Eficiência de duas técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães e avaliação seminal pós-criopreservação / [Efficiency of two techniques for recovering epididymal spermatozoids from dogs and seminal evaluation post cryopreservation]

O objetivo deste trabalho foi avaliar a recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, utilizando as técnicas de fluxo retrógrado (FR) e flutuação (FL) em diluidor Tris-gema, antes e após a criopreservação. Foram coletados 30 complexos testículo-epididímos (CTE), sendo 15 para FR e 15 para FL, e, logo após a recuperação dos espermatozoides, foram analisadas as alterações morfológicas nessas células espermáticas. Após a adição do diluidor, foram avaliados os parâmetros de motilidade total (MOT) e vigor (V) espermáticos. O sêmen pós-criopreservado foi submetido ao teste de termorresistência nos tempos T0, T30, T60 e T90 minutos, além da avaliação das membranas plasmática e acrossomal por sondas fluorescentes. Não houve diferença estatística entre as técnicas quanto à MOT e ao vigor no sêmen diluído (FR-MOT: 82,3% e V: 3,4; FL-MOT: 79,6% e V: 3,2) e pós-criopreservado (FR-MOT: 34% e V: 2,8; FL-MOT: 30% e V: 2,7). A partir do T30, houve diferença significativa quanto à MOT e ao vigor nas técnicas utilizadas, e o tempo também prejudicou o acrossoma espermático a partir do T30. Conclui-se que as técnicas de recuperação de espermatozoides epididimários de cães castrados, testadas neste trabalho, podem ser utilizadas para refrigeração e criopreservação de sêmen.(AU)

The objective of this work was to evaluate the recovery of epididymal spermatozoa from castrated dogs using retrograde flow (FL) and flotation (FL) techniques in Tris-egg yolk diluent, before and after cryopreservation. Thirty testicle-epididymal complexes (CTE) were collected, 15 for FR and 15 for FL and soon after spermatozoid recovery, morphological changes in these spermatic cells were analyzed. After addition of the diluent, the parameters of total motility (MOT) and vigor (V) were evaluated. The post-cryopreserved semen was submitted to thermoresistance (TTR) test at T0, T30, T60 and T90 minutes, as well as the plasma and acrosomal membrane evaluation by fluorescent probes. There was no statistically significant difference between techniques tested for MOT and vigor in the diluted semen (FR-MOT: 82.3% and V: 3.4, FL-MOT: 79.6% and V: 3.2) and post-cryopreserved (FR-MOT: 34% and V: 2.8, FL-MOT: 30% and V: 2.7). From the T30 there was a significant difference regarding MOT and vigor in the used techniques, and the time also damaged the spermatic acrosome from the T30. It is concluded that the epididymal spermatozoa recovering techniques from castrated dogs, tested in this study, can be used for semen refrigeration and cryopreservation.(AU)

Epididymal morphophysiology of adult collared peccaries (Pecari tajacu) / Morfofisiologia epididimária de catitus (Pecari tajacu) adultos

A functional understanding of the epididymis makes it possible to increase a species' fertility, since it facilitates the preservation of gametes for use in assisted reproduction techniques. This study analyzed the histological features of the different regions of the epididymis of the Pecari tajacu and the associated pathologies found in the spermatozoa present in this organ. After an orchiectomy surgery to remove the testicles and epididymis obtained from eight adult animals bred in captivity, fixation and histological processing of samples were carried out. The presence of pseudostratified columnar epithelium with stereocilia was observed in all regions of the epididymis (caput, corpus and caudal). Similarities were noted between the average height of the corpus and caudal epithelium, which differed from that found at the caput (1- proximal: region associated with the efferent ducts; 2- distal: region associated with corpus epididymis). It was also observed that the proximal caput presents a smaller average of the tubules diameter compared to other portions of the epididymis. Regarding pathologies of the spermatozoa, thirteen different types of morphological modifications were observed. Underdeveloped spermatozoa and detached heads were most frequently encountered along the epididymis of the collared peccaries. This study is a pioneer in the area and its data will serve as a basis for comparative research on the reproductive biology of artiodactyls, thus contributing to their conservation and reproduction.(AU)

O entendimento funcional do epidídimo possibilita o aumento da fertilidade de uma espécie, pois torna possível a preservação de gametas para o uso em técnicas de reprodução assistida. Este trabalho estudou os aspectos histológicos das diferentes regiões do epidídimo de Pecari tajacu, bem como as patologias associadas encontradas nos espermatozoides presentes nesse órgão. Após procedimento cirúrgico de orquiectomia, para remoção dos testículos e epidídimos, obtidos de oito animais adultos nascidos em cativeiro, realizou-se a fixação e o processamento histológico das amostras. Constatou-se em todas as regiões do epidídimo (cabeça, corpo e cauda) a presença de epitélio pseudoestratificado colunar com estereocílios. Foram observadas semelhanças entre a altura média do epitélio do corpo e da cauda, a qual era diferente da encontrada na cabeça (1- proximal: região associada aos ductos eferentes; 2- distal: região associada ao corpo do epidídimo). Foi verificado que a cabeça proximal apresenta a média de diâmetro dos túbulos menor em relação às demais porções do epidídimo. Em relação às patologias dos espermatozoides, constataram-se treze tipos diferentes de alterações morfológicas. Os espermatozoides subdesenvolvidos e cabeças soltas foram as mais frequentes ao longo do epidídimo de catitus. Os dados deste trabalho são pioneiros, e servirão como base para pesquisas comparativas sobre a biologia reprodutiva dos artiodátilos, contribuindo para a sua conservação e produção.(AU)

The effects of vasectomy on epididymal morphology and sperm parameters in adult male balb/c mice / Efectos de la vasectomía sobre la morfología del epidídimo y los parámetros espermáticos en ratones balb/c adultos

Vasectomy is a common contraceptive procedure in men. The present study is aimed to explore the impact of vasectomy on epididymal morphology and sperm parameters in adult male Balb/c mice. Twenty adult (age: 8 weeks) male Balb/c mice, weighting 20-30 g were used in the experiments. They were divided into 2 groups (vasectomy and sham). The operations were performed under sodium pentobarbital (40 mg/kg body weight, IP) anesthesia via a lower mid-abdominal incision. The left epididymis caput was fixed for histological studies and the right one was used for sperm count and motility. Progressive fast and slow sperm motility were significantly decreased in the vasectomized compared to the sham operation group (P<0.05) and the number of immotile sperm in the vasectomized group was increased in comparison to control group. Sperm granuloma was seen in 60 percent of epididymis after vasectomy. Also, Histological study showed an increase in tubular lumen diameter, interstitial space and infiltration of immune cells in interstitial tissue in vasectomized group. Vasectomy increases histopathological changes in epididymis and decreases the motility of sperm developing a reduction in fertility rates.

La vasectomía es un procedimiento anticonceptivo común en los hombres. El presente estudio tuvo como objetivo explorar el impacto de la vasectomía sobre la morfología del epidídimo y los parámetros espermáticos en ratones macho adultos Balb/c. Fueron utilizados en el estudio 20 ratones adultos (8 semanas de edad), con un peso ponderado de 20-30 g. Se dividieron en 2 grupos (vasectomía y Sham). Las cirugías se realizaron bajo anestesia con pentobarbital sódico (40 mg/kg de peso corporal, IP), con acceso a través de una incisión medio- abdominal inferior. La cabeza del epidídimo izquierdo fue fijada para estudios histológicos y la cabeza del epidídimo derecho se utilizó para el conteo de espermatozoides y evaluar su motilidad. La motilidad progresiva rápida y lenta de los espermatozoides se redujo significativamente en el grupo de ratones vasectomizados en comparación con el grupo Sham (p<0,05), y el número de espermatozoides inmóviles en el grupo sometido a la vasectomía aumentó. Granuloma espermático se observó en el 60 por ciento de los epidídimos después de la vasectomía. También, el estudio histológico mostró un aumento del diámetro del lumen tubular, espacio intersticial e infiltración de células inmunitarias en el tejido intersticial en el grupo sometido a la vasectomía . La vasectomía aumenta los cambios histopatológicos en el epidídimo y disminuye la motilidad de los espermatozoides, generando una reducción en las tasas de fertilidad.

Refrigeração do epidídimo canino a 4ºC e recuperação dos espermatozoides epididimários utilizando ACP-106c / Cooling of the canine epididymis at 4ºC and recovery of epididymal sperm using ACP-106c

Objetivou-se avaliar a qualidade dos espermatozoides recuperados da cauda do epidídimo após a refrigeração do complexo testículo-epidídimo (CTE) de cães usando o diluidor ACP-106c. Foram utilizados 60 cães machos adultos, com peso de 10-20 kg. Após a eutanásia, removeu-se o CTE que foi imerso em solução fisiológica 0,9% e transportado em caixa térmica ao laboratório a 30ºC. Para a refrigeração e recuperação dos espermatozoides epididimários, os 60 pares do CTE foram divididos em 4 grupos, de acordo com o tempo de refrigeração do CTE e posterior recuperação espermática: G0h, G6h, G12h e G18h, em que cada par do CTE permaneceu por zero, seis, doze ou dezoito horas a 4ºC, respectivamente. A recuperação dos espermatozoides da cauda do epidídimo foi realizada pela técnica de flutuação utilizando-se o diluidor ACP-106c ou Tris. Para cada epidídimo foi adicionado 1,0 mL de um dos dois diluidores, pré-aquecidos a 37ºC por 5 minutos. Em seguida foram centrifugados a 800g/5 minutos para remoção dos resíduos celulares. Avaliou-se a morfologia, funcionalidade e motilidade espermática total e progressiva, além de parâmetros obtidos pelo CASA. Os dados foram submetidos à ANOVA seguido do teste de Turkey (P < 0,05). Em todos os parâmetros avaliados, não houve diferença entre os diluidores testados (P>0,05). Os valores de motilidade total nos grupos G0h, G6h, G12h, e G18h para o ACP-106c foram 84,4±7,7; 81,6±11,6; 88,3±6,5 e 69,5±16,9, respectivamente, e para o Tris 85,2±8,7; 77,4±14,3; 79,0±17,8 e 65,4±17,9, respectivamente. Um decréscimo na qualidade espermática foi observado após 18 horas de refrigeração em ambos os diluidores. Dessa forma pode-se concluir que o ACP-106c pode ser utilizado para recuperar os espermatozoides epididimários refrigerados e podem ser viáveis por até 12h de refrigeração.

The study aimed to assess the quality of sperm recovered from the epididymal cauda after cooling the complex testis-epididymis (CTE) of dogs using ACP-106c extender. Sixty adult male dogs, weighing 10-20 kg were used. After euthanasia, CTE was removed and it was immersed in 0.9% saline and transported to the laboratory in cooler at 30ºC. For cooling and recovery of epididymal spermatozoa, the 60 pairs of CTE were divided into four groups, according to the refrigeration time of the CTE and subsequent sperm recovery: G0h, G6h, G12h and G18h, wherein each pair of CTE remained zero, six, 12 or 18 hours at 4ºC respectively. The recovery of sperm epididymal tail was conducted by flotation technique using ACP-106c or Tris extender. For each epididymis, it was added 1.0 mL of either extenders, preheated to 37ºC for 5 minutes. They were then centrifuged at 800g/5 minutes to remove the cell debris. Morphology, functionality and total and progressive motility, and parameters obtained by CASA were evaluated. Data were analyzed by ANOVA followed by Turkey test (P <0.05). In all parameters assessed, there was no difference between the extenders used (P>0.05). The values of total motility groups G0h, G6H, G12H, and G18h for ACP-106c were 84.4±7.7, 81.6±11.6, 88.3±6.5 and 69.5±16.9 respectively, and for Tris 85.2±8.7, 77.4±14.3, 79.0±17.8 and 65.4±17.9 respectively. A decrease in sperm quality was observed after 18 hours of cooling in both extenders. Thus it can be concluded that the ACP-106c may be used to recover the epididymal spermatozoa chilled and may be viable for up to 12h cooling.

Effects of hypoxia on epididymal sperm parameters and protective role of ibuprofen and melatonin

Hypobaric hypoxia is of interest due to an increase of human populations working at high altitude. Testicular damage is related to the physiological response (neoangiogenesis) to increased intrascrotal blood flow as temperature rises. Hypoxia is a stress factor with overproduction of reactive oxygen species (ROS). The effect of hypoxia in mice reproductive parameters is analyzed. Animals were exposed to simulated hypoxia of 4,200 meters above sea level (m.a.s.l.) in a chamber for 33.2 days, both to continuous (HH) or intermittent hypoxia (HI) with an intermittency period of 4 days hypoxia /4 days normoxia (500 m.a.s.l.). The anti-inflammatory drug Ibuprofen was administered to a group of mice to control vasodilation and increased blood flow. Melatonin was administered to another group of mice as a potent ROS scavenger. Animals in both HH and HI exposure were compared to normoxic non-treated controls. There was a hematological response in hypoxia, with an increase in hematocrit and reticulocytosis. There was also increased teratozoospermia. This damage was more pronounced in HH than HI, suggesting that alternating normoxic periods permits compensation for the effects of hypoxia. In both hypoxia systems, the level of lipoperoxidation and the instability of DNA increased. In HH, there was a reduction of teratozoospermia in melatonin-treated mice. Ibuprofen presented a protective effect on the same parameters as melatonin with both HI and HH. The quality of sperm DNA, fragmentation, unpacking and DNA stability diminished. In conclusion, reproductive damage elicited by HH or HI was partially ameliorated by simultaneous treatment with antiflogistic and/or antioxidant agents.

Biologia epididimária: maturação espermática e expressão gênica / Biología Epididimaria: maduración espermática y expresión génica / Epididymal biology: spermatic maturation and gene expression

O epidídimo dos mamíferos é um órgão formado por um ducto único e enovelado que liga os dúctulos eferentes ao ducto deferente, sendo anatomicamente dividido em segmento inicial, cabeça, corpo e cauda. A classificação baseia-se no estudo da altura do epitélio, do diâmetro tubular e da variação na frequência dos diferentes tipos celulares. A passagem dos espermatozoides, que são produzidos nos testículos, ao longo do ducto epididimário determina a aquisição da capacidade fertilizante e da motilidade progressiva, processo denominado maturação espermática. Durante a passagem através do epidídimo, o fluido ao qual os espermatozóides são expostos sofre alterações substanciais na composição, incluindo mudanças da osmolaridade, da proporção iônica, das reservas energéticas e de tipos protéicos. A expressão gênica programada e diferencial ao longo do epidídimo, responsável pela formação de um microambiente especializado, é importante para o sucesso do processo de maturação espermática. Embora vários estudos tenham identificado inúmeros genes com expressão seletiva e específica no epidídimo, os quais são importantes para o entendimento da expressão gênica complexa deste órgão, muito ainda permanece a ser determinado como, por exemplo, os tipos protéicos codificados por estes genes, bem como a identificação dos sítios de ação destas proteínas.

El epidídimo de los mamíferos es un órgano formado por un único ducto anovelado que conecta los dúctulos eferentes al ducto deferente, siendo dividido anatómicamente en segmento inicial, cabeza, cuerpo y cola. La clasificación se basa en el estudio de la altura del epitelio, del diámetro tubular y de la variación en la frecuencia de los diversos tipos celulares. El pasaje de espermatozoides (producidos en los testículos en toda la superficie del ducto epididimario), determina la adquisición de la capacidad de fertilización y dela motilidad progresiva, proceso denominado maduración espermática. Durante el pasaje a través del epidídimo, el líquido a lo que los espermatozoides se exponen sufre alteraciones substanciales en su composición, incluyendo cambios de la osmolaridad, del cociente iónico, de las reservas de energía y de los tipos proteínicos. La expresión génica programada y de distinción y diferencial a través del epidídimo, responsable de la formación de un microambiente especializado, siendo importante para el éxito del proceso de maduración espermática. Aunque algunos estudios hayan identificado genes innumerables con expresión selectiva y específica en el epidídimo, genes que son importante como para entender la expresión génica compleja de este órgano, todavía siguen muchos factores a ser determinados como, por ejemplo, los tipos de proteínas codificados por estos genes, así como la identificación de las áreas de acción de estas proteínas.

The mammalian epididymis consists of a single coiled duct that connects the efferent ducts to the different duct. Anatomically, four segments are distinguished in this organ: the caput, the corpus and the cauda epididymidis. This classification is based in the epithelium height, in the diameter of the duct and in the cell types present in each segment. During their transit through the epididymis, the sperm, produced in the testis, acquire progressive motility and become able to fertilize the oocyte, a process called sperm maturation. During this transit, the epididymis fluid changes its osmolarity, energetic reserves and proteins, in a way to promote sperm maturation. The programmed and differential gene expression along the epididymis provides the appropriate environment to sperm maturation. Although different studies have identified many epididymis-enriched and specific genes that are important to understand the transcriptome of this organ, many aspects of epididymis gene expression is still to be shown, such as what proteins are produced by the genes described so far, what are the functions of these proteins and where they act.

Testicular parameters and morphological characteristics of testicular and epididymal spermatozoa of white fulani bulls in Nigeria

RESUMEN: Se estudiaron parámetros testiculares y características morfológicas de los espermatozoides testiculares y epididimarios en 20 testículos de toros Fulani blancos. El objetivo fue determinar parámetros testiculares normales y los cambios morfológicos de los espermatozoides durante su trayecto en el epidídimo. Se observó que hubo disminución de espermatozoides llevando droplet citoplasmático proximal (PCD) en el epidídimo, durante la maduración espermática. Se presentaron más cabezas estrechas en el epidídimo izquierdo (0,40) que en el derecho (0,10). Hubo más espermatozoides con cola normal (16.7) en el epidídimo del lado izquierdo que en el lado derecho (13.0). Las células espermáticas tenían colas en loop en mayor cantidad en el epidídimo izquierdo (cabeza, 4.90; cuerpo, 5.30; cola 4.30) que en el lado derecho (cabeza, 4.70; cuerpo, 3.20; cola 5.10). Sin embargo, en la zona caudal del epidídimo derecho el valor promedio fue más alto. En este estudio, en el testículo izquierdo los espermatozoides presentaron más defectos morfológicos (12.96) que en el derecho (12.42). Entre los parámetros epididimarios y testiculares hubo correlación positiva (peso del epidídimo, peso de los testículos y epidídimos, longitud del epidídimo y circunferencias de los testículos y epidídimos p<0.05).

Seasonal variations in the heterologous binding of viscacha spermatozoa: A scanning electron microscope study

Seasonal changes in the reproductive activity of the adult male viscacha (Lagostomus maximus maximus) were investigated during the annual reproductive cycle. Assays of heterologous in vitro binding between compatible gametes were used to evaluate the ability of viscacha spermatozoa to achieve primary binding during its annual reproductive cycle. Sperm were collected by mincing cauda epididymis in HECM-3 medium and the sperm concentration and motility were evaluated. Cumulus-free and zona-free oocytes obtained from superovulated hamsters were inseminated in vitro with capacitated sperm suspensions, incubated at 37ºC, 5% CO2 for 3 h, and then processed for studies by scanning electronic microscopy. Statistical analysis was used to compare the quantitative differences. The number of spermatozoa significantly decreases during the regression period, while sperm motility was progressive speed in both periods. During the active period elevated sperm binding to cumulus-free and zona-free oocytes was observed, while the binding during the regression period decreased drastically. In both periods, oocyte microvilli covered sperm heads and tails. These results suggest that the ability of viscacha spermatozoa to participate in gamete recognition is profoundly affected. This would likely be related to different functional stages of the spermatozoa and their epididymal microenvironment during the annual reproductive cycle of viscacha.

Ageing induces apoptosis and increases HSP70 stress protein in the epididymis of Octodon degus

Apoptosis has been largely analyzed in the testis. Nevertheless, the epididymis has been scarcely studied. We analyzed the number of apoptotic cells in the different regions (caput, corpus and cauda) of the epididymis of the South American rodent Octodon degus both young and senile. Apoptosis was identified using the TUNEL method which detects in situ DNA fragmentation. Apoptosis was detected in the principal cells of the epididymal epithelium. The caput epididymis was the region more affected. The caput of young animals showed that 0.32/1000 cells were apoptotic in contrast to 5.1/1000 of senile animals. Also in the cauda epididymis apoptosis is increased with age, appearing 0.14/1000 and 3.9/1000 in young and senile animals, respectively. On the other hand, we used a immunocytochemical method to localize the stress protein HSP70. HSP70 appeared notably increased in the principal cells of the cauda epididymis of senile animals. Changes in the epididymal epithelium are probably due to the low androgen levels existing in senile animals and are a region dependent phenomenon

Maturation-dependent goat epididymal sperm autoagglutination and its inhibition by a glycoprotein factor.

The maturing goat epididymal spermatozoa were isolated from different segments of epididymis and these cells dispersed in a modified Ringer's solution, were incubated at 37 degrees C for 60 min to evaluate their autoagglutination efficacy. Distal corpus-epididymal spermatozoa specifically showed high order of head-to-head autoagglutination property whereas all other sperm cells did not show any detectable aggregation. The goat epididymal plasma has been shown to possess an anti-agglutinin that markedly inhibits sperm agglutination phenomenon and also dissociates the cells from the sperm clusters. Epididymal plasma is the most potent source of the anti-agglutinin which is a heat-stable specific glycoprotein. Like the autoagglutination phenomenon, the initiation of sperm forward progression also starts in the distal-corpus epididymis. The temporal correlation of these two events suggests that sperm autoagglutination may be a prerequisite for the induction of flagellar motility during the epididymal maturity of male gametes.

Spermatozoon maturation in vertebrates with internal fertilization

La maduración del espermatozoide de los mamíferos ocurre durante su tránsito a través del epidídimo. La maduración comprende una serie de cambios morfológicos y fisiológicos que comprenden la adquisición de la capacidad fertilizante de la gameta. Este proceso de maduración ha sido estudiado principalmente en los mamíferos, pero existen datos que revelan que los pájaros, reptiles y ciertos tipos de peces poseen características similares. El análisis anatómico e histológico del epidídimo de los mamíferos y de los conductos de Wolff de algunos pájaros y reptiles muestra el predominio de un sistema de células secretoras. Las proteínas secretadas por los conductos de los machos parece ser un factor importante en la adquisición de la motilidad del espermatozoide, así como en los cambios que ocurren en la organización molecular de la membrana plasmática. Los cambios que ocurren en la membrana plasmática de los espermatozoides de mamíferos se relacionan con la adquisición de proteínas foráneas (de origen epididimario). Algunos de estos cambios de la membrana parecen conectarse con el fenómeno de capacitación y también con la interacción de las gametas durante la fertilización. El uso de anticuerpos contra las proteínas del conducto de Wolff ha mostrado que los espermatozoides de los pájaros y reptiles también incorporan proteínas durante su pasaje a través de este conducto. Sin embargo, en los pájaros y también en los reptiles, la capacitación no es un prerequisito para fertilizar y algunos son capaces de fertilizar con espermatozoides del testículo. Por consiguiente se plantea la cuestión acerca del real significado de los cambios de maduración en estos vertebrados. Las proteínas adquiridas durante la maduración en tales especies tendrían funciones diferentes a las de los mamíferos, probablemente como apoyo para la sobrevivencia de los espermatozoides durante el transporte en el tracto reproductor femenino, donde as veces son depositados por largo tiempo. Posiblemente un rol similar podrían tener los cambios de superficie en las gametas de los mamíferos cuando están en el tracto reproductor femenino

Effect of low-intensity pulsed ultrasound on prepubertal rat testis

The testes of prepubertal male rats (N -12) aged 21 days were stimulated with low-intensity pulsed ultrasound (1.5-MHz frequency, 1-KHz repetion pulse rate, 200-*s pulse width, 30-V peak-to-peak amplitude and 20-mW/cm* intensity) applied to the skin for 20 min/day for 7 days. Control rats (N-8) were manipulated in the same manner but not submitted to ultrasound. Ultrasound stimulation promoted a significant increase in plasma testosterone (62%) leading to a significant increase in seminal vesicle relative weight (35%) as well as an increase in the fructose (92%) and DNA (200%) contents of the gland. No differences were detected between ultrasound-treated and control animals, in terms of body weight and the relative weights of testis, cauda epididymidis, testis DNA and mitosis

Características citoquímicas e ultraestruturais do epitélio de revestimento na parte distal do epidídimo do hamster (Mesocricetus auratus) / Cytochemical and ultraestructural characteristics of the lining epithelium in the terminal segment of the hamster (Mesocricetus auratus) epididymidis

Na parte distal do epidídimo (Cauda epididymidis) do hamster champanha notou-se alguma evidência de secreçäo protêica merócrina ao nível das células principais e evidências de secreçäo granular presumivelmente de glicoproteínas, nas células colunares claras, no epitélio de revestimento ductular. As reatividades celulares ao PAS e para a detecçäo de proteínas totais (Reaçäo de Millon), em ambos os tipos celulares, mas com especial ênfase nas células claras, säo sugestivas da presença de síntese e secreçäo de complexos de glicosaminoglicanas e proteínas, que do epitélio passa ao lumén do ducto o seu conteúdo. Um complexo microvacuolar-vesicular, aparentemente formado à partir do complexo de Golgi, é observado nas células principais. Foi sugerido que este complexo poderia representar pequenos vacúolos e vesículas de secreçäo merócrina, nestas células. Gränulos elétro-densos säo observados em todo o citoplasma das células claras, com correspondência a grânulos semelhantes e PAS-positivos observados nestas células, â microscopia de luz. Estes grânulos säo efetivamente secretados para o lúmen do ducto, pelo citoplasma apical das células claras nas observaçöes ta resoluçäo de microscopia de pinocitose bem como pela presença de corpos multivesiculares, de morfologia subcelular típica, ou pela observaçäo de grandes vacúolos supranucleares, com membranas limitantes, presumivelmente um outro tipo de corpos multivesiculares de conteúdo grandemente hidratado

Plasma membrane changes during epididymal transit in the guinea pig spermatozoa

El presente trabajo explora en un estudio comparado los cambios que ocurrem en la membrana plasmática (MP) de espermatozoides extraídos del caput (inmaduros) comparados con los extraídos de la región caudal del epidídimo (maduros) mediante técnicas convencionales de réplicas por criofractura, TEM, SEM y morfometría. Al final del tránsito epididimario la MP del segmento principal del acrosoma adquiere una trama hexagonal. El segmento ecuatorial y su borde serrado no muestran variaciones significativas. Otro importante cambio que ocurre también al final del tránsito epididimario es el aumento de la concentración de partículas intramembranosas en la región postacrosomal. El cuello del espermatozoide maduro se adelgaza probablemente debido a la migración de la gota citoplasmática. Esta gota presenta en la fase P de la mmembrana plasmática, hileras de partículas pequeñas que en ocasiones foram conglomerados densos. La MP de la pieza media también contiene particulas intramembranosas en al fase P que aparentemente están mejor el annulus. Se presume que estas dos zonas tienen de común la fusión de la mmembrana plasmática con las estructuras subyacentes, envoltura nuclear y anillo de Jensen respectivamente. La MP de la pieza principal contiene conglomerados de grandes partículas de forma rectangular y de función desconocida que junto al "zipper" no cambian durante el transito epididimario