Uso da FISH em mucosa oral para investigação de mosaicismo com linhagem 45,X: estudo com homens saudáveis e pacientes com distúrbios da diferenciação do sexo / The use of FISH on buccal smear to investigate mosaicism with a 45,X cell line: study on healthy men and patients with disorders of sex development

Objetivo: Verificar se a hibridização in situ por fluorescência (FISH) em células de mucosa oral poderia ser empregada para detectar criptomosaicismo com linhagem 45,X em pacientes 46,XY. Sujeitos e métodos: Amostra de 19 jovens saudáveis 46,XY e cinco pacientes com distúrbios da diferenciação do sexo (DDS), quatro 45,X/46,XY e um 46,XY. FISH com sondas específicas para X e Y em núcleos interfásicos de linfócitos e mucosa oral para investigar a proporção de núcleos contendo apenas o sinal do cromossomo X. Resultados: A frequência de núcleos contendo apenas o sinal do X nos dois tecidos dos homens saudáveis não diferiu (p = 0,69). Em todos os pacientes com DDS essa frequência foi significativamente maior, e também não houve diferença entre os dois tecidos (p = 0,38). Conclusões: A investigação de mosaicismo com linhagem 45,X em pacientes com DDS 46,XY ou esterilidade pode ser feita por FISH diretamente em células de mucosa oral. .

Objective: To verify whether fluorescence in situ hybridization (FISH) of cells from the buccal epithelium could be employed to detect cryptomosaicism with a 45,X lineage in 46,XY patients. Subjects and methods: Samples of nineteen 46,XY healthy young men and five patients with disorders of sex development (DSD), four 45,X/46,XY and one 46,XY were used. FISH analysis with X and Y specific probes on interphase nuclei from blood lymphocytes and buccal epithelium were analyzed to investigate the proportion of nuclei containing only the signal of the X chromosome. Results: The frequency of nuclei containing only the X signal in the two tissues of healthy men did not differ (p = 0.69). In all patients with DSD this frequency was significantly higher, and there was no difference between the two tissues (p = 0.38), either. Conclusions: Investigation of mosaicism with a 45,X cell line in patients with 46,XY DSD or sterility can be done by FISH directly using cells from the buccal epithelium. .

The use of fluorescence in situ hybridization in the diagnosis of hidden mosaicism: apropos of three cases of sex chromosome anomalies / O uso da hibridação in situ com fluorescência no diagnóstico de mosaicismo oculto: a propósito de três casos de anomalias de cromossomos sexuais

FISH has been used as a complement to classical cytogenetics in the detection of mosaicism in sex chromosome anomalies. The aim of this study is to describe three cases in which the final diagnosis could only be achieved by FISH. Case 1 was an 8-year-old 46,XY girl with normal female genitalia referred to our service because of short stature. FISH analysis of lymphocytes with probes for the X and Y centromeres identified a 45,X/46,X,idic(Y) constitution, and established the diagnosis of Turner syndrome. Case 2 was a 21-month-old 46,XY boy with genital ambiguity (penile hypospadias, right testis, and left streak gonad). FISH analysis of lymphocytes and buccal smear identified a 45,X/46,XY karyotype, leading to diagnosis of mixed gonadal dysgenesis. Case 3 was a 47,XYY 19-year-old boy with delayed neuromotor development, learning disabilities, psychological problems, tall stature, small testes, elevated gonadotropins, and azoospermia. FISH analysis of lymphocytes and buccal smear identified a 47,XYY/48,XXYY constitution. Cases 1 and 2 illustrate the phenotypic variability of the 45,X/46,XY mosaicism, and the importance of detection of the 45,X cell line for proper management and follow-up. In case 3, abnormal gonadal function could be explained by the 48,XXYY cell line. The use of FISH in clinical practice is particularly relevant when classical cytogenetic analysis yields normal or uncertain results in patients with features of sex chromosome aneuploidy. Arq Bras Endocrinol Metab. 2012;56(8):545-51.

FISH tem sido usado como um complemento para a citogenética clássica na detecção de mosaicismo em anomalias de cromossomos sexuais. O objetivo deste trabalho é descrever três casos nos quais o diagnóstico final só foi obtido por meio de FISH. O caso 1 é uma menina de 8 anos, 46,XY, com genitália feminina normal, encaminhada ao nosso setor devido à baixa estatura. A análise de linfócitos por FISH com sondas centroméricas de X e Y identificou a constituição 45,X/46,X,idic(Y) e estabeleceu o diagnóstico de síndrome de Turner. O caso 2 é um menino de 21 meses, 46,XY, com ambiguidade genital (hipospadia peniana, testículo à direita e gônada disgenética à esquerda). FISH de linfócitos e mucosa oral identificou o cariótipo 45,X/46,XY, levando ao diagnóstico de disgenesia gonadal mista. O caso 3 é um rapaz de 19 anos, 47,XYY, com atraso de desenvolvimento neuromotor, dificuldade de aprendizado, problemas psicológicos, alta estatura, testículos pequenos, gonadotrofinas elevadas e azoospermia. FISH de linfócitos e mucosa oral identificou a constituição 47,XYY/48,XXYY. Os casos 1 e 2 ilustram a variabilidade fenotípica do mosaico 45,X/46,XY e a importância da detecção da linhagem 45,X na avaliação e na condução dos casos. No caso 3, a função gonadal anormal pôde ser explicada pela linhagem 48,XXYY. O uso de FISH na prática clínica é particularmente relevante quando a análise citogenética clássica traz resultados normais ou incertos em pacientes com quadro sugestivo de uma aneuploidia de cromossomos sexuais. Arq Bras Endocrinol Metab. 2012;56(8):545-51.

46,XY and 45,X/46,XY testicular dysgenesis: similar gonadal and genital phenotype, different prognosis / Disgenesias testiculares 46,XY e 45,X/46,XY: fenótipo genital e gonadal semelhante, prognóstico distinto

The objective of this study was to describe the change in diagnosis and prognosis of a child with testicular dysgenesis and 46,XY karyotype after detection of a 45,X cell line and to discuss the difficulties caused by the terms mixed gonadal dysgenesis (MGD) and XY partial gonadal dysgenesis (XYPGD). One case was reported including clinical and laboratory findings of a child of 41-day-old infant with 1.3-cm phallus, penoscrotal hypospadias and left prepubertal testis. Karyotype 46,XY (16 cells), normal hormone levels. Right streak gonad, epididymis and müllerian remnants were removed; initial diagnosis was XYPGD. Persistent growth retardation led to further cytogenetic analysis (50 cells) and detection of a 45,X cell line. Detection of a 45,X lineage changed both the diagnosis to MGD and also the prognosis.The number of cells analyzed in karyotyping is critical. Use of MGD and XYPGD to designate both a histological picture and a syndromic diagnosis, results in lack of emphasis on clinical differences between 46,XY and 45,X/46,XY subjects.

O objetivo deste trabalho foi descrever a mudança no diagnóstico e no prognóstico de criança com disgenesia testicular e cariótipo 46,XY após detecção de linhagem 45,X e discutir as dificuldades causadas pelas denominações disgenesia gonadal mista (DGM) e disgenesia gonadal parcial XY (DGPXY). Relatou-se um caso incluindo achados clínicos e laboratoriais de uma criança de 41 dias com falo de 1,3 cm, hipospadia penoescrotal e testículo pré-puberal à esquerda. Cariótipo 46,XY (16 células), níveis hormonais normais. Gônada direita (disgenética), epidídimo e remanescentes müllerianos foram removidos; o diagnóstico inicial foi DGPXY. Retardo de crescimento persistente levou à ampliação da análise citogenética (50 células) e à detecção de linhagem 45,X. A detecção de linhagem 45,X modificou o diagnóstico para DGM e também o prognóstico. No cariótipo, o número de células analisadas é crítico. O uso de DGM e DGPXY para designar tanto quadro histológico quanto diagnóstico clínico resulta em falta de ênfase nas diferenças clínicas entre indivíduos 46,XY e 45,X/46,XY.

Profile of intersex children in south India.

Thirty five children with ambiguous genitalia admitted to our centre between January 1986 to December 1991, were followed up and their clinical, laboratory and management strategies were analyzed. Most of them presented between 1 month and 2 years of age and only 2 presented in the newborn period. Sixteen were female pseudohermaphrodites. Eighteen out of 31 children were assigned female sex. One genetic female with congenital adrenal hyperplasia was assigned male sex. We practised more than one type of clitoroplasty in our centre. Parents prefer the intersex children to be reared as male possibly because of the less social stigma attached to an impotent male than to sterile female, and because males are socially independent.

Disgenesia gonadal mixta: experiencia y resultados / Mixed gonadal dysgenesia: experience and results

Se estudiaron 62 paientes en la Clínica de Intersexo del Hospital de Pediatría del Centro Médico Nacional de Occidente, IMSS, en Guadalajara, Jalisco, México. de enero de 1987 a mayo de 1991. Siete de ellos eran portadores de disgenesia gonadal mixta (DGM), y en ellos se investigaron antecedentes familiares, edad al momento de envío, sexo psicosocial establecido al nacer, fenotipo predominante, cariotipo y cromatina nuclear, hallazgos de la paratomía e histopatológicos. tratamiento quirúrgico reconstructivo y asignación sexual definitiva. El diagnóstico de envío en todos los pacientes que ambigüedad de genitales externos, y el promedio de edad en ese momento fue de 12 meses. Todos los pacientes resultaron negativos a la cromatina; en cuatro de ellos el cariotipo fue 45X0/46XY (15.14 por ciento), en dos 46XY(28.57 por ciento) y en uno era un mosaico de mayor complejidad, 45XO/47XYY (14.28 por ciento). En seis pacientes se encontró testículo disgenético en un lado y estría ovárica en el otro; sólo en un paciente hubo testículo único. La asignación sexual al nacimiento fue la misma que la sexual definitiva, a pesar de que dos pacientes debieron reasignarse sexualmente; los aspectos que lo impidieron fueron edad avanzada al momento de envío, sexo psicosoial previo y rechazo de los padres. Todos los pacientes se sometieron a laparotomía exploradora con extirpación gonadal, por el riesgo de malginización. En tres pacientes se realizó genitoplastia feminizante que consintió en clitororreducción y vaginoplastia en un sólo tiempo quirúrgico. En los asignados como masculinos, se ralizaron cura de hipospadias y colocación de prótesis testiculares. En este artículo se pone de manifiesto la necesidad de establecer un diagnóstico temprano que permita realizar una asignación sexual adecuada, de conformidad con el criterio del mejor fenotipo predominante.

Gonadoblastoma en un paciente con disgenesia gonadal mixta 45, XO/46,XY / Gonadoblastome in a patient with gonadal disgenesia mixed 45, XO/46, XY

Se presenta un caso de Gonadoblastoma en un paciente con Disgenesia Gonadal Mixta, cromatina sexual negativa y cario tipo 45,XO/46,XY, fenotipo femenino. Se hace una revisión sobre este raro tumor gonadal, presentándose algunos alcances clínicos, genéticos y terapéuticos.

Disgenesia gonadal mixta / Mixed gonadal dysgenesis

Dentro de los intersexos, la disgnesia gonadal mixta, se nos ha presentado, como la segunda causa en frecuencia, después de la hiperplasia suprarrenal congénita virilizante. Su fenotipo es variable, mostrando diversos grados de diferenciación. La característica más importante es asimetría de genitales internos que compromete gónadas y anexos. El cariograma revela mosaico XO/XY y en algunos casos se ha encontrado falla estructural del cromosoma Y