RESUMEN
Resumen Introducción: La resistencia de enterobacterias a quinolonas se ha difundido por el mundo, fenómeno presente también en Venezuela. El mecanismo de esta resistencia pudiera estar mediado por genes incluidos en el cromosoma bacteriano o transmitirse en el interior de plásmidos. Objetivo: Evaluar la resistencia a quino-lonas, codificada por genes qnr, presentes en cepas de enterobacterias, aisladas en el Hospital Universitario de Cumaná, Venezuela. Métodos: A las cepas obtenidas se les realizaron pruebas de susceptibilidad antimicrobiana a quinolonas, β-lactámicos y aminoglucósidos. La presencia del gen qnr se determinó por RPC. Las enterobacterias portadoras del gen qnr fueron sometidas al proceso de conjugación bacteriana para comprobar su capacidad de transferencia. A las transconjugantes obtenidas se les realizó pruebas de susceptibilidad antimicrobiana y RPC para comprobar la transferencia de los genes. Resultados: Se encontraron elevados porcentajes de resistencia antimicrobiana a quinolonas y betalactámicos. El 33,6% de las cepas eran portadoras del gen qnrB, y 0,9% del gen qnrA. Se obtuvieron 23 cepas transconjugantes; de éstas, 20 portaban el gen qnrB, no se observó la presencia de qnrA. Discusión: En conclusión, el elevado porcentaje de genes qnr encontrado en las enterobacterias aisladas, y comprobada la presencia de éstos en plásmidos transferibles, complica la aplicación de tratamientos basados en quinolonas y fluoroquinolonas, por lo que es recomendable el uso racional de estos antimicrobianos, y proponer la rotación de la terapia antimicrobiana, a fin de evitar la selección de cepas resistentes.
Background: Enterobacteria resistant to quinolones is increasing worldwide, including Venezuela. The mechanism for this resistance could be due to genes included in the chromosome or in transmissible plasmids. Aim: To evaluate the resistance to quinolones, coded by qnr genes present in enterobacteria species, isolated in the University Hospital of Cumana, Venezuela. Methods: Antimicrobial susceptibility tests to quinolones, beta-lactams and aminoglycosides were carried out to all the isolates. The presence of qnr genes were determined by PCR. The isolates carrying the qnr genes were used for bacterial conjugation tests to determine the presence of transferable plasmids. Antimicrobial susceptibility tests and PCR were carried out in the transconjugants to verify the transfer of the genes. Results: High levels of antimicrobial resistance to quinolones and beta-lactams were found among the isolates. We found that 33.6% of the isolates carry the qnrB gene and 0.9% qnr A gene. Of the 23 transconjugants, 20 showed to have qnrB gene, but none qnrA. Discussion: We concluded that the high frequency of qnr genes found in the enterobacteria isolates and their presence on transferable plasmids, complicate the use of quinolones for the treatment of bacterial infections, thus, a treatment plan should be designed with the rational use and the rotation of different types of antimicrobials, in order to avoid the selection of increasingly resistant strains.
Asunto(s)
Plásmidos , Quinolonas/farmacología , Resistencia betalactámica/genética , Farmacorresistencia Bacteriana/genética , Enterobacteriaceae/genética , Infecciones por Enterobacteriaceae/genética , Bacterias Gramnegativas/genética , Antibacterianos/farmacología , Venezuela , beta-Lactamasas/genética , ADN Bacteriano/genética , Pruebas de Sensibilidad Microbiana , Reacción en Cadena de la Polimerasa , Análisis de Secuencia de ADN , Proteínas de Escherichia coli , Enterobacteriaceae/aislamiento & purificación , Infecciones por Enterobacteriaceae/microbiología , Genes Bacterianos , Bacterias Gramnegativas/clasificación , Hospitales UniversitariosRESUMEN
An 83-year-old male patient is admitted to the central hospital in Cumaná, Venezuela with severe urinary infection, history of hospitalizations and prolonged antimicrobial treatments. A strain of Enterobacter cloacae was isolated showing resistance to multiple types of antibiotics (only sensitive to gentamicin), with phenotype of serine- and metallo-carbapenemases. Both, blaVIM-2 and blaKPC genes were detected in the isolate. This is the first report of an Enterobacteriaceae species producing both KPC carbapenemase and VIM metallo carbapenemase in Venezuela. This finding has a great clinical and epidemiological impact in the region, because of the feasibility of transferring these genes, through mobile elements to other strains of Enterobacter and to other infection-causing species of bacteria.
En un paciente masculino de 83 años, que ingresó al Hospital de Cumaná, Venezuela, con diagnóstico de infección urinaria severa, antecedentes de hospitalización y diferentes tratamientos antimicrobianos durante largos periodos de tiempo, se aisló una cepa de Enterobacter cloacae, la cual evidenció resistencia a múltiples tipos de antibióticos (solo sensible a gentamicina) y con fenotipo de carbapenemasas de tipo serina y metalobetalactamasa. Los genes blaVIM-2 y blaKPC fueron detectados en esta cepa. Este representa el primer reporte de una especie de Enterobacteriaceae productora simultánea de carbapenemasa KPC y metalobetalactamasa VIM en Venezuela. Esto tiene un gran impacto clínico y epidemiológico en la región por la posibilidad de transferencia de estos genes a otras cepas de Enterobacter u otras especies bacterianas causantes de infecciones, por medio de elementos móviles.
Asunto(s)
Anciano de 80 o más Años , Humanos , Masculino , beta-Lactamasas/genética , Enterobacter cloacae/aislamiento & purificación , Infecciones por Enterobacteriaceae/genética , Infecciones Urinarias/microbiología , Infecciones Urinarias/tratamiento farmacológico , Venezuela , Enterobacter cloacae/genética , Farmacorresistencia Bacteriana Múltiple , Infecciones por Enterobacteriaceae/microbiología , Infecciones por Enterobacteriaceae/tratamiento farmacológico , Antibacterianos/farmacologíaRESUMEN
El objetivo de este estudio fue identificar los genes blaTEM, blaSHV y blaCTX-M en aislados clínicos de enterobacterias productoras de b-lactamasas de espectro extendido (BLEE), recolectadas entre septiembre y noviembre de 2005. Además de la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, los aislados también mostraron resistencia a cloranfenicol (59,2%) amikacina (37,0%) y gentamicina (40,7%) y se mostraron sensibles a imipenem y meropenem. Nueve cepas lograron transferir la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación, así como la producción de BLEE. En los aislados clínicos se detectaron los genes blaSHV, blaTEM y blaCTX-M, donde los tipos blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a y blaCTX-M-1 fueron los prevalentes; mientras que en las transconjugantes sólo se detectaron blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a. Se identificaron en total siete tipos de genes, de los cuales cinco eran codificantes de enzimas tipo BLEE, lo que demuestra que en el centro hospitalario la resistencia a las cefalosporinas de tercera generación es debida a diversas enzimas.
The objective of the present investigation was to identify the blaTEM, blaSHV and blaCTX-M genes on extended-spectrum b-lactamases (ESBL) producing Enterobacteriaceae from clinical isolates, collected between September and November 2005. In addition to third-generation cephalosporin resistance, the isolates also showed resistance to chloramphenicol (59.2%), amikacin (37.0%) and gentamicin (40.7%), and demonstrated sensitivity to imipenem and meropenem. Nine strains were capable of transferring third-generation cephalosporin resistance, as well as the production of ESBL. In the clinical isolates, the genes blaSHV, blaTEM and blaCTX-M were detected, being more prevalent the types blaTEM-1, blaSHV-1, blaSHV-5 blaSHV-5-2a and blaCTX-M-1; while in the trans-conjugated only blaTEM-1, blaSHV-5 y blaSHV-5-2a were found. In total, seven types of genes were identified, five of which were codifying genes for ESBL-type enzymes. This demonstrates that in the hospital center, resistance to third-generation cephalosporin is mediated by several enzymes.
Asunto(s)
Humanos , Proteínas Bacterianas/genética , Infección Hospitalaria/microbiología , Farmacorresistencia Bacteriana Múltiple/genética , Infecciones por Enterobacteriaceae/microbiología , Enterobacteriaceae/genética , Genes Bacterianos , beta-Lactamasas/genética , Proteínas Bacterianas/fisiología , Infección Hospitalaria/genética , ADN Bacteriano/genética , Enterobacter/efectos de los fármacos , Enterobacter/enzimología , Enterobacter/genética , Infecciones por Enterobacteriaceae/genética , Enterobacteriaceae/efectos de los fármacos , Enterobacteriaceae/enzimología , Enterobacteriaceae/aislamiento & purificación , Escherichia coli/efectos de los fármacos , Escherichia coli/enzimología , Escherichia coli/genética , Klebsiella pneumoniae/efectos de los fármacos , Klebsiella pneumoniae/enzimología , Klebsiella pneumoniae/genética , Especificidad por Sustrato , beta-Lactamasas/fisiologíaRESUMEN
Introdução - A crescente resistência antimicrobiana em bactérias responsáveis por infecções hospitalares é um grande desafio à Saúde Pública. as B-lactamases de espectro estendido (ESBL), que hidrolisam a maioria dos compostos B-lactâmicos, são reconhecidas mundialmente como um grande problema para pacientes hospitalizados, devido à localização de seus genes em elementos transferíveis, facilitando sua disseminação. Objetivo - Caracterizar geneticamente cepas de Enterobactérias produtoras de ESBL isoladas de pacientes de um hospital público da cidade de São Paulo. Material e métodos - Todas as cepas de enterobactérias produtoras de ESBL isoladas em um ano foram submetidas a análises moleculares pela PCR, com iniciadores específicos para oito genes bla, e as cepas de Klebsiella pneumoniae ESBL positivas (ESBL-Kp) identificadas nesse período foram comparadas pela técnica de PFGE.Resultados - Os genes, bla(tem), bla(shv), bla(ctx-m), bla(per-2) bla(veb) and bla(ges) foram identificados em 9 espécies: Klebsiella pneumoniae (71,5 por cento), Escherichia coli (13,5 por cento), Morganella morganii (6 por cento), Proteus mirabilis (3 por cento), Klebsiella oxytoca (1,5 por cento), Providencia rettgeri (1,5 por cento), Providencia stuartii (1,5 por cento), Enterobacter aerogenes (0,75 por cento). Os genes bla(per-1) e bla(oxa) não foram detectados. O PFGE revelou 8 perfis moleculares principais em 68,4 por cento das ESBL-Kp, e 31,6 por cento das cepas não estavam relacionadas. Conclusões - Os resultados de PCR revelaram uma grande variedade de grupos de ESBL, e aparentemente este é o primeiro relato de grupos GES e VEB em enterobactérias no Brasil