Analysis of immunostaining and western blotting of endothelin 1 and its receptors in mitral stenosis / Análise da expressão imunohistoquímica e de western blotting da endotelina 1 e seus receptores na estenose mitral

Abstract Introduction: Rheumatic Fever represents a serious public health problem in developing countries, with thousands of new cases each year. It is an autoimmune disease, which occurs in response to infection by streptococcus A. Objective: The aim of this study was to evaluate the immunolabeling and protein expression for endothelin-1 and 3 (ET-1, ET-3) and its receptors (ETA, ETB) in rheumatic mitral valves. Methods: Immunohistochemistry was used to identify ET-1/ET-3 and ETA/ETB receptors in rheumatic and control mitral valves. Quantitative analysis of immunostaining for ET-1/ET-3 and ETA/ETB receptors was performed. In addition, western blot analysis was carried out to assess protein levels in tissue samples. Results: ET-1 and ETA receptor immunostaining predominated in stenotic valves, mainly associated with fibrotic regions, inflammatory areas and neovascularization. Quantitative analysis showed that the average area with positive expression of ET-1 was 18.21±14.96%. For ETA and ETB, the mean expressed areas were respectively 15.06±13.13% and 9.20±11.09%. ET-3 did not have a significant expression. The correlation between the expression of both endothelin receptors were strongly positive (R=0.74, P=0.02), but the correlation between ET-1 and its receptor were negative for both ETA (R=-0.37, P=0.25), and ETB (R=-0.14, P=0.39). This data was supported by western blot analysis. Conclusion: The strong correlation between ET-1 and its receptors suggests that both play a role in the pathophysiology of rheumatic mitral valve stenosis and may potentially act as biomarkers of this disease. .

Resumo Introdução: A febre reumática representa um sério problema de saúde pública em países em desenvolvimento, com milhares de novos casos a cada ano. Ela é uma doença autoimune que ocorre em resposta à infecção por estreptococos do grupo A. Objetivo: O objetivo deste estudo foi avaliar a expressão proteica e imunohistoquímica para a endotelina-1 e 3 (ET-1 e ET-3) e seus receptores (ETA e ETB) em valvas mitrais reumáticas. Métodos: Imunohistoquímica foi utilizada para identificar receptores de ET1/ET3 e ETA/ETB em valvas mitrais reumáticas e controles. A análise quantitativa da expressão imunohistoquímica para receptores de ET1/ET3 e ETA/ETB foi também efetuada. Adicionalmente, foi feita análise do western blot para mensurar níveis de proteínas em extratos tissulares. Resultados: A expressão imunohistoquímica de ET-1 e de seu receptor predominou em valvas estenóticas, estando associada com regiões fibróticas, áreas inflamatórias e neovascularização. A análise quantitativa mostrou que a área média com expressão positiva para ET-1 foi de 18,21±14,96%. Para o ETA e o ETB, as áreas médias expressas foram, respectivamente, 15,06±13,13% e 9,20±11,09%. ET-3 não teve uma expressão significante. A correlação entre a expressão dos dois receptores de endotelina foi fortemente positiva (R=0,74, P=0,02); mas a correlação entre ET-1 e o seu receptor foi negativa tanto para ETA (R=-0,37, P=0,25) como para ETB (R=-0,14, P=0,39). Estes dados foram confirmados pela análise do western blot. Conclusão: A forte correlação entre ET-1 e seus receptores sugere que ambos têm papel importante na fisiopatologia da estenose mitral reumática, podendo potencialmente atuar como biomarcadores desta doença. .

Dominância coronariana na síndrome da hipoplasia do coração esquerdo / Coronary dominance patterns in hypoplastic left heart syndrome

INTRODUÇÃO: Apesar de a síndrome do coração esquerdo hipoplásico (SCEH) ser extensamente estudada, esta doença ainda apresenta mortalidade elevada se comparada a outras doenças tratadas como fisiologia univentricular. Assim, diferenças morfológicas entre fenótipos dentro do espectro da SCEH podem ser fatores de risco e sua identificação pode auxiliar na escolha terapêutica entre os subgrupos anatômicos. OBJETIVOS: Determinar a forma mais frequente de dominância coronariana em corações com SCEH nos subgrupos com atresia (AM) e estenose mitral (EM). MÉTODOS: Análise da anatomia coronariana de acordo com a distribuição dos ramos epicárdicos e o padrão de dominância, classificadas em direita, esquerda ou balanceada. O grupo controle foi composto por nove peças de corações morfologicamente normais. O grupo SCEH constituiu-se de nove peças com AM e 24 peças com EM. Para análise estatística foi utilizado o teste do qui-quadrado. RESULTADOS: Houve diferença significativa entre os dois grupos em relação à dominância coronariana (x²= 9,298; P=0,01). A dominância esquerda esteve presente em 75 por cento dos casos de EM, e a balanceada só foi observada na EM. No grupo controle, observou-se dominância direita em todos os casos (P<0,01). CONCLUSÕES: A dominância esquerda é mais frequente na SCEH que no grupo controle de corações normais e, na SCEH, a dominância coronariana esquerda é mais frequente no subgrupo com EM.

INTRODUCTION: Although hypoplastic left heart syndrome (HLHS) be extensively studied, this disease still has a high mortality rate compared to other diseases treated as univentricular physiology. In this way, morphological differences between phenotypes within the spectrum of HLHS may be risk factors and their identification can assist in choosing treatment between subgroups. OBJECTIVE: To identify the most prevalent form of coronary artery dominance in hearts with HLHS groups with mitral atresia (MA) and mitral stenosis (MS). METHODS: Analysis of coronary anatomy according to the distribution of epicardial branches and the pattern of dominance, classified as right, left or balanced. The control group was composed of nine pieces of morphologically normal hearts, the HLHS group consisted of 9 pieces with MA and 24 pieces with MS. For statistical analysis we used the x² test. RESULTS: There were significant differences between the two groups in relation to coronary artery dominance (x² = 9.298, P = 0.01). Left dominance was present in 75 percent of cases of MS, and balanced one was only observed in pieces with MS. The control group had right dominance in all cases (P <0.01). CONCLUSIONS:Left dominance is more common in HLHS than in the control group of normal hearts and in HLHS. The left coronary dominance is more frequent in the subgroup with mitral stenosis.

Estudo comparativo da evolução em longo prazo da valvoplastia mitral com a técnica de Inoue versus a do balão único / Comparative study of long-term outcomes of Inoue ballon and single ballon in mitral valvuloplasty

Diferentes técnicas de balão têm custo diverso e podem ter evolução diferente. Comparar a evolução da valvoplastia mitral realizada com a técnica de Inoue e com a do balão único, verificando se a técnica é fator de risco independente para óbito ou eventos maiores e determinar na população total, variáveis independentes para óbito e eventos maiores e determinar na população total, variáveis independentes para óbito e eventos maiores. Métodos: Foi usando o balão de Inoue em 54 (17,4 por cento) pacientes e o balão único em 256 (82,6 por cento) pacientes. Seguimento: grupo do balão de Inoue de 33 + - 27 meses, e do balão único de 55 + - 33 meses (p=0,0001). Resultados: encontrou-se na evolução, no grupo do balão de Inoue...

Caracterización de la angiogénesis en la valvulitis reumática crónica como factor de progresión de las lesiones del aparato valvular mitral

La caracterización de la angiogénesis en la valvulopatía crónica reumática y su relación con la progresión de las lesiones del tejido valvular es novedosa en nuestro medio. El objetivo de este estudio es cuantificar la neovascularización y relacionarla con la progresión del proceso inflamatorio y de la remodelación colágena (fibrosis). Se analizaron 40 biopsias con valvulitis crónica reumática mitral, de pacientes con edades representativas de dos etapas evolutivas. El promedio de edades en el grupo A, fue de 31 ± 1,5 años y 49 ± 1,4 años en el grupo B. Las secciones histológicas fueron coloreadas con hematoxilina-eosina y tricrómico de Gomori, e inmunomarcadas con CD34. Macroscópicamente, las valvas de ambos grupos estaban engrosadas por fibrosis. En el grupo B, las lesiones fueron más severas, siendo la calcificación focal, su nota más importante (50,0 %). Histológicamente, en ambos grupos, se observó fibrosis, infiltrado inflamatorio sin presencia de nódulos de Aschoff. Los mayores grados de inflamación fueron observados en el grupo A.

En el grupo B, hubo calcificaciones en el 60 % vs. 5 % de los casos del grupo A. En cada caso, se contaron los neovasos con marcaje positivo para CD34. La densidad vascular fue calculada dividiendo el número total de vasos entre el área de la sección en mm2” (vasos/mm2). La densidad fue de 5,98 ±1,08 vasos/mm2, y 3,55 ± 0,76 (P< 0,001) vasos/mm2.en el grupo A, y en el grupo B, respectivamente. Se concluyó que la angiogénesis es constante en todas las fases de la valvulitis crónica reumática y que forma parte del cortejo de los elementos tisulares inflamatorios y reparativos, representando un potencial factor de progresión y de agravamiento de la remodelación colágena. Considerando que la angiogénesis presenta variantes morfológicas producidas por diferentes factores moduladores, es probable que estos puedan constituirse en blancos terapéuticos para inhibir este proceso y disminuir la cicatrización del aparato valvular mitral.

Characterisation of angiogenesis in chronic rheumatic valvulopathy and his relation with progression of the valvular injuries is novel in our country. The objective of this study is to quantify neovascularizacion and to relate it with progression of the inflammatory process and fibrosis. We analyzed 40 biopsies with chronic valvulitis rheumatic from patients with representative ages of two evolutionary stages. The average of ages in the Group A, was of 31 ± 1.5 years and in Group B, of 49,7 ± 1,4 years. The histology sections were collored with haematoxylineosin and tricromic of Gomori, and immune marked with CD34. Macroscopic valves of both groups was thickened by fibrosis, although in group B, the changes were more severe being focal calcification, its more important note (50.0 %). Histology cally in both groups, they were observed fibrosis, inflammatory infiltrate without presence of Aschoff.’nodules. The greater degrees of inflammation were observed in group A. The group B there were calcifications in 60 % of the cases versus 5 % of group A. In each case the positive immune neovessels were counted. The vascular density was calculated dividing the total number of vessels by the section’s area (vessels/mm2). The density was 5.98 ± 1.08 vessels/mm2, and 3.55 ± 0.76 (P< 0.001) in the groups A, and B, respectively. We conclude that angiogenesis is constant in all phases of the chronic rheumatic valvulitis and comprises all the courtship of the inflammatory and reparative tissue elements, representing a potential factor of progression of collagen remodelation. Considering that angiogenesis displays morphologic variants produced by different modulators factors, it is probable that they may become therapeutics targets to inhibit this process in order to diminish cicatrisation of the mitral valvular apparatus.

Obstrução de valva mitral por embolização tumoral per-operatória (pneumectomia direita) com parada cardíaca irreversível / Mitral valve obstruction by tumor embolus as a cause of irreversible cardiac arrest during right pneumonectomy

Um paciente de 26 anos, portador de volumoso hemangiopericitoma primário de pulmão direito, diagnosticado por biópsia cirúrgica prévia, apresentou parada cardíaca irreversível durante dissecção hilar de pneumectomia direita. O paciente não respondeu às manobras de ressuscitação. A necropsia mostrou obstrução total de valva mitral por êmbolo tumoral. Os autores recomendam, em casos de grandes massas pulmonares com envolvimento hilar, como no caso aqui apresentado, a avaliação pré-operatória com ecocardiografia transesofágica, ressonância magnética nuclear ou angiotomografia. Se for detectada lesão em vasos pulmonares ou cavidades atriais, deve-se programar a cirurgia com circulação extracorpórea, para permitir ressecção da massa intra-vascular ou cardíaca, combinada com a ressecção pulmonar. Os autores recomendam cuidados para reconhecer e tratar este problema, se o diagnóstico pré-operatório não for feito.

A 26-year-old patient with a voluminous primary pulmonary hemangiopericytoma in the right lung, diagnosed through previous surgical biopsy, presented irreversible cardiac arrest during the hilar dissection portion of a right pneumonectomy. The patient did not respond to resuscitation efforts. Autopsy showed total obstruction of the mitral valve by a tumor embolism. In cases of large lung masses with hilar involvement, as in the case presented, we recommend preoperative evaluation using transesophageal echocardiography, magnetic resonance imaging or angiotomography. If injury to the pulmonary vessels or atrial cavities is detected, surgery with extracorporeal circulation should be arranged in order to allow resection of the intravascular or cardiac mass, together with pulmonary resection. We recommend that care be taken in order to recognize and treat this problem in patients not receiving a preoperative diagnosis.

Frequency of atrial fibrillation in mitral stenosis and its correlation with left atrial size

Chronic rheumatic heart disease is much the commonest cause of mitral stenosis. Incidence of rheumatic MS parallels that of acute rheumatic fever. Atrial fibrillation usually develops in the presence of pre-existing ECG evidence of left atrial enlargement and is related to the size of the chamber, the extend of fibrosis of the left atrial myocardium, the duration of the atriomegaly and the age of the patient. Descriptive. Mayo Hospital, Lahore and Punjab Institute of Cardiology, Lahore. Convenient. 129 consecutive cases of predominant mitral stenosis. 112 cases included in the final workup. The frequency of AF in MS in this study was calculated as 25.9%. The correlation between AF and left atrial size was significant [p = 0.000]. This was plotted on the scattergram [Figure No. 1], which shows a steep rise in the frequency of AF beyond a left atrial size of 70 mm. Frequency of AF in patients with MS is 25.9%. The correlation between AF in MS and left atrial size is significant [p = 0.000]

Respuesta clínica y ecocardiografica en pacientes con estenosis mitral reumática sometidos a valvuloplastia mitral percútanea / Clinical answer and ecocardiografica in patient with subjected estenosis rheumatic mitral to valvuloplastia mitral percútanea

Este estudio se realizó con el objetivo de conocer los cambios clínicos y ecocardiográficos en pacientes con estenosis mitral reumática sometidos a valvuloplastia mitral percutánea en el Centro Nacional de Cardiología en el periodo de Septiembre del 2000 a Septiembre del 2002. Se realizó el procedimiento en 61 pacientes (52 femenino y 9 masculino), con edad promedio (15- 66 años) el 59 porciento con antecedentes de fiebre reumática, y el 78 porciento de amigdalitis. El 30 porciento presentó ritmo cardíaco de fibrilación auricular con anticoagulación, y el 9.8 porciento reportó complicaciones hemorrágicas. El área mitral prevalvuloplastia promedio 0.94cm gradiente diastólico máximo promedio de 22 mmHg, presión sistólica pulmonar de 56.26 mmHg. Clase funcional prevalvuloplastia III IV. Método: este procedimiento se realizó bajo anestesia local por punción de la vena femoral derecha se realizó cateterismo transeptal, después de dilatar el septum, se pasó el balón de Inoue, se llevó al ventrículo izquierdo, y colocó en la válvula mitral, donde se realizaron la separación de las comisuras, fracturas de las calcificaciones. Se valoró las complicaciones durante las valvuloplastia presentándose 1 embolia cerebral, Insuficiencia mitral 1, taponamiento cardiaco 2, hemorragia en el sitio de venopunción 5. Resultados: el área mitral posvalvuloplastia promedio 1.6cm2 DS 0.45, el gradiente diastólico máximo promedio de l3mmhg DS 4.98, presión sistólica pulmonar promedio 39.71mmhg DS 12.93, disminución del tamaño de la aurícula izquierda Capacidad funcional mejoró notablemente, encontrándose clase funcional I- II. Conclusiones: Se valoró que la valvuloplastia mitral percutánea es un procedimiento seguro, tiene excelentes resultados clínicos, evita la cirugía de recambio valvular...

Valvotomía mitral percutánea con sistema multi-track bonhoeffer: experiencia preliminar de doce casos entre mayo y octubre de 1998 / Percutaneous mitral valvotomy with bonhoeffer multi-track System: experience preliminary of twelve cases between may and october of 1998

Dilatación mitral con sistema Multi-Track Bonhoeffer, experiencia preliminar de doce casos en el Laboratorio de Hemodinamia del Hospital de Clínicas Caracas. La valvotomía mitral percutánea fue descrita por Inoue en 1984, con aprobación clínica en 1994. Este balón era altamente sofisticado y al dilatarse, lo hacía en forma secuencial distal, proximal y media, respectivamente. Recientemente se han desarrollado otros sistemas con dos balones, dos guías, un balón con una guía, así como también se ha desarrollado la técnica de dos balones a través de una guía monorriel los cuales se insuflan lado a lado, a través del orificio mitral en forma simultánea. Presentamos nuestra experiencia con el sistema Multi-Track. La técnica se aplicó a doce pacientes mujeres en edades comprendidas entre 29 y 56 años, peso de 49 a 73 Kg., área valvular pre de 0,4 cm²-1,0 cm² que aumentaron a 1,7-2,3 cm² y la presión media de auricular izquierda cayó de 30mmHg. a 5mmHg, clase funcional III-IV prevalvotomía a I-II post. En conclusión, la dilatación mitral con este sistema incrementa el área valvular mitral, disminuye el gradiente transmitral y mejora la clase funcional

Valvopatia mitral com aspecto reumático em presença de fibrose endomiocárdica do ventrículo esquerdo / Mitral valve disease with theumatic appereance in the presence of left ventricular endomyocardial fibrosis

Descre-se caso de menino de 9 anos, portador de dupla lesäo mitral, com extensa fibrose endomiocádica do vetrículo esquerdo. A singularidade do processo fibrótico é realçada, com ênfase a aspectos etiopatogênicos

Síndrome de shone asociado a hidramnios: a propósito de un caso y revisión de la literatura / Shone's syndrome associate a hydramnios: a purpose of a case and literature review

Presentamos un disco de diagnóstico prenatal de Síndrome de Shone, el cual fue llevado a término y extraído por cesárea. El diagnóstico prenatal se acompaño de hidramnios que pensamos se debio a compresión externa del esófago por la aurícula izquierda muy dilatada. Se establecio insuficiencia cardíaca intratable y dada la severidad de las lesiones se consideró inoperable, muriendo a las 48 horas de nacido. Los ecosonogramas rutinarios y de Doppler prenatales fueron registrados en cinta VHS. No hubo estudio anatomo-patológico

Análise do estudo anatomopatológico de pacientes submetidos a cirurgia valvar no InCór - HC FMUSP / Anatomopathological study of patients subjected to valvar surgery in the InCor - HC FMESP

Das 44 necropsias realizadas em pacientes submetidos a cirurgia valvar no ano de l990 no InCór, foram encontradas como causas clínicas de óbito nos pacientes mitrais: coagulopatia e sangramento em 11 casos; baixo débito em 7; choque cardiogênico em 5; choque séptico em 3; falência de múltiplos órgaos em 3; síndrome da angústia respiratória do adulto (S.A.R.A.) em 2; arritmia ventricular severa em 2; tromboembolismo pulmonar (T. E. P.) em 1. Nos pacientes aórtcos: coagulopatia e sangramento em 5; choque cardiogênico em 2; septicemia em 3; aneurisma micótico roto em 1; acidente vascular cerebral hemorrágico (A.V.C.H.) em 1; arritmia venticular em 1. Nos pacientes mitro-aórticos: coagulopatia e sangramento em 2; T.E.P. em 2; septicemia em 1; arritmia ventricular severa em 1; S.A.R.A. em 1. Encontramos como causas anatomopatológicas de óbito nos pacientes mitrais: choque hemorrágico em 13; falência de múltiplos órgaos em 4; choque séptico em 3; broncopneumonia (B.C.P.) em 4; infarto agudo do miocárdio (I.A.M.) em 3; choque cardiogênico em 3; hemorragia cerebral em 1; S.A.R.A. em 1. Nos pacientes aórticos: endocardite em 3; choque hemorrágico em 2; hemorragia cerebral em 2; I.A.M. em 1; choque cardiogênico em 1; septicemia em 1; S.A.R.A. em 1; dissecçao aguda de aorta com coagulopatia em 1. Nos pacientes mitro-aórticos: falência de múltiplos órgaos em 2; T.E.P. em 2; S.A.R.A. em 1; choque hemorrágico em 1; endocardite em 1. Concluímos haver correlaçao entre diagnóstico clínico e anatomopatológico em 36 pacientes, correspondendo a 82 por cento dos casos, sendo a principal causa de óbito o choque hemorrágico. Uma observaçao importante: ll (25 por cento) pacientes apresentavam alguma forma de hepatopatia crônica, nao diagnosticada anteriormente pelo estudo clínico-laboratorial, e que alguns pacientes que evoluíram em baixo débito. Nao explicado clinicamente, tiveram como achado anatomopatológico infarto subendocárdico.

Sizing of balloons in balloon mitral valvotomy.

In twenty six consecutive patients who underwent balloon mitral valvotomy (BMV) by the transseptal double balloon technique, the mitral valve area (MVA) increased from 0.78 +/- 0.1 cm2 to 1.80 +/- 0.3 cm2, (p < 0.001). Effective balloon dilating area (EBDA) of each combination of balloons used was calculated using a standard formula. Patients were classified into 4 subgroups with approximate EBDAs of 3.3, 4.0, 4.9 and 5.7 cm2 and they had mean post-BMV MVAs of 1.28, 1.78, 1.89 and 1.98 cm2 respectively (ANOVA F = 3.32, p < 0.05). Patients were reclassified after normalisation of EBDA and post-BMV MVA to square metre of body surface area. Three subgroups with mean normalised EBDAs of 2.32, 2.96 and 3.62 cm2/m2 had mean normalised post-BMV MVAs of 0.99, 1.17 and 1.40 cm2/m2 respectively (ANOVA F = 6.85, p 0.01). A trend towards increasing mitral regurgitation with increasing balloon size was noted. Three cases of mitral regurgitation including one case of severe mitral regurgitation occurred in the subgroup of 9 patients with largest normalised EBDAs. The overall correlation between normalised EBDAs and normalised post BMV MVA was strong r = 0.67, p < 0.01). The optimal normalised EBDA for Indian patients undergoing BMV is around 3.6 cm2/m2. Balloons used should be sized accordingly.

Area da valva mitral estenotica em gestantes portadoras de doenca reumatica: correlacao com o prognostico perinatal / Mitral valve stenosis and its correlation with the development of the conception product

Em um estudo prospectivo, 52 pacientes, divididas em 29 gestantes portadoras de estenose da valva mitral 23 gestantes normais sem intercorrencias clinicas foram acompanhadas durante o ciclo gravidico-puerperal por um obstetra e um cardiologista. As pacientes dos dois grupos foram submetidas a exames de ecocardiodopplergrafia em fases distintas de idade gestacional entre a vigesima quarta e vigesima oitava semanas e a trigesima segunda e trigesima sexta semanas, a fim de medir a area da valva mitral e sua correlacao com desenvolvimento do produto conceptual e as provaveis repercussoes perinatais advindas da patologia. Nao foram encontrados criterios numericos de correlacao entre tamanho da area mitral e os resultados perinatais. Os resultados perinatais do grupo patologico foram considerados bons, nao se registrando nenhuma morte perinatal ou materna. No entanto observamos a presenca de crescimento intra-uterino (31,03 por cento) quando comparado ao grupo controle (8,70 por cento). Permaneceu a indicacao de cirurgia cardiaca por interesse materno.