Aplicación de una cámara de flujo para el análisis de la aglutinación eritrocitaria mediada por anticuerpos monoclonales / Application of the flow chamber technique to the analysis of the erythrocyte agglutination mediated by monoclonal antibodies

El conocimiento de la energía involucrada en las interacciones célula-célula tiene importantes implicaciones en las ciencias biológicas y médicas. Los glóbulos rojos se adhieren entre si cuando macromoléculas específicas o no específicas (aglutininas) enlazan células adyacentes de manera irreversible o reversible. La técnica de la cámara de flujo fue utilizada para evaluar la afinidad de un anticuerpo monoclonal analizando la disociación de un doblete (dos células aglutinadas por el anticuerpo) determinando la energía de adhesión. Esta técnica permite aplicar una tensión de corte uniforme paralela a la interfase de adhesión de un aglutinado de dos células fijado sobre la superficie inferior de un microcanal. La tensión produce el desprendimiento progresivo de la célula superior del doblete. La observación microscópica de la separación producida en el aglutinado aislado y la obtención de imágenes secuenciales con una cámara CCD (Charged Coupled Device), permite determinar la relación entre la tensión de corte aplicada (sigma) y el porcentaje de separación de las células del doblete. A partir de estos resultados calculamos la energía de disociación por unidad de área membranal adherida(gamma d), valor igual a 8.92 x 10 elevado a -19 N.cm por moléculas de anticuerpo. Del análisis de los resultados, se concluye que la tensión de corte necesaria para disociar el doblete es proporcional a la densidad superficial de moléculas de anticuerpo y a la densidad antigénica de los eritrocitos.

Partial characterization of hemagglutinin activity of the marine sponge Anthosigmella varians

The marine sponge Anthosigmella varians contains proteins that agglutinate human erythrocytes irrespective of their ABO group antigens. The hemagglutination reaction depends on divalent cations andf is not inhibited by L-arabinose, D-xylose, L-rhamnose, D-galactose, D-glucose, L and D-fucose, N-acetyl-D-galactosamine, N-acetyl-D-glucosamine, methyl-alpha-Dmannopiranoside, D-cellobiose, lactose, maltose, melibiose nor raffinose (33 mM each). A partial purification of the hemagglutinins with 31-fold ioncrease in SA and 80% recovery of activity was obtained after gel filtration and ion-exchange gradient elution chromatography. Hemadsorption experiments carried our with out with the semipurified fraction using glutaraldehyde-fixed human erythrocytes suggest that protein with molecular weight of 90 and 34 kDa participate in this rection

Efectos de la coccion tradicional sobre los factores antinutricionales de los frijoles negros (Phaseolus vulgaris) de Costa Rica / Effects of the traditional cooking on antinutritional factors of the black beans (Phaseolus vulgaris) of Costa Rica

En esta investigación se determinó la presencia de los inhibidores de tripsina, inhibidores de alfa amilase y hemaglutininas en los frijoles (P. vulgares) producidos en Costa Rica. Además, se estudió su comportamiento ante la cocción tradicional. Los factores antinutricionales se determinaron por espectofotometría en los frijoles crudos, y después de diferentes tiempos de cocción. Se observó que los inhibidores de alfa amilase son los más termorresistentes, ya que a los 30 min de cocción existe un 33% de la actividad inicial presente en el frijol crudo. Alrededor del 80% de la actividad antitripsina ha desaparecido de los 9 min de cocción. En cuanto a las hemaglutininas, a los 10 min la actividad es aproximadamente sólo de 1%

The distribution of agglutinins and lytic activity against Trypanosoma rangeli and erythrocytes in Rhodnius prolixus and Triatoma infestans tissue extracts and haemolymph

Haemolymph, heads, salivary glands, crops, midguts, hindguts, and Malpighian tubules from Rhodnius prolixus and Triatoma infestans were extracted in phosphate or Tris buffer saline with calcium, and tested for agglutination and lytic activities by microtitration against both vertebrateerythrocytes and cultured epimatigote forms of Trypanosoma rangeli. Haemagglutination activity against rabbit erythrocytes was found in the crop, midgut and hindgut extracts of T. infestans but only in the haemolymph of R. prolixus. Higher titres of parasite agglutinins were found in R. prolixus haemolymph than T. infestans, whilst the converse occurred for the tissue extracts. In addition, the extracts of T. infestans salivary glands, but not those of R. prolixus, showed a trypanolytic activity that was heat-inactivated and was not abolished by pre-incubation with any of the sugars or glycoproteins tested. T. infestans, which is refractory to infection by T. rangeli, thus appears to contain a much wider distribution of agglutinating and trypanolytic factors in its tissues than the more susceptible species, R. prolixus