In vitro ANTIGIARDIAL ACTIVITY OF THE CYSTEINE PROTEASE INHIBITOR E-64 / Atividade in vitro do inibidor de cisteína-proteases E-64 sobre trofozoítos de Giardia

The quest for new antiparasitic alternatives has led researchers to base their studies on insights into biology, host-parasite interactions and pathogenesis. In this context, proteases and their inhibitors are focused, respectively, as druggable targets and new therapy alternatives. Herein, we proposed to evaluate the in vitro effect of the cysteine protease inhibitor E-64 on Giardia trophozoites growth, adherence and viability. Trophozoites (105) were exposed to E-64 at different final concentrations, for 24, 48 and 72 h at 37 °C. In the growth and adherence assays, the number of trophozoites was estimated microscopically in a haemocytometer, whereas cell viability was evaluated by a dye-reduction assay using MTT. The E-64 inhibitor showed effect on growth, adherence and viability of trophozoites, however, its better performance was detected in the 100 µM-treated cultures. Although metronidazole was more effective, the E-64 was shown to be able to inhibit growth, adherence and viability rates by ≥ 50%. These results reveal that E-64 can interfere in some crucial processes to the parasite survival and they open perspectives for future investigations in order to confirm the real antigiardial potential of the protease inhibitors.

As cisteína-proteases estão entre os alvos mais promissores para o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos, visto que participam de eventos fundamentais do ciclo de vida de muitos microorganismos, inclusive Giardia. Como a atividade das proteases pode ser controlada por inibidores específicos, essas substâncias têm sido avaliadas quanto ao potencial antiparasitário. Diante disso, o presente estudo teve por objetivo avaliar o efeito in vitro do inibidor de cisteína-proteases E-64 sobre o crescimento, a aderência e a viabilidade de trofozoítos de cepa de Giardia isolada em Botucatu. Nos ensaios de crescimento e aderência, o número de trofozoítos foi estimado microscopicamente em hemocitômetro, enquanto que a viabilidade celular foi avaliada pelo método do MTT. No presente estudo, embora o metronidazol tenha se apresentado bastante efetivo, o E-64 mostrou ser capaz de inibir o crescimento, a aderência e a viabilidade em taxas superiores a 50%, especialmente nos cultivos expostos à concentração de 100 µM. A despeito de preliminares, esses resultados demonstram que o inibidor E-64 pode interferir em processos primordiais para a sobrevivência do parasita, além do que, abrem novas perspectivas para investigações futuras a fim de se avaliar o real potencial giardicida dos inibidores de proteases.

Secnidazol en el tratamiento de la giardiasis / The use of Secnidazol in the treatment of giardiasis

Se emplea el secnidazol en un prueba terapéutica en 60 pacientes con giardiasis a una dosis de 20 mg/kg/día. Los síntomas que predominaron fueron la dispepsia (53 por ciento ), urticaria (32 por ciento ) y diarrea (18 por ciento ). La toleracia a la droga fue satisfactoria. En 75 por ciento de los pacientes se demostró la desaparición de los trofozoítos y quistes de Giardia lamblia

Ensayo terapéutico con un preparado a base de propoleo propolisina en la giardiasis del humano

Se presentaron los resultados de un ensayo clínico con un preparado a base de propóleo (sustancia elaborada por las abejas) o "Propolisina", con el objeto de demostrar su efectividad como antigiardiásico. Se estudiaron 138 pacientes (48 niños y 90 adultos, en dos grupos) seleccionados aleatoriamente para ser tratados con "Propolisina" o un derivado imidazóilico (tinidazol). El método para el diagnóstico de certeza usado en los niños fue el aspirado duodenal, y en los adultos el frotis de mucosa duodenal, mediante la duodenoscopía. Se utilizaron estudios similares como critério de curación, realizados en un término menor de cinco días después de finalizado el tratamiento. La Propilisina se utilizó con diferentes concentraciones: en los niños -concentración al 10% -los resultados mostraron una curación de un 52%. En 40 adultos, con una concentración del 20%, se obtuvo una eficacia similar a la del Timidazol; al elevar la concentración de la Propolisina al 30% en los restantes 50 pacientes, hubo una mayor efectividad -60% de curación vs. 40% con el tinidazol-. Este trabajo demuestra la utilidad de este producto natural, de fácil obtención en Cuba y sin reacciones secundarias, en el tratamiento de este parasitismo intestinal, lo que resulta de gran trascendencia económica para nuestros pueblos