Avaliação da eficácia de diferentes protocolos de preparo do Plasma Rico em Plaquetas para uso em Medicina Equina / Evaluating the effectiveness of different protocols for preparation of platelet rich plasma for use in equine medicine

O Plasma Rico em Plaquetas (PRP) é um preparado do sangue total que contém diversos fatores de crescimento responsáveis pela proliferação e diferenciação celular, angiogênese, como também pelo aumento da produção da matriz extracelular. Nesse sentido, o objetivo do presente estudo foi testar 10 protocolos diferentes de centrifugação para obtenção de PRP a partir do sangue total de equinos hígidos. Para isso foram utilizadas 10 amostras de 27mL de sangue total de cinco animais, as quais foram centrifugadas conforme cada protocolo proposto. Os resultados revelaram que os protocolos com menor força de centrifugação relativa resultaram em maior (p<0,05) concentração de plaquetas e, que não houve (p>0,05) influência do tempo de centrifugação em relação a essa variável. A influência do tempo foi observada apenas no número de leucócitos em protocolos com menor força de centrifugação relativa (FCR). Os quatro melhores protocolos, que obtiveram as maiores concentrações de plaquetas, foram submetidos à análise pelo teste de ELISA para dosar a quantidade de TGF-β que não revelou diferença (p>0,05) entre os protocolos.

Platelet-rich plasma (PRP) is a prepared of the whole blood which contains several growth factors responsible for cellular proliferation and differentiation, angiogenesis, and for the increase of the extracellular matrix. Thus, the aim of this study was to test 10 different centrifugation protocols to obtain PRP from the whole blood of healthy equines. Ten samples of 27mL of the whole blood of 5 healthy equines were used, which were centrifuged in accordance to the proposed protocols. The results showed that the protocols with less relative centrifugation force resulted in greater (p<0,05) platelets concentration. Also, platelets concentration was not influenced by varying the time of centrifugation. However, time did affect the number of leukocytes in some protocols. The best four protocols were analyzed by ELISA test to quantitate the amount of TGF-β, which revealed no difference (p> 0.05) between the protocols.

Patogênese da nefropatia diabética: o papel das citocinas / Pathogenesis of diabetic nephropathy: citokines role

Os autores abordam a patogênese da nefropatia diabética (ND) em seus aspectos hemodinâmicos-renais e metabólicos, com ênfase na formaçäo da matriz extra celular (MEC). O aumento da pressäo capilar intra-glomerular é um fator patogenético bem estabelecido, mas seu mecanismo de lesäo, embora desconhecido, pode envolver distensäo glomerular, levando a um aumento da produçäo de MEC. Existe entretanto um efeito direto da glicose, observado em glomérulos in vitro, onde altas concentraçöes de glicose estimulam o aumento de síntese da MEC. Este efeito pode ser tanto direto, via ativaçäo da proteina quinase C, como indireto pela formaçäo de produtos de glicosilaçäo nao-enzimática ou pela ativaçao da via dos polióis. O TGF-beta (Transforming Growth Factor Beta) é uma citocina que promove aumento de síntese e a reduçäo da degradaçao da MEC, levando ao acúmulo desta. Aumentos dos níveis de RNAm para TGF-beta no glomérulo de ratos diabéticos já foram documentados nas fases iniciais da ND experimental e a presença de reaçäo imunohistoquímica para TGF-beta já foi detectada em ratos e em pacientes com ND estabelecida. O TGF-beta também regula, in vitro, o aumento de síntese de MEC induzido pela angiotensina II e pelo tromboxane A2. A IGF-1 (Insulin Growth Factor-1) pode ter papel significativo na hipertrofia renal diabética, enquanto que o TNF-alpha (Tumor Necrosis Factor) participa na regulaçäo do aumento da permeabilidade do endotélio glomerular. As demais citocinas (EGF, FGF, IL-1, PDGF e TGF-a) ainda precisam ser melhor estudadas.