Estudio retrospectivo de la aplicación de la amplificación génica cualitativa en muestras biológicas para el seguimiento de la toxoplasmosis en pacientes pediátricos receptores de trasplante de células progenitoras hematopoyéticas / Retrospective study of the implementation of the qualitative PCR technique in biological samples for monitoring toxoplasmosis in pediatric patients receiving hematopoietic stem cell transplantion

La toxoplasmosis es una infección oportunista causada por el parásito Toxoplasma gondii; su infección es grave y de difícil diagnóstico en pacientes que reciben un trasplante alogénico de células progenitoras hematopoyéticas (TCPH). En el Hospital de Pediatría S.A.M.I.C. "Profesor Dr. Juan P. Garrahan" se realizó la vigilancia postrasplante de 12 pacientes receptores de TCPH mediante la técnica de PCR cualitativa. La necesidad de seguimiento de estos pacientes fue definida por el antecedente de serología positiva para toxoplasmosis en el donante o receptor y ante la imposibilidad de iniciar el uso profiláctico de trimetoprima-sulfametoxazol a causa de la condición hematológica. Dos pacientes presentaron signos de enfermedad por T. gondii con resultado de PCR positivo y recibieron tratamiento con pirimetamina-clindamicina. En otros dos, la toxoplasmosis fue causa de muerte y hallazgo de autopsia, con resultado de PCR negativo. Cuatro pacientes recibieron tratamiento contra toxoplasmosis por la detección de una PCR positiva, sin manifestaciones clínicas. En los cuatro pacientes restantes no se detectaron signos de enfermedad por toxoplasmosis, con resultados de PCR negativos durante el seguimiento. La técnica de PCR cualitativa demostró ser útil para detectar la reactivación de la toxoplasmosis en receptores de TCPH, pero tiene limitaciones para el seguimiento y la toma de decisiones clínicas en pacientes con PCR positiva que persiste en el tiempo y manifestaciones de toxicidad por el tratamiento.

Toxoplasmosis is an opportunistic infection caused by the parasite Toxoplasma gondii. The infection is severe and difficult to diagnose in patients receiving allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). Twelve patients receiving HSCT were monitored post-transplant, by qualitative PCR at the Children's Hospital S.A.M.I.C. "Prof. Dr. Juan P. Garrahan". The monitoring of these patients was defined by a history of positive serology for toxoplasmosis in the donor or recipient and because their hematologic condition did not allow the use of trimethoprim-sulfamethoxazole for prophylaxis. During the patients' monitoring, two of them with positive PCR results showed signs of illness by T. gondii and were treated with pyrimethamine-clindamycin. In two other patients, toxoplasmosis was the cause of death and an autopsy finding, showing negative PCR results. Four patients without clinical manifestations received treatment for toxoplasmosis because of positive PCR detection. In four patients there were no signs of toxoplasmosis disease and negative PCR results during follow-up. The qualitative PCR technique proved useful for the detection of toxoplasmosis reactivation in HSCT recipients, but has limitations in monitoring and making clinical decisions due to the persistence of positive PCR over time and manifestations of toxicity caused by the treatment.

Primer aislamiento de Histoplasma capsulatum de murciélago urbano Eumops bonariensis / First isolation of Histoplasma capsulatum from the urban bat Eumops bonariensis

Se comunica el primer aislamiento de Histoplasma capsulatum var. capsulatum de un murciélago macho de la especie Eumops bonariensis, capturado en la ciudad de Buenos Aires en 2003. Los aislamientos fueron recuperados de bazo e hígado e identificados fenotípicamente. Se los comparó por PCR, con 17 aislamientos clínicos, 12 de pacientes residentes en la ciudad de Buenos Aires y cinco de otros países de América, usando los iniciadores 1283, (GTG)5, (GACA)4 y M13. Con los cuatro iniciadores, los perfiles de los aislamientos de murciélago resultaron idénticos entre sí y más relacionados a los de pacientes de Buenos Aires que a los de otros países (porcentaje de similitud: 91-100% y 55-87%, respectivamente). La alta relación genética entre los aislamientos obtenidos del murciélago y de los humanos residentes en Buenos Aires sugiere una fuente común de infección. Este es el primer registro de E. bonariensis infectado con H. capsulatum en el mundo, y el primer aislamiento del hongo en la población de quirópteros de la Argentina. Así como estos mamíferos actúan como reservorio y dispersan el hongo en la naturaleza, la infección en murciélagos urbanos podría asociarse al elevado número de casos de histoplasmosis entre pacientes inmunodeprimidos en la ciudad de Buenos Aires.

We report the first isolation of Histoplasma capsulatum var. capsulatum from a male bat Eumops bonariensis captured in Buenos Aires city in 2003. The pathogen was recovered from spleen and liver specimens, and was identified by its phenotypic characteristics. PCR with primers 1283, (GTG)5, (GACA)4 and M13 was used to compare both bat isolates with 17 human isolates, 12 from patients residing in Buenos Aires city, and 5 from other countries of the Americas. The profiles obtained with the four primers showed that both bat isolates were identical to each other and closer to Buenos Aires patients than to the other isolates (similarity percentage: 91-100% and 55-97%, respectively). The high genetic relationship between bat isolates and those from patients living in Buenos Aires suggests a common source of infection. This is the first record of E. bonariensis infected with H. capsulatum in the world, and the first isolation of the fungus in the Argentinean Chiroptera population. In the same way as these wild mammals act as reservoir and spread the fungus in the natural environment, infection in urban bats could well be associated with the increase in histoplasmosis clinical cases among immunosuppressed hosts in Buenos Aires city.

Infecciones oportunistas en el síndrome de inmunodeficiencia adquirida: La historia en México a 20 años del inicio de la epidemia / Opportunistic infections in the acquired inmunodeficiency syndrome: the history in Mexico 20 years after the begining of the epidemic

Las infecciones oportunistas (IO's) complican la evolución de los pacientes VIH-positivos. Se han observado diferencias regionales en la incidencia y en la prevalencia de las IO's en los pacientes con SIDA en relación con deficiencias inmunológicas, factores ambientales y a las condiciones socioeconómicas y sanitarias en el entorno de estos pacientes. Al inicio de la epidemia, la incidencia global de IO's alcanzó entre 60 y 100% de los pacientes VIH-positivos. Posteriormente, la incidencia de tuberculosis, de enteropatógenos, de Pneumocystis jiroveci y de Mycobacterium avium ha disminuido en el hemisferio occidental debido a la profilaxis farmacológica, a la mejoría en la atención médica y a la introducción de la terapia antirretroviral. Este fenómeno ha sido más obvio en Estados Unidos, en Europa occidental y en la mayoría de los países de América Latina. Al inicio de la epidemia de VIH, la frecuencia de las diferentes IO's en México fue similar en todos los reportes clínicos, la mayoría de los casos mostraban candidiasis mucocutánea o esofágica seguida por neumonía por P. jiroveci y enteritis por Cryptosporidium sp. Recientemente, se ha observado un incremento en el número de episodios de retinitis por CMV y de infección diseminada por M. avium como consecuencia de la sobrevida más prolongada de los pacientes VIH-positivos. En conclusión, las tasas de morbilidad y de mortalidad en los pacientes VIH-positivos han disminuido como resultado de la mejoría de la atención en el cuidado de estos pacientes, la aplicación de medidas de prevención específicas para IO's y más recientemente por la introducción de terapia antirretroviral muy activa.

Opportunistic infections (OI's) complicate the outcome of HIV-positive patients. There have been observed regional differences in the incidence and the prevalence of OI's in AIDS patients secondary to immunological deficiencies, environmental factors and socioeconomic and sanitary conditions. At the beginning of the epidemic, the global incidence of OI's in HIV-positive patients was between 60 and 100%. Later, the incidence of tuberculosis, intestinal pathogens, Pneumocystis jiroveci and Mycobacterium avium has decreased in the western hemisphere, because of the pharmacological prophylaxis, the improvement in the medical care and the introduction of the antiretroviral therapy. This phenomenon has been more evident in the United States, in Western Europe, and most Latin American countries. At the beginning of the HIV epidemic, the frequency of the different OI's in Mexico was similar among all the clinical reports; the majority of the cases showed mucocutaneous or esofagic candidiasis, followed by P. jiroveci pneumonia, and Cryptosporidium sp. enteritis. Recently, we have seen an increased in the number of episodes of CMV retinitis and M. avium disseminated infection as evidence of a prolonged survival of the HIV-positive patients. In conclusion, the morbidity and mortality rates in the HIV-positive patients have diminished as a result of the improvement of the medical care, the application of specific IO's prevention measures and more recently to the introduction of HAART. KEY WORDS. AIDS. HAART. Pneumocystis jiroveci. Mycobacterium avium. Toxoplasma gondii. Opportunistic infections.

Utilidade da investigaçäo rotineira de infecçäo fúngica pela broncoscopia em pacientes infectados ou näo pelo HIV em um hospital geral, referência para SIDA / Usefulness of routine investigation of fungal infection through bronchoscopy in patients HIV-infected or not in a general hospital, reference to AIDS

Avaliamos a frequência de fungos nos materiais de broncofibroscopia em pacientes infectados ou näo pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV), quais as espécies de fungos mais encontradas e se a infecçäo pelo HIV alterava o perfil destes fungos. Foram revistas 1943 broncofibroscopias realizadas em hospital de referência para SIDA, no período de 1990-1995. Deste total, 47 por cento foram realizadas em pacientes HIV positivos e 53 por cento em HIV negativos. Dos 908 HIV positivos, 38 (4 por cento) tiveram diagnóstico de micose pulmonar enquanto que dos 1035 HIV negativos, somente 4 (0,2 por cento) tiveram tal diagnóstco (p < 0,001). O diagnóstico de histoplasmose e criptococose predominou no grupo soropositivo para o HIV (p < 0,001). A paracoccidioidomicose foi diagnosticada em três pacientes näo infectados pelo HIV. O estudo mostrou que, embora a positividade da pesquisa de fungos nestes materiais tenha baixo percentual de positividade, o grupo soropositivo para o HIV parece se beneficiar desta pesquisa rotineira

Is Pneumocystis carinii vertically transmitted to neonatal rats?

Pneumocystis carinii is a pulmonary pathogen of immunocompromised humans or other mammals. Its infection results from activation of organisms involved in latent infection or from new infection through the air. Almost all children are known to be infected within 2 to 4 years of birth, though prenatal transplacental transmission has not yet been demonstrated. In this study we observed experimental P. carinii infection in neonatal rats, thus investigating the possibility of transplacental vertical transmission by Diff-Quik staining of the lung impression smears and in-situ hybridization for lung sections. The positive rate of P. carinii infection in immunosuppressed maternal rats was 100%, but that in normal maternal rats was 0%. Cystic forms of P. carinii were observed in three of six 1-week old neonatal rats born of heavily infected mothers, but none of them was positive by in-situ hybridization. Five weeks after birth, cystic forms were detected in four neonatal rats. In the lobes of the lungs, no predilection site of P. carinii was recognized. Counts of cystic forms on smears and the reactivity of in-situ hybridization in the lungs of neonatal rats were significantly lower than in maternal rats. The present findings suggest that P. carinii is rarely transmitted through the placenta and proliferates less successfully in the lungs of neonatal rats than in mothers.