Deradelphous Cephalothoracoomphalopagus in kittens: case report / Cefalotoraconfalopago derafelfo em gatos: relato de caso

The present report describes a case of conjoined twins of the cephalo-thoraco-omphalopagus deradelphous type in cats. A feline female was transferred to our veterinary hospital as an emergency for dystocic labor. The stillborn was subjected to radiographic evaluation, and a single skull and two complete distinct vertebral columns were found. Anatomopathological examination revealed that the twins presented the head, chest, and umbilicus as the main points of union and were classified as the cephalo-thoraco-omphalopagus type. In addition, the twins had unique and well-developed faces, which allowed them to be classified as deradelphous. This malformation is rare in domestic animals, and to the best of our knowledge, this type has not been reported in felines. Further studies are warranted on this embryonic alteration, primarily because its etiology remains unknown.(AU)

O presente relato descreve um caso de gêmeos siameses do tipo cefalotoraconfalopago deradelfo em gatos. Uma fêmea felina foi atendida na emergência do hospital veterinário em trabalho de parto distócico. Os natimortos foram encaminhados para avaliação radiográfica e constatou-se que apresentavam um único crânio e duas colunas vertebrais completas e distintas. O exame anatomopatológico evidenciou que os gêmeos possuíam cabeça, tórax e umbigo como principais pontos de união, sendo classificados como cefalotoraconfalopago. Além disso, os gêmeos apresentaram face única e bem desenvolvida, o que permitiu classificá-los como deradelfos. Esse tipo de malformação é raro em animais domésticos, e não foi encontrado nenhum trabalho em felino com a mesma classificação do presente relato. Há necessidade de mais estudos sobre essa alteração embrionária, pois a etiologia do processo ainda não foi esclarecida.(AU)

Viabilidad de Ovocitos Vitrificados y Madurados in Vitro de Gata Doméstica Adulta (Felis catus) en Estación Reproductiva / Vitrified and in Vitro Matured Oocytes Viability from Adult Housecat (Felis catus) in Reproductive Season

La vitrificación de ovocitos de mamíferos es considerada una técnica en experimentación. La supervivencia de los ovocitos es extremadamente variable, según las técnicas utilizadas e influida por una serie de condiciones. El objetivo de éste trabajo fue determinar los efectos de la vitrificación en ovocitos de gata domestica adulta en estación reproductiva y madurados in vitro. Se obtuvieron 33 ovarios correspondientes a hembras de más de un año en buen estado nutricional y sin tratamiento hormonal, ovariectomizadas en domicilio del propietario por profesional veterinario. Los ovarios fueron trasladados al laboratorio y se fragmentaron por microdisección bajo microscopio estereoscópico en caja de Petri con solución de buffer fosfato salino modificado con suero de ternero inactivado y antibióticos para la obtención, evaluación y selección de los complejos cúmulo-ovocitos (CCOs) de buena calidad. Se vitrificaron 506 CCOs en pajuelas de 0.25 ml con 10-12 ovocitos cada una y almacenados por 30 días en nitrógeno líquido (N2) a -196 C. Posteriormente se desvitrificaron las pajuelas, recuperándose 320 CCOs, los que fueron madurados in vitro. Transcurrido ese tiempo se evaluaron los CCOs, descartándose 50 por presentar signos de degeneración. En los 270 restantes se observó buena expansión del cúmulo, citoplasma uniforme y oscuro e integridad de la zona pelúcida. A estos últimos se los dividió en dos grupos similares para evaluar la viabilidad, a uno se lo coloreó con metil tiazol tetrazolio y al otro con Azul Tripán. En ambos se constató un resultado positivo para la viabilidad de los CCOs. El análisis de los resultados nos permite concluir que la vitrificación comprometió la integridad de un importante número de CCOs aunque más del 50% respondió en cultivo favorablemente, mostrando signos de viabilidad esperados. Estos resultados hacen necesarios la profundización en el mejoramiento del protocolo para incrementar el porcentaje de viabilidad.

Vitrification of mammalian oocytes is a technique considered in experimentation. Oocyte survival is extremely variable, according to the techniques used and influenced by a number of conditions. The objective of this study was to determine the effects of adult domestic cat oocyte matured in vitro and vitrified in breeding season. We obtained 33 ovaries from housecats in good nutritional status without hormonal treatment, ovariectomized by a veterinary professional at home. The ovaries were transported to the laboratory and fragmented by microdissection under a stereoscopic microscope in a petri dish with modified buffer saline phosphate solution, inactivated calf serum and antibiotics to the collection, evaluation and selection of good quality cumulus-oocyte complexes (COCs). 506 COCs were vitrified in 0.25 ml straws each with 10­12 oocytes and stored for 30 days in liquid nitrogen (N2) at -196 °C. Then the straws were thawed, recovering 320 CCOs, which were matured in vitro. After this time the COCs were evaluated, discarding 50 which showed signs of degeneration. In the remaining 270 COCs good cumulus expansion was observed and also uniformly dark cytoplasm and integrity of the zona pellucida. The latter were divided into two similar groups to assess the feasibility; one was stained with Methylthiazblyl tetrazolium and the other with Trypan Blue. Both tested positive for the viability of the CCOs was found. The analysis of the results allow us to conclude that vitrification compromised the integrity of a large number of CCOs although more than 50% responded favorably in culture, showing signs of expected viability. According to these results it is necessary to further improve the protocol to increase the percentage of viability.

Caracterización de estadios del desarrollo embrio-fetal, vesícula coriónica y de placenta en la gata doméstica (Felis catus) mediante método ecográfico / Characterization of stages of embrio-fetal, chorionic vesicle and placenta development in the domestic cat (Felis catus) by ultrasonography

La ecografía es uno de los métodos de diagnóstico gestacional más utilizados, que permite confirmar una gestación temprana y realizar seguimientos del desarrollo embrio-fetal. En este estudio se emplearon 10 gatas gestantes, entre 10 meses a 6 años de edad, con fecha de cruza conocida. Se realizaron exámenes ecográficos seriados en los días 15 (estadio 1), 18 (estadio 2), 21 (estadio 3), 38 (estadio 4), y 45 (estadio 5) de gestación para medir parámetros biométricos. Vesícula coriónica: diámetro transversal (DTVC), diámetro longitudinal (DLVC); Placenta: grosor (GP); Feto: longitud céfalo-caudal (LCC), diámetro toraco-abdominal (DTA), diámetro cefálico (DC), tomándose un registro fotográfico de cada estadio. En el estadio 1, no se logró visualizar el embrión. En el estadio 2, el embrión se observó cercano a la pared midiendo en promedio 4,7 milímetros de LCC, el tubo endocárdico se observó funcional. En el estadio 3, se observó el cordón umbilical, pero resultó difícil distinguir los diferentes órganos, excepto el corazón, debido al movimiento causado por sus latidos. En el estadio 4, el feto adquiere movimientos, se observó órganos como el encéfalo, pulmones, el tabicamiento del corazón, diafragma, hígado, estómago, asas intestinales, vejiga y la osificación de huesos. Se observó la flexión de los miembros. En los miembros anteriores se visualizaron los dedos separados, con garras y cojinetes plantares. En el estadio 5, además de las características observadas en el estadio anterior, los riñones muestran la corteza y médula, las cámaras del corazón se visualizaron claramente. Se realizó una correlación lineal entre los parámetros biométricos estudiados y los resultados dieron valor significativo (p<0,0001) para la mayoría de éstos. Se logró caracterizar los estadios gestacionales estudiados. Siete de las diez gatas presentaron una gestación normal, mientras que una de ellas presentó en uno de sus fetos una malformación congénita y en las otras dos gatas se presentó muerte embrio-fetal.

Ultrasound is one of the most widely used methods for gestational diagnosis, allowing the detection of early pregnancy and evaluation of fetal growth and development. Ten pregnant cats (aged 10 months to-6 years) were used in this study, with known dates of mating. Serial ultrasound testings were performed on days 15th (stage 1), 18th (stage 2), 21st (stage 3), 38th (stage 4) and 45th (stage 5) of gestation, to measure biometric parameters (Chorionic vesicle: transverse diameter (DTVC), longitudinal diameter (DLVC); Placenta: thickness (GP); Fetus: cephalocaudal length (LCC), thoraco-abdominal diameter (DTA), cephalic diameter (DC). Photographic records were made at each stage. In stage 1, it was impossible to visualize the embryo. In stage 2, the embryo was observed near the wall measuring 4.7 mm on average LCC, and the endocardial tube was functioning. In stage 3, the umbilical cord was observed, but it was difficult to distinguish different organs, with the exception of the heart, which was detected by heartbeat movements. In stage 4, the fetus begins to move. Organs, such as the brain, lungs, heart septation, diaphragm, liver, stomach, bowel, bladder and bone ossification were observed. In the forelimbs, fingers apart with claws and footpads were visualized. In stage 5, in addition to the features observed in the previous stage, the kidneys show the cortex and medulla, and the heart chambers are clearly visualize. A linear correlation analysis among the biometric parameters was performed. Results were statistically significant for most parameters studied (p<0.0001). We characterized the gestational stages studied. Out of the ten cats studied, seven cats had a normal pregnancy. One cat showed one congenitally malformed fetus, and one fetal death occurred in the other two cats.

The seasonal and ovarian status effects on in vitro production of domestic cat embryos between Equator and Tropic of Capricorn / Efeitos da sazonalidade e da condição ovariana sobre a produção in vitro de embriões de gatos domésticos em uma região entre o Equador e o Trópico de Capricórnio

From the Tropic of Capricorn to Equator, the seasonality of domestic cat is known to be absent, i.e., these animals are considered non-seasonal breeders at these regions. We hypothesized that this particularity might have some influence on in vitro embryo production. The aim of this experiment was to determine the percentage of cleavage and morulae and blastocyst formation produced from oocytes recovered from queen ovaries of three distinct status - follicular, luteal or inactive - during two different reproductive seasons experienced by cats in southeast of Brazil (22°53'09" S and 48°26'42" W) - non breeding season (NBS), comprehending January to March; and breeding season (BS), August to October. Thirty queens were neutered. [...] During NBS, from a total of 272 (inactive), 162 (luteal) and 134 (follicular) fertilized oocytes, the percentage of cleaved zygotes, morulae and blastocysts derived from inactive ovaries were 24.63, 16.54 and 8.09 respectively; for those derived from luteal ovaries, the percentage was 21.6, 12.96 and 8.64, and for those from follicular ovaries, they were 24.62, 16.41 and 8.21. Considering BS, from a total of 102 (inactive), 198 (luteal) and 86 (follicular) fertilized oocytes, the relative frequency (%) of cleaved zygotes, morulae and blastocysts derived from inactive ovaries were 64.7, 41.17 and 23.53 respectively; for those derived from luteal ovaries, the percentage was 64.14, 40.41 and 23.73, and for those from follicular ovaries, they were 63.95, 39.54 and 24.41. The results of this experiment demonstrate that no statistically significant difference (P<0.05) was verified in the frequency of cleaved embryos and morulae and blastocyst formation when comparing the three ovarian conditions in the same season. However the breeding season presented better results considering cleavage and morulae and blastocyst formation.

Do Trópico de Capricórnio ao Equador, sabe-se que a sazonalidade no gato domestico é ausente, i.e., estes animais são considerados reprodutores não sazonais nestas regiões. [...] O objetivo deste experimento foi determinar a porcentagem de clivagem e formação de mórulas e blastocistos produzidos a partir de oócitos recuperados de ovários de gatas em três condições - folicular, lútea ou inativa - durante duas estações reprodutivas pelas quais gatas passam na região sudeste do Brasil (22°53'09" S e 48°26'42" O) - estação não reprodutiva (ENR), que compreende os meses de janeiro a março; e estação reprodutiva (ER), agosto à outubro. Trinta gatas foram castradas. [...] Durante a ENR, de um total de 272 (inativo), 162 (lútea) e 134 (folicular) oócitos fertilizados, a porcentagem de clivagem de zigotos, formação de mórulas e de blastocistos derivados de ovários inativos foi 24,63, 16,54 e 8,09 respectivamente; para aqueles oriundos de ovários na condição lútea, a porcentagem foi de 21,6, 12,96 e 8,64, e para aqueles provenientes de ovários na fase folicular, foi de 24,62, 16,41 e 8,21. Considerando a ER, de um total de 102 (inativo), 198 (lútea) e 86 (folicular) oócitos fertilizados, a frequência relativa (%) de zigotos clivados, mórulas e blastocistos derivados de ovários na condição inativa foi de 64,7, 41,17 e 23,53 respectivamente; para aqueles oriundos de ovários na condição lútea, a porcentagem foi de 64,14, 40,41 e 23,73, e para aqueles provenientes de ovários na fase folicular, foi de 63,95, 39,54 e 24,41. Os resultados deste experimento demonstraram que não houve diferença estatística significante (P < 0.05) na frequência de embriões clivados e na formação de mórulas e blastocistos quando comparadas as três condições ovarianas dentro da mesma estação. Entretanto, a ER apresentou resultados melhores considerando as taxas de clivagem e formação de mórula e de blastocisto se comparada à ENR.

Análisis Macroscópico y Microscópico del Desarrollo Embrionario y Fetal en el Gato (Felis catus), en Relación con el Desarrollo de la Vesícula Coriónica y de la Placenta / Macroscopic and Microscopic Analysis of the Embryonic and Fetal Growth in the Cat (Felis catus), in Relation to Chorionic Vesicle and Placental Development

La gata doméstica (Felis catus) presenta una gestación que dura, en promedio 62 + 5 días. Sin embargo, establecer la edad gestacional en forma más o menos precisa resulta difícil, ya que no existe un análisis que correlacione el tamaño de la vesícula coriónica; desarrollo de la placenta; desarrollo embrionario y Fetal durante la gestación. En este trabajo se utilizaron 12 úteros grávidos, provenientes de gatas mestizas entre 8 y 18 meses de edad, éstos fueron fijados en formol neutro al 10%. Para cada útero se determinó el número de vesículas coriónicas, de cada una se removieron el embrión, feto y la placenta, los que fueron medidos, tarados y fotografiados para su análisis morfológico. Las etapas del desarrollo embrionario y Fetal fueron establecidas conforme a las características y estructuras externas de los embriones y fetos, desde el inicio hasta el término de la gestación. A los 13 días de gestación se observó una gástrula tardía. Embriones somíticos, entre los 13 y 18 días. Embriones prefetales, entre los 18 y 28 días, y fetos desde el día 28 hasta el nacimiento. El amnios se cierra a los 17 días; la formación de la cara y cuello ocurre entre los 16 y 28 días, y de los miembros, entre los 17 y 28 días de gestación. A los 15 días de gestación comienza el latido cardiaco, momento en que se observa el tubo endocárdico. El tabicamiento del corazón se produce entre los 17 y 20 días. El tubo neural está cerrado a los 17 días de gestación. Todos los parámetros estudiados en los diferentes estadios del desarrollo en el gato están significativamente correlacionados (p < 0.0001).

The domestic cat (Felis catus) presents a gestation that lasts 62 ± 5 days. However, gestational age determination in a more precise way is difficult, as there are no analysis that correlate chorionic vesicle size; placental development; embryonic and Fetal development during gestation. In this work 12 gravid uteruses from hybrid cats between 8 and 18 months of age were studied; these were fixed in 10% neutral formaldehyde. For each uterus the chorionic vesicles number was determined. The embryos, fetuses and placenta were removed, measured, weighed and photographed for morphologic analysis. The embryonic and Fetal stages of development were determined according to the external characteristics and structures of the embryos or fetuses, from gastrulation to term. At 13 days of gestation a late gastrula was observed; between days 13 and 18, somitic embryos; between days 18 and 28, prefetal embryos; and fetuses from day 28 until birth. The amnion is closed by day 17; differentiation of the facial region occurs between days 16 and 28, while limb development takes place between days 17 and 28. At 15 days of gestation the heart begins to beat and the endocardial tube is observed. Septation of the heart occurs between days 17 and 20 and the neural tube is closed by day 17. All parameters studied in the different developmental stages in the cat are significantly correlated (p < 0.0001).

Embriogénesis del área mandibular en oveja y gato / Embryonic development of mandibule in sheep and cat

Se describe en forma comparada la ontogenia del cartílago del primer arco faríngeo y su relación con la formación de la mandíbula, en dos especies: oveja y gato, que presentan diferencias fenotípicas y funcionales a nivel de ese carácter. Se utilizó una muestra de 18 embriones y fetos felinos con un desarrollo entre 20 y 48 días de gestación y 12 fetos ovinos de 27 a 45 días. Un grupo de embriones fue procesado con la técnica de doble tinción "in toto" con alizarina y azul de Alcian, y el otro grupo fue analizado con técnica histológica corriente: hematoxilina eosina-azul de Alcian. En ovinos de 31 a 35 días y felinos de 32 a 39 días, se observa el cartílago diferenciado en sínfisis, centro o cuerpo y componente caudal. Los primeros componentes evidenciaron diferencias entre ambas especies. En la oveja, el centro del cartílago del primer arco no sufre osificación endocondral. La sínfisis mantiene el diámetro y se prolonga para formar el proceso rostral que promueve el crecimiento de la mandíbula. En gatos, la sínfisis es poco desarrollada y la parte anterior del centro del cartílago sufre osificación ondocondral, la que aumenta la distancia transversa entre las mandíbulas derecha e izquierda. Las diferencias encontradas en la estructura del cartílago de Meckel y su diferenciación posterior estarían relacionadas con la forma definitiva de la mandíbula en ovinos (dolicocefálicos) y en felinos (braquiocefálicos).

Embriogénesis del área clavicular en oveja (ovis aries) y gato (felis catus) / Embryogenesis of clavicle area in sheep (ovis aries) and cat (felis catus)

La forma y complejidad de la clavícula varía en las distintas especies animales: es máxima en aquellas que vuelan o mantienen una posición bípeda y reducida o no existe en las que se apoyan y desplazan sobre sus cuatro miembros. Se estudió la evolución prenatal del área clavicular en felinos: animales con clavícula afuncional y ovinos que no presentan este carácter. Se realizó un estudio morfológico y morfométrico computacional de la clavícula en 12 embriones y fetos felinos entre 25 y 48 días de gestación y 6 embriones y fetos ovinos de 37 a 45 días. En ambas especies se detectó un desplazamiento en el inicio de la osificación clavicular (27 por ciento de gestación transcurrida en ovino y 53 por ciento en felinos) lo cual es tardío en comparación con el 16 por ciento de la especie humana. La forma y longitud de la clavícula es diferente en las dos especies, su presencia es efímera en ovinos, en cambio, en el gato se mantiene con pocos cambios. Ninguna de las dos desarrolla cartílagos secundarios. Si bien especies tendrían información genética para desarrollar este caracter, su aparición heterocrónica en relación a las especies claviculados, sumado a la falta de formación de cartílagos secunadarios serían responsables de la involución que la lleva a mantener una presencia vestigial o su regresión definitiva