Laser capture microscope: an innovative tool for single cell dissection.

Increasing strides have recently been made in the understanding of the biologic basis of health and disease, largely because of the current emphasis on investigations directed at a cellular level. This has necessitated the development and use of convenient, accurate and reliable research equipment. While it is not necessitated the need for every researcher or clinician to be fully knowledgeable of all the intricacies of the recent developments in the field of research equipment, basic awareness of new research tools is the critical to the understanding and analysis of results obtained from current studies. The laser capture microscope is one of the most recent research equipment that permits easy dissection and examination of single cells from tissues. This has enabled researchers to carry out specific studies on the behaviour of different cell populations in a tissue sample. This article aims to explain the basic principles of the usage of laser capture microscope for single cell dissection.

Histopathological and ultrastructural characteristics of myeloid leukosis in broiler chicken

An ultrastructural and histological study was performed to determine the degree of differentiation of the neoplastic cells. The histological study revealed neoplastic cells with pleomorphism, oval nuclei, prominent nucleoli, irregularly distributed chromatin, atypical mitotic figures and moderate amount of cytoplasm containing spherical eosinophilic granulations, typical features of the myeloid lineage. Ultrastructurally, there were cells with an electron-dense, oval and voluminous nucleus, with predominant euchromatin and cytoplasm containing many spherical, electron-dense and homogeneous granules, indicative of myelocytes with differentiation to eosinophils. Type-C viral particles were also seen in the intercellular space of renal tubules and inside the intracytoplasmic vesicles of immature myelocytes in the bone marrow and ovary. PCR was positive to ALV-J.

Caracterizaram-se a linhagem e o grau de diferenciação das células neoplásicas no estudo histopatológico e ultraestrutural da leucose mielóide. Histologicamente as células neoplásicas apresentaram pleomorfismo, núcleos ovais, nucléolos proeminentes, cromatina distribuída de maneira irregular, figuras de mitose atípicas e moderada quantidade de citoplasma contendo granulações eosinofílicas esféricas. Essas características indicam a linhagem mielóide. Ultraestruturalmente evidenciaram-se células com núcleo oval, volumoso, eletrodenso, com predomínio de eucromatina e citoplasma com numerosos grânulos esféricos, eletrodensos e homogêneos, indicando mielócitos com diferenciação para eosinófilos. Constatou-se também a presença de partículas virais tipo-C no espaço intercelular dos túbulos renais, no interior de vesículas intracitoplasmáticas dos mielócitos imaturos presentes na medula óssea e ovário, e PCR positivo para ALV-J.

Ultrastructural observations of the vitelline cells of Metamicrocotyla macracantha (Monogenea, Microcotylidae)

An electron microscopic study of the vitelline follicles of Metamicrocotyla macracantha (Alexander, 1954) Karatha, 1955 showed that they are composed of cells in different stages of development. The immature cells have a large nucleus, nucleolus, cytoplasm with free ribosomes and few mitochondria. The development vitelline cells present granules which are small in the early stages, increasing with maturity. The mature cells have an extensive granular endoplasmic reticulum and droplets of shell-protein; with maturation, clusters of shell protein and yolk bodies are formed and released in the ciliated vitelline ducts. Vitelline development is continuous and all of the cellular stages involved can be found in each follicle.

A genética do câncer colorretal: princípios para o cirurgiäo / Genetics of colorectal cancer: principles for the surgeon

O câncer colorretal ainda é uma das neoplasias de maior importância no mundo ocidental. O grande desenvolvimento da genética e biologia molecular nos últimos anos permitiu um melhor conhecimento dos mecanismos biomoleculares no câncer, e em especial, no câncer colorretal. Oncogenes (K-ras), genes supressores de tumor (p53, DCC e APC) e genes reparadores de DNA (hMSH2, MLH1, PMS1 e 2) estäo envolvidos na progressäo da seqüência adenoma-carcinoma no cólon e no reto. Algumas características anatômicas, histopatológicas, epidemiológicas e o comportamento biológico dos tumores parecem estar relacionados com alteraçöes genéticas específicas nestes genes. O conhecimento dos mecanismos genéticos que promovem a carcinogênese dos tumores colorretais abre novas perspectivas para o diagnóstico, tratamento, prognóstico e seguimento dos pacientes acometidos por esta neoplasia

Obtençäo e caracterizaçäo de linhagem de células osteoblásticas / Development and characterization of osteoblastic cell line

Apresentamos metodologia para obtençäo de linhagem de células osteoblásticas propagada a partir de tecido ósseo normal. Por meio de técnica de dispersäo enzimática as células isoladas do osso pariental de ratos recém-nascidos foram cultivadas em meio apropriado e induzidas a diferenciaçäo fenotípica e funcional. Avaliaçäo da morfologia, presença de atividade de fosfatase alcalina, produçäo de nódulos calcificados, expressäo imuno-citoquímica de proteínas colagênicas (colágeno tipo I) e näo colagênicas próprias (osteonectina e sialoproteína óssea II) do tecido ósseo comprovaram a característica osteoblástica da linhagem obtida. O sistema desenvolvido confirmou que a técnica de cultivo celular primário a partir de tecido ósseo normal é viável e origina células com as características básicas dos osteoblastos. Este estudo "in vitro" pode ser utilizado amplamente em Odontologia, em especial no estudo da fisiopatologia óssea e em testes de compatibilidade de biomateriais com o tecido ósseo

Conceitos básicos e estimativas de alguns parâmetros da proliferaçäo celular / Basic concepts and estimations of some parameters about cell proliferation

A presente comunicaçäo relata os conceitos básicos gerais dos estudos da proliferaçäo celular: ciclo celular com alguns conhecimentos recentes de seu controle; divisäo dos compartimentos celulares de acordo com seus aspectos estruturais e funcionais; e os parâmetros mais utilizados (tempo do ciclo, taxa de proliferaçäo e taxa de produçäo celular), exemplificados com resultados obtidos de nossos experimentos

Estudo morfométrico da evoluçäo da populaçäo de células do ducto granuloso da glândula submandibular do camundongo durante a vida pós-natal / Morphometric study of the granular duct cells population evolution of mouse submandibular gland during the post natal life

O desenvolvimento pós-natal da glândula submandibular do camundongo albino (Mus musculus) foi estudado em animais com idades de 14, 21, 28, 35, 42, 56 e 84 dias, através de métodos morfométricos aplicados à microscopia de luz. A massa glandular aumentou substancialmente em todo período analisado passando de 24,3 mg aos 14 dias para 175,2 mg aos 84 dias, com um incremento diário médio de 2,16 mg. O volume processado da glândula foi obtido, a partir de sua massa fresca, da densidade e da retraçäo provocada pelo processamento histológico. Através de contagens realizadas ao microscópio de luz, utilizando-se do método morfométrico II de AHERNE (1967) 2, obtivemos o número absoluto e a frequência de células de cada compartimento glandular. A análise da evoluçäo do número absoluto de células de cada compartimento glandular nos permitiu calcular o tempo de duplicaçäo e/ou decaimento de células, assim como o acréscimo e/ou perda diária de células. Em relaçäo as células do ducto granuloso avaliamos ainda, em cortes de 0,25µm de material incluído em resina araldite, o volume nuclear através do método morfométrico de BACH (1963) 9 e a densidade de volume do núcleo e do citoplasma através da volumetria de pontos (CHALKLEY, 1943 25). A partir destes valores calculamos o volume citoplasmático das células do ducto granuloso. Aos 14 dias de vida pós-parto a glândula submandibular está constituída por células acinosas (64,1x10(5)), células do túbulo terminal (41,9x10(5)), células do ducto intercalar (29,4x10(5)), células do ducto estriado (26,5x10(5)), células do ducto excretor (3,4x10(5)) e estroma (22,9x10(5))...