os ratos de ambos os grupos foram inoculados, por via intravenosa, com suspensão de Escherichia coli marcada com tecnécio-99m, e depois de 20 minutos, foram mortos. Fígado, pulmão, baço e uma amostra de coágulo sangüíneo foram removidos para determinação da contagem radioativa. O estudo estatístico foi realizado pelo teste t de Student. RESULTADOS: Não ocorreram diferenças no percentual de captação obtido em ratos esplenectomizados jovens ou adultos. Entretanto, esses animais apresentaram contagens sangüíneas mais elevadas que os ratos do grupo controle (p<0,0001), devido a maior remanescente bacteriano na corrente sangüínea. CONCLUSÃO: Esse achado sugere ocorrer alguma falha no sistema mononuclear fagocitário em sua adaptação à ausência do baço e ratifica a necessidade de desenvolvimento de técnicas cirúrgicas alternativas à esplenectomia total para emprego em pacientes em que seja necessária a remoção esplênica.

Influence of acute renal failure on the mononuclear phagocytic system

Several studies show the ability of macrophages to remove particles injected into the bloodstream. This function seems to be increased in the presence of acute renal failure. The objective of the present study was to assess the phagocytic function of the main organs (spleen, liver and lung) of the mononuclear phagocytic system in renal and postrenal failures. Fifteen rats (250-350 g) were divided into three groups (N = 5): group I - control; group II - ligature of both ureters, and group III - bilateral nephrectomy. On the third postoperative day, all animals received an iv injection of 1 ml/kg 99mTc sulfur colloid. Blood samples were collected for the assessment of plasma urea, creatinine, sodium, and potassium concentrations and arterial gasometry. Samples of liver, spleen, lung and blood clots were obtained and radioactivity was measured. Samples of liver, spleen, lung and kidney were prepared for routine histopathological analysis. Plasma urea, creatinine and potassium concentrations in groups II and III were higher than in group I (P<0.05). Plasma sodium concentrations in groups II and III were lower than in group I (P<0.05). Compensated metabolic acidosis was observed in the presence of postrenal failure. Group II animals showed a lower level of radioactivity in the spleen (0.98) and lung (2.63), and a higher level in the liver (105.51) than control. Group III animals showed a lower level of radioactivity in the spleen (11.94) and a higher level in the liver (61.80), lung (11.30) and blood clot (5.13) than control. In groups II and III liver steatosis and bronchopneumonia were observed. Renal and postrenal failures seem to interfere with blood clearance by the mononuclear phagocytic system

Autotransplant of spleen tissue in children with schistosomiasis: evaluation of splenic function after splenosis

Autotransplantation of spleen tissue has been done, in the past ten years, in children with schistosomiasis mansoni with bleeding varices. The purposes of this investigation were: (1) to study the morphology and function of the remnant spleen tissue; (2) to quantify the production of tuftsin; and (3) to assess the immune response to pneomococcal vaccine of these patients. Twenty three children, who underwent splenectomy and autologous implantation of spleen tissue into the greater omentum were included in this investigation. The average postoperative follow-up is five years. Splenosis was proved by colloid liver-spleen scans. Search for Howell-Jolly bodies assessed the filtration function. Tuftsin and the titer of pneumococcal antibodies were quantified by ELISA. Splenosis was evident in all children; however, it was insufficient in two. Howell-Jolly bodies were found only in these two patients. The mean tuftsin serum concentration (335.0 ± 29.8 ng/ml) was inside the normal range. The immune response to pneumococcal vaccination was adequate in 15 patients; intermediate in four; and inadequate in four. From the results the following conclusions can be drawn: splenosis was efficient in maintaining the filtration splenic function in more than 90 percent and produced tuftsin inside the range of normality. It also provided the immunologic splenic response to pneumococcal vaccination in 65 percent of the patients of this series