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1.
Braz. j. microbiol ; 46(4): 957-968, Oct.-Dec. 2015. tab, graf
Artículo en Inglés | LILACS | ID: lil-769664

RESUMEN

Abstract L-glutaminase was produced by Streptomyces canarius FR (KC460654) with an apparent molecular mass of 44 kDa. It has 17.9 purification fold with a final specific activity 132.2 U/mg proteins and 28% yield recovery. The purified L-glutaminase showed a maximal activity against L-glutamine when incubated at pH 8.0 at 40 °C for 30 min. It maintained its stability at wide range of pH from 5.0 11.0 and thermal stable up to 60 °C with Tm value 57.5 °C. It has high affinity and catalytic activity for L-glutamine (Km 0.129 mM, Vmax 2.02 U/mg/min), followed by L-asparagine and L-aspartic acid. In vivo, L-glutaminase showed no observed changes in liver; kidney functions; hematological parameters and slight effect on RBCs and level of platelets after 10 days of rabbit's injection. The anticancer activity of L-glutaminase was also tested against five types of human cancer cell lines using MTT assay in vitro. L-glutaminase has a significant efficiency against Hep-G2 cell (IC50, 6.8 μg/mL) and HeLa cells (IC50, 8.3 μg/mL), while the growth of MCF-7 cells was not affected. L-glutaminase has a moderate cytotoxic effect against HCT-116 cell (IC50, 64.7 μg/mL) and RAW 264.7 cell (IC50, 59.3 μg/mL).


Asunto(s)
Animales/química , Animales/efectos de los fármacos , Animales/enzimología , Animales/metabolismo , Animales/farmacología , Antineoplásicos/química , Antineoplásicos/efectos de los fármacos , Antineoplásicos/enzimología , Antineoplásicos/metabolismo , Antineoplásicos/farmacología , Biocatálisis/química , Biocatálisis/efectos de los fármacos , Biocatálisis/enzimología , Biocatálisis/metabolismo , Biocatálisis/farmacología , Proliferación Celular/química , Proliferación Celular/efectos de los fármacos , Proliferación Celular/enzimología , Proliferación Celular/metabolismo , Proliferación Celular/farmacología , Estabilidad de Enzimas/química , Estabilidad de Enzimas/efectos de los fármacos , Estabilidad de Enzimas/enzimología , Estabilidad de Enzimas/metabolismo , Estabilidad de Enzimas/farmacología , Glutaminasa/química , Glutaminasa/efectos de los fármacos , Glutaminasa/enzimología , Glutaminasa/metabolismo , Glutaminasa/farmacología , Glutamina/química , Glutamina/efectos de los fármacos , Glutamina/enzimología , Glutamina/metabolismo , Glutamina/farmacología , Células HeLa/química , Células HeLa/efectos de los fármacos , Células HeLa/enzimología , Células HeLa/metabolismo , Células HeLa/farmacología , /química , /efectos de los fármacos , /enzimología , /metabolismo , /farmacología , Humanos/química , Humanos/efectos de los fármacos , Humanos/enzimología , Humanos/metabolismo , Humanos/farmacología , Cinética/química , Cinética/efectos de los fármacos , Cinética/enzimología , Cinética/metabolismo , Cinética/farmacología , Streptomyces/química , Streptomyces/efectos de los fármacos , Streptomyces/enzimología , Streptomyces/metabolismo , Streptomyces/farmacología , Especificidad por Sustrato/química , Especificidad por Sustrato/efectos de los fármacos , Especificidad por Sustrato/enzimología , Especificidad por Sustrato/metabolismo , Especificidad por Sustrato/farmacología
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